啤酒分析操作步驟及方法

1、啤酒分析操作步驟及方法1水質(zhì)分析：1.1堿度的測定：1.1.1試劑：1.1.1.1不含二氧化碳水，用于制備和稀釋溶液。1.1.1.20.1%酚酞指示劑:0.1克酚酞溶于95%乙醇稀釋至100ml。1.1.1.3 0.1%甲基橙指示劑:0.1克甲基橙溶于蒸餾水稀釋至100ml。1.1.1.4 0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取1+1鹽酸溶液18ml或1+1硫酸溶液6ml,用無二氧化碳水稀釋至1000ml o標(biāo)定方法一；準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)試劑硼砂(N a2B407.10H200.4-0.5克之間，稱準(zhǔn)至0.0001g稱量前該試劑不需要干燥。溶于 40ml水中，加入2-3滴0.2%甲基紅指示劑 (0

2、.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中，溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶 液滴定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)(大約消耗23ml左右。同時(shí)用40ml水做空白試 驗(yàn)。按下式計(jì)算：c=1000m/190.7(V1-V2;式中c鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; m 硼砂的質(zhì) 量,g;V1 滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;190.7 硼砂的摩爾質(zhì)量 M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/mol。標(biāo)定方法二：稱取在140C干燥箱干燥至恒重(3小時(shí)的無水碳酸鈉0.1-0.15克, 稱準(zhǔn)至0.000

3、1g溶于無二氧化碳水的三角瓶中(做三個(gè)平行試驗(yàn)，各加入100ml無二氧化碳水溶解，分別加入2滴甲基橙指示劑，用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅 色為止，記錄用量，按下式計(jì)算：C=m1000/V52.995式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽 酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三：準(zhǔn)確稱取經(jīng)140C干燥至恒重的無水碳酸鈉 0.15-0.2克于三角瓶內(nèi) 溶于40ml水，加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配制待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液 滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2分鐘，冷卻，

4、繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。 同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。C=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度 C(HCI或 C(1/2H 2. SO4. ,mol/Lm為無水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積 ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積 ml。52.99為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol。1000為換算成升后的單位。1.1.2操作:1.1.2.1酚酞堿度的測定：取50ml或100ml水于250ml三角瓶中，若水樣中有余氯，則 加入1滴0.1mol/L硫代硫酸鈉。加2滴酚酞指示劑，如溶液呈紅色,則用0.1mol/L鹽 酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液

5、滴定至顏色恰好消失。1.1.2.2甲基橙指示劑法總堿度的測定：在滴定過酚酞堿度的溶液中（或另取一份水 樣，加入2滴甲基橙指示劑，若溶液呈橙黃色，則用O.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定 至溶液呈淡橙紅色。1.1.3計(jì)算:C1.仁 1000CV1/V C2=1000CV2/V式中CL 1為酚酞堿度 mmol/L C2為總堿度 mmol/LV1-測定酚酞堿度所消耗的鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積mlV2-滴定至甲基橙終點(diǎn)的酸的用量（如果總堿度所用式樣為測定酚酞堿度后的 溶液,則酸液用量應(yīng)該包括 V1ml。V-為水樣的體積。C-為鹽酸c（HCI丨或硫酸c（1/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 mol/L。1.

6、2總硬度的測定：1.2.1試劑和溶液：1.2.1.1 PH=10的氨-氯化銨緩沖溶液:溶 16.9克氯化銨于143ml濃氨水中,用水 稀釋至250ml搖勻,密圭寸保存可保存一個(gè)月。1.2.1.2鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)氧化鋅4克（干燥至恒重或基準(zhǔn)鋅3.3克稱準(zhǔn)至0.0001g用少許水濕潤，滴加1+1鹽酸溶液至樣品溶解（必要時(shí)可稍微加熱，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶，用水稀釋至刻度，搖勻用基準(zhǔn)氧化鋅配制時(shí)C=M1/81.38。用基準(zhǔn)鋅配制時(shí)C=M2/65.37。式中C鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mol/L;M1 稱取基準(zhǔn)氧化鋅的質(zhì)量g;81.38氧化鋅的摩爾質(zhì)量g/mol;M2 稱取基準(zhǔn)鋅的質(zhì)量g;65.37鋅的

7、摩爾質(zhì)量g/mol121.3 EDTA 標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/L配制:稱取EDTA二鈉20克溶于適量熱水中，用水稀釋至1000ml,搖勻。標(biāo)定:吸取與所需標(biāo)定的EDTA溶液濃度相當(dāng)?shù)匿\標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/L25.00ml 于三角瓶中，仔細(xì)滴加1+1氨水至開始出現(xiàn)白色氫氧化鋅Z N（0H2丨沉淀，加入 10mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液，加50ml水，加3-4滴鉻黑T指示劑或0.2g鉻黑T固 體指示劑，用待標(biāo)定的EDTA溶液滴定至溶液由酒紅色變?yōu)榧兯{(lán)色為終點(diǎn)。同時(shí)用 75ml水做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算：C=25C0/V1-V2式中CEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 mol/L;C0-鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液的

8、濃度；V1 滴定所消耗EDTA溶液的體積ml;V2空白試驗(yàn)消耗的體積 ml121.40.5%鉻黑T指示劑:稱取0.5克鉻黑T溶于10mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液中，用95%乙醇稀釋至1000ml,搖勻。也可用固體鉻黑T指示劑，稱取0.5克鉻黑T與50克氯化鈉研細(xì)混勻，易存放。1.2.2操作:1.221吸取水樣50ml或適當(dāng)體積（以滴定時(shí)消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積大于 15ml為宜，注入250ml三角瓶中。1.2.2.2加1-2mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液，加2滴鉻黑T指示劑或約0.2克固體 鉻黑T指示劑。1.2.2.3以EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由酒紅色變?yōu)樗{(lán)色即為終點(diǎn) （在滴入最后幾滴

9、時(shí)，兩次之間應(yīng)間隔3-5秒，記錄消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。1.2.3計(jì)算：3=1000C（V1-V2/V P2=56.08C1 P3=100.1C1P4=P2/10式中 C1 總硬度 c（C a O,mmol/L;P2總硬度（以C a O計(jì),mg/L;P3總硬度（以C a CO3計(jì),mg/L;P4總硬度德國度（°CEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 mol/L;V1 滴定水樣所消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)時(shí)所消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V水樣的體積,ml;56.08氧化鈣的摩爾質(zhì)量g/mol;100.1碳酸鈣的摩爾質(zhì)量g/mol。1.3永久硬度的測定：1.3.1試劑;同

10、總硬度。1.3.2操作;取水樣100ml,加入三角瓶中，煮沸5分鐘，冷卻沉淀后,過濾，用水充分 洗滌，濾液用水稀釋至約100ml,按總硬度操作測定并計(jì)算永久硬度。1.4暫時(shí)硬度：暫時(shí)硬度=總硬度-永久硬度1.5鈣離子的測定；1.5.1儀器:1.5.1.1酸式滴定管。1.5.1.2250三角瓶。1.5.1.3移液管。1.5.2試劑;1.5.2.1 0.05mol/L EDTA 標(biāo)準(zhǔn)溶液;1.5.2.2 1mol/L氫氧化鈉溶液（不用標(biāo)定；1.5.2.3鈣指示劑（鉻藍(lán)黑R將氯化鈉于105-107C干燥箱3-4小時(shí),干燥器中冷卻后稱取100g氯化鈉與0.5g鉻藍(lán)黑R研細(xì)，混勻，棕色瓶保 存。1.5.

11、2.41+1鹽酸溶液；1.5.2.5剛果紅試紙；1.5.3操作：取水樣50ml（鈣含量在5-10mg之間若欲測樣品是較高堿度的硬水，可加入剛果 紅試紙一小塊，用1+1鹽酸溶液中和至試紙變藍(lán)色，然后煮沸一分鐘，冷卻后滴定于250ml三角瓶中，加2ml氫氧化鈉，使PH值達(dá)12-13,加約0.2克指示劑，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。用鈣指示劑時(shí)，終點(diǎn)由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)樘焖{(lán)色。1.5.4計(jì)算;C1=1000V1C2/V2C3=40.08C1式中C1 水樣中鈣離子濃度（鈣硬,mmol/L;C2- EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mmol/L;C3水樣中鈣離子的質(zhì)量濃度，mg/L;V1 消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,m

12、l;V2水樣的體積,ml;40.08鈣離子的摩爾質(zhì)量，g/mol。1.6鎂離子的測定（有兩種方法；161（第一種方法：鎂離子的硬度（C=總硬度-鈣離子的硬度C單位以mg/L表示之。162（第二種方法：1.6.2.1原理用EDTA絡(luò)合滴定法測定。在用紫脲酸銨做指示劑時(shí)，將EDTA絡(luò)合滴定法測 定鈣后的水樣中，加入鹽酸分解紫脲酸銨，再調(diào)節(jié)PH至10,以鉻黑T作指示劑，用 EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定水樣中的鎂離子。1.6.2.2試劑1.6.2.2.1紫脲酸銨指示劑150mg紫脲酸銨（C8H4O6M5.NH4.H2O溶于100g無水乙二醇中，或用200mg紫脲酸銨與100g固體氯化鈉一起研磨至通過40-50

13、目篩孔。1.6.2.2.2其它試劑同總硬度及鈣的測定1.6.2.3操作用紫脲酸銨作指示劑測定鈣后，取滴定鈣后的溶液，用1:1鹽酸中和至剛果紅試 紙變藍(lán)，放置5-10分鐘，待溶液退至無色（若不褪色，可加熱至40-50°,使之褪色。用 氫氧化鈉中和至剛果紅試紙變紅，再加入緩沖溶液1-2ml,鉻黑T指示液1-2滴（或適 量的固體粉末指示劑，同測總硬度一樣用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。1.6.2.4計(jì)算3=1000V1C2/V2C3=24.31C1式中C1 水樣中鎂離子濃度（鎂硬,mmol/L;C2- EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mmol/L;C3水樣中鎂離子的質(zhì)量濃度,mg/L;V1 消耗ED

14、TA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2水樣的體積,ml;24.31鎂離子的摩爾質(zhì)量，g/mol。162.5說明在滴定前把溶液加熱到30-40 °可使終點(diǎn)更清楚。其它注意事項(xiàng)同總度硬度測 定的說明。1.7氯化物的測定；1.7.1試劑;1.7.1.1氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制c（N a Cl=0.0141mol/L（以氯離子計(jì),500mg/L;將氯化鈉置于坩堝中，在500600r馬弗爐（有些書上寫140C干燥兩小時(shí)中灼 燒40 50分鐘，取出在干燥器中冷卻室溫，稱取0.8240g書上是寫8.2400g溶于蒸餾 水，轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,用水稀釋至刻度，搖勻。1.7.1.2 5%g鉻酸鉀指示劑溶5g

15、鉻酸鉀（K2C r O4于少量水中，滴加硝酸銀溶液至有明顯的紅色沉淀生成，放置24小時(shí),過濾后稀釋至100ml, 搖勻。1.7.1.3 0.5%酚酞指示劑稱取0.5克酚酞，溶于50ml95%乙醇中加水稀釋至100ml。1.7.1.4 硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液 c（A g NO3=0.0141mol/L;配制:準(zhǔn)確稱取2.3956g硝酸銀，溶于蒸餾水后轉(zhuǎn)入1000ml棕色容量瓶，稀釋至 刻度搖勻標(biāo)定:吸取25.00ml氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c(N a Cl=0.0141mol/L丨于250ml三角瓶中加水25,另取50ml水于另一 250ml三角瓶中做空白，分別加入1ml鉻酸鉀指示劑, 在不斷搖動(dòng)下用硝酸銀溶液滴

16、定至磚紅色剛剛出現(xiàn)為終點(diǎn)。按下式計(jì)算:C 仁 C225.00/V1-V2式中C1 硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(A g NO3,mol/L;C2-氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 c(N a CI,mol/L;V1 滴定時(shí)消耗硝酸銀溶液的體積，ml;V2空白試驗(yàn)時(shí)消耗硝酸銀溶液的體積，ml。1.7.2操作;1.7.2.1取50ml水樣(若氯離子含量高，可取適量水樣稀釋至50ml置于250ml三角瓶中，另一三角瓶加50ml蒸餾水作為空白。1.7.2.2水樣PH=7-10可直接滴定，超出此范圍時(shí) 加入2滴酚酞作指示劑，用0.05mol/L氫氧化鈉溶液或硫酸溶液(1/2H2SO4=0.05mol/L調(diào)至酚酞 變色點(diǎn)(

17、PH=8.3。1.7.2.3加入1ml鉻酸鉀指示劑，用0.0141mol/L硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至磚紅色剛出現(xiàn)即為終點(diǎn)。記錄消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)做空白滴1.7.3 計(jì)算：P=35.45(V1-V2C1000/V式中P水樣中氯化物的質(zhì)量濃度（以CI離子計(jì),mg/L;V1 滴定水樣時(shí)消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2做空白試驗(yàn)時(shí)消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;C硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（A g NO3,mol/L;V水樣的體積,ml;35.45氯離子的摩爾質(zhì)量，g/mol。1.8電導(dǎo)率的測定；按電導(dǎo)率儀使用說明書操作。1.9 PH值的測定；按PH計(jì)使用說明書操作。2啤酒花理化分析：2.1崩解

18、時(shí)間：在500ml的燒杯中盛入約200ml自來水，放在電爐上加熱，在沸騰狀態(tài)下投入2- 3粒顆粒酒花，投入時(shí)立即按下秒表計(jì)時(shí)，待顆粒啤酒花在沸水中已膨脹并松散狀態(tài) 時(shí)，停止秒表,記錄時(shí)間（s。2.2水分的測定；2.2.1儀器;稱量瓶、電熱干燥箱、干燥器。222操作;準(zhǔn)確稱取粉碎酒花5克兩份，稱準(zhǔn)至O.OOOIg,分別置于已烘干至恒重的有蓋稱量瓶中，連同蓋一并放入恒溫的103-104C的電熱烘箱中烘1 小時(shí)。加蓋放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫，連蓋稱重。前后兩次質(zhì)量差不超過 2mg,即為 恒重。2.2.3計(jì)算；X=（M1-M2100/M1-M式中x水分含量%M1 烘干前稱量皿及樣品質(zhì)量,gM2 烘干后稱

19、量皿及樣品質(zhì)量,gM 稱量皿的質(zhì)量,g報(bào)告以平行試驗(yàn)結(jié)果的平均值表示。2.3 a酸和 3-酸:2.3.1儀器;紫外分光光度儀、5000轉(zhuǎn)離心機(jī)、感量0.1g的天平、振蕩器2.3.2試劑;2.3.2.1甲苯（分析純2.3.2.2甲醇（分析純2.3.2.36.0mol/L氫氧化鈉溶液；將氫氧化鈉配制成飽和溶液，注入聚乙烯塑料瓶 中,密閉放置至溶液清亮后吸取上清液 31.2ml注入100ml不含二氧化碳的水中，搖 勻。2.324堿性甲醇溶液；每100ml甲醇中加入0.2ml6.0mol/L氫氧化鈉溶液，此溶液 需當(dāng)天配當(dāng)天用。2.3.3操作;2.3.3.1萃取準(zhǔn)確稱取兩份經(jīng)粉碎的酒花式樣5.000g

20、分別置于250ml干凈的碘量瓶中，用移液管加入100ml甲苯，加塞稱重并記錄。將碘量瓶置于振蕩器上震蕩（或用手搖動(dòng)30分鐘,取下重新稱量（若震蕩后失重超過0.3克應(yīng)重做試驗(yàn)。將碘量瓶傾 斜靜置5分鐘備用。2.3.3.2測定吸光度；a稀釋A溶液用移液管吸取萃取液5.0ml注入100ml容量瓶用甲醇稀釋至刻度, 搖勻。b稀釋B溶液用移液管吸取A溶液3.0ml注入50ml容量瓶中，用堿性甲醇溶液 稀釋至刻度，搖勻。C參比溶液吸取5.0ml甲苯注入100ml容量瓶中用甲醇稀釋至刻度，搖勻后吸取 3.0ml注入50ml容量瓶中，用堿性甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻。在波長275、325、355nm下用10mm

21、石英比色皿分別測定稀釋 B溶液的吸光 度，參比溶液作為空白。測定時(shí)應(yīng)迅速讀數(shù)。2.3.4計(jì)算；D=V A V B/500EV=100.50/500.5.3=0.667W=d(-51.56A355+73.79A325-19.07A275W0=W/1-G式中d稀釋指數(shù)；500-轉(zhuǎn)換系數(shù)；W-a-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;W0a-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（以絕干計(jì),%;G酒花式樣水分含量，3酸的計(jì)算；W=0.667（55.57A355-47.59A325+5.10A275W0=W/1-GW 伕酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;W0 伕酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（以絕干計(jì),%；G-酒花水分含量,%。注意:所有有機(jī)試劑均有毒性，操作時(shí)應(yīng)戴口罩。測定吸光

22、度時(shí)，操作應(yīng)迅速，防 止有機(jī)溶劑的大量蒸發(fā)。平行試驗(yàn)之差 w 0.2%3麥芽質(zhì)量的理化分析3.1水分的測定；3.1.1儀器;粉碎機(jī)、電熱干燥箱、分析天平、稱量瓶、干燥器。3.1.2操作;粉碎前將鐵丁、石粒等堅(jiān)硬雜質(zhì)檢出來。細(xì)粉碎樣品后，及時(shí)稱取3-5克，稱準(zhǔn)至0.0002g置于于烘至質(zhì)量恒定的稱量瓶中，此操作應(yīng)迅速進(jìn)行。將稱量瓶置于 105-107C電熱干燥箱內(nèi)，取下蓋子,烘3小時(shí)后，蓋上蓋子移入干燥器內(nèi)冷卻,30分鐘 后稱量。3.1.3計(jì)算;W=（m1-m2/m1-m100%W 麥芽水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，;m稱量瓶的質(zhì)量,g;ml烘干前稱量瓶加樣品的質(zhì)量，g;m2烘干后稱量瓶加樣品的質(zhì)量，g;計(jì)算

23、結(jié)果保留三位小數(shù)。3.2協(xié)定法糖化麥汁制備；略。3.3粗細(xì)粉浸出物差的測定；3.3.1操作;分別測出協(xié)定法麥汁粗粉和細(xì)分中的浸出物（絕干,。3.3.2計(jì)算;粗細(xì)粉浸出物差（絕干,=細(xì)分浸出物（絕干,-粗粉浸出物（絕干,。3.4色度的測定；按EBC色度儀操作測定。3.5總氮的測定;3.5.1試劑;3.5.1.1濃硫酸。3.5.1.2 400g/L氫氧化鈉:溶400g氫氧化鈉于不含氨的水中,再稀釋至1L,靜置，使 碳酸鈉沉淀，吸取上層澄清溶液儲(chǔ)存于聚乙烯塑料瓶中(或儲(chǔ)存于帶有橡皮塞的瓶 內(nèi)。此溶液的相對(duì)密度應(yīng)為1.36以上。3.5.1.3混合催化劑：二氧化鈦:結(jié)晶硫酸銅：硫酸鉀=0.3:0.3:

24、10。3.5.1.4 20g/L 硼酸。3.5.1.5溴甲酚綠混合指示劑；稱取0.1克溴甲酚綠，溶解于100ml95%酒精溶液 中。另稱取0.1克甲基紅指示劑溶解于100ml95%酒精溶液中。兩份溶液按10:4的 比例混合。此指示劑在酸性溶液中呈粉紅色，在堿性溶液中呈藍(lán)色，終點(diǎn)為灰色。3.5.1.6鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 c(HCI 或(1/2H2SO4=0.1mol/L;吸取1+1鹽酸溶液18ml或1+1硫酸溶液6ml,用無二氧化碳水稀釋至1000ml。標(biāo)定方法一；準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)試劑硼砂(N a2B4O7.10H2O0.4-0.5克之間，稱準(zhǔn)至0.0001g稱量前該試劑不需要干燥。溶于 40ml水

25、中，加入2-3滴0.2%甲基紅指示劑 (0.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中，溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸溶液滴 定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)(大約消耗23ml左右。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。按 下式計(jì)算:c=1000m/190.7(V1-V2;式中c鹽酸或硫酸準(zhǔn)溶液的濃度 c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; m 硼砂的質(zhì) 量,g;V1 滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;190.7 硼砂的摩爾質(zhì)量 M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/mol。標(biāo)定方法二：稱取在140C干燥箱干燥至恒重(3小時(shí)的無水碳酸鈉0

26、.1-0.15克, 稱準(zhǔn)至0.0001g溶于無二氧化碳水的三角瓶中(做三個(gè)平行試驗(yàn)，各加入100ml無二 氧化碳水溶解，分別加入2滴甲基橙指示劑，用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅色為止，記錄用量，按下式計(jì)算:C=m1000/V52.995式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三：準(zhǔn)確稱取經(jīng)140C干燥至恒重的無水碳酸鈉 0.15-0.2克于三角瓶內(nèi) 溶于40ml水，加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配制待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液 滴定至溶液由

27、綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2分鐘，冷卻，繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。 同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。C=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度 C(HCI或C(1/2H 2. SO4. ,mol/Lm為無水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積 ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積 ml。52.99為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol1000為換算成升后的單位。3.5.2 操作;3.521消化;3.521.1準(zhǔn)確稱取兩份1.500g左右混合均勻的粉碎樣品(或經(jīng)測水分的樣品，小 心轉(zhuǎn)移到兩個(gè)完全干燥的凱氏燒瓶中。3.5.2.1.2每克加約10克粉狀混

28、合催化劑與樣品混合后,再加入20ml濃硫酸，搖 勻。瓶中置一玻璃漏斗，然后將燒瓶成45。斜置在加熱器上。3.5.2.1.3文火加熱到泡沫停止發(fā)生后強(qiáng)熱使之沸騰，直至溶液轉(zhuǎn)為透明，再繼續(xù) 強(qiáng)熱20-30分鐘,最終溶液應(yīng)呈過量硫酸銅的綠色。3.522蒸餾;3.5.2.2.1消化液冷卻后，緩緩加入250ml水混勻，再冷卻。3.5.2.2.2連接燒瓶與蒸餾裝置，溜出管的尖端插入一 250ml三角瓶中。瓶中盛有約25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑。溜出管尖端應(yīng)在 液面以下。3.5.2.2.3在燒瓶中加入2克鋅粒，塞緊瓶塞，通過加液漏斗加入70ml40%氫氧化 鈉溶液，輕輕搖動(dòng)燒瓶,使內(nèi)溶

29、物混勻。加熱蒸餾到溜出液體約達(dá)180ml時(shí)停止蒸餾。3.5.2.2.4用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定蒸餾液到綠色消失轉(zhuǎn)為灰色。3.5.2.2.5同樣操作做一不加樣品的空白測定。3.5.3計(jì)算;W= 0.0140(V2-V1M/W0(1-G.100%W仁 6.25W式中一W無水麥芽中含氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，;V1空白測定中標(biāo)準(zhǔn)酸的用量，ml;V2樣品測定中標(biāo)準(zhǔn)酸的用量，ml;M標(biāo)準(zhǔn)酸的摩爾濃度，mol/L;G樣品中水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;0.0140每Immol氮的克數(shù)；6.25麥芽中氮和蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換系數(shù)；W0樣品質(zhì)量,g；W1樣品中含蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（絕干,。3.6可溶性氮的測定：3.6.1儀器、試劑與總氮的測

30、定。3.6.2操作;3.6.2.1樣品的消化吸取制備好的協(xié)定法麥芽汁25.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶中，加入濃硫酸2-3ml,小心蒸發(fā)至近干。加入混合催化劑約10克,緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生后，大火加熱使之沸騰，待溶液清亮后，再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。3.6.2.2蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后，緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻,冷 卻。向凱氏燒瓶內(nèi)放入約2克鋅?；驇讐K小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置，溜出 管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的錐形瓶中，溜出 管的尖端應(yīng)在液面以下。通過加液漏斗加入 70ml10

31、mol/L氫氧化鈉溶液于凱氏燒瓶 中，輕輕搖勻,使內(nèi)容物混合均勻，然后加熱蒸餾,待溜出液達(dá)到180ml時(shí)停止蒸餾。362.3滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液,至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛?色為終點(diǎn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)操作1,2,3步驟用25.00ml水代替麥芽汁做一不加樣品的空白試驗(yàn)。記錄 消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積3.6.3計(jì)算麥芽中可溶性氮的計(jì)算W=0.0140(V2-V1Cw1/25d20W2式中W 麥芽中可溶性氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,;W1 麥芽的浸出物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,;V1 空白試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2樣品試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，

32、ml;C-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; W2 同一樣品麥 芽制備的協(xié)定法麥芽汁的浸出物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，； d20-同一樣品麥芽制備的協(xié)定法麥 芽汁在20C時(shí)的相對(duì)密度；0.0140-氮的摩爾質(zhì)量 M,kg/mol。3.7庫爾巴哈值的計(jì)算；W=(W1/W2.100%式中W麥芽的庫爾巴哈值；W1 麥芽的可溶性氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,;W2麥芽的總氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%。3.8浸出物的測定；3.8.1儀器;附溫比重瓶、分析天平，高精度恒溫水浴3.8.2操作;略。3.8.3計(jì)算;麥芽汁比重(d20=m2-m/m1-m式中m比重瓶質(zhì)量,g;ml 比重瓶和水的質(zhì)量,g;

33、m2比重瓶和樣品的質(zhì)量,g;查比重與浸出物含量對(duì)照表得相應(yīng)的麥汁的浸出物含量(G。E1(%=(800+MG/100-GE2(%=100E1/100-M式中一E1風(fēng)干麥芽的浸出物,%; M麥芽水分,%;E2無水麥芽的浸出物，; G查表得出的浸出物。3.9煮沸色度的測定；3.9.1主要儀器;500ml燒瓶、球形回流冷凝管、可調(diào)電爐、110C甘油浴或其它 的油浴。3.9.2操作;麥芽汁煮沸回流：移取制備好的協(xié)定法麥芽汁200ml于500ml平底或圓底燒瓶 中，將燒瓶放甘油浴中，置于可調(diào)電爐上，連接球形回流冷凝管，開啟電爐和冷卻水 加 熱沸騰(麥芽汁沸騰，調(diào)節(jié)電爐，保持油浴溫度在(108 ±

34、C ,回流兩小時(shí)，取下燒瓶，用自 來水快速冷卻至室溫后，再用中速濾紙過濾。色度的測定：按EBC色度儀操作方法測定色度。結(jié)果保留一位小數(shù)3.10 a氨基氮的測定;3.10.1 儀器；高精度恒溫水浴、可見分光光度計(jì)、沸騰水浴。3.10.2試劑;3.10.2.1顯色劑10g N a2HPO4.12H2O;6g KH2PO4;0.500g水合茚三酮；0.300g 果糖。稱取以上試劑混勻，用水溶解并稀釋至100ml,搖勻（此溶液在冰箱內(nèi)可保存二 周,PH 應(yīng)為 6.6-6.8。3.10.2.2稀釋溶液稱取KIO32g溶于600ml水中加入96%乙醇400ml,冰箱內(nèi)5C保存。3.10.2.3甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)

35、備液稱取甘氨酸0.1072g用水溶解并定容至100ml,搖勻,于冰箱內(nèi)儲(chǔ)存。此溶液a-氨基氮的含量為200mg/L.3.10.2.4甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液（使用時(shí)現(xiàn)配吸取甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00ml，用水稀釋至100ml。此標(biāo)準(zhǔn)溶液的a-氨基氮含量為2mg/L3.10.3操作3.1031樣液的制備取協(xié)定法麥芽汁1.00ml用水稀釋至100ml搖勻。3.10.3.2取7支試管并編號(hào)，于1、2、3管中分別加入上述稀釋過的樣液 2.0ml,4 號(hào)管中加入水2.0ml,5、6號(hào)管中分別加入甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液2.0ml。各加入顯色劑1.00ml,搖勻，并分別放一顆玻璃球于試管口 上，以避免蒸發(fā)損失，將試管放入水

36、浴中準(zhǔn)確加熱16分鐘。3.10.3.3后在20T水浴中冷卻20分鐘。各加入碘酸鉀稀釋溶液 5.00ml,混勻，并 在30分鐘內(nèi)，在570nm波長下,用1cm比色皿以4號(hào)管為空白，分別測其吸光度。3.10.4計(jì)算C=2 nA1/A2式中c麥芽汁中a-氨基氮的質(zhì)量濃度，mg/L;A1 樣品溶液的平均吸光度；A2甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度；2甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液中a-氨基氮的含量,mg/L;n樣品溶液的稀釋倍數(shù)(若按操作將1ml樣品稀釋至100ml,n為100。麥芽中a-氨基氮的含量按下式計(jì)算；W=(800+W0C/1000d20(100-G(100-W0式中W麥芽中a-氨基氮的含量,mg/100g無水麥

37、芽；c麥芽汁中a-氨基氮的含量,mg/L;W0麥芽水分的百分含量,%;d20麥芽汁在20C時(shí)的相對(duì)密度;G麥芽汁浸出物質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。計(jì)算結(jié)果保留兩位小數(shù)。注意事項(xiàng)； 必須嚴(yán)防任何外界痕量氨基酸的引入，為此有關(guān)玻璃器皿都必須仔細(xì)洗滌，洗凈后只能接觸其外部表面。移液管必須用吸球吸，不能用嘴吸，以免唾液引入氨基酸，拿玻璃球最好用鑷子。 測定中加入果糖作為還原性發(fā)色劑。碘酸鉀在稀溶液中使茚三酮保持氧化態(tài)，以阻止進(jìn)一步發(fā)生不希望的生色反應(yīng)。3.11麥芽蛋白質(zhì)區(qū)分的測定（隆丁區(qū)分法；3.11.1 儀器；蛋白質(zhì)測定儀、蛋白質(zhì)消化爐、高精度恒溫水浴鍋。3.11.2試劑；3.11.2.1濃硫酸。3.11.2.2

38、400g/L氫氧化鈉:溶400g氫氧化鈉于不含氨的水中，再稀釋至1L,靜置， 使碳酸鈉沉淀，吸取上層澄清溶液儲(chǔ)存于聚乙烯塑料瓶中（或儲(chǔ)存于帶有橡皮塞的瓶 內(nèi)。此溶液的相對(duì)密度應(yīng)為1.36以上。3.11.2.3混合催化劑:二氧化鈦:結(jié)晶硫酸銅：硫酸鉀=0.3:0.3: 10。3.11.2.4 20g/L 硼酸3.1125溴甲酚綠混合指示劑；稱取0.1克溴甲酚綠，溶解于100ml95%酒精溶液 中。另稱取0.1克甲基紅指示劑溶解于100ml95%酒精溶液中。兩份溶液按10:4的 比例混合。此指示劑在酸性溶液中呈粉紅色，在堿性溶液中呈藍(lán)色，終點(diǎn)為灰色。3.11.2.6 鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 c（HCI

39、 或（1/2H2SO4=0.1mol/L;吸取1+1鹽酸溶液18ml或1+1硫酸溶液6ml,用無二氧化碳水稀釋至1000ml3.11.2.7不含氨的水取強(qiáng)堿性及強(qiáng)酸性陰離子交換樹脂（用量2:1,依次填充于直徑3cm長50cm的交換柱中，將水以每分鐘3-5ml的流速通過交換柱。標(biāo)定方法一；準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)試劑硼砂（N a2B4O7.10H2O0.4-0.5克之間，稱準(zhǔn)至0.0001g稱量前該試劑不需要干燥。溶于 40ml水中，加入2-3滴0.2%甲基紅指示劑 （0.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中，溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸溶液滴 定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)（大約消耗23ml左右。同時(shí)

40、用40ml水做空白試驗(yàn)。按 下式計(jì)算:c=1000m/190.7（V1-V2;式中c鹽酸或硫酸準(zhǔn)溶液的濃度 c（HCI或c（1/2H2SO4,mol/L; m 硼砂的質(zhì)量 ,g;V1 滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;190.7 硼砂的摩爾質(zhì)量 M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/mol。標(biāo)定方法二：稱取在140C干燥箱干燥至恒重（3小時(shí)的無水碳酸鈉0.1-0.15克, 稱準(zhǔn)至0.0001g溶于無二氧化碳水的三角瓶中（做三個(gè)平行試驗(yàn)，各加入100ml無二 氧化碳水溶解，分別加入2滴甲基橙指示劑，用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅

41、 色為止，記錄用量，按下式計(jì)算:C=m1000/V52.995式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三：準(zhǔn)確稱取經(jīng)140C干燥至恒重的無水碳酸鈉 0.15-0.2克于三角瓶內(nèi) 溶于40ml水，加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，用配制待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液 滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2分鐘，冷卻，繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。 同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。C=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度 C(HCI或C(1

42、/2H 2. SO4. ,mol/Lm為無水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積 ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積 ml。52.99為無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol。1000為換算成升后的單位。3.11.2.7 16%單寧稱取16g單寧溶于水并定容至100ml。3.11.2.8相對(duì)密度為1.4的硫酸量取92ml水加54.3ml濃硫酸。3.11.2.9 50%鉬酸鈉50g鉬酸鈉溶于水并定容至100ml。3.11.3協(xié)定法麥汁總氮(總可溶性氮的測定3.1131樣品的消化吸取制備好的協(xié)定法麥芽汁10.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶中，加入濃硫酸2ml左右

43、，小心蒸發(fā)至近干。加入混合 催化劑約10克，緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生 后，大火加熱使之沸騰，待溶液清亮后，再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。3.11.3.2蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后，緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻, 冷卻。向凱氏燒瓶內(nèi)放入約2克鋅粒或幾塊小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置 ，溜 出管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的500ml錐形 瓶中,溜出管的尖端應(yīng)在液面以下。通過加液漏斗加入 70ml10mol/L氫氧化鈉溶液 于凱氏燒瓶中，輕輕搖勻，使內(nèi)容物混合均勻，然后加熱蒸餾，待溜出液達(dá)到180ml時(shí) 停止蒸餾。

44、3.11.3.3滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液，至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛?色為終點(diǎn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)操作1,2,3步驟用25.00ml水代替麥芽汁做一不加樣品的空白試驗(yàn)。記錄 消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。3.11.3.4計(jì)算協(xié)定法麥汁總氮(總可溶性氮的計(jì)算W(總氮,mg/100ml=10(V 2-V 1.C.14式中W 100ml協(xié)定法麥汁中總氮的毫克數(shù)(mg/100ml;V1 空白試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;V2樣品試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml;c-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 c(HCI或c (1/2H2SO4,mol/L;14氮的摩爾質(zhì)

45、量 M,g/mol。3.11.4用單寧沉淀后，濾液中氮的測定：取100ml麥芽汁于200ml容量瓶中，加水至180-185ml，加4ml相對(duì)密度為1.4的 硫酸，混勻。置20 C水浴中保溫15-20分鐘。加10ml單寧溶液，加水至刻度搖勻。立即用折疊紙過濾，重復(fù)過濾至澄清。取濾液50ml,用凱氏定氮法測其含氮量：總氮(N,mg/100ml=4(V2-V1.c.14。因此，用單寧 沉淀后 50ml 濾液中含氮量(mg 是:W1(N,mg/50ml=2( V 2-V 1.C.143.11.5用磷鉬酸沉淀后，濾液中氮的測定：取100ml麥芽汁于200ml容量瓶中，加75ml水及10ml鉬酸鈉溶液搖勻

46、，置20C水浴中保溫15-20分鐘加10ml相對(duì)密度為1.4的硫酸，加水至刻度搖勻。立即用折疊紙過濾，重復(fù)過濾至澄清。取濾液50ml,用凱氏定氮法測其含氮量：W2(總氮，mg/50ml=2(V2-V 1.C.14三個(gè)區(qū)分中氮含量(mg/100ml分別為A、B、CA=(W-W1.200/50.1000/ V A 區(qū)分=A/W.100%B=(W1-W2.200/50.100/ V B 區(qū)分=B/W.100%C=W2.200/50.100/V C 區(qū)分=C/W. 100%V為取樣量(測總氮時(shí)的取樣量，ml。3.11.6 說明：用單寧沉淀后高分子氮對(duì)溫度的變化非常敏感，最好實(shí)驗(yàn)室溫度能保持近似20r

47、.若用單寧沉淀后不能立即過濾，則在繼續(xù)操作前，應(yīng)在20r放置15分鐘。在低 于20r時(shí)，濾液能重新混濁，甚至可以形成沉淀，這沉淀不能用過濾法除去。在測定濾 液的含氮量前應(yīng)充分搖勻。因此用單寧沉淀后應(yīng)立即過濾。4麥汁的理化分析;4.1麥汁PH值的測定4.1.1儀器PH計(jì)4.1.2試劑PH=4.008和PH=6.86(均為25C緩沖溶液。4.1.3操作按PH計(jì)使用說明書操作。4.2總酸的測定4.2.1儀器一般玻璃儀器4.2.2試劑1 %酚酞指示劑及0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.2.3操作吸取麥汁10ml于250ml三角瓶中,加90ml水加2-3滴1%酚酞指示 劑，用0.1mol/L氫氧化鈉

48、標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色。另取100ml水加2-3滴1%酚酞指示劑做空白試驗(yàn)。4.2.4計(jì)算V=10c(V2-V1式中V100ml麥汁中消耗1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)的毫升數(shù)。c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度，mol/L。V2 0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量，ml。V1 空白試驗(yàn)消耗0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml。10取樣量換算成 100ml麥汁的系數(shù)。4.3色度的測定按EBC比色計(jì)測定。4.4總還原糖的測定441儀器50ml滴定管、250ml三角瓶、可調(diào)電爐。442試劑442.11%次甲基藍(lán)指示劑稱取1g次甲基藍(lán)用水稀釋至100ml。442.2 30%醋酸溶液量取28.5ml冰

49、醋酸用水稀釋至100ml。4.4.2.3 0.5%淀粉溶液稱取0.5g于105C烘2小時(shí)的可溶性淀粉，用少量水調(diào)成 糊狀,再用煮沸的水稀釋至100ml。4.4.2.4 0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液A配制稱取硫代硫酸鈉26g或無水硫代硫酸鈉16g及0.2g無水碳酸鈉溶于 1000ml水中,緩緩煮沸10分鐘，冷卻。將溶液保存于棕色具塞瓶中，放置1-2周后過 濾備用。使用前進(jìn)行標(biāo)定。B標(biāo)定稱取于120C烘干至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀 0.15-0.2g,稱準(zhǔn)至0.0001g。置 于500ml具塞錐形瓶(或碘量瓶中，溶于25ml煮沸后冷卻的水中加2g碘化鉀及 20ml4mol/L硫酸。搖勻。待碘化鉀溶

50、解后于暗處放置10分鐘,加150ml水,用配制好待標(biāo)定的硫代硫酸鈉溶液滴定。近終點(diǎn)時(shí)加入3ml0.5%淀粉指示劑，繼續(xù)滴定至溶液由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榱辆G色(亮藍(lán)綠色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算：C=m/0.04903(V2-V1式中C硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(N a2S2O3,mol/L;m重鉻酸鉀的質(zhì)量,g;V2滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，ml;V1 空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，ml;0.04903-重鉻酸鉀的摩爾質(zhì)量,kg/mol。442.5斐林溶液A溶液稱取34.639g結(jié)晶硫酸銅用水溶解后稀釋至 500.0ml。B溶液稱取173g酒石酸鉀鈉(N a KC4H4O6.4H2O和

51、50g氫氧化鈉，混合后溶于 水中稀釋至500.0ml。斐林溶液的標(biāo)定：吸取A溶液10.00ml注入250ml三角瓶中，加4ml30%醋酸溶液和3g碘化鉀，再 加25ml煮沸后冷卻的水，使碘化鉀溶解，以0.1mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定使溶液呈微黃色，加硫氰酸銨2g,0.5%淀粉溶液3ml,攪拌 后繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。斐林溶液的校正系數(shù)f計(jì)算如下:f=0.06355cV/10.0.01763式中f斐林溶液的校正系數(shù)；c-硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(N a2S2O3,mol/L。V滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml。0.06355-銅的摩爾質(zhì)量,kg/mol;0.01763-斐林溶液的A

52、溶液中銅的質(zhì)量濃度,g/ml。4.4.3操作:4.4.3.1吸取麥汁5.0ml用水稀釋至200ml。4.4.3.2分別吸取斐林溶液A和B溶液各5.0ml注入250三角瓶中，加10ml水稀釋，加熱使其在5分鐘內(nèi)沸騰,在沸騰狀態(tài) 下,用滴定管滴入稀釋麥汁至藍(lán)色即將消失時(shí)，加1-2滴次甲基藍(lán)指示劑，繼續(xù)滴定至 溶液由藍(lán)色變?yōu)榧t色。443.3分別吸取斐林溶液A和B溶液各5.0ml注入250ml三角瓶中，加少于預(yù)備試驗(yàn)所消耗的稀釋麥汁約1ml,加熱至沸后，加1-2滴次甲基藍(lán)指示劑，用稀釋麥汁滴定至溶液由藍(lán)色變?yōu)榧t色即為終點(diǎn)。記 錄消耗稀釋麥汁的總量。4.4.4計(jì)算4.4.4.1根據(jù)稀釋麥汁在正式測定中的

53、用量，從附錄表查得相應(yīng)的麥芽糖量 C14.4.4.2計(jì)算100ml麥汁樣品中還原糖的含量 C仁fnC0/10004.4.4.3計(jì)算每100g麥汁浸出物中還原糖的含量 C=fc0 n/1000WD式中C1 麥汁總還原糖（以麥芽糖計(jì),g/100ml麥汁；C2麥汁總還原糖（以麥芽糖計(jì),g/100g麥汁浸出物；f斐林溶液的校正系數(shù)；C0從附錄表查得麥芽糖量,mg/100ml麥汁；n麥汁的稀釋倍數(shù)；W麥汁中浸出物的含量；D麥汁在20C時(shí)的相對(duì)密度。操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制加熱時(shí)間。由沸騰至滴定完應(yīng)在3分鐘內(nèi)結(jié)束。4.5苦味質(zhì)的測定4.5.1儀器35ml派來克斯硬質(zhì)玻璃血清管，帶有螺紋頸口、塑料蓋、回轉(zhuǎn)震蕩器 振

54、幅2-3cm、離心機(jī)（轉(zhuǎn)速3000、紫外分光光度計(jì)。4.5.2試劑4.5.2.16mol/L鹽酸250ml濃鹽酸加250ml重蒸餾水；4.522異辛烷;4.5.2.3重蒸餾水。4.5.3操作4.5.3.1取20 C的麥汁5ml于35ml離心管內(nèi)，并加入0.5ml6mol/L鹽酸和20ml 異辛烷。4.5.3.2再加入3個(gè)玻璃球，擰上帶有聚丙烯塞的蓋，并用回轉(zhuǎn)振蕩器（130轉(zhuǎn)/分鐘 在20C下震蕩15分鐘。4.5.3.3以每分3000轉(zhuǎn)離心3分鐘。4.5.3.4取離心后上層清液置于1cm石英比色皿中，在波長275nm處,以5ml重蒸 水代替麥汁用同樣方法作為空白，測其吸光度。（書上是直接用異辛烷

55、做為空白，測其 吸光度。4.5.4 計(jì)算 C=50A275式中C麥汁樣品中苦味質(zhì)含量，BU;A275波長275nm處的吸光度。4.6麥汁總可溶性氮的測定4.6.1儀器及試劑：與測總氮相同462樣品的消化吸取過濾后的麥芽汁10.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶 中，加入濃硫酸2-3ml,小心蒸發(fā)至近干。加入混合催化劑約10克,緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生后，大火加熱使之沸騰，待溶液清亮后，再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。4.6.3蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后，緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻，冷 卻。向凱氏燒瓶內(nèi)放入約2克鋅?；驇讐K小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置，溜出 管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的錐形瓶中，溜出 管的尖端應(yīng)在液面以下。通過加液漏斗加入70ml10mol/L(40%氫氧化鈉溶液于凱氏燒瓶中，輕輕搖勻，使內(nèi)容物混合均勻，然后加熱蒸餾，待溜出液達(dá)到180ml時(shí)停止蒸 餾。4.6.4滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液，至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛疑珵榻K點(diǎn)。記錄消