苯甲酸鈉急性毒性試驗(yàn)

1、安徽科技學(xué)院食品藥品學(xué)院本科畢業(yè)論文苯甲酸鈉的急性毒性試驗(yàn)食品質(zhì)量與安全111:王文靜學(xué)號(hào)：2302110120摘要:苯甲酸鈉的急性毒性試驗(yàn)?zāi)康模焊鶕?jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠的苯甲酸鈉的致死劑量水平初步估計(jì)其對(duì)人類的可能毒害的危險(xiǎn)性。為了對(duì)苯甲酸鈉毒性性質(zhì)的進(jìn)一步了解， 找出其劑量一反應(yīng)和劑量一效 應(yīng)的關(guān)系。方法：經(jīng)查閱資料得小鼠的 LD50值為2512mg/kg ,通過霍恩式法設(shè)計(jì)出劑量組。通過經(jīng)口灌胃方式染毒，觀察小鼠中毒癥狀。結(jié)論：苯甲酸鈉毒性為3級(jí)，屬于低毒物質(zhì)。中毒癥狀出現(xiàn)的時(shí)間與灌胃劑量存在直接線性關(guān)系：劑量越大，死亡就越快，死亡率就越高.。關(guān)鍵字：苯甲酸鈉急性毒性LD50值 灌胃染毒1.引言

2、1.1苯甲酸鈉性質(zhì)：苯甲酸鈉是酸性防腐劑，一般用在酸性條件下，在酸性條件下能轉(zhuǎn) 化為有活性的苯甲酸，因此防腐的機(jī)理同苯甲酸。其防腐功能在pH為2.5 4.0時(shí)最佳。在堿性介質(zhì)中則無(wú)殺菌和抑菌作用。由丁苯甲酸鈉的水溶性遠(yuǎn)大丁苯甲酸，在水介體系中 更容易溶解和分散，而且在空氣中穩(wěn)定，因此比苯甲酸常用得多。苯甲酸鈉親油性較大， 易穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞體內(nèi)，干擾細(xì)胞膜的通透性，抑制細(xì)胞膜對(duì)氨基酸的吸收；進(jìn)入細(xì) 胞體內(nèi)電離酸化細(xì)胞內(nèi)的堿儲(chǔ)，并抑制細(xì)胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰輔酶A縮合反應(yīng), 從而起到食品防腐的目的。1.2苯甲酸鈉的作用及限量：苯甲酸鈉是很常用的食品防腐劑，有防止變質(zhì)發(fā)酸、延 長(zhǎng)保質(zhì)期的效

3、果。在飲料、罐頭、果汁、冷食、醬油、醋等食品領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用，也可 作為飲料的防腐劑。苯甲酸鈉低蠹。近年來對(duì)其蠹性的顧慮使得它的應(yīng)用受限，對(duì)它的使 用作出限制。應(yīng)用在食品中的限量為 0.1%,不允許用丁食用肉類和維生素 B1中。可參見 苯甲酸。苯甲酸鈉的ADI值05mg/kg （即每人每天每千克體重可允許攝入 0 5毫克）， 相當(dāng)丁 60kg成人的終身攝入無(wú)蠹作用劑量是每天 300mg中國(guó)規(guī)定苯甲酸鈉在飲料中的最 大使用量為0. 2g/kg，即一個(gè)成年人每天喝一升飲料，苯甲酸鈉為 200mg比國(guó)際規(guī)定的 ADI值還低。1.3急性蠹性試驗(yàn)設(shè)計(jì)：本研究采用小鼠經(jīng)口染蠹，急性蠹性試驗(yàn)主要測(cè)定半數(shù)致死

4、 量，觀察中蠹表現(xiàn)，確定蠹作用方式，為業(yè)急性和慢性試驗(yàn)的觀察指標(biāo)及劑量分組提供參 考依據(jù)。本試驗(yàn)采用灌胃染蠹是將配成一定濃度梯度的溶液，裝入灌胃針，注入受試小鼠 的胃內(nèi)。實(shí)驗(yàn)所選小鼠體重差別不大，所以受試小鼠一次灌胃體積在0.4ml/只。急性蠹性中蠹重點(diǎn)觀察癥狀如下：器官系統(tǒng)觀察及檢驗(yàn)項(xiàng)目中毒后反應(yīng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能及軀體運(yùn)動(dòng)行為與動(dòng)作體位、叫聲、活動(dòng)異常，不安或臥倒。振顫、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、麻痹、驚覺,對(duì)刺激反應(yīng)易興奮，感覺遲鈍或過敏。肌肉張力松弛或緊張自主神經(jīng)系統(tǒng)瞳孔放大或縮小腺體分泌垂涎，流淚，出汗2.呼吸系統(tǒng)鼻鼻孔溢出液體材呼吸表現(xiàn)呼吸徐緩或過速，困難或衰竭- 料與方法2.1實(shí)驗(yàn)材料：小白鼠16

5、只（室溫，自由飲水?dāng)z食），鼠籠，鼠糧。2.2儀器與試劑儀器：灌胃針，灑精棉，100ml容量瓶若干，燒杯，分析天平。試劑：苯甲酸鈉150mg/ml,蒸僻水。2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理取16只小鼠，隨機(jī)分成A、B、C、D四組，每組四只小鼠。分別稱取每只小鼠重量， 記錄并做標(biāo)記，分別為頭部，前腿，腹部，后腿。將試驗(yàn)小鼠將分組后的小鼠置丁同一籠 中喂養(yǎng)，禁食一夜，飲水正常。2.4實(shí)驗(yàn)設(shè)四個(gè)劑量組濃度將查閱相關(guān)資料得到的苯甲酸鈉 LD50值安排在在第二組與第三組之間，根據(jù)霍恩式法 計(jì)算出各小組濃度如下：1.00*10 3mg/kg、2.15*10 3mg/kg、4.64*10 3mg/kg、10.00*10

6、3mg/kg ,且每個(gè)劑量組濃度組 距為2.15倍。禁食一夜后對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃操作。各組小鼠灌胃水平組別ABCD灌胃水平1.00*10 3mg/kg2.15*10 3mg/kg4.64*10 3mg/kg10.00*10 3mg/kg小鼠灌胃死亡前后體重變化體重/g 芝別標(biāo)記部位一AA'BB，CC，DD頭部25.222.329.128.323.207前腿26.721.726.324.1928.022.56腹部22.120.827.525.2626.824.55后退28.320.725.923.4829.727.81按上表對(duì)小鼠進(jìn)行分次灌胃，灌胃前用灑精棉對(duì)灌胃針進(jìn)行消蠹。灌胃結(jié)束之后2-

7、3h 可以進(jìn)行喂食。灌胃完成后，觀察小鼠是否有反常癥狀以及死亡情況并記錄。2.5觀察指標(biāo)觀察小鼠的異常癥狀及死亡數(shù)急性毒性重點(diǎn)觀察的中毒癥狀記錄表觀察時(shí)間現(xiàn)象記錄第一組(A第二組(B)第三組(C)第四組(D)11.27上午(灌胃 實(shí)驗(yàn)結(jié)束即 計(jì))時(shí)各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐下 午各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)量減少，飲食量減少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，活 動(dòng)失調(diào)，飲食量少，身體抽搐各鼠反應(yīng)降低，

8、活 動(dòng)失調(diào)，飲食量少，身體抽搐11.28上 午各鼠活動(dòng)減少，身體抽搐，飲食正常各鼠活動(dòng)減少，身體抽搐，飲食正常死亡三只，肺部破 裂，心臟變黑，腎 臟，肝臟腫大 另外一只活動(dòng)少， 身體抽搐，飲食正 常全部死亡肺部破裂心臟變黑腎臟，肝臟腫大下 午各鼠活動(dòng)減少，飲 食正常各鼠活動(dòng)減少，飲 食正常小鼠活動(dòng)減少，飲 食正常11.29上 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常下 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常11.30上 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常下 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常12.1上

9、 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常下 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常12.2上 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常下 午各鼠活動(dòng)，飲食均正常各鼠活動(dòng)，飲食均正常小鼠活動(dòng)，飲食正常3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上觀察記錄表，經(jīng)第一次灌胃染蠹 23h后，四組(A,B,C,D)小鼠均反應(yīng)降低，運(yùn)動(dòng)量 減少，進(jìn)食量減少，身體抽搐。在 24h后給藥劑量大的小鼠第三，四組小鼠剛開始異?？?奮，運(yùn)動(dòng)量增大，呼吸急促而后精神萎靡，行動(dòng)遲緩，臥倒，蜷縮，垂涎及抽搐癥狀，最 后死亡。36h后，剩余的小鼠活動(dòng)，飲食漸漸趨丁正常。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：四組小鼠

10、死亡數(shù)目分 別為0, 0,3,4，通過查閱霍恩法LD5o計(jì)算用表得出小鼠經(jīng)口染蠹的苯甲酸鈉的 LD5o值，查 表知 LDo=3830mg/kg，可信限為 2.61-5.62。4. 結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠出現(xiàn)抽搐，行動(dòng)遲緩，呼吸減慢，精神萎靡及死亡等中蠹表現(xiàn)，說 明苯甲酸鈉具有一定的蠹性，應(yīng)引起食品生產(chǎn)過程中防腐劑苯甲酸鈉應(yīng)用的注意。在24h后剩余小鼠中蠹狀況漸漸好轉(zhuǎn)，說明苯甲酸鈉不在機(jī)體內(nèi)蓄積。查閱資料：苯甲酸鈉進(jìn)入 機(jī)體后，在9-15小時(shí)內(nèi)，大部分與甘氨酸化合成馬尿酸，從尿中排出，剩余部分和葡萄 糖醛酸化合成葡萄苜酸而解蠹，通過尿排出體外。在代謝方面小鼠與人較為接近，急性蠹 性試驗(yàn)表明苯甲

11、酸鈉屆丁低蠹性物質(zhì)，苯甲酸鈉灌胃小鼠半數(shù)致死量為L(zhǎng)D5°=3830mg/kg,95%勺可信限為2.61-5.62。5. 結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在安全范圍內(nèi)使用苯甲酸鈉對(duì)機(jī)體是沒有影響，過量使用苯甲酸鈉會(huì) 引起致癌，致畸及死亡。苯甲酸鈉屆丁低蠹物質(zhì)，中蠹癥狀出現(xiàn)的時(shí)間與灌胃劑量存在直 接線性關(guān)系，劑量越大死亡率就越高，急性蠹性經(jīng)口試驗(yàn)可提供在短時(shí)間內(nèi)經(jīng)口接觸受試 物所產(chǎn)生的危害信息，為進(jìn)一步試驗(yàn)劑量選擇提供依據(jù)，并初步估測(cè)可能的蠹作用機(jī)制， 為實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推至人提供參考依據(jù)。苯甲酸鈉這種化學(xué)物質(zhì)，對(duì)人類有利也有害。我們應(yīng) 該盡量減少食用含有苯甲酸鈉做防腐劑的物質(zhì)，取利避害，正確對(duì)待苯甲酸鈉。參考文獻(xiàn)1、沈建忠，動(dòng)物蠹理學(xué)M.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2