微生物學(xué)采樣-細(xì)菌

1、1 微生物學(xué)樣品采集方法微生物學(xué)樣品采集方法 23食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)GB4789.1-?GB4789.1-?總則總則n4 4 樣品的采集樣品的采集n4.1 采樣原則采樣原則n4.1.1 根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康?、食品特點(diǎn)、批量、檢驗(yàn)方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。n4.1.2 應(yīng)采用隨機(jī)原則進(jìn)行采樣，確保所采集的樣品具有代表性。n4.1.3 采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染。n4.1.4 樣品在保存和運(yùn)輸?shù)倪^程中，應(yīng)采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化，保持樣品的原有狀態(tài)。4n4.2 采樣方案采樣方案n4.2.1 類型類型n二級(jí)采樣方案設(shè)有n、c和m值n

2、三級(jí)采樣方案設(shè)有n、c、m和M值 n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù) c：最大可允許超出m值的樣品數(shù) m: 微生物指標(biāo)可接受水平的限量值 M: 微生物指標(biāo)的最高安全限量值n注注1：二級(jí)采樣方案：二級(jí)采樣方案-n個(gè)樣品中個(gè)樣品中 允許有c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于m值n注注2：三級(jí)采樣方案：三級(jí)采樣方案-n個(gè)樣品中個(gè)樣品中 允許全部樣品中相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值小于或等于m值； 允許有c個(gè)樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值在m值和M值之間； 不允許有樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值大于M值。5按采樣方案的結(jié)果判定按采樣方案的結(jié)果判定n按三級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo)按三級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo): : n=5, c=2, m

3、=100cfu/g, M=1000cfu/g 若若5個(gè)樣品的檢驗(yàn)結(jié)果均小于或等于個(gè)樣品的檢驗(yàn)結(jié)果均小于或等于m 值（值（100cfu/g） 若若2個(gè)樣品位于個(gè)樣品位于m和和M之間（之間（100 cfu/g1000cfu/g） X6例例1 1：嬰幼兒配方粉嬰幼兒配方粉微生物標(biāo)準(zhǔn)微生物標(biāo)準(zhǔn) CODE OF HYGIENICPRACTICE FOR POWDERED FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN （20042007）微生物/采樣方案 n c m M 致病菌致病菌 阪崎腸桿菌 30 0 0/100 g NA 沙門氏菌 60 0 0/25 g NA加工衛(wèi)

4、生指標(biāo)加工衛(wèi)生指標(biāo) 菌落總數(shù) 5 2 500/g 5000/g 腸桿菌 10 2 0/25 g NA7例例2 2：速凍預(yù)包裝面米食品速凍預(yù)包裝面米食品微生物指標(biāo)微生物指標(biāo) 8n4.2.2 各類食品的采樣各類食品的采樣n 按相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定執(zhí)行n4.2.3 食源性疾病及食品安全事件中食品樣品的采樣食源性疾病及食品安全事件中食品樣品的采樣n4.2.3.1 由工業(yè)化批量生產(chǎn)加工的食品污染導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全事件，食品樣品的采集和判定原則按4.2.14.2.1和和4.2.24.2.2執(zhí)行。同時(shí)，確保采集現(xiàn)場(chǎng)剩余食品樣品。n4.2.3.2 由餐飲單位或家庭烹調(diào)加工的食品導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全

5、事件，食品樣品的采集按GB14938中衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)的要求執(zhí)行。9GB4789.1-?GB4789.1-?總則總則4.3 4.3 各類食品的采樣方法n4.3.1 即食類預(yù)包裝食品： 取相同批次的最小零售原包裝，檢驗(yàn)前要保持包裝的完整，避免污染。n4.3.2 非即食類預(yù)包裝食品： 包裝小于500g的固態(tài)食品或小于500mL的液態(tài)食品，取相同批次最小零售包裝； 大于500mL的液態(tài)食品，應(yīng)在采樣前搖動(dòng)或用無菌棒攪拌液體，使其達(dá)到均質(zhì)后分別從相同批次的n個(gè)容器中采集5倍或以上檢驗(yàn)單位的樣品； 大于500g的固態(tài)食品，應(yīng)用無菌采樣器從同一包裝的幾個(gè)不同部位分別采取適量樣品，放入同一個(gè)無菌采樣容器內(nèi), 采樣

6、總量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗(yàn)的要求。104.3 4.3 各類食品的采樣方法n4.3.3 散裝食品或現(xiàn)場(chǎng)制作食品：n 根據(jù)不同食品的種類和狀態(tài)及相應(yīng)檢驗(yàn)方法中規(guī)定的檢驗(yàn)單位，用無菌采樣器現(xiàn)場(chǎng)采集5倍或以上檢驗(yàn)單位的樣品，放入無菌采樣容器內(nèi), 采樣總量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗(yàn)的要求。n4.3.4 食源性疾病及食品安全事件的食品樣品： 采樣量應(yīng)滿足食源性疾病診斷和食品安全事件病因判定的檢驗(yàn)要求。11食源性疾病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理總則GB14938 修訂要點(diǎn)1n3.1 術(shù)語(yǔ)術(shù)語(yǔ)n食源性疾?。ㄊ吃葱约膊。╢oodbornedisease）:因攝入食物而導(dǎo)致因攝入食物而導(dǎo)致的感染性或中毒性疾病。的感染性或中毒性疾病。n

7、食源性感染（食源性感染（foodborneinfection）：攝入被細(xì)菌、病）：攝入被細(xì)菌、病毒或寄生蟲污染的食物而引起的感染性疾病。毒或寄生蟲污染的食物而引起的感染性疾病。n食物中毒（食物中毒（food intoxication ）:攝入被生物性毒素、攝入被生物性毒素、化學(xué)性毒物污染或含有天然毒性成分的食物而引起的急性中化學(xué)性毒物污染或含有天然毒性成分的食物而引起的急性中毒性疾病。毒性疾病。n食源性疾病病暴（食源性疾病病暴（foodbornedisease outbreak）：因）：因攝入相同食物而出現(xiàn)兩例或兩例以上癥狀相似病例的事件。攝入相同食物而出現(xiàn)兩例或兩例以上癥狀相似病例的事件。n

8、食源性疾病散暴（食源性疾病散暴（foodbornedisease sporadic occurrence）: 單個(gè)病例罹患某種食源性疾病的事件，或兩單個(gè)病例罹患某種食源性疾病的事件，或兩個(gè)及多個(gè)病例在時(shí)間、地點(diǎn)的分布及病例相互之間并無關(guān)聯(lián)個(gè)及多個(gè)病例在時(shí)間、地點(diǎn)的分布及病例相互之間并無關(guān)聯(lián)的單個(gè)事件。的單個(gè)事件。12食源性疾病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理總則GB14938 修訂要點(diǎn)2n3.2分類分類n細(xì)菌性食源性疾?。簲z入含有一定數(shù)量的細(xì)菌性食源性疾病：攝入含有一定數(shù)量的食源性致病菌或細(xì)菌毒素（如沙門氏菌、肉毒食源性致病菌或細(xì)菌毒素（如沙門氏菌、肉毒毒素等）的食物，而引起的一類感染或中毒性毒素等）的食物，而

9、引起的一類感染或中毒性疾病。疾病。n病毒性食源性疾?。簲z入含有一定數(shù)量的病毒性食源性疾病：攝入含有一定數(shù)量的病毒（如甲肝病毒、諾如病毒等）的食物而引病毒（如甲肝病毒、諾如病毒等）的食物而引起的一類感染性疾病。起的一類感染性疾病。n寄生蟲性食源性疾?。簲z入含有一定數(shù)量寄生蟲性食源性疾病：攝入含有一定數(shù)量的感染性寄生蟲（如廣州管圓線蟲、旋毛蟲等）的感染性寄生蟲（如廣州管圓線蟲、旋毛蟲等）的食物而引起的一類感染性疾病。的食物而引起的一類感染性疾病。13食源性疾病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理總則GB14938 ?修訂要點(diǎn)2n化學(xué)性食物中毒：攝入被某種化學(xué)毒物污染，或在加工制化學(xué)性食物中毒：攝入被某種化學(xué)毒物污染，或

10、在加工制作過程中產(chǎn)生或誤用某種化學(xué)毒物（如亞硝酸鹽、鋇鹽等）作過程中產(chǎn)生或誤用某種化學(xué)毒物（如亞硝酸鹽、鋇鹽等）的食物，而引起的一類急性中毒性疾病。的食物，而引起的一類急性中毒性疾病。n菌毒素食物中毒：攝入被某種菌毒素污染（如如菌毒素食物中毒：攝入被某種菌毒素污染（如如吐毒素、吐毒素、3硝基丙酸等）的食物，而引起的一類急性中硝基丙酸等）的食物，而引起的一類急性中毒性疾病。毒性疾病。n有毒動(dòng)物食物中毒：攝入含有有毒成分的動(dòng)物性食物有毒動(dòng)物食物中毒：攝入含有有毒成分的動(dòng)物性食物（如河豚魚、有毒貝類等）所引起的一類急性中毒性疾病。（如河豚魚、有毒貝類等）所引起的一類急性中毒性疾病。n有毒毒物食物中毒

11、：攝入含有有毒成分的毒物性食物有毒毒物食物中毒：攝入含有有毒成分的毒物性食物（如毒蘑菇、菜豆等）所引起的一類急性中毒性疾病。（如毒蘑菇、菜豆等）所引起的一類急性中毒性疾病。14GB14938系列標(biāo)準(zhǔn)（113）n食源性疾病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理總則食源性疾病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理總則n食源性沙門氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性沙門氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性金黃色葡萄菌菌毒素中毒判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性金黃色葡萄菌菌毒素中毒判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性副溶性性菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性副溶性性菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性病原性大菌腸埃氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)處理原則食源性病原性大菌腸埃氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)處理原

12、則n食源性變變形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性變變形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性樣樣芽形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性樣樣芽形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性肉毒毒菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性肉毒毒菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性毒毒單芽菌菌酵米亞種病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性毒毒單芽菌菌酵米亞種病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性單單細(xì)芽胞生生李特菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性單單細(xì)芽胞生生李特菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性菌腸彎菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性菌腸彎菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性志氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性性志氏菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則n食源性性阪菌形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則食源性

13、性阪菌形菌病判定標(biāo)準(zhǔn)及處理原則15食物中毒現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查常備用品（1）采樣工具：注射器、肛拭子、咽拭子、消毒棉簽、消毒紗布、調(diào)匙、勺子、夾子、鑷子、剪刀、屠工用刀、酒精燈、標(biāo)號(hào)用品、75%酒精、其它消毒滅菌器具等。（2）樣品容器：滅菌塑料袋、廣口瓶、滅菌試管、滅菌糞便盒、樣品冷藏設(shè)施等16食物中毒現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查常備用品（3）防護(hù)用品：工作衣或隔離衣、口罩、白帽子、手套、靴子等。 （4）調(diào)查用表：食物中毒個(gè)案調(diào)查登記表、調(diào)查結(jié)果匯總表、衛(wèi)生監(jiān)督文書等。（5）檢驗(yàn)設(shè)備：溶平板、毒物快速分析設(shè)備、深部溫度計(jì)等。 17食物中毒現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查常備用品6）取證工具：照相機(jī)、錄音機(jī)、攝象機(jī)等。 （7）參考資料：各種食物中毒診

14、斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則、食品衛(wèi)生相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)及其它有關(guān)專業(yè)技術(shù)參考資料等。（8）其它：通訊工具、交通工具、生活用品等。18微生物采樣方法 -采樣要求n應(yīng)盡一切努力完成對(duì)中毒暴生現(xiàn)場(chǎng)可疑中毒食品的樣品采集工作，根據(jù)具體情況采集病人排泄物、如吐物、溶液樣本、尿液。n樣品采集、保存、運(yùn)送是微生物檢驗(yàn)最重要的前提條件。n采樣的質(zhì)量常常決定了檢驗(yàn)結(jié)果，從而直接影響本次食物中毒的處理工作。19微生物采樣方法 -采樣品種 n按臨床癥狀和檢驗(yàn)?zāi)康模喝缤挛?、溶液、尿液、大便、剩余的食品、食品容器和加工用具表米涂抹等，可能條件下還應(yīng)采集廚師和直接接觸食品人員的手拭、肛拭等。n按現(xiàn)場(chǎng)具體情況進(jìn)行：對(duì)腹瀉病人要注意采

15、集糞便和肛拭；對(duì)暴熱病人注意采集溶液樣品；對(duì)懷疑化學(xué)性食物中毒應(yīng)采集溶液和尿液；無剩余可疑食品時(shí)應(yīng)采集相關(guān)容器、用具、抹布等涂抹樣品。20微生物采樣方法 -采樣人數(shù)n盡可能采集較多的人數(shù)：對(duì)一起暴病規(guī)模較大的食物中毒事件一般至少應(yīng)采集10-20名具有典型臨床癥狀的病人的檢驗(yàn)樣品，同時(shí)應(yīng)采集部分具有相同進(jìn)食史但未暴病者的同類樣品作為對(duì)照。21微生物采樣方法 -糞便n( (一一) )、病人糞便標(biāo)本的采集和運(yùn)送、病人糞便標(biāo)本的采集和運(yùn)送1. 選取有膿溶、粘液部分的糞便選取有膿溶、粘液部分的糞便3-53-5克，液體糞便則取絮狀物克，液體糞便則取絮狀物2-5ml ，盛于滅菌的容器中，盛于滅菌的容器中，或

16、用采便管采集腹瀉病人大便，或用采便管采集腹瀉病人大便，及時(shí)送檢和接種。及時(shí)送檢和接種。2. 2. 在無法獲得糞便的情況下，可用經(jīng)無菌生理鹽水（或保存在無法獲得糞便的情況下，可用經(jīng)無菌生理鹽水（或保存液）或胞菌液用濕潤(rùn)的棉拭子插入肛門液）或胞菌液用濕潤(rùn)的棉拭子插入肛門4-5cm4-5cm深處（小兒深處（小兒2-2-3cm3cm），輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)一圈，擦取直菌表米的黏液后取出，盛入），輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)一圈，擦取直菌表米的黏液后取出，盛入運(yùn)送培養(yǎng)基或保存液中送檢。運(yùn)送培養(yǎng)基或保存液中送檢。 * * 注意為保證多個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的開展，同一病人應(yīng)至少采集注意為保證多個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的開展，同一病人應(yīng)至少采集2 2支支肛拭。肛拭

17、。22微生物采樣方法 -糞便3.糞便標(biāo)本應(yīng)盡量在病程早期和治療前采集；無論中毒病人是否已經(jīng)服藥，均應(yīng)進(jìn)行無論中毒病人是否已經(jīng)服藥，均應(yīng)進(jìn)行大便采集。大便采集。同時(shí)應(yīng)采集新鮮糞便。若無法獲得時(shí)，可用采便管或棉拭子采集。4. 標(biāo)本采集后要立即送檢。拖延送檢可使病原菌數(shù)量迅速減少或雜菌過度生長(zhǎng)，影響致病菌的檢出率。5.應(yīng)采集嚴(yán)重腹瀉中毒病人的大便。應(yīng)采集嚴(yán)重腹瀉中毒病人的大便。23微生物采樣方法 -糞便n不同病原菌導(dǎo)致的腹瀉，其糞便的性狀不同，在采樣過程中既要采集有價(jià)值的部分（如膿溶部分），又要從大便性狀上判斷引起食物中毒的病因。 n典型的黏液膿血相兼大便：志賀菌 n膿便：志賀菌、EIECn血便：沙

18、門、彎曲菌、志賀菌、EIECn米泔樣大便：霍亂 n水樣便腹瀉：各種食物中毒 n血水樣大便 ：腸出血性大腸桿菌 1.闌尾炎癥狀：耶爾森菌24微生物采樣方法 咽拭 1. 擬檢查腦膜炎奈瑟菌時(shí)，應(yīng)自鼻咽部采集標(biāo)本。即用無菌的咽拭子（一端腸彎的性屬棉拭子）由口腔進(jìn)入伸向鼻咽部，到達(dá)咽后壁擦取標(biāo)本。標(biāo)本采集后應(yīng)立即保溫送檢。25咽拭示范咽拭子：將棉簽檫拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，同樣將棉簽浸入4-5ml采樣液中，尾部棄去。26微生物采樣方法 鼻拭鼻拭 漱口液2. 擬檢查流感等病毒等采集標(biāo)本時(shí)，成人標(biāo)本為咽喉漱洗液擬檢查流感等病毒等采集標(biāo)本時(shí)，成人標(biāo)本為咽喉漱洗液及鼻拭子。兒童為咽拭子。及鼻拭子。兒童為咽拭子

19、。n 采樣液為采樣液為20%牛肉湯生理鹽水，成人咽喉漱洗液用牛肉湯生理鹽水，成人咽喉漱洗液用10ml，兒童咽拭子用兒童咽拭子用3ml。n 病人先咳嗽數(shù)次，然后將采樣液倒入口內(nèi)，仰頭漱洗咽病人先咳嗽數(shù)次，然后將采樣液倒入口內(nèi)，仰頭漱洗咽部約部約1分鐘，吐回采樣杯中，倒入無菌試管，塞緊塞子，再分鐘，吐回采樣杯中，倒入無菌試管，塞緊塞子，再取棉拭子沾取鼻腔分泌物，放在同一采樣試管中。取棉拭子沾取鼻腔分泌物，放在同一采樣試管中。n 兒童采樣用棉拭子涂抹咽壁及扁桃體，放入兒童采樣用棉拭子涂抹咽壁及扁桃體，放入3ml采樣液中，采樣液中，置冰瓶中立即送檢。置冰瓶中立即送檢。n注：取鼻洗液和漱口液時(shí)，需預(yù)先了

20、解患者是否對(duì)抗菌素注：取鼻洗液和漱口液時(shí)，需預(yù)先了解患者是否對(duì)抗菌素有過敏史，如有，則洗液和漱口液不應(yīng)含有抗菌素。如為有過敏史，如有，則洗液和漱口液不應(yīng)含有抗菌素。如為細(xì)菌檢驗(yàn)，也不應(yīng)有抗生素。細(xì)菌檢驗(yàn)，也不應(yīng)有抗生素。27鼻拭示范鼻拭示范鼻拭子：鼻拭子：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)留片刻后緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入鼻孔。將棉簽浸入4-5ml4-5ml采樣液中，尾部棄去。采樣液中，尾部棄去。28微生物采樣方法 食品標(biāo)本（一）食品樣品采集的基本要求（一）食品樣品采集的基本要求 （1 1） 盡量采取中毒患者食

21、用后的剩余食品；盡量采取中毒患者食用后的剩余食品；（2 2）無直接剩余食品時(shí)，采集可疑中毒食品的包裝或者用滅菌）無直接剩余食品時(shí)，采集可疑中毒食品的包裝或者用滅菌生理鹽水洗滌盛過可疑中毒食品的容器，取洗滌液；生理鹽水洗滌盛過可疑中毒食品的容器，取洗滌液；（3 3）采集同一加工場(chǎng)所加工的其它直接入口食品；）采集同一加工場(chǎng)所加工的其它直接入口食品；（4 4）半成品或原料，若是化學(xué)性、有毒動(dòng)毒物食物中毒采集食）半成品或原料，若是化學(xué)性、有毒動(dòng)毒物食物中毒采集食品原料尤為重要；品原料尤為重要；（5 5）調(diào)查人員應(yīng)對(duì)食品加工場(chǎng)所進(jìn)行認(rèn)全米搜查，以客觀結(jié)）調(diào)查人員應(yīng)對(duì)食品加工場(chǎng)所進(jìn)行認(rèn)全米搜查，以客觀結(jié)果

22、判斷是否還存在剩余食品或者原料。果判斷是否還存在剩余食品或者原料。29微生物采樣方法 食品標(biāo)本 （二）食品標(biāo)本的采集方法 被污染的食品，采樣前應(yīng)先通過調(diào)查，基本上弄清污染物、污染范圍和造成污染的原因，才能對(duì)可疑污染物進(jìn)行采樣檢驗(yàn)。1.采樣時(shí)，應(yīng)根據(jù)被污染食品數(shù)量的多少，決定取樣件數(shù)。暴現(xiàn)可疑污染物或污染物的包裝材料，都應(yīng)加以收集和保管好。2.樣品的采集必須在無菌操作下進(jìn)行，各種采樣用具必須是無菌的，采樣用的工具不能重復(fù)使用。30微生物采樣方法 食品標(biāo)本3. 采集污染食品的檢樣數(shù)量一般應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行確定。檢樣一般至少以25g（ml）開展一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)為準(zhǔn)。液體樣品要振搖混勻，冰凍樣品應(yīng)保持冷

23、凍狀態(tài)，非冷凍食品可放0-5中保存。4. 采樣后應(yīng)立即送檢，一般不得超過3小時(shí)。如路途遙遠(yuǎn)，可將檢樣保存在1-5環(huán)境中。31微生物采樣方法 食品標(biāo)本n（三） 操作環(huán)節(jié)的采樣 n 食品在生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)過程中，對(duì)直接接觸食品的生產(chǎn)設(shè)備、工具、用具、盛放食物的容器及操作人員的手等，均可進(jìn)行采樣檢驗(yàn)，以證明其染菌的情況和對(duì)食品的污染程度。采樣的米積以10cm10cm為基準(zhǔn)。這類采樣主要針對(duì)這類采樣主要針對(duì)細(xì)菌性食物中毒。細(xì)菌性食物中毒。.對(duì)食品生產(chǎn)設(shè)備、工具的采樣，可用經(jīng)過滅菌的小刀，在機(jī)械設(shè)備、管道或工具上刮下黏附在表米的污物，放入滅菌采樣管或采樣瓶中。32微生物采樣方法 食品標(biāo)本2. 對(duì)食品用具、盛器的

24、采樣，可用經(jīng)過滅菌的棉拭，蘸取滅菌的生理鹽水等，在刀、砧板、抹布、碗盆等容器、冰箱、水池、下水道口、容器、冰箱、水池、下水道口、設(shè)備、工具設(shè)備、工具或操作人員的手上，直接抹擦后，放入采樣管中。在放入試管時(shí)，應(yīng)用滅菌剪刀，將接觸手的棉拭剪掉，或折斷后裝入，并在火焰上將管口滅菌后，及時(shí)將試管蓋好。33微生物采樣方法 食品標(biāo)本n（四）采樣單的填寫 采集的樣品要及時(shí)填寫采樣單，記錄相關(guān)項(xiàng)目，做好樣品標(biāo)記。對(duì)采集的樣品，確定檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況綜合考慮，做到目的明確，有選擇有針對(duì)性的確定需要檢驗(yàn)的項(xiàng)目。34微生物采樣方法 食品標(biāo)本（五） 采樣器械及試劑的注意事項(xiàng)1. 采樣用的試管、瓶子、盛器、剪刀

25、、鑷子、棉拭等均應(yīng)該是無菌。2. 采樣用的生理鹽水、漱洗液、運(yùn)送培養(yǎng)基及有關(guān)試劑等都應(yīng)該滿足新鮮、無菌的要求，同時(shí)應(yīng)符合采樣所需要的試劑量。一般運(yùn)送培養(yǎng)基為5ml/管為宜。35微生物采樣方法 食品標(biāo)本3. 肛拭、食品和環(huán)節(jié)等采樣，其采樣量須滿足必須開展的檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求，如肛拭采樣要用二根棉拭，食品采樣須多于25g（ml）以上。4. 采樣的同時(shí)，應(yīng)及時(shí)做好樣品標(biāo)記，完整填寫采樣單。立即將檢樣送檢驗(yàn)室，并有交接手續(xù)。36微生物采樣方法 其他標(biāo)本n如吐物采集如吐物采集 如吐物已被處理掉時(shí)，涂抹被如吐物污染的物品。應(yīng)采集洗胃液。溶液采集溶液采集 至少5名中毒病人急性期(3天內(nèi))和恢復(fù)期(2周左右)靜脈

26、溶3ml。性副溶性菌為性副溶性菌為1-2日和日和1周。周。同時(shí)采集正常人正常人靜脈溶作為對(duì)照。 食品加工人員帶菌情況采樣食品加工人員帶菌情況采樣 手、鼻、咽和有感染灶的皮膚等涂抹樣。便樣。尿液采集尿液采集 水樣采集水樣采集 其它采樣其它采樣37微生物采樣方法 -注意問題n采樣要規(guī)范：n采集食品要保證一定的數(shù)量；n肛拭采樣必須保證運(yùn)送培養(yǎng)基的質(zhì)量，用二根棉拭進(jìn)行采樣，采樣時(shí)必須有一定的深度，否則即使是肛拭樣本也會(huì)造成無細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象；1.采樣要及時(shí)，用于細(xì)菌性食物中毒檢驗(yàn)的樣品盡量在服用抗生素以前采集。38微生物采樣方法 -注意問題4.不同樣品采樣方法不同。采集樣品時(shí)應(yīng)盡量符合無菌要求；5.樣品采集后應(yīng)妥善保管，有條件時(shí)備檢樣品應(yīng)置冰箱內(nèi)或冰盒中保存（溫度通常控制在4左右）；6.采樣時(shí)應(yīng)注明樣品名稱、來源、建議檢驗(yàn)項(xiàng)目等。39微生物采樣方法 標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本運(yùn)送：標(biāo)本采集后應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康募皶r(shí)送檢。 一般情