病原生物實驗課：實驗十二、凝集反應(yīng)（免疫實驗1）

1、 第十五次實驗第十五次實驗 病毒及復(fù)習(xí)病毒及復(fù)習(xí) 實驗內(nèi)容：實驗內(nèi)容：1.病毒的形態(tài)病毒的形態(tài)（病毒模式圖病毒模式圖）示教圖象示教圖象2.病毒的培養(yǎng)方法病毒的培養(yǎng)方法示教示教3.狂犬病毒包涵體狂犬病毒包涵體的形態(tài)的形態(tài)示教示教4.病毒血凝試驗病毒血凝試驗小組做小組做5.病毒血凝抑制試驗病毒血凝抑制試驗示教示教6.病毒檢驗的病毒檢驗的新方法新方法介紹介紹學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求1. 熟悉病毒種類和形態(tài)；熟悉病毒種類和形態(tài)；2. 掌握狂犬病毒包涵體的形態(tài)；掌握狂犬病毒包涵體的形態(tài)；3. 掌握常見病毒培養(yǎng)方法；掌握常見病毒培養(yǎng)方法；4. 熟悉病毒各種檢查方法；熟悉病毒各種檢查方法；5. 復(fù)習(xí)掌握已學(xué)過的常見

2、微生物和復(fù)習(xí)掌握已學(xué)過的常見微生物和 寄生蟲標(biāo)本形態(tài)寄生蟲標(biāo)本形態(tài)。病毒的培養(yǎng)方法病毒的培養(yǎng)方法 動物接種病毒的分離、鑒定、制備疫苗、制 備免疫診斷血清等 細(xì)胞培養(yǎng)分離、鑒定病毒 雞胚培養(yǎng)痘類病毒、粘液病毒和皰疹病毒的 分離 1.絨毛尿囊膜接種 2.尿囊腔接種 3.羊膜腔接種 4.卵黃囊接種 病毒的血凝試驗病毒的血凝試驗1.原理原理有些病毒如流感病毒在一定條件下， 能與雞、豚鼠或人的紅細(xì)胞發(fā)生凝 集現(xiàn)象。這是因為這些病毒表面有 血凝素，能與紅細(xì)胞表面的糖蛋白 受體結(jié)合而形成凝集。2.方法方法 試管號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 生理鹽水（ml） 0.2 0.2 0.2 0.2 0

3、.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 尿囊液（ml） 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 -病毒稀釋度 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 0.5%雞紅細(xì)胞(ml) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 振蕩1分鐘，置室溫3045分鐘觀察結(jié)果棄0.2 病毒血凝試驗病毒血凝試驗 病毒的血凝抑制試驗病毒的血凝抑制試驗1.原理原理流感病毒可凝集紅細(xì)胞，但相應(yīng)的 抗體可結(jié)合病毒的 HA ，使其失去 凝集作用，借此可用已知的抗體鑒 定未知病毒，或用已知的病毒抗原 來

4、測定病人血清中的相應(yīng)抗體。2.方法方法試管號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 生理鹽水 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.5 血 清（1:5） 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 稀釋度 1:10 1:20 1:40 1: 80 1:160 1:3201:640 1:1280 病毒抗原 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.5%雞紅細(xì)胞 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 （血清對照）（抗原對照）（紅細(xì)胞對照） 振蕩1分鐘，室溫3045分鐘觀察結(jié)果棄去0.25病毒血凝抑制試驗雞胚錄像雞胚錄像1.絨毛尿囊膜接種 2.尿囊腔接種 3.羊膜腔接種 4.卵黃囊接種狂犬病毒包涵體RNA病毒模式圖病毒模式圖DNA病毒模式圖病毒模式圖呼吸道病毒呼吸道病毒流感病毒流感病毒 麻疹病毒麻疹病毒 腺病毒腺病毒 HIV病毒CMV病毒病毒肝炎病毒肝炎病毒漢坦病毒漢坦病毒病毒被吞噬過程病毒被吞噬過程 噬菌體噬菌體埃搏拉病埃搏拉病毒毒天花天花(天花病毒天花