高效液相色譜思考題與練習(xí)題

1、思考題與練習(xí)題1 .高效液相色譜是如何實(shí)現(xiàn)高效、快速、靈敏的解：氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)造條件，從它的高效、高速和高靈敏度得到啟發(fā)，采用5-10 pm微粒固定相以提高柱效，采用高壓泵加快液體流動(dòng)相的流速；設(shè)計(jì)高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測器，提高檢測靈敏度，克服經(jīng) 典液相色譜的缺點(diǎn)，從而達(dá)到高效、快速、靈敏。2 .簡述液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素，如何減少譜帶擴(kuò)張，提高柱效解：液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流動(dòng)相傳質(zhì)、停留流動(dòng)相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。在液相色譜中要減少譜帶擴(kuò)張，提高柱效，要減少填料顆粒直徑，減小填料孔穴深度，提高裝填的均勻性，采用低黏度

2、溶劑作流動(dòng)相，流速盡可能低，同時(shí)要盡可能 采用死體積較小的進(jìn)樣器、檢測器、接頭和傳輸管線等。3 .色譜柱A柱長為15cm,載體粒度為5 dmi另一B柱長為30cm,載體粒度為10 dmi兩柱的柱效相等嗎解：l=L/dp.lA=15/=30000lB= 30/=30000A柱的折合柱長為 30000, B柱的折合柱長也為 30000,表明組分在兩根柱內(nèi)從柱入口到 出口都經(jīng)過30000個(gè)載體顆粒，兩柱的柱效相等。4 .流動(dòng)相為什么要脫氣常用的脫氣方法有拿幾種解：流動(dòng)相中溶解氣體存在以下幾個(gè)方面的害處(1)氣泡進(jìn)入檢測器，引起光吸收或電信號的變化，基線突然跳動(dòng)，干擾檢測；(2)溶解在溶劑中的氣體進(jìn)入

3、色譜柱時(shí)，可能與流動(dòng)相或固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；(3)溶解氣體還會引起某些樣品的氧化降解，對分離和分析結(jié)果帶來誤差。因此，使用前必須進(jìn)行脫氣處理。常用的脫氣法有以下幾種：(1)加熱脫氣法；(2)抽吸脫氣法(3)吹氨脫氣法；(4)超聲波振蕩脫氣法。5 .在液相色譜中。常用作固定相，又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是A.分子篩 B.硅膠 C.氧化鋁 D.活性炭解：B硅膠要形成化學(xué)鍵合固定相，所用的基質(zhì)材料應(yīng)有某種化學(xué)反應(yīng)活性，在四種固體固定相中只有硅膠含有硅醇基，是能進(jìn)行鍵合的活性官能團(tuán)。6 .在150X2mm硅膠柱流動(dòng)相為己烷/甲醇(150:2 ),紫外檢測器色譜條件下分離丙烯酰胺，判斷以下組分的出峰次序，

4、為什么0A_ IID_ IIA.一二-二-1 B.一H C解：在給定的色譜條件下，組分 B先出峰，組分A后出峰。以硅膠為固定相，己烷/甲醇(150:2 )為流動(dòng)相，該體系為正相色譜，樣品的極性 A>B在正相色譜體系極性小的組分先出峰，極性大的組分后出峰，所以出峰次序?yàn)?B先出，A后出。7 .在硅膠柱上，用甲苯為流動(dòng)相，某組分的保留時(shí)間為 30min,如果改用四氯化碳或乙醛為流動(dòng)相，試指出選用哪中溶劑能減少該組分的保留時(shí)間為什么解:該體系為正向色譜體系。在該體系中流動(dòng)相的極性增大保留值減少。流動(dòng)相甲苯、四氯化碳及乙醛的溶劑強(qiáng)度參數(shù)分別是、，因此選用溶劑強(qiáng)度參數(shù)大于甲苯的乙醒，可縮短該化合物

5、的保留時(shí)間。8.為什么體積排阻色譜中任何組分的分配系數(shù)必須符合0WKW1如果K>1說明什么問題解：因?yàn)榻M分的分配系數(shù)為 K=Cs/Cm,Cs與Cm#別為組分在固定相和流動(dòng)相中的濃度，當(dāng)分子直徑大于孔徑時(shí)，此時(shí)Cm=0jK=0.當(dāng)分子直徑小于固定相孔徑時(shí)，組分向空隙內(nèi)流動(dòng)相擴(kuò)散，達(dá)到平衡時(shí)，一半組分在空隙內(nèi)，一半組分在空隙外，此時(shí)K=，若分子直 徑介于以上兩種極限情況之間,K 一定介于0與1之間，可見體積排阻色譜中，任何祖父呢的分配系數(shù)為0WKW 1,如果K>1說明此時(shí)的分離方式已不是純粹的體積排阻色譜，其分離過程受到其他作用力（如吸附）的支配.9.為了測定鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺，

6、現(xiàn)有下列固定相：硅膠,ODS鍵合相，流動(dòng)相有：水-甲醇，異丙醛-己烷，應(yīng)選用哪種固定相，流動(dòng)相為什么解：鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺測定 ，為了良好分離,應(yīng)讓苯胺先出峰，由于苯胺的 極性小于鄰氨基苯酚，因此應(yīng)采用正相色譜法，選用硅膠為固定相，異丙醛-己烷為流動(dòng) 相.10.在OD璇合相固定相,甲醇-水為流動(dòng)相時(shí)試判斷四種苯并二氮雜苯的出現(xiàn)峰順序.為什3.4.解：色譜條件為反相鍵合相色譜體系，在反相色譜體系中極性大的組分k小,首先出峰，按四種苯并二氮雜苯的結(jié)構(gòu)，出峰順序?yàn)?-3-2-1.自測題1.在GC和LC中，影響柱選擇性的不同的因素是A.固定相的種類； B.柱溫；C.流動(dòng)相的種類；C D.分配比。

7、2.在液相色譜中，范氏方程中的哪一項(xiàng)對柱效能的影響可以忽略不計(jì)A.渦流擴(kuò)散項(xiàng)；B.分子擴(kuò)散項(xiàng)；C.固定相傳質(zhì)阻力項(xiàng)；D.流動(dòng)相中的傳質(zhì)阻力。3.在液相色譜中，某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力A.組分與流動(dòng)相；B.組分與固定相；C.組分與流動(dòng)相和固定相；D.組分與組分。4.在液-固色譜法中，以硅膠為固定相，對以下四組分，最后流出色譜柱的組分可能是° A.苯酚；0B.苯胺； C C.鄰羥基苯胺；0 D.對羥基苯胺。5 .在液-固色譜法中，以硅膠為固定相，對以下四組分，最后流出色譜柱的組分可能是口 A.苯酚；B.苯胺； C.鄰羥基苯胺；C D.對羥基苯胺。6 .用液相色譜

8、法分離長鏈飽和烷燒的混合物，應(yīng)采用下述哪一種檢測器A.紫外吸收檢測器；B.示差折光檢測器；C.熒光檢測器；D.電化學(xué)檢測器。7 .液-液色譜法中的反相液相色譜法，其固定相、流動(dòng)相和分離化合物的性質(zhì)分別為：A.非極性、極性和非極性；8 .極性、非極性和非極性；C.極性、非極性和極性；D.非極性、極性和離子化合物。8 .若在一個(gè)1m長的色譜柱上測得兩組分的分離度為，若要使它們完全分離，則柱長（m）至少應(yīng)為：rrr八rA.0.5 ;*B.2 ;1C.5;1D. 9。9 .在液相色譜中，梯度洗脫最宜于分離：A.幾何異構(gòu)體；B.沸點(diǎn)相近，官能團(tuán)相同的試樣；C.沸點(diǎn)相差大的試樣；D.分配比變化范圍寬的試樣。10 .液-液色譜法中的反相液相色譜法，其固定相、流動(dòng)相和分離化合物的性質(zhì)分別為:口 A