全血基因組DNA的提取

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2、，加入等體積（1ml） 3%的明膠， 蓋緊后顛倒混勻，37冰浴靜置5-10分鐘。明膠是高分子的聚合物， 可與紅細胞粘合并使其凝聚成串錢狀而加速紅細胞快速沉降，使之與白細胞分離。（2）取上清液至另一干凈離心管，4000轉離心5分鐘。（3）棄 上清液，留沉淀。2.破碎wbc在留有沉淀的離心管中加Tes2mL溶解沉淀（滴管或加樣器抽吸， 一定要充分吹散沉淀以利于破膜）后加 10%sDs1嗝，抽吸混勻，破 膜。以后的操作要小心輕柔，以免機械剪切力破壞核酸的完整性（核 酸已釋出）3.抽提DnA（1）加入2mlph7.8的飽和酚（在通風櫥中操作，吸取下層。苯 酚有毒，注意安全），顛倒混勻（一定要充分混勻）

3、。4000轉離心5-10 分鐘。（2）取上層水相至另一離心管，加入等體積的氯仿：異戊醇（24: 1）（在通風櫥中操作，有毒，注意安全），顛倒混勻，4000轉離心5 分鐘。4.沉淀DnA將上層水相移至一小玻璃試管中，小心沿試管壁加入 2.5倍體積 的無水乙醇，用滴管吸上層乙醇沿管壁緩慢沖洗下層溶液（小心，不 要把DnA吹散），看到DnA絮狀沉淀完全析出為止。5.溶解DnA沉淀用吸管吸出絮狀沉淀至另一 1.5ml小離心管，稍離心后加入70% 乙醇洗滌1次（去除共沉淀的鹽），離心后將乙醇去除干凈，揮干5-10 分鐘。將上述揮干的DnA加入200-300區(qū)ITe或者雙蒸水），輕輕震蕩， 使之溶解，冰箱保存?zhèn)溆谩＝Y果：獲得基因組 DnA討論：小組10人，個人分別為一組，有的同學的 DnA成形狀不 明顯，到實驗步驟的最后沒有肉眼看見 DnA絮狀沉淀析出，難以判 斷基因組DnA是否提取成功。出現(xiàn)這樣情況的原因可能是在實驗操 作過程中吸取上清液和顛倒混勻時技巧問題， 致使wbc的純度不夠或 者DnA在混勻時早已斷裂。所以，本實驗應特別注意操作過程的細 心和技巧。（實驗原理、材料、方法、結果、討論）最后