生理試驗(yàn)家兔呼吸衰竭和肝性腦病試驗(yàn)報(bào)告

1、醫(yī)學(xué)形態(tài)與機(jī)能實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告中山醫(yī)學(xué)院 09393184 林永東一：實(shí)驗(yàn)綜述本次實(shí)驗(yàn)包括2個(gè)實(shí)驗(yàn)：家兔急性呼吸衰竭實(shí)驗(yàn)和肝性腦病實(shí)驗(yàn)， 通過制作兔 的閉合性氣胸及開放性氣胸，復(fù)制呼吸衰竭模型。做氣管內(nèi)插管并連接呼吸傳感 設(shè)置，記錄家兔呼吸運(yùn)動(dòng)的變化，以及記錄注射不同劑量的氯化鉉對(duì)家兔的影響， 結(jié)合組織制片和顯微照相等技術(shù)，從器官層次到細(xì)胞層次了解肺，肝急性衰竭前 后結(jié)構(gòu)組織變化的情況。二：目的和原理1:呼吸衰竭是指由于外呼吸功能的嚴(yán)重障礙，以致動(dòng)脈血氧分壓低于正常 范圍，伴有或不伴有二氧化碳分壓增高的病理過程。肺通氣障礙或（和）肺換氣 功能障礙都可引起呼吸衰竭。本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制呼吸衰竭病理模型

2、，觀察呼吸和血?dú)獾淖兓⒎治銎錂C(jī)制， 學(xué)習(xí)動(dòng)脈采血的方法，了解血?dú)鉁y(cè)定方法。2:正常情況下，血氨的來源與活除保持動(dòng)態(tài)平衡，而氨在肝臟中合成尿素是維 持此平衡的關(guān)鍵。通過結(jié)扎大部分肝臟造成急性肝功能不全，然后經(jīng)消化道輸入 堿性氯化鉉溶液，導(dǎo)致腸道中氨生成增多并吸收入血，引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血氨迅速升 高，出現(xiàn)震頷、抽搐、昏迷等類似肝性腦病癥狀，證明氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中 起主要作用。本次實(shí)驗(yàn)的目的是學(xué)習(xí)復(fù)制急性肝功能不全造成急性肝功能不全模型的方法，了解氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中的作用， 通過制作組織切片了解肝組織損傷的 形態(tài)學(xué)改變。三：實(shí)驗(yàn)對(duì)象家兔四：手術(shù)器材和藥品兔手術(shù)臺(tái)、實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械一套、氣管插管（兩

3、側(cè)管套有橡皮管）、連接靜脈插管的輸液裝置、連接三通的動(dòng)脈插管、注射器（1ml、2ml、10ml、50ml）、軟 木塞、濾紙、血?dú)馑釅A分析儀。離心機(jī)、分光光度計(jì)、水浴鍋、電爐、注射器（5ml）、 輸液瓶、膠管、螺旋夾、滴管、吸管、離心管、試管、試管夾、試管架、灑精燈、 手術(shù)器械一套、輸尿管塑料插管、顯微鏡、玻片。20%烏拉坦、1 %肝素生理鹽水溶液、生理鹽水、0.1%腎上腺素，2.5%氯化 鉉，1%t魯卡。五：實(shí)驗(yàn)步驟肺衰竭：1 .取家兔一只，稱重，從耳緣靜脈注射 20%烏拉坦溶液5ml/kg。將家兔仰 臥固定于兔臺(tái)上。2. 沿頸部正中切開皮膚，分離氣管，插入氣管插管。分離左側(cè)頸總動(dòng)脈，插入充滿

4、肝素生理鹽水的動(dòng)脈插管。 分離右側(cè)頸外靜脈，插入靜脈插管，連接輸 液裝置，并緩慢輸入生理鹽水（45滴/min ）。3. 用注射器抽出動(dòng)脈插管內(nèi)的死腔液，然后用充有肝素生理鹽水溶液的注射器與動(dòng)脈插管相連，讓血液自動(dòng)流入注射器內(nèi)（切勿進(jìn)入氣泡），取血2ml,迅速套上帶軟木塞的針頭，作血?dú)夥治?，同時(shí)觀察家兔的呼吸頻率及深度。4. 打開胸腔，觀察家兔的呼吸頻率和深度。5:用止血鉗夾住氣管，處死動(dòng)物，打開胸腔，在氣管分義處結(jié)扎氣管以防 止水腫液流出，取出一部分肺組織。注意事項(xiàng)：1、穿刺胸腔時(shí)，針頭應(yīng)與胸壁垂直，順肋骨上緣插入以免損傷肋問動(dòng)脈， 注意不要插得太深或太淺（0.5cm左右）進(jìn)針時(shí)不可用力夠猛以

5、免穿破胸膜臟層。肝衰竭：1:取兔一只，稱重后仰臥固定于兔臺(tái)上，剪去腹部正中兔毛，在上腹部正中 用1%普魯卡因作浸潤性局麻。2:從胸骨劍突起作上腹部正中切口（長約 5-6cm）,打開腹腔后，即可見到 肝臟。用手輕輕向下壓肝臟，切斷肝與橫膈之間的鐮狀韌帶。3:將肝臟各葉向上翻，除與胃連接緊密的肝尾葉外，用粗棉線自根部將其余 各部結(jié)扎。4:順著胃幽門部找出十二指腸，在其表面作一荷包縫合。用眼科剪剪一小口， 插入一導(dǎo)尿管，結(jié)扎固定，然后關(guān)閉腹腔，然后關(guān)閉腹腔，松綁，放于實(shí)驗(yàn)桌上 進(jìn)行觀察和實(shí)驗(yàn)。5:觀察家兔的一般情況，角膜反射及對(duì)刺激的反應(yīng)。6:每隔5min向十二指腸內(nèi)注入2.5%氯化鉉混合液5ml。

6、仔細(xì)觀察動(dòng)物的一 股情況、角膜反射及對(duì)刺激反應(yīng)的變化。 注意有無反應(yīng)性增高，直至出現(xiàn)痙攣發(fā) 作為止。記錄從給藥開始到痙攣抽搐發(fā)作時(shí)間以及用藥總量。7:切下一小塊肝尾葉組織和一小塊之前結(jié)扎的正常肝臟組織，制成組織切片并進(jìn)行觀察。注意事項(xiàng)：1、勿將藥液漏入腹腔。2、用生理鹽水紗布覆蓋傷口，避免體熱及水分丟失。3、手術(shù)操作要輕，因肝臟軟易破。切斷鐮狀韌帶時(shí)要小心勿損傷其后方的 下腔靜脈。4、動(dòng)物行局麻時(shí)，有時(shí)會(huì)掙扎，要與氨引起的強(qiáng)直性痙攣相區(qū)別。肺呼吸衰竭六：實(shí)驗(yàn)結(jié)果（一）呼吸曲線描記1.正常呼吸01.03 05,07=0捌 率:而初分最大值：. 16g最小清:-0.21g平均值：FQ槌rFrI21

7、 0 l5r0 15.02. 閉合性氣胸呼吸幅度降低O 2 1 9 T & 4 Z1 .o,O.O.O.O.I閉合性氣胸初04-0.6-0.9 r II I01.05.05.07.0頻 率：88次/分最大值:0.10g最小值:-0.15g平均信:-O.OLg11. 013.015.00.4閉合性氣胸中期/VWVWVvA/ v/VWv / v/Vww<-0.60 1.0535.07.090 n.O 13.015.0 s頻 率：85次/分最大值：0. 08g最小值：-Q.10g平均值:-O.OLg閉4隹氣胸采k1.05.0率：11 5次/分值m值大小均:li 02s:-0.01g:-

8、Q.oig3. 閉合性氣胸?fù)尵群髶尵瘸晒a值值值 大小均 師最>平.s.n:1印次/分 u. 13S c.iSg -Q.QLg7.09.011 013 Q 15 04. 開放性氣胸呼吸曲線很快便接近一條直線1.1Q S0 T0.& 0-10.Z0 *0 2 -C.J-0.16 -0 T0I.O3.05.07.ftMnoI3,c15.0s頻 率：朝好最大值：u. 03g最小宿:-0.04g;平均值：-C.Q*（二）病理切片氣胸模型肺組織的組織切片10*10倍肺整體 支氣管腔內(nèi)空氣充滿40*10倍支氣管腔支氣管腔增大40*10倍可見肺臟萎縮肝急性衰竭（一）、每隔5min注入5ml的

9、氯化鉉混合液，并觀察兔子的一般情況，角膜反 射，刺激反應(yīng)等，記錄結(jié)果如下：次數(shù)時(shí)間一般情況角膜反射刺激反應(yīng)10min正常存在（+）靈敏（+）25min正常存在（+）靈敏（+）310min正常存在（+）靈敏（+）415min正常存在（+）靈敏（+）520min從21min開始抽搐，22min出現(xiàn)角弓反張（二）、病理切片1、肝尾葉10倍肝小葉中央靜脈可見部分肝細(xì)胞呈空泡樣門管區(qū)有炎癥細(xì)胞浸潤40倍 肝尾葉肝細(xì)胞部分肝細(xì)胞受損，肝細(xì)胞腫脹呈球形有些可見炎癥細(xì)胞肝賽內(nèi)淤血2、正常的肝組織切片七：實(shí)驗(yàn)討論肺呼吸衰竭本實(shí)驗(yàn)以兔子為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，分別制作兔子閉合性氣胸、開放性氣胸導(dǎo)致急 性呼吸衰竭以觀察兔子的呼

10、吸曲線變化。 從呼吸曲線可以看出，對(duì)兔子進(jìn)行閉合 性氣胸后，呼吸幅度降低，頻率減慢，直至接近直線，抽氣搶救成功后，呼吸曲 線逐漸恢復(fù)到接近原來狀態(tài)；對(duì)兔子進(jìn)行開放性氣胸，可觀察到呼吸曲線很快便 接近一條直線，呼吸衰竭模型制作成功。肝急性衰竭肝性腦病(hepatic encephalopathy he)是由嚴(yán)重肝病引起的，以代謝紊亂為基 礎(chǔ)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào)的綜合征。臨床表現(xiàn)為意識(shí)障礙、行為失常和昏迷?？梢詮拈_始的情緒或行為改變、衣著不整和大腦反應(yīng)遲鈍，發(fā)展至昏迷及深度昏 迷。病因大部分肝性腦病是由各型肝硬化(病蠹性肝炎肝硬化最多見)和 門體分流手術(shù)引起，包括如經(jīng)頸靜脈肝內(nèi)門體分流術(shù)(tip

11、s),如果連輕微肝性腦病也計(jì)算在內(nèi)，則肝硬化發(fā)生肝性腦病者可達(dá)70%.小部分肝性腦病見于重癥病蠹性肝炎、中蠹性肝炎和藥物性肝病的急性或暴發(fā)性肝功能衰竭階段。其余見于原發(fā)性肝癌、妊娠期急性脂肪肝、嚴(yán)重膽道感染等。引起肝性腦病的誘因可歸納為三方面：增加氨等含氮物質(zhì)及其他蠹物的來 源，如進(jìn)過量的蛋白質(zhì)、消化道大出血、氮質(zhì)血癥、口服鉉鹽、尿素、蛋氨酸等。 便秘也是不利的因素，使有蠹物質(zhì)排出減慢。低鉀堿中蠹時(shí)，nh4+容易變成nh3,導(dǎo)致氨中蠹，常由于大量利尿或放腹水引起。加重對(duì)肝細(xì)胞的損害，使 肝功能進(jìn)一步減退。例如手術(shù)、麻醉、鎮(zhèn)靜劑、某些抗撈藥物、感染和缺氧等。 在慢性肝病時(shí)，大約半數(shù)病例可發(fā)現(xiàn)肝性

12、腦病的誘因。發(fā)病機(jī)制 肝性腦病的發(fā)病機(jī)制未完全明確。一般認(rèn)為產(chǎn)生肝性腦病的病 理生理基礎(chǔ)是肝細(xì)胞功能衰竭和門腔靜脈之間有手術(shù)造成的或自然形成的側(cè)支 分流。主要是來自腸道的許多蠹性代謝產(chǎn)物，未被肝解蠹和活除，經(jīng)側(cè)支進(jìn)入體循環(huán)，透過血腦屏障而至腦部，引起大腦功能紊亂。血吸蟲病性肝纖維化雖有側(cè) 支循環(huán)，但由于肝功能較好，很少發(fā)生肝性腦病。有關(guān)肝性腦病發(fā)病機(jī)制有許多 學(xué)說，其中以氨中蠹理論的研究最多，最確實(shí)有據(jù)。暴發(fā)性肝功能衰竭所致的肝 性腦病與門一體性肝性腦病的發(fā)病機(jī)制不盡相同。氨中蠹學(xué)說氨代謝紊亂引起的氨中蠹是肝性腦病，特別是門體分流性腦病的重要 發(fā)病機(jī)制。與氨中蠹有關(guān)的腦病乂稱為氮性腦病 (ni

13、trogenous encephalopathy。（一）氨的形成和代謝 血氨主要來自腸道、腎和骨髓肌生成的氨，但胃腸 道是氨進(jìn)入身體的主要門戶。正常人胃腸道每日可產(chǎn)氨4g ,大部分是由尿素經(jīng)腸道細(xì)菌的尿素酶分解產(chǎn)生，小部分是食物中的蛋白質(zhì)被腸道細(xì)菌的氨基酸氧化酶分解產(chǎn)生。氨在腸道的吸收主要以非離子型氨（nh3）彌散進(jìn)入腸膜，其吸收率比離子型鉉 （nh 4 ）高得多。游離的nh 3有蠹性，且能透過血腦屏 障；nh 4呈鹽類形式存在，相對(duì)無蠹，不能透過血腦屏障。nh 3與nh 4的互相轉(zhuǎn)化受ph梯度改變的影響。當(dāng)結(jié)腸內(nèi) ph>6時(shí)，nh 3大量彌散入血； ph<6時(shí)，則nh 3從血液轉(zhuǎn)

14、至腸腔，隨糞排泄。腎產(chǎn)氨是通過谷氨酰胺酶分解 谷氨酰胺為氨，亦受腎小管液ph的影響。此外，骨髓肌和心肌在運(yùn)動(dòng)時(shí)也能產(chǎn) 氨。機(jī)體活除血氨的主要途徑為：尿素合成，絕大部分來自腸道的氨在肝中經(jīng) 鳥氨酸代謝環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩兀?腦、肝、腎等組織在三磷酸腺昔（atp）的供能條件下，利用和消耗氨以合成谷氨酸和谷氨酰胺；腎是排泄氨的主要場(chǎng)所， 除排出大量尿素外，在排酸的同時(shí)，也以 nh 4的形式排除大量的氨； 血氨過高時(shí)可從肺部少量呼出。（二）肝性腦病時(shí)血氨增高的原因 血氨增高主要是由于生成過多和 （或） 代謝活除過少。在肝功能衰竭時(shí)，肝將氨合成為尿素的能力減退，門體分流存在時(shí)，腸道的氨未經(jīng)肝解蠹而直 接進(jìn)入體循環(huán)，使血氨增高。許多誘發(fā)肝性腦病的因素能影響血氨進(jìn)入腦組織的 量，和（或）改變腦組織對(duì)氨的敏感性。診斷肝性腦病的臨床表現(xiàn)主要診斷依據(jù)為： 嚴(yán)重肝?。ɑ颍V泛門體側(cè)支 循環(huán)；精神紊亂、昏睡或昏迷；肝性腦病的誘因；明顯肝功能損害或血氨 增高。撲翼（擊）樣震頷和典型的腦電圖改變有重要參考價(jià)值。對(duì)肝硬化患者進(jìn) 行數(shù)字連接試驗(yàn)和心理智能測(cè)驗(yàn)可發(fā)現(xiàn)輕微肝性腦病。鑒別診斷肝性腦病應(yīng)與精神病及可引起昏迷的其他疾病，如腦血管意外、糖尿病、低血糖、尿蠹癥、腦部感染和鎮(zhèn)靜藥過量等相