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文檔簡介

1、shmt的電泳制備1.shmt的電泳制備方案制定1.2SHMT的分離制備v原理原理：利用溶液中帶有不同量的電荷的陽離子或陰離子，在外加電場中以不同的遷移速度向電極移動，而達(dá)到分離目的的分析方法。v電泳方案電泳方案：聚丙烯酰胺凝膠電泳3操作準(zhǔn)備v樣品處理樣品處理：超聲波破碎大腸桿菌。v管型盤狀電泳管型盤狀電泳v 電泳槽電泳槽：盤狀電泳槽國內(nèi)有很多單位生產(chǎn)，也可因地制宜，自己制造，槽大多為圓筒形(圖9)，也有長方形的，上、下槽分別接鉑金絲電極，要注意電極到各膠管的距離相等，以保持各凝膠管的電場一致。v 電泳儀電泳儀：國內(nèi)生產(chǎn)的型號很多，如北京六一儀器廠的DYY-型，電壓在0600v內(nèi)任意調(diào)節(jié)，電流

2、輸出0100mA，這類電泳儀比較恰當(dāng)。v 玻璃管：玻璃管：選擇粗細(xì)均一的圓玻璃管，內(nèi)徑57mm左右，管長70100mm。管口用金剛砂磨平，電泳管的清潔很重要，需浸入10%重鉻酸鹽-硫酸溶液中清洗，再用蒸餾水徹底淋洗干凈，在管中滴入丙酮而后干燥備用。v 4v聚膠架：聚膠架：普通試管架式樣，有機(jī)玻璃制成，架的孔洞內(nèi)裝一乳膠管，要求乳膠管孔內(nèi)徑與玻璃管外徑相同或略小。v 微量注射器或微量進(jìn)樣器微量注射器或微量進(jìn)樣器：加樣時，由于需樣品量極小，作定量分析時要求樣品量準(zhǔn)確，因此最好用25.50或100l的微量進(jìn)樣器加樣，也可用50或100l加液器代用。v普通注射器普通注射器：主要用于灌膠和剝膠，2030ml，附加10號不銹鋼長針頭(約10cm長)。 5v 其他其他：日光臺燈，PH計，恒溫水浴，燒杯，容量瓶，量筒，試管，漏斗，濾紙，電爐，電子天平等。v試劑試劑 甲叉雙丙烯酰胺(Bis)；丙烯酰胺(Acr)；四甲基乙二胺(TEMED)；過硫酸銨；核黃素(VB2)；三羥甲基氨基甲烷(Tris)；蔗糖；甘氨酸；鹽酸等。 6分離膠的制備分離膠的制備濃縮膠的制備濃縮膠的制

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