1.2基因工程的基本操作程序

1、專題1 基因工程1.2 基因工程的基本操作程序ks5uks5uks5uKS5U1基因工程常用的受體細胞有()大腸桿菌枯草桿菌支原體動植物細胞ABCD解析：支原體太小了，細胞中唯一可見的細胞器是核糖體，而基因工程要求基因能在受體細胞內復制、轉錄、翻譯表達；因為支原體結構的限制，其所具有的功能不能滿足基因工程對細胞的要求，故支原體不能作為受體細胞。答案：D2檢測轉基因生物是否轉錄出mRNA，應通過何種分子雜交方法實現()ADNADNA雜交BDNARNA雜交CRNA蛋白質雜交D蛋白質蛋白質雜交解析：A、B、D三項分別是在復制、轉錄和翻譯水平上檢測基因工程是否成功，C項所述分子雜交方法是不存在的。答案

2、：B3應用基因工程技術診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達到探測疾病的目的?；蛱结樖侵?)A用于檢測疾病的醫(yī)療器械B用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子C合成球蛋白的DNAD合成苯丙羥化酶的DNA片段解析：基因探針是具有特定序列的單鏈DNA，作用是能檢測是否含有目的基因，運用了DNA分子雜交技術；基因探針目的基因放射性同位素標記。答案：B4目的基因整合到某作物DNA片段上后()A改變了原DNA的堿基排列順序ks5uks5uKs5uB改變了原DNA上各基因的堿基排列順序C改變了原DNA上各基因的復制過程D改變了原DNA上各基因的轉錄過程解析：目的基因整合到某作物DNA片段上后改變了原D

3、NA的堿基排列順序，A項正確；目的基因整合到某作物DNA片段上后不能改變其他基因的堿基排列順序，B項錯誤；目的基因整合到某作物DNA片段上后不能改變基因的復制過程，C項錯誤；目的基因整合到某作物DNA片段上后不能改變基因的表達過程，D項錯誤。答案：A5請據圖回答下列問題。(1)基因工程的核心步驟是_。(2)利用_技術可以獲得大量的目的基因。該技術利用_的原理，將基因的核苷酸序列不斷加以復制，使其數量呈指數增長。(3)圖中_位于目的基因的首端，是_識別和結合的部位。抗生素抗性基因的作用是作為_，用于鑒別受體細胞中是否導入了目的基因。ks5uks5uks5uKS5U解析：本題考查基因表達載體的組成

4、及其構建。基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建；目的基因的獲取方法很多，其中PCR技術能迅速獲得大量目的基因，其依據的原理是DNA雙鏈復制原理；基因表達載體必須包含目的基因、啟動子、標記基因、終止子，其中啟動子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄為mRNA，抗生素抗性基因作為標記基因用于鑒別受體細胞中是否含有目的基因。答案：(1)基因表達載體的構建(2)PCRDNA雙鏈復制(3)啟動子RNA聚合酶標記基因A級基礎鞏固1下列不屬于獲取目的基因的方法是()A利用DNA連接酶復制目的基因B反轉錄法C從基因文庫中獲取目的基因D利用PCR技術擴增目的基因解析：對目的基因(D

5、NA片段)進行復制需利用DNA聚合酶而不是DNA連接酶。答案：A2下列關于基因表達載體構建的相關敘述，不正確的是()A需要限制酶和DNA連接酶B必須在細胞內進行ks5uks5uks5uC抗生素抗性基因可作為標記基因D啟動子位于目的基因的首端ks5uks5uKs5u解析：基因表達載體的構建是指目的基因與載體結合，在此過程中需用同一種限制酶切割目的基因與載體，用DNA連接酶將互補的末端連接起來；基因表達載體的構建是在細胞外進行的；基因表達載體包括啟動子(位于基因首端使轉錄開始)、終止子、目的基因和標記基因。答案：B3將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶

6、。下列敘述錯誤的是()A每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質粒B每個重組質粒至少含一個限制性核酸內切酶識別位點C每個限制性核酸內切酶識別位點至少插入一個adaD每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子解析：質粒作為載體的條件之一是有多個限制性核酸內切酶的識別位點，但每種限制性核酸內切酶的一個識別位點，只能插入一個目的基因(ada)，不能插入多個目的基因(ada)。答案：C4基因工程的正確操作步驟是()目的基因與運載體相結合將目的基因導入受體細胞檢測目的基因的表達提取目的基因ABCD解析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：(1)目的基因的獲取，即提取目的基因。(2)基因表達載體的構建，即使目的

7、基因與運載體結合。(3)將目的基因導入受體細胞，即。(4)目的基因的檢測與表達，即檢測目的基因的表達。答案：C5某研究所的研究人員將生長激素基因通過質粒介導進入大腸桿菌細胞內，來表達產生生長激素。已知質粒中存在兩個抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗氨芐青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是()A導入大腸桿菌的質粒一定為重組質粒BRNA聚合酶是構建該重組質粒必需的工具酶C可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒D在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產要求的大腸桿菌解析：導入大腸桿菌的質粒可能為重組

8、質粒，也可能為普通質粒，A項錯誤；構建基因表達載體過程中需要限制酶和DNA連接酶，不需要RNA聚合酶，B項錯誤；由于目的基因要插入到基因B中，即抗氨芐青霉素基因破壞，即工程菌不能抗氨芐青霉素，因此不能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒，C項錯誤；據分析可知，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產要求的大腸桿菌，D項正確。答案：D6科學家通過基因工程方法，培育了能抗棉鈴蟲的棉花植株抗蟲棉。其過程大致如圖所示。根據題意，回答下列問題。(1)基因工程的操作程序主要包括的四個步驟是：_、_、_、_。(2)Ti質粒是農桿菌中的一種質粒，其上有TDN

9、A，把目的基因插入Ti質粒的TDNA中是利用TDNA_的特點。(3)Bt毒蛋白基因轉入普通棉株細胞內并成功實現表達的過程，在基因工程中稱為_。(4)將目的基因導入受體細胞的方法有很多種，該題中涉及的是_。(5)目的基因能否在棉株體內穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性的關鍵是_，這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_。解析：農桿菌轉化法是將目的基因導入植物細胞的常用方法，利用它能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，以及其Ti質粒上的TDNA能轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體DNA上的特點，可以把目的基因插入其Ti質粒的TDNA中，借助其作用使目的基因成功導入受體細胞。答案：(1)目的基因的獲

10、取基因表達載體的構建將目的基因導入受體細胞目的基因的檢測與鑒定(2)可轉移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體DNA上(3)轉化(4)農桿菌轉化法(5)目的基因是否插入了受體細胞的染色體DNA上DNA分子雜交技術B級能力訓練7科學家通過基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶主要蛋白。以下有關該基因工程的敘述，錯誤的是()A采用反轉錄的方法得到的目的基因有內含子B基因非編碼區(qū)對于目的基因在塊莖中的表達是不可缺少的C馬鈴薯的葉肉細胞可作為受體細胞D用同一種限制酶，分別處理質粒和含目的基因的DNA，可產生黏性末端而形成重組DNA分子解析：真核基因結構中，內含子部分不能編碼蛋白質。在轉錄形成成熟的mRN

11、A的過程中，內含子轉錄部分被剪切，因此采用反轉錄法得到的目的基因不含內含子，故A項錯誤；非編碼區(qū)雖然不能編碼蛋白質，但對于遺傳信息表達是不可缺少的，在它上面由調控遺傳信息表達的核苷酸序列，比如RNA聚合酶結合位點，對目的基因的表達必須先有RNA聚合酶與之結合，才可轉錄形成信使RNA，故B項正確；受體細胞可以是受精卵，也可以是體細胞，如葉肉細胞，故C項正確；用同一種限制酶處理質粒和含目的基因的DNA，可產生相同黏性末端，再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子，故D項正確。答案：A8下列有關人胰島素基因表達載體的敘述，正確的是()A表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA反轉錄獲得B表達載體的

12、復制和胰島素基因的表達均啟動于復制原(起)點C借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉錄中起作用解析：由于基因的選擇性表達，在人的肝細胞中，沒有胰島素基因轉錄的mRNA，A項錯誤；表達載體的復制啟動于復制原(起)點，胰島素基因的表達啟動于啟動子，B項錯誤；標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來，C項正確；啟動子在胰島素基因的轉錄中起作用，終止密碼子在胰島素基因的翻譯中起作用，D項錯誤。答案：C9如圖表示一項重要生物技術的關鍵步驟，X是獲得外源基因并能夠表達的細胞。下列說法不正確的是()AX是能合成胰

13、島素的細菌細胞B質粒通常有多個標記基因和多個限制酶切點C基因與運載體的重組只需要DNA連接酶D該細菌的性狀被定向改造解析：X是含有胰島素基因的細菌細胞分裂形成的，含有胰島素基因，因此能合成胰島素，A項正確；質粒通常有多個標記基因和多個限制酶切點，這樣便于目的基因的插入和篩選含有重組DNA的細胞，B項正確；基因與運載體的重組除了需要DNA連接酶，還需要限制酶，C項錯誤；基因工程能定向改造生物的性狀，該細菌是采用基因工程技術培育形成的，因此其性狀已被定向改造，D項正確。答案：C10基因工程是在DNA分子水平上進行設計施工的，在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的步驟是()A人工合成目的基因B

14、目的基因與載體結合C將目的基因導入受體細胞D目的基因的檢測和表達解析：目的基因的合成、檢測和表達以及與載體結合都發(fā)生堿基互補配對行為。將目的基因導入受體細胞不進行堿基互補配對。答案：C11基因工程中科學家常采用細菌、酵母菌等微生物作為受體細胞，原因是()A結構簡單，操作方便B繁殖速度快C遺傳物質含量少D性狀穩(wěn)定，變異少解析：目的基因導入受體細胞后，隨著受體細胞的繁殖而復制，由于細菌等微生物繁殖速度非?？?，在很短的時間內就能獲得大量的目的基因?；蚬こ坛Ｓ玫氖荏w有細菌、真菌、動植物細胞。答案：B12基因工程中不會出現()ADNA連接酶將黏性末端的堿基連接起來B限制酶可用于目的基因的獲取C目的基因

15、必須由載體導入受體細胞D人工合成目的基因不用限制酶解析：DNA連接酶連接的不是堿基，而是磷酸二酯鍵。答案：A13下圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖完成下列問題。(1)能否利用人的皮膚細胞來完成過程？_，為什么？_。(2)過程一定要用到的酶是_酶，過程在細胞內需要的酶是_酶。(3)在利用A、B獲得C的過程中，必須用_切割A和B，使它們產生_，再加入_，才可形成C。(4)為使過程更易進行，可用_(填藥劑)處理D。解析：由于基因在不同細胞中的表達情況不同，胰島素基因在皮膚細胞中不表達，也就不可能形成胰島素的mRNA。由mRNA獲取目的基因是反轉錄的過程，需要反轉錄酶催化。DN

16、A分子的擴增首先需解旋，而解旋需要解旋酶?；蚬こ讨星懈钅康幕蚝洼d體用的是同一種限制酶，以產生相同的黏性末端，在DNA連接酶作用下形成重組DNA分子。當受體細胞為微生物時，將重組DNA分子導入時，常用Ca2處理細胞。答案：(1)不能皮膚細胞中的胰島素基因未表達(或未轉錄)，不能形成胰島素mRNA(2)反轉錄解旋(3)同一種限制性核酸內切酶相同的黏性末端DNA連接酶(4)Ca2141抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見的單基因遺傳病，患者成年后會出現肺氣腫及其他疾病，嚴重者甚至死亡。對于該致病患者?？刹捎米⑸淙?抗胰蛋白酶來緩解癥狀。據此完成(1)(2)題。(1)圖1表示獲取人1抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請回答下列問題。a過程是在_酶的作用下完成的，該酶的作用特點是_。c過程稱為_，該過程需要的原料是_。要確定獲得的基因是否是