茶樹冰核細(xì)菌

1、茶葉微生物專題報告人：李傳愷 霜凍是指發(fā)生在冬春和秋冬之交，由于冷空氣的入侵或輻射冷卻，使土壤表面、植物表面以及近地面空氣層的溫度驟降到0以下，植物原生質(zhì)受到破壞，導(dǎo)致植株受害或者死亡的一種短時間低溫災(zāi)害。水汽含量較高有白色凝結(jié)物白霜水汽含量較低無白色凝結(jié)物暗霜 輕者出現(xiàn)“麻點”現(xiàn)象，芽葉焦灼，新梢停止萌發(fā) 重者造成葉枯、葉落、枝梢萎枯，呈燒焦?fàn)?經(jīng)霜凍危害后發(fā)出的茶芽往往瘦弱稀少，主要原因是之前凍傷的茶芽已經(jīng)消耗了大量養(yǎng)分。新梢部分細(xì)胞已經(jīng)壞死，但難以察覺，制得成茶沖泡后出現(xiàn)很多類似蟲孔狀的斑點，加工綠茶滋味苦澀，加工紅茶因酚類衍生物的減少而發(fā)酵不良，香氣降低。晴朗無風(fēng)、濕度較低天氣迎風(fēng)、封

2、閉、低洼地形植物種類、發(fā)育階段遺傳冰核細(xì)菌生物 冰核細(xì)菌（ice nucleation active bacteria，簡稱ina細(xì)菌）是一類能在-2-5條件下誘導(dǎo)植物體內(nèi)水分形成冰核而引起霜凍的細(xì)菌。1974年maki赤楊樹葉分離1978年lindow1988年azad廣泛研究1986年孫福在種群分布調(diào)查2002年唐朝榮pcr克隆冰核基因 攝氏零度是水的液相與固相的平衡點，稱為冰點。水在攝氏零度以下仍能保持液體狀態(tài)，這種現(xiàn)象叫做過冷卻作用，小體積純水可過冷卻到-40而不結(jié)冰。 水從液態(tài)向固態(tài)轉(zhuǎn)變需要一種稱為冰核的物質(zhì)來催化。由水分子自身形成的冰核稱為同質(zhì)冰核，它在-40時催化水結(jié)冰；由非水分

3、子形成的冰核稱為異質(zhì)冰核，多數(shù)異質(zhì)冰核催化水結(jié)冰的溫度都在-10以上。 正常情況下，植物細(xì)胞中的游離水即使處于-7-8的低溫下也不會產(chǎn)生過冷卻現(xiàn)象，但當(dāng)冰核細(xì)菌存在時，這種微生物作為異質(zhì)冰核因子誘發(fā)冰晶的形成，從而使植物組織中的水分失去了過冷卻作用，引起對宿主植物組織的凍傷損害。 根據(jù)vali推導(dǎo)后又由lindow等人改進的冰核率公式，以-3下產(chǎn)生一個冰核所需細(xì)菌數(shù)作為分級標(biāo)準(zhǔn)，將ina細(xì)菌的冰核活性劃分4個等級： 特強（102個細(xì)菌/冰核） 強（103104個細(xì)菌/冰核） 中（105106個細(xì)菌/冰核） 弱（107以上個細(xì)菌/冰核） snomax、冬奧會人工造雪 芳香組分、營養(yǎng)成分食品保鮮

4、促凍殺蟲基因工程菌促凍殺蟲 微生物檢測互作、元素利用報告基因 ina細(xì)菌在植物體上的數(shù)量消長變化，受溫度高低、雨 露 多 少 、 濕 度 大 小 影 響 較 大 ， 當(dāng) 氣 溫 平 均 在1025、雨露多、濕度大，又逢春秋霜凍易發(fā)季節(jié)時，ina細(xì)菌出現(xiàn)頻率高、數(shù)量大；相反，當(dāng)平均氣溫高于30，處于炎熱盛夏季節(jié)時，ina細(xì)菌分布數(shù)量很少，甚至難以分離到。 在我國云南、廣西等亞熱帶地區(qū)的主要分布種為erw.ananas；在東北、西北和華北等溫帶地區(qū)則主要為ps.syringae.pv.和erw.ananas。 同一種植物上可同時存在幾種ina細(xì)菌，但因植物種類不同，ina細(xì)菌種類間出現(xiàn)頻率差異較大

5、。如在水稻、小麥、玉米、香蕉等植物上主要分布erw.ananas；在白菜、番茄和黃瓜上則主要分布ps.syringa.pvs；日本研究者從茶樹上分離到三個種屬的冰核細(xì)菌，認(rèn)為黃單胞菌（xanthomonas）和歐文氏菌（erwinia）是主要存在的種類。菌株來源從山東日照、青島、泰安等地采集茶樹霜凍葉，分離并鑒定具有冰核活性的細(xì)菌菌株22株形態(tài)觀察革蘭氏染色，申云生氏法培養(yǎng)特征常見細(xì)菌鑒定手冊分子鑒定分析菌株16s rdna序列（穩(wěn)定）引物設(shè)計菌株總dna的提取pcr擴增序列連接、篩選和測定序列分析和鑒定拮抗菌篩選土壤微生物分離茶樹樹冠下2030cm多點取樣，na培養(yǎng)基分離純化拮抗作用測定平板對峙法：制備含冰核細(xì)菌的培養(yǎng)基，土壤細(xì)菌培養(yǎng)基上打菌餅，接種至含冰核細(xì)菌的培養(yǎng)基，觀察抑菌圈拮抗菌鑒定形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征、分子鑒定 目前，春茶的生產(chǎn)是我國茶葉經(jīng)濟的重要內(nèi)容，而影響春茶生產(chǎn)的主要是氣候因素，特別是霜凍對春茶生產(chǎn)影響最大。冰核細(xì)菌的存在與霜凍有關(guān)，為進一步防御霜害開辟了新途徑，傳統(tǒng)的防霜措施費時費力，而針對冰核細(xì)菌的防霜措施近年來得到大力研究。 從冰核細(xì)菌的角度進行茶樹防