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1、2017年全國(guó)職業(yè)院校技能大賽雞新城疫抗體水平測(cè)定項(xiàng)目公開(kāi)賽題一、競(jìng)賽內(nèi)容本項(xiàng)目為雞新城疫抗體水平測(cè)定(微量法),測(cè)定方法按新城 疫抗體診斷技術(shù)(GB/T16550-2008)標(biāo)準(zhǔn),競(jìng)賽總時(shí)間為180分鐘。 具體步驟及其分值如下:(一)試驗(yàn)器材準(zhǔn)備(占總成績(jī)的 8%按照操作規(guī)程進(jìn)行器材準(zhǔn)備,要求器材擺放有序,物品標(biāo)識(shí)合理, 桌面整潔等。(二) 配制1%鳥(niǎo)紅細(xì)胞懸液(占總成績(jī)的18%按照操作規(guī)程進(jìn)行采血、離心、洗滌、配制1%鳥(niǎo)紅細(xì)胞懸液,要求采血規(guī)范、熟練、采血量適量、離心機(jī)使用規(guī)范、洗滌次數(shù)及洗 滌時(shí)間適宜等。(三)血凝試驗(yàn)(占總成績(jī)的 20%按照操作規(guī)程,用微量移液器在 96孔V型血凝反應(yīng)板
2、滴加稀釋 液、新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原,充分混勻,倍比稀釋后,添加1%鳥(niǎo)紅細(xì)胞懸液,充分振蕩混勻,正確判定抗原的血凝效價(jià)。要求微量移液器使用 規(guī)范、倍比稀釋操作規(guī)范、結(jié)果正確等。(四) 配制四單位病毒(占總成績(jī)的10%根據(jù)血凝試驗(yàn)結(jié)果,按照操作規(guī)程配制四單位病毒。 要求稀釋倍 數(shù)計(jì)算正確,稀釋液體積加入得當(dāng)、四單位病毒配制量適宜等。(五)血凝抑制試驗(yàn)(占總成績(jī)的 20%按照操作規(guī)程,對(duì)20個(gè)被檢血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)操作,并設(shè)新城疫標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清對(duì)照、陰性血清對(duì)照;正確讀取抗體滴度結(jié)果, 完成報(bào)告。要求移液器使用規(guī)范、反應(yīng)板各孔的稀釋正確、感作時(shí)間 得當(dāng)、結(jié)果判斷正確等。(六)抗體滴度報(bào)告(占總成績(jī)的 24
3、%按照操作規(guī)程,正確讀取抗體滴度結(jié)果,完成報(bào)告。要求抗體滴 度報(bào)告方式正確、場(chǎng)地整潔、結(jié)果誤差小等。二、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。表1項(xiàng)目技能競(jìng)賽評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)廳P考核內(nèi)容考核要點(diǎn)分值評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)1試驗(yàn)器材 準(zhǔn)備(8分)儀器使用與 材料準(zhǔn)備2儀器正確使用,1分; 材料準(zhǔn)備到位,1分。物品標(biāo)識(shí)4不標(biāo)小不行分;標(biāo)識(shí)合理,2分;標(biāo)示清晰,2分。注:缺一個(gè)器皿未標(biāo)注,扣 0.5分,扣完2分為止。實(shí)桌間整潔度2擺放合理,2分; 酌情扣分。2配制1%鳥(niǎo) 紅細(xì)胞懸 液(18分)采血方法 米血量6抗硼劑適里,2分;米血方法規(guī)范、熟練,2分; 采血量控制在2-4mL之間(每超 1mL扣1分)2分。注:雞未保定好
4、,扣1分;采血 前未消9扣1分;血液與抗硼劑 比為4:1 ,差異較小扣1分,差 異較大扣2分;米血木,針見(jiàn)血, 每多加一針扣0.5分;未用干棉 球按壓止血,扣1分;采血未成 功的,扣6分等。以上細(xì)節(jié)累加, 6分扣完為止。離心機(jī)使用4離心機(jī)使用規(guī)范,4分。注:未做好平衡扣2分,平衡時(shí) 未加套管等,各扣1分,累積扣 完4分為止。紅細(xì)胞懸液配 制方法8稀釋液倍數(shù)正確(離心時(shí)原抗凝 血的3-4倍稀釋?zhuān)♂尯竺抗茏疃?、可超過(guò)12mL, 2分; 離心機(jī)轉(zhuǎn)速、離心時(shí)間止確廳p考核內(nèi)容考核要點(diǎn)分值評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(2000 r/m , 5-10 min) , 2分; 洗滌次數(shù)適宜,2分;壓積紅細(xì)胞吸取正確,2分。注
5、:最后配置1%!細(xì)月包為10-20 mL每超過(guò)10 mL扣1分,最多 扣2分。3血凝試驗(yàn) (20 分)器材使用4微量移液器使用規(guī)范,2分; 槍頭更換操作符合規(guī)范,2分。 注:加槍頭時(shí)操作規(guī)范,/、口用 力撞擊槍盒,移液槍垂直加樣為 規(guī)范,傾斜角度不要過(guò)人,否則 酌情扣分。操作程序6及時(shí)換槍頭,2分;加樣順序止確,1分;倍比稀釋操作規(guī)范,1分; 震揚(yáng)及感作時(shí)間得當(dāng)(可以使用 振揚(yáng)器,以液體不震出孔外為 準(zhǔn)),2分。結(jié)果判定準(zhǔn)確10生理鹽水對(duì)照孔的RBM明顯鈕 扣狀沉到孔底時(shí)判定結(jié)果,4分; 對(duì)照孔結(jié)果止確,能確定完全凝 集的新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原最高稀釋 倍數(shù),4分; 能把完全凝集的病毒的最高稀 釋倍數(shù)
6、作為1個(gè)血凝單位,2分。 注:讀數(shù)時(shí),有跳孔現(xiàn)象的,每 跳1孔扣2分。4配制四 單位 病母 (10 分)器材選擇4器材選擇合理,2分; 使用規(guī)范、熟練,2分。配制方法4稀釋倍數(shù)計(jì)算止確,2分; 稀釋液加入得當(dāng)、操作規(guī)范,2 分。配制量適宜2配制量適宜,2分;注:配置量10-20 mL為適量, 每超過(guò)10 mL扣1分,最多扣2 分。5血凝抑制 試驗(yàn)(20 分)器材使用4器材使用規(guī)范、熟練,4分; 酌情扣分。操作程序696孔V型微量反應(yīng)板各孔加入的 稀釋劑止確,1分;被檢血清、新城疫標(biāo)準(zhǔn)陰性血清 對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清對(duì)照加入正 確(參照國(guó)標(biāo),每缺一個(gè)對(duì)照扣 1分),2分;感作時(shí)間適宜(以國(guó)標(biāo)為準(zhǔn),時(shí) 日不止確扣2分)、2分:廳p考核內(nèi)容考核要點(diǎn)分值評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)槍頭更換正確,1分。結(jié)果判定準(zhǔn)確10能在生理鹽水對(duì)照孔紅細(xì)胞呈 明顯鈕扣狀沉淀到孔底時(shí)判定 結(jié)果,2分;在對(duì)照孔結(jié)果正確情況下,能從 背側(cè)觀察RBCW無(wú)呈淚珠樣流 淌,2分;能把完全不凝集(RBCI全流卜) 作為被檢血清的最高稀釋倍數(shù), 3分;陰性血清與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的HI滴度 不大于2log2 ,陽(yáng)性血清與標(biāo)準(zhǔn) 抗原對(duì)照的HI滴度與已知滴度 相差1個(gè)稀釋度范圍內(nèi),3分。6抗體滴度 報(bào)告 (24 分)抗體滴度報(bào)告2抗體滴度報(bào)告方式正確,2分; 注:若超過(guò)10孔,應(yīng)寫(xiě)成 10log2。結(jié)果誤差20每個(gè)樣本
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