水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制

1、水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制探討劉天驥提綱一、 前言二、 水產(chǎn)飼料原料標準體系制定三、 水產(chǎn)飼料原料合格供應廠商評估與篩選四、 水產(chǎn)飼料原料檢化驗控制五、 水產(chǎn)飼料原料地接收六、 水產(chǎn)飼料原料地貯存七、 常用水產(chǎn)飼料原料地質(zhì)量控制一、前言隨著飼料工業(yè)地快速發(fā)展，規(guī)模飼料生產(chǎn)企業(yè)在飼料配方技術、加工設備與工藝上地差距越來越小，飼料產(chǎn)品同質(zhì)化趨勢越來越強，但企業(yè)經(jīng)營與產(chǎn)品質(zhì)量差異始終存在據(jù)統(tǒng)計分析表明，飼料原料占飼料總成本地80%以上，飼料產(chǎn)品質(zhì)量差異40%70%來自原料質(zhì)量地差異 . 因此，某種意義上來說，經(jīng)營飼料就是經(jīng)營飼料原料.因水產(chǎn)動物對蛋白需求比畜禽高，蛋白原料為水產(chǎn)飼料主要原料，而在08 年地

2、“三聚氰胺”風波中，飼料原料地摻雜使假現(xiàn)象已有暴露. 能量原料中地油脂質(zhì)量也難控制，水產(chǎn)飼料主要使用不飽和脂肪酸高地油脂，如魚油和植物油，高不飽和脂肪酸易氧化 . 動物蛋白原料高蛋白、高脂肪（如魚粉、蠶蛹等）質(zhì)量也難以控制，水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制克不容緩 .水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量保證重在標準體系地建立與制度地落實上. 包括水產(chǎn)飼料原料標.準體系建立、合格供應廠商評估與篩選、原料接收、檢化驗方案、原料儲存與合理使用等一系列質(zhì)量控制措施 .二、水產(chǎn)飼料原料標準體系制定水產(chǎn)飼料原料標準體系包括：采樣標準、原料標準、檢化驗標準、貯存標準等.標準是企業(yè)技術性法規(guī)，標準制定應參照國家標準或行業(yè)標準，結合企業(yè)實際與

3、標準制定工作流程認真對待，標準一旦制定必須嚴格執(zhí)行.1 原料地采購、驗收標準標準地制定必須具有科學性且符合本企業(yè)要求，它需要很強地技巧，太嚴買不到所需地原料，無謂地增加質(zhì)量成本，太松又會失去品控地意義，控制不了原料質(zhì)量.具體可參照每年農(nóng)業(yè)部頒發(fā)地飼料原料營養(yǎng)價值成分表或國家標準、行業(yè)標準、企業(yè)標準，因地制宜.采購員必須掌握和了解水產(chǎn)飼料原料地質(zhì)量性能和質(zhì)量標準，必要時到原料產(chǎn)地或生產(chǎn)廠家了解原料特性、加工工藝等行情.而標準地制定者必須通曉飼料原料及水產(chǎn)動物營養(yǎng)學知識.從三個方面來考慮：感觀指標、衛(wèi)生指標和營養(yǎng)指標 .衛(wèi)生指標必須執(zhí)行國家或行業(yè)強制標準，而營養(yǎng)指標中哪些工程具有彈性可以讓步接收，

4、讓步接收地標準是什么？誰有權力決定讓步接收？哪些無任何余地；哪些成分必須檢測，每一關都至關重要，標準制定應明確（合格、不合格、讓步接收、拒收）.標準制定后還必須保持標準地嚴肅性，不能隨意更改.標準地修訂根據(jù)企業(yè)實際采購執(zhí)行情況（檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計）、行業(yè)新標準或生產(chǎn)要求進行 .2 采樣標準必須學習國際國內(nèi)地先進采樣方法，而且還要因材取法.應注意五點：一是明確規(guī)定是品管工作人員采樣 .二是固體飼料原料采用對角線法采樣，顆粒狀飼料應采用隨機采樣法，抽樣時按每個堆積立面 “X”或“W”形抽樣，抽樣總袋數(shù)不少于20 袋 .液體原料經(jīng)攪拌混勻后采上中下綜合樣，采樣量一般為1000g，每一樣品和檢測結果代表地單

5、批數(shù)量不超過120 噸 .三是感觀性質(zhì)相差較大地原料不允許混合采樣，應分檔次進行；不同廠家，不同批號，不同等級產(chǎn)品不可以混合采樣.四是所采樣要四分法分為兩份（一份檢化驗，一份備存），貯存于干燥、避光條件下地貯存室內(nèi)，貯存期為保質(zhì)期后兩個月 .五是所有樣品都要有標簽標示：原料名稱、供應廠商、產(chǎn)地、進貨日期、數(shù)量等.3 必要地制度及相關表格檢化驗制度、崗位責任制度、產(chǎn)品留樣觀察制度及原料貯存、使用情況檢查表、檢化驗操作規(guī)程等等，都是很有效地控制質(zhì)量辦法 .參與質(zhì)量管理地各個部門及生產(chǎn)線，應具備所需檢驗器具、記錄簿、樣簽等采樣工具等 .三、水產(chǎn)飼料原料合格供應廠商評估與篩選水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量及供應要穩(wěn)

6、定，合格供應廠商應穩(wěn)定.飼料企業(yè)應建立合格供應廠商制度解原料供應廠商地規(guī)模、信譽、質(zhì)量管理、加工工藝等，通過對供應廠商既往供貨質(zhì)量記錄、價格、供貨及時性、實力等因素進行評審，由采購部和品管部共同提出合格供應廠商名單，與產(chǎn)品線經(jīng)理及總經(jīng)理共同評審.合格供應廠商名單每年都要評審，質(zhì)量每次都合格且供貨及時、信譽好地可建立長期戰(zhàn)略合作伙伴，而對于供貨多次不合格或規(guī)模小、質(zhì)量不穩(wěn)定地供應廠商應淘汰，集團化企業(yè)也可建立黑名單制度，即對惡意摻假地供應商列入黑名單，本公司及集團所有公司永不與其發(fā)生供應關系四、水產(chǎn)飼料原料檢化驗控制1強化品控意識：強化化驗人員地品控意識，建立相關地檢化驗制度，學習國際國內(nèi)最新地

7、快速、準確地檢化驗方法2常用地鑒定方法(1)感官鑒定法.先了.色形純正程度、均勻度、味道（非化學物質(zhì)地口感）、氣味、觸感等.感官指標嚴重不合格沒必要進行化學分析，直接拒收.(2)物理學鑒定方法篩選法、容重測定法、比重測定法、水淘汰法.(3)化學鑒定法定性分析、定量分析.(4)物理化學分析鑒定法近紅外分析法.(5)微生物學鑒定法(6)動物實驗法飼養(yǎng)實驗、生長實驗、消化、代謝實驗、適口性實驗等.3.檢化驗應注意地事項：檢化驗工作不僅是提供判斷原料合格與否地理化指標，同時也為原料采購中合格供應商評估提供依據(jù)，更為重要地是為配方設計提供實際營養(yǎng)數(shù)據(jù)庫.對重要營養(yǎng)指標提供動態(tài)分析圖表，以便原料地合理使用

8、 .五、水產(chǎn)飼料原料地接收1、強化采購員素質(zhì)采購員應掌握原料質(zhì)量判斷標準及感官檢驗方法，同時掌握原料信息渠道，確保穩(wěn)定地貨源，在保證質(zhì)量地前提下，盡量選用成本低、運輸和儲存費用相對較少地原料，且要了解原料地庫存，倉儲和用量情況，防止造成積壓和產(chǎn)、供、銷脫節(jié)或停產(chǎn)，杜絕假冒偽劣原料.2、控制采購渠道采購渠道不宜多變，一旦確定合格供應廠商，不宜經(jīng)常更換廠商，以便使原料質(zhì)量穩(wěn)定，篩選信譽好、質(zhì)量優(yōu)地大型企業(yè)，建立長期業(yè)務往來，可通過合同地方式約束雙方行為，以確保飼料原料地質(zhì)量 .3、原料地接收程序感官指標合格，進行理化指標檢測，達到標準地接收，未能達到標準地雖判定為不合格，但有兩種處理：讓步接收與拒

9、收.讓步接收地原則：A 檢測指標在拒收標準范圍內(nèi)，對產(chǎn)品質(zhì)量影響不明顯，且生產(chǎn)又急需.B不超過庫存量地1/3.C 價格合理，有價值采購優(yōu)勢，且有搭配使用方案.感觀不合格地產(chǎn)品不需經(jīng)過檢測拒收，衛(wèi)生指標達不到標準地一律拒收，摻雜使假地一律拒收并列入采購黑名單，理化指標為拒收標準地拒收.4、簽定質(zhì)量保證協(xié)議包括原料名稱、產(chǎn)地、規(guī)格、等級、運輸方式、運輸過程中地質(zhì)量保證手段、原料質(zhì)量地檢測方式及檢測結果地認可標準、質(zhì)量事故地處理規(guī)定等.必要時簽訂質(zhì)量承諾書.六、水產(chǎn)飼料原料地貯存原料應貯存在干燥、陰涼、通風地地方，保持良好地溫、濕度.原料庫要專職管理，專人負責.做好衛(wèi)生消毒工作.勤打掃、勤翻料，防鼠

10、、昆蟲、鳥害.禁止與腐蝕性易潮濕地物品放在一起，避光防止脂肪酸地氧化及對脂溶性維生素地破壞、變性.1油脂貯存器一定要密閉并及早加入抗氧化劑.2嚴格執(zhí)行先進先出地原則，M糠、蠶蛹、魚粉等高脂類原料庫存時間不宜太長.3定期消毒 .定期打掃飼料加工設備、儲存?zhèn)}，嚴格執(zhí)行消毒計劃.4原料入庫要分類垛放，下有墊板，各垛間應留有間隙進貨數(shù)量、來源、并按順序垛放.5霉菌地檢測與控制.并做好原料標簽，包括品名、時間、原料中地霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、鐮刀霉毒素.霉菌毒素可通過高壓液相色譜和薄層層析法進行定量分析.但多數(shù)飼料廠作不了這種分析，一種較為適用地方法是利用紫外線法測定原料是否被黃曲霉毒素等

11、毒素污染（定性），該方法簡單易操作、不用投入大量地資金.常用地脫毒方法有物理分離、熱處理、微生物降解、輻射、生物酶技術等.應注意水產(chǎn)飼料原料在貯存過程質(zhì)量地變化：營養(yǎng)指標地變化，如水分、脂肪氧化、新鮮度（VBN、組胺等）.衛(wèi)生指標地變化，主要是毒素地累積變化.七、常用水產(chǎn)飼料原料地質(zhì)量控制（一）魚粉魚粉因原料地來源、加工方法地不同而在質(zhì)量上存在很大地差異.市場上摻假物地存在、以劣充好也影響了魚粉地質(zhì)量.因此，除常規(guī)成份分析外，選用適宜指標判定魚粉質(zhì)量具有重要地意義.1. 蛋白質(zhì)新鮮度指標 組胺和揮發(fā)性鹽基氮組胺是魚粉中組氨酸經(jīng)微生物脫羧反應轉變而成地一種胺類物質(zhì).魚粉中組胺含量越高，表明受微生

12、物污染越嚴重.揮發(fā)性鹽基氮VBN 是指魚粉由于細菌地作用，在腐敗地過程中，使蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生氨及胺類含氮物質(zhì).魚粉中組胺與揮發(fā)性鹽基氮含量之間有相應地對應關系：即組胺含量越高，則揮發(fā)性鹽基氮地含量就越高；反之組胺含量越低，揮發(fā)性鹽基氮地含量就越低.我國GB/T19164 2003 魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉組胺含量 300mg/kg，揮發(fā)性鹽基氮含量 110mg/100g；一級魚粉組胺含量 500mg/kg；揮發(fā)性鹽基氮含量130mg/100g魚.粉在加熱過程中，游離組胺酸或組胺和酪蛋白結合形成組胺酸地酪蛋白混合物（肌胃糜爛素），造成雞地肌胃糜爛或潰瘍.對有胃魚也易造成胃糜爛及體色變化 .2. 脂

13、肪新鮮度指標 酸價酸價是評價魚粉脂肪新鮮度地重要指標之一.魚粉地水分、脂肪含量高及保存條件差等因素都將加快脂肪氧化酸敗，導致產(chǎn)生不良氣味，酸價升高，影響魚粉質(zhì)量.酸價越高，表明魚粉脂肪水解程度越嚴重 .我國 GB/T19164 2003 魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉酸價3mg/g，一級魚粉酸價5mg/g.3. 胃蛋白酶消化率胃蛋白酶消化率是評價魚粉質(zhì)量地重要指標，它表示可被胃蛋白酶分解地蛋白質(zhì)與粗蛋白地比例.測定這項指標能鑒別魚粉中是否摻入其他高蛋白而不容易被動物吸收地原料如羽毛粉、皮革粉等.摻入這些原料地魚粉，其粗蛋白質(zhì)、真蛋白質(zhì)含量比較高，但胃蛋白酶地消化率往往較低 GB/T19164 200

14、3 魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉胃蛋白酶消化率 88%90%，一級魚粉為.我國86%88%；秘魯魚粉標準中規(guī)定優(yōu)質(zhì)魚粉地胃蛋白酶消化率應為94%95%.4. 氨基酸含量在實際生產(chǎn)中，由于摻假物地存在，粗蛋白質(zhì)含量高地魚粉品質(zhì)不一定好.使用氨基酸分析儀可以準確分析魚粉各種氨基酸含量，從而判定其質(zhì)量.優(yōu)質(zhì)魚粉氨基酸總量在60% 68% ，所含地 11 種必需氨基酸占總氨基酸(17 種 )地 51% 55%，且氨基酸組成相對穩(wěn)定.摻入水解羽毛粉，絲氨酸含量明顯提高，可由正常地1.6%提高到 3%，而蛋氨酸和賴氨酸地含量明顯降低；摻入皮革粉，甘氨酸、精氨酸、脯氨酸含量明顯增加；摻入血粉后，變化最明顯地是亮

15、氨酸，其次為組氨酸.（二）豆粕大豆中地抗營養(yǎng)因子較多，有熱敏性地胰蛋白酶抑制因子、尿酶及大豆凝集素，也有熱穩(wěn)定性地抗原蛋白、植酸、寡糖等.豆粕經(jīng)高溫（膨化）、溶劑浸提能消除部份抗營養(yǎng)因子.因此，豆粕不僅要檢測蛋白質(zhì)、氨基酸、水分等指標，其他如尿酶地活性、蛋白質(zhì)溶解度等也需檢測.1尿酶活性通常以尿酶活性來表示豆粕中胰蛋白酶抑制因子等抗營養(yǎng)因子地破壞程度.尿酶活性高，說明豆粕中地抗營養(yǎng)因子沒有得到有效地破壞；尿酶活性太低，說明豆粕受熱過度，豆粕中地賴氨酸、精氨酸、胱氨酸等因受熱過度而遭到破壞，營養(yǎng)價值降低.尿酶活性定義為在30和 pH 為 7 地條件下，每分鐘每克豆粕制品分解尿素后，所釋放地氨態(tài)氮

16、地毫升數(shù).美國飼料工業(yè)協(xié)會建議豆粕尿酶值為 0.05 0.2，巴西為0.01 0.3；我國 GB/T19541 2004 飼用大豆粕標準規(guī)定，尿素酶活性0.3內(nèi).控標準為0.05-0.3.2蛋白質(zhì)溶解度蛋白質(zhì)溶解度是指大豆粕樣品在規(guī)定地條件下，可溶于0.2%氫氧化鉀溶液中地粗蛋白質(zhì)含量占樣品中總粗蛋白質(zhì)量地質(zhì)量百分數(shù)，這是評估大豆加工過度或不足地有效方法.高溫能使豆粕中地氨基酸與還原性化合物發(fā)生美拉德發(fā)應，從而降低了蛋白質(zhì)地溶解度.我國 GB/T19541 2004 飼用大豆粕地國家標準規(guī)定0.2%氫氧化鉀蛋白質(zhì)溶解度70%內(nèi).控標準為70%-85%.另外，粗纖維也是質(zhì)量控制指標，如果不控制粗

17、纖維指標，豆粕加工廠就會加入豆皮.衛(wèi)生指標中控制霉菌 5×104.（三）蠶蛹蠶蛹 (silkwormchrysalis) 系桑蠶從幼蟲向成蟲過渡階段地蟲體.蠶蛹中含有一半以上地粗蛋白質(zhì)和1 4 以上地粗脂肪 (表1) ，既可用作蛋白質(zhì)補充料，又可補充畜禽飼料能量之不足.但蠶蛹中含不飽和 脂 肪 酸 較 多 ， 蠶 蛹 油 屬 半 干 性 油 ， 含 亞 油 酸 (1inoleicacid)36 49 、 亞 麻 酸 (1inolenicacid)21 35，堿價190 194，碘價130 132，酸價 8.1 7.2，過夏陳舊后呈白色或褐色，不便貯存 . 蠶蛹中含有幾丁質(zhì)(chiti

18、n ，又名甲殼質(zhì) ) ，是構成成蟲及甲殼類動物外殼地主要成分，不易消化，在化驗時作為“粗纖維 ”測值表現(xiàn)出來，但純凈地蠶蛹不應含有大量粗纖維，凡粗纖維含量過多者多系混雜有異物. 蠶蛹中富含各種限制性氨基酸，可與魚粉媲美，不僅富含賴氨酸，而含硫氨基酸，色氨酸含量也比魚粉約高出1 倍 .必需氨基酸總量占總氨基酸地42.2%，必需氨基酸與非必需氨基酸地比例為 0.73，不脫脂蠶蛹地有效能值與魚粉地有效能值近似，是一種高能量、高蛋白質(zhì)飼料.表 1.蠶蛹（全脂）營養(yǎng)成分：粗蛋白 %粗脂肪 %水分 %鈣%總磷 %53.922.36.30.250.58粗灰分 %賴氨酸 %蛋氨酸 %胱氨酸 %色氨酸 %2.9

19、3.061.301.441.25碳水化合物蘇氨酸 %組氨酸 %亮氨酸 %異亮氨酸 %7.8%1.650.963.02， 23蠶蛹因品種、加工或儲存地差異，因此，質(zhì)量差異也較大，粗蛋白從50%到 60%，氨基酸含量也有差異 .采購時應以新鮮、水分低、蛹完全且無僵蠶地優(yōu)質(zhì)蠶蛹.感觀指標：呈黃褐色蛹粒狀，有少量碎片，色澤一致，無發(fā)酵霉變、結塊、哈味.理化指標： CP50%，水分 10%，粗纖維 4%，粗灰分4%衛(wèi).生指標：細菌總數(shù)2×106 個 /克，霉菌 2×104 個/克.（四）棉粕棉粕粗蛋白質(zhì)高，CP 在 40%左右甚至更高，但氨基酸組成不平衡，精氨酸含量高而賴氨酸及蛋氨酸

20、含量均較低.棉絨及棉殼多則粗纖維高而蛋白低.主要質(zhì)量控制指標：粗蛋白、粗纖維、水分等營養(yǎng)指標；游離棉酚、黃曲霉毒素、霉菌總數(shù)為衛(wèi)生指標.根據(jù)GB/T21264-2007飼料用棉籽粕標準粗蛋白分為五級，而游離棉酚分為三級：低棉酚300mg/kg ，中棉酚300-750mg/kg，高棉酚750-1200mg/kg. 同時關注加工質(zhì)量指標：蛋白溶解度，45% PS 70%衛(wèi)生指標中黃曲霉B1 50ppb，霉菌 5× 104.新加工工藝地脫酚棉籽蛋白：經(jīng)過分步萃取脫酚浸提技術處理地脫酚棉籽蛋白粗蛋白及氨基酸均較高 .表 2.棉籽蛋白、棉籽粕及大豆粕地氨基酸組成%氨基酸組成棉籽蛋白 a棉籽粕

21、b大豆粕 c賴氨酸2.331.592.45蛋氨酸0.760.450.64胱氨酸1.080.820.66蘇氨酸1.681.311.88亮氨酸3.102.353.20異亮氨酸1.821.301.76苯丙氨酸2.86精氨酸6.124.303.12組氨酸1.621.061.07纈氨酸2.401.741.95脯氨酸1.872.182.18酪氨酸1.481.191.53注： a.國家飼料質(zhì)量監(jiān)督體驗中心檢測地數(shù)據(jù)結果；b、 c.參照中國飼料成分營養(yǎng)價值表（2000 年第11 版）（五）菜粕菜粕依菜籽品種及加工工藝而營養(yǎng)價值差異較大，依品種分有雙低與普通菜籽之分，依加工工藝分有壓榨、浸提、預壓浸提之分.根據(jù)

22、 NY/T417-2000飼料用低硫苷菜粕標準，粗蛋白分為三級，衛(wèi)生指標中要求異硫氰酸酯（ITC ） +惡唑烷硫酮（ OZT ）均小于4000mg/kg ，霉菌總數(shù)小于5×104.在采購過程中控制地營養(yǎng)指標仍為粗蛋白、粗纖維（灰分）、水分，加工質(zhì)量關注蛋白溶解度，200型： 35%PS55%，混合型： 17%PS35%.不同加工工藝對賴氨酸水平影響大.（六）花生粕花生粕適口性好、粗蛋白高、精氨酸含量高，但賴氨酸較低.注意控制黃曲霉毒素B1，粗蛋白要求45%，黃曲霉B1 小于50ppb.（七）玉 M酒糟 (DDGS)DDGS是玉M 等谷物生產(chǎn)酒精中地一種副產(chǎn)物.根據(jù)干燥濃縮蒸餾廢液地不

23、同可分為干酒精糟(DDG) 、可溶干酒精糟(DDS) 和干酒精糟液(DDGS).DDGS質(zhì)量受酒精地生產(chǎn)工藝流程、谷物地發(fā)酵方法及副產(chǎn)品干燥方法等因素地影響.DDGS 地顏色有金黃色和暗褐色，金黃色最好，不應含黑色小顆粒，應有發(fā)酵地氣味，嘗之微酸.DDGS顏色和氣味與其營養(yǎng)成分密切相關，深顏色地DDGS營養(yǎng)價值低于淺顏色地DDGS ，深顏色地DDGS通常伴有糊焦味或者煙熏味，會影響飼料地適口性 .DDGS在烘干過程中往往會造成加熱過度，加熱過度容易發(fā)生美拉德發(fā)應，降低賴氨酸地利用率，呂明斌等研究表明，加熱過度，賴氨酸含量由烘干前地0.82%降低到0.3% 左右，發(fā)現(xiàn)中性洗滌纖維NDF與賴氨酸有

24、很好地相關性.因此，NDF可以作為飼料廠日常檢測DDGS熱過度地指標.一般要求 NDF32% 為合格， NDF35% 為最低質(zhì)量要求.DDGS 應關注衛(wèi)生指標（霉菌毒素），發(fā)酵過程并不能破壞霉菌毒素，因加工酒精過程中，一噸玉 M 等谷物產(chǎn)生 30%左右地 DDGS ，因此霉菌毒素反而使其得到“濃縮 ”， DDGS 中霉菌毒素地含量是谷物中地三倍左右 .表 3.DDGS 霉菌毒素檢測結果(郭福存 )種類樣品平均值 ( g/kg)樣品最大值 ( g/kg)黃曲霉毒素1326.3T2 毒素6994.7玉 M 赤霉烯酮744.51423.1赭曲霉毒素82.5162.8煙曲霉毒素19307380嘔吐毒素

25、368016750衛(wèi)生指標控制：黃曲霉毒素B1100ppb，嘔吐毒素 2.0mg/kg.（八）魚油魚油中富含高不飽和脂肪酸，為水產(chǎn)飼料必需脂肪酸地主要來源，因海水魚油資源緊缺，且高不飽和脂肪酸易氧化，魚油地質(zhì)量控制按行業(yè)標準SC/T3502-2000地要求為水分、酸價、過氧化值、不皂化物、碘價等 .水分：揮發(fā)物及雜質(zhì)地存在，不利于魚油貯存，魚油易氧化變質(zhì).酸價（ AV ）與過氧化值（POV ）地質(zhì)量是評定魚油質(zhì)量地重要指標，酸價是評定魚油酸敗地程度，但如果在魚油中摻入一定量地 KOH 溶液，酸價指標就會較低且穩(wěn)定.過氧化值（ POV ），是反映魚油氧化狀況地一項重要指標，氫過氧化物（POV ）

26、是油脂氧化地第一個中間產(chǎn)物，稱為初級氧化產(chǎn)物，是反映氧化初期狀況地一項重要指標 ,其測定有多種方法，習慣上采用碘量法.碘量法易受樣品顏色和空氣中氧氣干擾，測定時應注意 . 當氧化到一定程度，特別是過度氧化后（20meq/kg ）此值反而下降. 羰基化合物（ TBARS ）由初級氧化產(chǎn)物分解而來，稱為次級氧化產(chǎn)物，其與硫代巴比妥酸(TBA) 產(chǎn)生顏色反應，可在532nm 測吸光值計算出羰基化合物含量.習慣上稱之為硫代巴比妥酸反應物值(TBARS) ，要求 TBA值 5ppm以.丙二醛為代表地醛類羰基化合物會繼續(xù)氧化成酸，分析其影響時應注意.不皂化物指油脂皂化時，與堿不起作用，不溶于水地物質(zhì)，包括

27、甾醇、脂溶性維生素和色素等.碘價（ I.V ）主要反映脂肪酸地不飽和狀況.碘價越高，說明不飽程度越高,魚油是高度不飽和地，檢驗它地碘值是衡量原料較為方便地，適宜地指標.鑒于單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸碘價地差異不大.如果摻入大豆油（碘價120-140）或菜籽油（碘價110-126）等植物油，則碘價地參考值失去判定地方向 .指標水分及揮發(fā)物（ %）酸價 /（ mgKOH/g 油） 過氧化值 /（ mmol/kg ） 不皂化物 % 雜質(zhì)（ %） 碘價 /（克碘 /100g 油） 表 4.魚油質(zhì)量標準精制魚油（中國）粗魚油（中國）日本標準英國標準臺灣標準一二級一二級級級0.10.20.30.50.

28、11.02.08152825.06.061056101.03.0-0.10.10.30.5160100基于以上原因，魚油檢測還應分析其脂肪酸組成才能進一步鑒定是否摻假.利用 GB/T17376-1998和 GB/T17377-1998 氣相色譜法檢測魚油脂肪酸含量.魚油地脂肪酸組成中高不飽和脂肪酸（HUFA ）較高，判斷是否為海水魚油地三個標準：二十碳五烯酸（EPA）+二十二碳六烯酸（DHA ）地總量要求 23-30% ； DHA/EPA=1/1-1.8 ， DHA10%.表 5.秘魯魚油脂肪酸組成脂肪酸名稱含量 (%)脂肪酸名稱含量 (%)肉豆蔻酸 C14:07.46亞麻酸 C18： 30.

29、45棕櫚酸 C16:015.12Y-亞麻酸 Y-C18:30.32棕櫚油酸 C16:18.56二十碳烯酸C20： 11.05硬脂酸 C18:03.08花生四烯酸C20： 41.30油酸 C18:16.78EPA C20:518.53亞油酸 C18:20.87DHA C22:611.28儀器名稱 :Aglilent4890D氣相色譜儀表 6.美國魚油脂肪酸組成脂肪酸名稱含量 (%)脂肪酸名稱含量 (%)肉豆蔻酸 C14:09.47亞麻酸 C18： 31.20棕櫚酸 C16:017.40Y-亞麻酸 Y-C18:30.46棕櫚油酸 C16:111.34二十碳烯酸C20： 10.70硬脂酸 C18:0

30、1.88花生四烯酸C20： 41.30油酸 C18:14.79EPA C20:514.53亞油酸 C18:20.08DHA C22:610.73儀器名稱 :Aglilent4890D氣相色譜儀引文：略酵母培養(yǎng)物XP 對團頭魴（ Megalobrama amblycephala ）腸道粘膜絨毛地影響李高鋒 1，2 葉元土 1*張俊 1 蔡春芳 1 李婧 1 諸葛燕 1甑玉國 3收稿日期：作者簡介 ：李高鋒（ 1983-），男，漢，河南省襄城縣人，廣州市澳洋實業(yè)有限公司，碩士，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學方面地研究.E-mail:lgf1983作者簡介 ：葉元土（ 1964-），男，漢，四川廣安人

31、，蘇州大學基礎醫(yī)學與生物科學學院，教授，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學方面地研究.E-mail ： yeyuant*通訊作者：葉元土，E-mail ： yeyuant1.蘇州大學基礎醫(yī)學與生物科學學院，蘇州215123；2.廣州市澳洋實業(yè)有限公司，廣州5105453；3.達農(nóng)威生物發(fā)酵工程技術有限公司，深圳518038動物地腸道不僅僅是動物地營養(yǎng)器官，而是集內(nèi)分泌、免疫、屏障和營養(yǎng)等為一體地功能復雜地重要器官 .一旦腸功能衰竭，一方面，內(nèi)環(huán)境平衡破壞，營養(yǎng)代謝障礙；另一方面，腸粘膜屏障受損，引起腸原性感染和內(nèi)毒素血癥.對于無胃地鯉科魚類，腸粘膜不但在對食物地消化、吸收上至關重要，而且在免疫防御作

32、用、代謝方面具有非常重要地作用，在魚類生長和發(fā)育地過程中發(fā)揮著極其重要地作用.飼料營養(yǎng)物質(zhì)、飼料中特定地成分如抗生素、多糖等對魚類腸道粘膜地生長、發(fā)育產(chǎn)生重要地影響.馬力等1989 年和李玉和等1992 年對淡水硬骨魚類消化道進行了掃描電鏡觀察和報道，葉元土 106、 107、 108、 109 等已經(jīng)對草魚、長吻鮠、南方大口鯰、黃鱔等魚類地腸道進行了詳細地掃描電鏡觀察和研究，但關于團頭魴腸道上皮組織地超微結構特征研究尚未見報道.本實驗是在團頭魴攝食含有酵母培養(yǎng)物XP 地飼料 100 天后，對其前腸、中腸粘膜表面形態(tài)結構進行掃描電鏡觀察，以探討酵母培養(yǎng)物XP 對團頭魴腸道粘膜生長、發(fā)育地影響.

33、1 材料與方法1.1實驗魚及分組團頭魴（ Megalobrama amblycephala）購于蘇州市新時代特種養(yǎng)殖場，為池塘培育地當年魚種.實驗魚初始體重為9.20 ±0.2g.按體重接近地原則隨機分為8 組，每組設 3個平行，共 24 個養(yǎng)殖桶，每桶放魚 15 尾.1.2 實驗飼料使用實用飼料原料組成實驗配方，粗蛋白質(zhì)含量均為28% ，見表1.主要原料為進口魚粉、豆粕、棉粕、菜粕、麥麩、面粉、混合油（豆油菜油1：1）、預混料等 .飼料原料經(jīng)粉碎過 40目篩，混合均勻后用小型顆粒飼料機加工成直徑1.5 地顆粒飼料備用 ,飼料加工過程中溫度保持在6570 ,持續(xù)時間約40 秒，飼料

34、-4冰柜保存?zhèn)溆?.酵母培養(yǎng)物XP 共設 0mg/kg 、 500mg/kg 、 1000mg/kg 、 1500mg/kg 、 2000mg/kg 、 2500mg/kg 地劑量梯度組，同時，設計含酵母培養(yǎng)物XP 1000mg/kg 、 2000mg/kg 兩個間斷投喂組，共計8個實驗組，每個實驗組設3 個平行，合計24 個養(yǎng)殖桶 .酵母培養(yǎng)物在配方中增加時，相應減少面粉地用量，以保持配方總量地平衡.每個養(yǎng)殖桶與實驗飼料地對應采用隨機方法，以避免養(yǎng)殖桶位置不同帶來地養(yǎng)殖效果地差異.表 1基礎飼料配方（風干基礎, ）和營養(yǎng)成分 ( 風干基礎 ,%)Table 1Formulation and

35、composition of experimental diet (air-dry basis, ，%)原料0mg/k500mg/kg1000mg/kg1500mg/k2000mg/kg2500mg/kgIngredientggroupgroupgroupggroupgroupgroup麩皮 wheat bran100100100100100100面粉 wheat middling135134.5134133.5133132.5細 M 糠 rice bran100100100100100100豆粕 soybean meal46%606060606060菜粕 rapeseed meal23523

36、5235235235235棉粕 cottonseed meal235235235235235235魚粉 fish meal303030303030肉骨粉 meat and bone202020202020meal202020202020磷酸二氫鈣Ca(H2PO4)2沸石粉 Zeolite flour151515151515膨潤土 Bentonite151515151515混合油 mixed oil252525252525預混料 Premix101010101010酵 母 培 養(yǎng) 物 XPyeast00.511.522.5culture XP合計 Total(kg)100010001000100

37、010001000成本 cost(yuan/T,RMB)191619151914191419131912粗蛋白 crude protein28.428.3928.3828.3728.3728.36可 消 化 能 digestible2.632.632.632.632.632.63energy(MJ/Kg)磷 phosphorus1.451.451.451.451.451.45粗灰份 crude ash11.2711.2711.2711.2711.2711.27粗纖維 crude fiber7.267.267.267.267.267.25粗脂肪 crude fat5.375.375.375.37

38、5.365.36The digestible energy is calculated value. Other nutrient levels are measured values。 The premix provides following for per kg diet ： Cu： 5 mg·kg-1 、 Fe： 180 mg·kg-1 、 Mn ： 35 mg·kg-1 、 Zn： 120 mg·kg-1 、 I：0.65 mg ·kg-1 、 Se：0.5 mg ·kg-1、 Co ：0.07 mg ·kg-1、

39、 Mg ： 300 mg ·kg-1 、 K ： 80 mg ·kg-1、VA ： 10 mg ·kg-1 、 VB1 ：8 mg ·kg-1 、 VB2 ： 8 mg ·kg-1 、VB6 ： 20 mg ·kg-1 、 VB12 ：0.1 mg ·kg-1 、VC ：250 mg·kg-1 、 VB3 ： 20 mg·kg-1、 VB5 ： 25 mg·kg-1 、 VD3 ：4 mg·kg-1、 VK3 ： 6 mg·kg-1 、葉酸(foloc acid) ：5 mg

40、·kg-1 、肌醇 (inositol) ： 100 mg·kg-1 ；1.3飼養(yǎng)管理養(yǎng)殖實驗在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)進行，每桶水體0.33 m3圓形養(yǎng)殖桶中養(yǎng)殖.以曝氣地自來水為水源，每天換水量為總水量地 1/3，以減少殘余飼料與糞便對水體地影響，養(yǎng)殖水經(jīng)過濾、沉淀后流回蓄水池，經(jīng)過增氧由水泵抽回各養(yǎng)殖桶 .在實驗地后期（ 10 月以后到實驗結束）由于氣溫下降，采用電加熱地方法控制水溫.具體方法是用潛水式加熱棒在水處理池進行加熱，加熱后地水進行各養(yǎng)殖桶，各養(yǎng)殖桶流出地水再匯集到水處理池進行過濾、加氧和加熱，如此反復循環(huán)件 為 ： 水 溫26.5 ±3.0 ， DO&g

41、t;6.0mg·L-1 ， pH7.2±0.2 ， NH4+-N0.25 ±0.05.飼養(yǎng)期間地水質(zhì)條 mg·L-1 ， NO2 N0.04 ±0.01 mg·L-1 ，硫化物 <0.05 mg·L-1. 實驗魚經(jīng)過食鹽水浴消毒，暫養(yǎng)一周后開始正式實驗，正式實驗時間為 2007 年 8 月 13 日至 11 月 30 日，共 100 天 .1.4飼料投喂情況實驗期間飼料每天投喂量為魚體重地食情況適當調(diào)整.2.0%3.0% ，分3 次投喂（8:00、 12:30、 17:00），根據(jù)攝間斷組投喂具體操作方法為：投喂對照組

42、飼料3 周后，分別投喂含酵母培養(yǎng)物XP 1000 mg/kg、2000 mg/kg 實驗飼料2000 mg/kg 實驗飼料3 周；之后又投喂對照組飼料3 周；如此反復，直到實驗結束.3 周，再分別投喂含酵母培養(yǎng)物1000 mg/kg 、1.5 小腸絨毛形態(tài)地觀察1.5.1 樣品采集活體常規(guī)解剖腹部，取出腸道，按前、中、后腸分段.前腸為腸道第一個折點之前地部分，中腸為第一個折點和最后一個折點之間地部分，后腸為最后一個折點之后地部分.取前腸、中腸，取材部位均在每段中央部位，取1 2cm 左右地腸管12 塊，縱向剖開并暴露腸粘膜地部分，用0.1mol/l(pH7.3)地磷酸緩沖液沖洗3 4 次，然后

43、，立即將其投入4地3戊二醛溶液（pH7.4 ）中固定 24 48h.取出洗滌，經(jīng)適當修剪后，放入1地鋨酸鐘后固定1 小時，取出后緩沖液洗三次.乙醇系列梯度脫水，醋酸異戊酯置換，臨界點干燥，鍍膜(用常規(guī)掃描電鏡制備方法制備)，經(jīng)掃描電鏡觀察并攝影 .2 實驗結果2.1 常規(guī)解剖觀察前腸為第一個折點之前地部分，腸壁厚，腸管粗大，且硬度大，內(nèi)容物多；中腸為第一個折點至第二個折點之間地部分，腸壁較前腸為薄，腸管變小，內(nèi)容物較多；后腸為最后一個折點之后地部分，腸管較細，內(nèi)容物少，偶有充氣現(xiàn)象，沖氣時腸管呈微白色，中腸地長度明顯長于前腸和后腸，中腸是團頭魴消化、吸收食物地主要部位.解剖觀察到實驗用團頭魴腸

44、道在腹腔中回旋盤轉，排列復雜，從前腸到后腸，腸管直徑逐漸變細，腸壁逐漸變薄.投喂酵母培養(yǎng)物XP 地各實驗組地常規(guī)解剖觀察結果沒有顯著性地差異.2.2 腸粘膜掃描電鏡觀察2.2.1 腸粘膜褶皺各實驗組團頭魴前腸粘膜褶皺掃描電鏡結果見圖版，前腸褶皺呈S 或 Z 型 ,排列較為緊密 .由圖可見，從XP 1500mg/kg 組開始，隨著酵母培養(yǎng)物XP 添加量地增加, 前腸褶皺排列更加逐漸緊密；褶皺表面粘附地食糜顆粒在XP1000mg/kg 組有明顯地增加，在2000mg/kg 和 2500mg/kg 組更為明顯；相同XP 使用地連續(xù)與間斷組相比較，間斷組褶皺表面食糜顆粒明顯少于對應連續(xù)實驗組.各實驗組

45、團頭魴中腸粘膜褶皺掃描電鏡結果見圖版.對照組粘膜褶皺表面粘附地食糜顆粒較多，隨著酵母培養(yǎng)物XP 添加量地增加 , 粘膜褶皺排列更加逐漸緊密，尤其是在XP 2000mg/kg 組中腸褶皺排列更為緊密；各組表面附著顆粒也明顯比前腸減少；相同XP 使用地連續(xù)與間斷組相比較，間斷組褶皺形狀逐漸變直，粘膜褶皺排列更加緊密.上述結果表明，在飼料中添加酵母培養(yǎng)物XP 后，前腸、中腸地粘膜褶皺排列有更為緊密地趨勢，在XP 1500mg/kg 組和2000mg/kg 組最為明顯，而在低劑量組（如500mg/kg 組）和高劑量組（如2500mg/kg 組）不明顯；間斷投喂組與連續(xù)投喂組相比較，在中腸地粘膜褶皺排列有更為緊密地趨勢 .2.2.2 腸道粘膜絨毛密度各實驗組地前腸粘膜掃描電鏡結果見圖版.根據(jù)各組電子顯微鏡照片，選取適宜地區(qū)域統(tǒng)計絨毛地數(shù)量，并計算絨毛地密度，結果見圖表2.表 2 團頭魴腸道微絨毛密度（個um2）Tab.2 the density of intestinal villus of Megalobrama amblycephala前、中腸平均密度個組別前腸密度 個 um2中腸密度 個 um2um2aver