同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌臨床特征與外科治療療效分析PH17是新的具有抗腫瘤活性的香茶菜屬二萜類化合物

1、PH17同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌臨床特征與外科治療療效分析是新的具有抗腫瘤活性的香茶菜屬二萜類化合物目的同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌正逐年增加 , 但因既往研究存在樣本例數(shù)較 少、診斷標(biāo)準(zhǔn)不一、入組條件各異等問題 , 致使該疾病外科治療療效的預(yù)后因素 尚不十分明確。本研究旨在通過更大的樣本量以及改良的診斷標(biāo)準(zhǔn) , 探討該病的 臨床特征并完整系統(tǒng)分析與外科療效相關(guān)的預(yù)后因素。方法采用改良的 Martini-Melamed 診斷標(biāo)準(zhǔn),對2010年01月至 2014年12 月在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院胸外科手術(shù)治療的同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌患 者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析?？偣?290 例患者符合入組標(biāo)準(zhǔn)。

2、所有病變均行根治性手術(shù)切除且有明確的病理診斷與分期。 所有患者均有完 整的隨訪信息。采用 Kaplan-Meier 法計(jì)算患者無復(fù)發(fā)生存率和總體生存率 ,Log-rank 檢驗(yàn) 比較各組生存差異 ,Cox 風(fēng)險(xiǎn)比例回歸模型進(jìn)行預(yù)后多因素分析。結(jié)果總共 285 例患者用于進(jìn)行生存分析 (2 例因術(shù)后嚴(yán)重并發(fā)癥死亡 ,2 例因非腫瘤相關(guān)原因死 亡,1 例失訪 ) 。285例患者中 ,雙原發(fā)肺癌患者 234例(82.1%), 三原發(fā)及以上肺癌患者 51例 (17.9%) ；94例(33.0%) 為雙側(cè)同時(shí)多原發(fā)。全組患者中 1年、3年、5年無復(fù)發(fā) 生存率分別為 90.1%、68.5%、58.7%,1

3、 年、3年、5 年總生存率分別為 92.7%、 81.6%、77.6%；單因素分析結(jié)果顯示 , 男性、有癥狀主訴、無家族史、最大腫瘤 直徑越大、非全為腺癌類型、最高 pT 分期越高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性是影響患者總 體生存的危險(xiǎn)因素； 多因素回歸分析顯示男性 (p=0.020) 、有癥狀主訴 (p=0.017) 、 淋巴結(jié)陽性 (p<0.001) 是同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后生存的獨(dú)立不 良影響因素。對于多原發(fā)腺癌患者 ,1 年、3 年、 5年無復(fù)發(fā)生存率分別為 85.0%、 71.7%、 59.6%,1 年、3 年、5年總生存率分別為 95.5%、85.2%、82.4%；非附壁

4、型為主的 亞型 (p<0.001) 、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性 (p=0.002) 是獨(dú)立的不良預(yù)后因素。對于雙 側(cè)多原發(fā)非小細(xì)胞肺癌患者 ,1 年、3年、5 年無復(fù)發(fā)生存率分別為 87.4%、70.8%、 58.1%,1年、3年、5年總生存率分別為 97.6%、89.0%、82.7%;最高pT分期越 高(p=0.006)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性(p=0.008)是獨(dú)立的不良預(yù)后因素。對于淋巴結(jié)陽性的多原發(fā)非小細(xì)胞肺癌患者 ,1 年、 3年、 5年無復(fù)發(fā)生存率 分別為 59.8%、 41.6%、 17.3%,1 年、 3年、 5年總生存率分別為 82.1%、 63.6%、 56.5%;無術(shù)后輔助化

5、療 (p=0.019) 是獨(dú)立的不良預(yù)后因素。 結(jié)論對于肺同時(shí)性多 發(fā)病灶的診斷應(yīng)仔細(xì)謹(jǐn)慎 , 切不可武斷判為晚期轉(zhuǎn)移病變;同時(shí)多原發(fā)非小細(xì)胞 肺癌患者根治術(shù)后的生存率較高 , 在充分保證安全和根治原則的基礎(chǔ)上能夠從手 術(shù)中獲益。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響同時(shí)多原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后生存的重要因素 ,應(yīng) 盡量進(jìn)行充分的手術(shù)切除及徹底的淋巴結(jié)清掃以準(zhǔn)確判斷預(yù)后。 本研究所確定的 相關(guān)預(yù)后因素能為同時(shí)多原發(fā)性肺癌患者的臨床診治決策提供可靠依據(jù)。目的惡性腫瘤是危害人類健康最嚴(yán)重的疾病之一。 目前傳統(tǒng)化療藥物存在選 擇性差、毒副作用大及耐藥性等問題 , 傳統(tǒng)化療藥物治療癌癥的效果并不理想。尋找療效顯著、 特

6、異性強(qiáng)、 副作用較小的藥物是提高惡性腫瘤治療效果的有 效手段。天然藥物是當(dāng)今抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)之一。本研究中我們初步檢測和評價(jià)了 4 種植物提取化合物的抗腫瘤活性。 方法我 們獲得了 4種香茶菜中提取的對映 -貝殼杉烷二萜類化合物 (PH12、PH15、 PH17、PH27)利用CCK8法檢測了 5卩m濃度下這4種二萜類化合物對食管鱗癌和肺癌細(xì)胞 的增殖抑制活性。進(jìn)一步檢測了抑制活性最高的化合物PH17處理食管鱗癌細(xì)胞（KYSE30和KYSE450和肺癌細(xì)胞（A549和H1299）后的增殖曲線,并計(jì)算了 IC50 值。進(jìn)一步利用流式細(xì)胞術(shù)檢測了二萜類化合物PH17對細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。

7、結(jié)果我們檢測了 4種對映-貝殼杉烷二萜類化合物（PH12、PH15 PH17和 PH27）在 5卩M濃度時(shí)對7株食管鱗癌細(xì)胞系（KYSE30KYSE70KYSE150KYSE180 KYSE410KYSE45和 KYSE510和 7 株肺癌細(xì)胞系（H226,H292, H322, H358, H460, A549和H1299）72小時(shí)增殖抑制率。結(jié)果表明,4種化合物中,PH17對食管鱗癌和肺癌細(xì)胞的增殖抑制活性最強(qiáng)。 我們進(jìn)一步分別用9個(gè)不同濃度的PH17處理了食管鱗癌細(xì)胞（KYSE30和 KYSE450） 及肺癌細(xì)胞（A549和H1299）,在處理后的12、24、48和72小時(shí),檢測了細(xì)胞活

8、性, 繪制增殖曲線并計(jì)算了 72小時(shí)IC50值。結(jié)果表明,PH17處理48小時(shí)后,不同濃度處理組已經(jīng)表現(xiàn)出顯著的抑制效果；PH17對4株細(xì)胞的增殖抑制的 72小時(shí)IC50值如下：KYSE3C為1.40卩M,KYSE450 為1.35卩M,A549為2.200M,H1299為0.54卩M 另外，人成纖維細(xì)胞系 NIH-3T3 為1.13卩M,人胚腎細(xì)胞HEK-293為0.95卩M這一結(jié)果表明二萜類化合物 PH17 對兩株食管鱗癌細(xì)胞的增殖抑制活性接近；兩株肺癌細(xì)胞中H1299對PH17表現(xiàn)出更高的敏感性。我們繼續(xù)檢測了 PH17對食管鱗癌和肺癌細(xì)胞周期的影響。結(jié)果表明,與DMSO 處理組和低濃度

9、處理組（2卩M或4卩M PH17相比,高濃度處理組（5卩M或PH17）中細(xì)胞G0/G1期和S期細(xì)胞顯著減少，G2/M期細(xì)胞顯著增加,這說明PH17引起了 食管鱗癌和肺癌細(xì)胞G2/M期阻滯,介導(dǎo)了其增殖抑制活性。同時(shí)我們檢測了 PH17對食管鱗癌和肺癌細(xì)胞凋亡的影響,結(jié)果表明,與DMSO 處理組和低濃度處理組（2gM或4卩MPH17相比,高濃度處理組（5卩M或8卩MPH17） 中細(xì)胞凋亡比例顯著增多 ,處理48小時(shí)與 24小時(shí)相比 ,晚期凋亡細(xì)胞比例顯著增 加，這一結(jié)果說明PH17誘導(dǎo)了食管鱗癌和肺癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，介導(dǎo)了其增殖抑 制活性。結(jié)論香茶香茶菜屬植物提取的對映-貝殼杉烷二萜類化合物PH17對食管 鱗癌和肺癌具有顯著增殖抑制活性：高濃度PH1