福建醫(yī)科大學(xué)研究生生物化學(xué)考試經(jīng)典總結(jié)

1、福建醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)考試經(jīng)典總結(jié)生物化學(xué)導(dǎo)入泛素化：泛素與選擇性被降解蛋白質(zhì)形成共價連接，并使其激活，即泛素化。自噬（autophagy）：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)雙層膜包裹細(xì)胞內(nèi)需降解的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等成分形成自噬體(autophagosome)，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體(autolysosome)，降解其所包裹的內(nèi)容物的生物學(xué)過程。未折疊蛋白應(yīng)答（unfolded protein response，UPR）：分泌性蛋白和膜蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)未能形成正確折疊，未折疊蛋白的累積，則引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。細(xì)胞出現(xiàn)的一系列反應(yīng)，以應(yīng)對ERS，稱為未折疊

2、蛋白應(yīng)答（unfolded protein response，UPR）蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（折疊酶）（protein disulfide isomerase，PDI）：蛋白質(zhì)二硫鍵的形成影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和折疊，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)催化二硫鍵的酶也具有異構(gòu)作用，稱為二硫鍵異構(gòu)酶。脯氨酰順-反異構(gòu)酶(peptide prolyl-cis-trans isomerase, PPI)：多肽鏈中肽酰-脯氨酸間形成的肽鍵有順反兩種異構(gòu)體，空間構(gòu)象差別明顯。脯氨酰順-反異構(gòu)酶可促進(jìn)上述順反兩種異構(gòu)體之間的轉(zhuǎn)換。脯氨酰順-反異構(gòu)酶催化這種異構(gòu)化的過程，可加速蛋白質(zhì)的折疊。蛋白質(zhì)質(zhì)量調(diào)控的研究內(nèi)容及意義研究內(nèi)容：1.

3、合成正確蛋白質(zhì) 2.降解異常蛋白質(zhì) 3.選擇結(jié)構(gòu)、功能正確的蛋白蛋白質(zhì)質(zhì)量調(diào)控意義：1. 細(xì)胞維持自穩(wěn)狀態(tài)的一種選擇性代謝機制。2. 失效的蛋白質(zhì)質(zhì)量控制是許多疾病的分子病因。蛋白質(zhì)折疊模式有哪幾種1. 自組裝模式（空間結(jié)構(gòu)按等級進(jìn)行、非極性殘基間疏水作用介導(dǎo)、牛胰RNAase恢復(fù)天然構(gòu)象和功能）2. 輔助性蛋白參與（輔助性蛋白、分子伴侶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（折疊酶）、脯氨酰順-反異構(gòu)酶）輔助性蛋白的種類及功能種類：1）分子伴侶 (molecular chaperon) 2）蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3） 肽-脯氨酰順反異構(gòu)酶(p

4、eptide prolyl-cis-trans isomerase, PPI) 。功能：1）封閉蛋白疏水區(qū)段，保護(hù)新生肽段；2）構(gòu)成隔離環(huán)境，蛋白質(zhì)互不干擾進(jìn)行折疊；3）應(yīng)激時，使已折疊的蛋白質(zhì)去折疊，再誘導(dǎo)其正確折疊。4）促進(jìn)二硫鍵形成正確的配對。分子伴侶的定義、分類及作用定義為：能夠協(xié)助其它蛋白質(zhì)分子，使之折疊成具有天然構(gòu)象蛋白質(zhì)的分子。分類：熱休克蛋白、伴侶分子、核質(zhì)蛋白。生物學(xué)功能： 輔助蛋白質(zhì)折疊；直接參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等。自噬過程1.自噬體膜包裹降解物：在應(yīng)激時，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基膜識別并包裹降解物；2.自噬體形成：自噬體膜延伸、閉合形成自噬體；3.自噬溶酶體形成：自噬體與溶

5、酶體融合形成自噬溶酶體，降解內(nèi)容物。未折疊蛋白應(yīng)答（UPR）作用1. 保護(hù)細(xì)胞存活通過上調(diào)細(xì)胞存活基因的表達(dá)，減少新生肽的合成，增加分子伴侶和折疊酶的產(chǎn)量，以促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊。2. 激活泛素化，清除未折疊蛋白UPR通過泛素化蛋白途徑介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白質(zhì)降解（ER-associated degradation，ERAD），清除未折疊蛋白。3. 促進(jìn)細(xì)胞凋亡UPR通過三種蛋白激酶作用，將持續(xù)激活線粒體依賴和線粒體非依賴細(xì)胞凋亡途徑，清除未折疊蛋白累積的細(xì)胞。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與疾病超二級結(jié)構(gòu)：在許多蛋白質(zhì)分子中，二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)組合，被稱為超二級

6、結(jié)構(gòu)。模體：在許多蛋白質(zhì)分子中，二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個特殊的空間構(gòu)象，具有特殊功能，稱為模體。結(jié)構(gòu)域：大分子蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)?？煞指畛梢粋€或數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊得較為緊密，各行使其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。分子伴侶：是細(xì)胞內(nèi)一類通過提供一個保護(hù)環(huán)境，可識別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊的保守蛋白質(zhì)。熱休克蛋白HSP：熱休克蛋白屬于應(yīng)激反應(yīng)性蛋白質(zhì)，高溫應(yīng)激可誘導(dǎo)該蛋白質(zhì)合成。熱休克蛋白包括HSP70、HSP40和GrpE三族。變構(gòu)效應(yīng)(allosteric effect)：蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨其功能的變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)。分子?。喝魏斡?/p>

7、遺傳原因引起的蛋白質(zhì)功能異常所帶來的疾病都是分子病。朊蛋白：又名蛋白質(zhì)傳染因子, 是一種非常特殊的傳染病的病原體。蛋白質(zhì)在生命活動中的作用1. 酶的催化作用2.控制生長與分化3.轉(zhuǎn)化和儲存功能4.運動功能5.結(jié)構(gòu)支持作用6.免疫保護(hù)作用 7.代謝調(diào)節(jié)作用 8.接受和傳遞信息9.生物膜功能10.感染和毒性作用11.其它作用 常見的膜體結(jié)構(gòu)有哪些1. 鈣結(jié)合膜結(jié)構(gòu) 2.DNA結(jié)合膜結(jié)構(gòu)模體（鋅指結(jié)構(gòu)）根據(jù)結(jié)構(gòu)域可將蛋白分為哪幾類1.反平行螺旋結(jié)構(gòu)域（全-結(jié)構(gòu)）2.平行或混合型折疊片結(jié)構(gòu)域（，-結(jié)構(gòu)）3.反平行折疊片結(jié)構(gòu)域(全-結(jié)構(gòu))4.富含金屬或二硫鍵結(jié)構(gòu)域（不規(guī)則小蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)）分子伴侶的定義及功

8、能分子伴侶是細(xì)胞內(nèi)一類通過提供一個保護(hù)環(huán)境，可識別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊的保守蛋白質(zhì)。主要作用：封閉待折疊蛋白質(zhì)的暴露的疏水區(qū)段；創(chuàng)建一個隔離的環(huán)境，可以使蛋白質(zhì)的折疊互不干擾；誘導(dǎo)錯誤聚集的肽段解聚誘導(dǎo)二硫鍵的形成。蛋白質(zhì)構(gòu)象改變導(dǎo)致疾病的機制蛋白質(zhì)錯誤折疊后相互聚集，聚集蛋白抵抗蛋白水解酶，產(chǎn)生淀粉樣纖維沉淀，而致病?！昂芸赡転锳D”的新診斷標(biāo)準(zhǔn)核心癥狀（早期、顯著的情景記憶障礙）+至少1項支持特征 存在內(nèi)側(cè)顳葉萎縮； 腦脊液生物標(biāo)志物異常； (AD相關(guān)蛋白標(biāo)志物:如淀粉樣蛋白42、總tau蛋白及磷酸化tau蛋白） 雙側(cè)顳葉糖代謝率降低或其他示蹤劑預(yù)見的AD病

9、理改變； 直系親屬中有被證實的常染色體顯性遺傳突變所致AD。新標(biāo)準(zhǔn)強調(diào)了早期場景記憶（3W：什么時間、什么地點和發(fā)生了什么事）障礙的重要性。脂蛋白與疾病血脂：血漿所含脂質(zhì)統(tǒng)稱血脂，包括：甘油三酯、磷脂、膽固醇及其酯以及游離脂肪酸。脂蛋白：血脂與血漿中的蛋白質(zhì)結(jié)合，以脂蛋白(lipoprotein)形式而運輸。脂蛋白受體：血液中脂蛋白可與細(xì)胞膜上存在的特異受體相結(jié)合，被攝取進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行代謝。脂蛋白受體在決定脂類代謝途徑、參與脂類代謝、調(diào)節(jié)血漿脂蛋白水平等方面起重要的作用。清道夫受體：是吞噬細(xì)胞表面的一組異質(zhì)性分子，至少以6種不同的分子形式存在?？勺R別乙?；兔芏戎鞍准案裉m氏陰性菌LPS，格蘭

10、氏陽性菌的磷壁酸等陰離子聚合體，也可識別由細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸。它們參與對病原體的識別和清除，同時也對喪失唾液酸的陳舊紅細(xì)胞和某些凋亡細(xì)胞的清除。原發(fā)性高脂血癥：排除由于全身性疾病所致的繼發(fā)性高脂血癥后，所有的血脂升高均統(tǒng)稱為原發(fā)性高脂血癥。這是一類多因素引起的疾病, 是環(huán)境因素與遺傳基因異常相互作用的結(jié)果。繼發(fā)性高脂血癥：繼發(fā)性高脂血癥是指由于系統(tǒng)性疾病或藥物所引起的血脂異常。 常見疾病有：甲狀腺功能減退癥、糖尿病、腎病綜合征、腎功能衰竭、肝臟疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖原累積癥、骨髓瘤、脂肪萎縮癥、急性卟啉病等。此外, 某些藥物如利尿劑、受體阻滯劑、糖皮質(zhì)激素等也可引起繼發(fā)性血脂

11、升高。脂蛋白a /LP（a）：主要是在肝臟合成,主要的功能是阻止血管內(nèi)血塊溶解，促進(jìn)動脈粥樣硬化形成,脂蛋白水平持續(xù)升高與心絞痛、心肌梗死、腦溢血有密切關(guān)系,是冠心病的獨立危險因子。脂蛋白代謝的影響因素膳食、職業(yè)、營養(yǎng)、代謝、疾病、年齡糖尿病血脂異常的機制1、 胰島素作用下降2、血脂代謝紊亂3、糖化、氧化應(yīng)激導(dǎo)致脂蛋白結(jié)構(gòu)異常小而密的LDL致動脈粥樣硬化的作用動脈粥樣硬化的發(fā)病機理引起AS的起始因子是什么?1.損害反應(yīng)學(xué)說認(rèn)為血小板凝集能力亢進(jìn)，引起血管壁損害是其起始因子。2.起始因子是使血管內(nèi)皮細(xì)胞層下發(fā)生完整的剝脫，并以泡沫細(xì)胞為主，外加平滑肌細(xì)胞的浸入，使單核細(xì)胞在循環(huán)血液中發(fā)生。3.變

12、性LDL經(jīng)巨噬細(xì)胞清道夫受體結(jié)合形成AS，為AS早期起始因子。4.氧化LDL是早期AS的起始，即OXLDL學(xué)說；5.LDL的磷脂經(jīng)氧化產(chǎn)生溶血卵磷脂，成為循環(huán)中單核細(xì)胞的趨化物，起主要作用。蛋白組與蛋白組學(xué)蛋白質(zhì)：是由許多氨基酸(amino acids)通過肽鍵(peptide bond)相連形成的高分子含氮化合物。蛋白質(zhì)組：一個細(xì)胞或一個組織基因組所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)：指應(yīng)用各種技術(shù)手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)，其目的是從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動規(guī)律。雙向凝膠電泳：2DE，利用

13、蛋白質(zhì)的等電點和分子量大小，結(jié)合凝膠化學(xué)性質(zhì)，分別在凝膠二維空間上對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行等電聚焦和電泳來分離與純化蛋白質(zhì)的方法。氨基酸組成分析：通過測定蛋白質(zhì)中各氨基酸所占摩爾百分?jǐn)?shù)或各氨基酸的摩爾比率，然后與數(shù)據(jù)庫中已知蛋白質(zhì)的理論值進(jìn)行比較。簡述雙向凝膠電泳的原理及其優(yōu)缺點原理：第一向在高壓電場下對蛋白質(zhì)進(jìn)行等電聚焦，再在第一向垂直方向上進(jìn)行第二向SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。優(yōu)點:1、可分離10-100kD分子量的蛋白質(zhì) 2.高靈敏度和分辨率 3.便于計算機進(jìn)行圖像分析處理 4.與質(zhì)子譜分析匹配。缺點：1.極酸、極堿性蛋白質(zhì)，疏水性蛋白質(zhì)，極大蛋白質(zhì)、極小蛋白質(zhì)、以及低豐度蛋白質(zhì)用此種技術(shù)難于有效

14、分離；2.膠內(nèi)酶解過程費時、費力，難于與質(zhì)譜聯(lián)用實現(xiàn)自動化。試述蛋白質(zhì)組學(xué)常用的研究方法表達(dá)模式：1、雙向凝膠電泳 2.新型非凝膠技術(shù)（蛋白質(zhì)微量測序、氨基酸組成分析、質(zhì)譜法MS功能模式：1、酵母雙雜交系統(tǒng) 2.噬菌體表面展示技術(shù)3.基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)（親和層析偶聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、免疫共沉淀藕聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、生物傳感器耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、串聯(lián)親和純化耦聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)）蛋白芯片技術(shù)試舉2例敘述蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)1、酵母雙雜交系統(tǒng)；2、噬菌體表面展示技術(shù)糖蛋白與糖組學(xué)酶學(xué)一、名詞 酶：由生物活細(xì)胞產(chǎn)生的一類能對特定底物起高效催化作用，由蛋白質(zhì)和/或核酸組成的具有活性中心特定構(gòu)象的生物催化劑。 米氏常

15、數(shù)Km：Km = (K2+K3)/K1，它是ES的分解速度和ES的形成速度的比值，是速度常數(shù)K1、K2 、K3的函數(shù)，對特定酶反應(yīng)、特定反應(yīng)條件（如PH、溫度、底物）來說，Km值是酶的特征性常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，和酶的濃度無關(guān)。 酶的鈍化作用：主要指在某些物理或化學(xué)因素作用下酶蛋白分子的次級鍵受破壞，酶蛋白的空間構(gòu)象改變，酶蛋白因變性而失去了酶活性，稱之酶的鈍化作用。 酶的抑制作用：由酶的必需基團(tuán)或活性部位的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，引起的酶活性的降低或喪失的作用。這時酶蛋白一般并未變性，可用物理或化學(xué)方法使酶恢復(fù)活性。能引起這種抑制作用的物質(zhì)稱為抑制劑。 酶的活力單位：1961年國際酶學(xué)會統(tǒng)一

16、規(guī)定：在特定的條件下，1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量，或轉(zhuǎn)化1微摩爾的底物有關(guān)基團(tuán)的酶量為1個酶的活力單位（國際單位IU)。 酶的比活力：酶的活力與蛋白質(zhì)的量相聯(lián)系的1種活力單位。如每mg酶蛋白所具有的酶活力 (單位mg蛋白)，每ml酶制劑含有的酶活力(單位m1)，或每g酶制劑具有的活力單位(單位g)等。對同一種酶來講，比活力愈高則酶越純。 酶活力測定的空白試驗和對照試驗：空白試驗：是指雜質(zhì)反應(yīng)和自發(fā)反應(yīng)引起的變化量，它提供的是未知因素的影響?？瞻字悼梢酝ㄟ^不加酶，或不加底物，或二者都加(酶預(yù)先經(jīng)過失效處理)。對照試驗：是指用純酶或標(biāo)準(zhǔn)酶制劑測得的結(jié)果，主要作為比較或標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)。二、問答試述酶的

17、催化作用的獨特特點。1. 酶催化反應(yīng)的高效性 2. 酶催化作用對象的專一性（特異性） 3. 酶的不穩(wěn)定性（易變性）4. 酶活性的可調(diào)節(jié)性敘述雙底物反應(yīng)的順序機制和乒乓機制的特征。順序機制：(Sequential Mechanism) 底物A和B順序結(jié)合在一個酶的活性部位，形成EAB三元復(fù)合物，反應(yīng)才能進(jìn)行，然后釋放產(chǎn)物。乒乓機制：（Ping Pong Mechanism）是指底物和產(chǎn)物交替進(jìn)出的機制，兩底物不能同時與酶結(jié)合形成EAB復(fù)合物。酶E轉(zhuǎn)變?yōu)樾揎椥问紼。哪些激活劑會影響酶反應(yīng)速度？1. 無機離子：包括金屬離子和非金屬離子，常見的有K+、Na+、Mg2+、Zn2+、Fe2+、 Ca2+、

18、Cl-、Br-和H+。葡糖-6-磷酸脫氫酶需要Mg2+，而-淀粉酶需要Cl-。有些離子可相互替代，如Mn2+可取代Mg2+，作為激酶的激活劑。有些離子間有拮抗作用，如Na+抑制K+的激活作用，Ca2+抑制Mg2+的激活作用等。2. 分子：一些有機化合物分子能使酶分子中發(fā)揮活性作用的基團(tuán)保持本身狀態(tài)，保證和提高酶活性。a、某些還原劑如：GSH，半胱氨酸b、 EDTA（乙二胺四乙酸）能除去酶中重金屬離子雜質(zhì)，從而解除重金屬離子對酶的抑制作用。3. 蛋白質(zhì)：主要指的是酶，能夠切斷酶原分子中特定肽鍵，使無活性的酶原轉(zhuǎn)變成有活性的酶。如胰蛋白酶原在腸激酶的作用下，切去酶原中的六肽，轉(zhuǎn)變成胰蛋白酶，腸激酶為胰蛋白酶原的激活