耐藥基因TopoⅡ及Ki67在食管鱗癌的表達(dá)

1、耐藥基因Topo及Ki-67在食管鱗癌的表達(dá) 作者：柳維軍,陽(yáng)云平,徐志強(qiáng)【摘要】 目的 探討Topo及Ki-67在食管鱗癌的表達(dá)及其與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組化檢測(cè)75例食管鱗癌組織中Topo和Ki-67的表達(dá)情況。結(jié)果 Topo和ki-67的表達(dá)與食管鱗癌的組織分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有密切關(guān)系（P0.05），并且Topo和ki-67陽(yáng)性表達(dá)具有較強(qiáng)的一致性。結(jié)論 檢測(cè)Topo和ki-67的表達(dá)可作為判斷食管鱗癌預(yù)后的重要指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】 食管鱗癌；Topo； ki-67； 免疫組化ABSTRACT Objective To discuss the expressi

2、on of Topo II and Ki-67 in esophageal sqauamous cell carcinoma and their relationship with the histodifferentiation grades and lymph node metastasis. Methods Immunohistochemistry was applied to study the expression.Results Topo II and Ki-67 were closely related to the histodifferentiation grades and

3、 lymph node metastasis of esophageal squamous cell carcinoma, and there existed a great consistence between the positive expression of Topo II and Ki-67.Conclusions The expression of Topo II and Ki-67 can be used as the important index in judging the prognosis of esophageal squamous cell carcinoma.2

4、 / 11KEYWORDS esophageal squamous cell carcinoma Topo II Ki-67 immunohistochemistryDNA拓普異構(gòu)酶(Topo)是一種核內(nèi)酶，是DNA復(fù)制時(shí)必需的酶，也是某些抗腫瘤藥物的“靶分子”，抗腫瘤藥物通過(guò)與其結(jié)合而行使抗腫瘤作用。當(dāng)基因突變時(shí)，此酶的轉(zhuǎn)錄水平或活性下降，抗癌藥物不能與其結(jié)合而產(chǎn)生耐藥，使抗腫瘤藥物不能發(fā)揮抗癌活性而耐藥。細(xì)胞增殖和凋亡在腫瘤發(fā)生時(shí)起著相當(dāng)重要的作用。因此，了解腫瘤增殖動(dòng)力學(xué)參數(shù)，可以監(jiān)測(cè)病變的進(jìn)展、指導(dǎo)臨床治療并對(duì)預(yù)后進(jìn)行判斷。Ki-67是一種與細(xì)胞增殖有關(guān)的核抗原，它的陽(yáng)性率與腫瘤的惡性

5、程度、分級(jí)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也呈正相關(guān)1。但在食管鱗癌中的表達(dá)報(bào)道較少，我們應(yīng)用免疫組化檢測(cè)75例食管鱗癌Topo及Ki-67的表達(dá)情況，并觀察其與腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。1 材料與方法1.1 材料收集儀隴縣人民醫(yī)院2002年至2007年7月已確診的食管鱗癌75例，其中高分化26例，中分化21例，低分化28例；59例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。1.2 方法選擇原病例蠟塊（10%中性福爾馬林液固定），4um厚連續(xù)切片3張，分別HE染色，Topo、Ki-67免疫組織化學(xué)染色（Emision Systen二步法），抗原修復(fù)液采用高PH值9.0修復(fù)液，試劑盒購(gòu)自成都基因公司。1.3 結(jié)果判定每張切片選擇典型部位2

6、3個(gè)視野觀察，記數(shù)500個(gè)腫瘤細(xì)胞中Topo、Ki-67核表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：Topo級(jí)為陰性（25%），級(jí)為陽(yáng)性（2550%為級(jí)，5075%為級(jí)，75為級(jí)）。Ki-67陽(yáng)性（其中525為，2550為，5075為，75為）。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理SPSS11.12軟件進(jìn)行2檢驗(yàn)、kappa檢驗(yàn)。2 結(jié) 果2.1 Topo的表達(dá)與生物學(xué)特征的關(guān)系見(jiàn)表1。表1 Topo的表達(dá)與食管鱗癌分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系（略） 從表1可知：Topo陽(yáng)性表達(dá)率在高分化組明顯低于中、低分化組（P0.05)；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P0.05)。一般腫瘤分化愈低，Topo陽(yáng)性表達(dá)率愈高（見(jiàn)圖1、2）。

7、Topo陽(yáng)性表達(dá)率在腫瘤原發(fā)灶與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中基本相近。2.2 Ki-67的表達(dá)與生物學(xué)特征的關(guān)系見(jiàn)表2。表 ki-67的表達(dá)與腫瘤分化程度及轉(zhuǎn)移的關(guān)系（略）ki-67陽(yáng)性表達(dá)指數(shù)與腫瘤分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有密切關(guān)系，一般地腫瘤分化愈低，陽(yáng)性表達(dá)指數(shù)愈高（P0.05）（見(jiàn)圖3、4）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者陽(yáng)性表達(dá)指數(shù)較強(qiáng)（P0.05），且在腫瘤原發(fā)灶與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中其表達(dá)指數(shù)基本相近。2.3 Topo與Ki-67在食管鱗癌組織中表達(dá)的關(guān)系：見(jiàn)表3。表3 Topo的表達(dá)與Ki-67的表達(dá)間的關(guān)系（略）從表3可知，ki-67的表達(dá)與Topo的表達(dá)，具有較強(qiáng)的一致性（kappa=0.535，P0.05）。

8、3 討 論3.1 Topo是DNA復(fù)制時(shí)必需的酶，也是某些抗腫瘤藥物的靶分子，抗腫瘤藥物只有通過(guò)與其結(jié)合才能行使抗腫瘤作用,Topo活性的下降是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥的機(jī)制之一。因此檢查T(mén)opo在腫瘤中的表達(dá)情況有利于我們對(duì)腫瘤的化療提供正確化療方案，提高患者的生存率。通過(guò)對(duì)75例食管鱗癌Topo的表達(dá)情況的分析，Topo的陽(yáng)性表達(dá)率分別是高分化鱗癌23.08%，中分化90.05%，低分化組高達(dá)96.4%，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組79.66%，無(wú)淋巴結(jié)組31.25%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，Topo的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況均有非常密切的關(guān)系，與文獻(xiàn)報(bào)道其它類(lèi)型惡性腫瘤基本相似，。3.2 Ki-67是一種

9、能識(shí)別存在于增殖細(xì)胞核基質(zhì)內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的核蛋白，其表達(dá)根據(jù)細(xì)胞周期而異。有報(bào)道, Ki-67在不同臨床分期惡性腫瘤之間的表達(dá)差異性顯著，轉(zhuǎn)移病例指數(shù)顯著高于無(wú)轉(zhuǎn)移病例4，5。通過(guò)對(duì)75例食管鱗癌Ki-67的表達(dá)進(jìn)行觀察（見(jiàn)表2），經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，Ki-67表達(dá)特點(diǎn)為高分化鱗癌表達(dá)指數(shù)較低，中、低分化鱗癌表達(dá)指數(shù)較高，且腫瘤分化越低，表達(dá)指數(shù)越高。Ki-67陽(yáng)性表達(dá)指數(shù)也與食管鱗癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中表達(dá)指數(shù)偏高，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中表達(dá)指數(shù)較低，與文獻(xiàn)報(bào)道基本相近，因此認(rèn)為Ki-67是判斷腫瘤預(yù)后的較好指標(biāo)之一。33 由于Topo常作為腫瘤耐藥檢查的指標(biāo)，Ki-67常作為判斷腫瘤預(yù)

10、后的指標(biāo)。研究中發(fā)現(xiàn)，Topo在對(duì)食管鱗癌陽(yáng)性表達(dá)的同時(shí)，Ki-67也基本陽(yáng)性表達(dá)（見(jiàn)表3），并且陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞的部位與Topo基本相近，具有較強(qiáng)的一致性。通過(guò)分析對(duì)比， Topo除了能作為耐藥基因檢查的指標(biāo)，也可與Ki-67一樣可作為腫瘤預(yù)后判斷的指標(biāo)之一?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 吳玉新，王靖華，王華等.Ki-67、早期凋亡之相關(guān)蛋白M30在子宮內(nèi)膜的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系J.中華病理學(xué)雜志，2003，32（4）：314318.2孫麗梅，朱繼江，王恩華等.耐藥基因Topo在肺癌中表達(dá)與預(yù)后的研究J.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，29（1）：1718.3張軍航，馬琳，崔肅等.P-糖蛋白，GST-，TopoII在食管癌組織中的表達(dá)及其臨床意義J.中國(guó)腫瘤臨