淺談開展血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的體會(huì)

1、2022-1-51淺談開展血小板抗體淺談開展血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的體會(huì)檢測(cè)項(xiàng)目的體會(huì)2022-1-52一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)六六 血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展 六大方面六大方面2022-1-53一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（一）（一） 血小板抗體的內(nèi)涵：血小板抗體的內(nèi)涵：（二）（二） 目前杭州省

2、級(jí)醫(yī)院開展情況：目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況：（三）三點(diǎn)思考：（三）三點(diǎn)思考：（四）我們的觀點(diǎn)：（四）我們的觀點(diǎn)：2022-1-54一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（一）（一）血小板抗體的內(nèi)涵：血小板抗體的內(nèi)涵：1 1白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體：白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)HLA-類抗原（類抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量抗原和少量HLA-C抗原）抗原）的的 HLA-HLA-類抗體（類抗體（ 50-80%50-80% ）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼260000016 260000016 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱白細(xì)胞特異性和組白細(xì)胞特異性和組

3、織織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無(wú)限定支付范圍；甲乙分類）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無(wú)限定支付范圍；甲乙分類甲。甲。2 2血小板特異性和組織相容性抗體：血小板特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)血小板特異性抗原（血小板特異性抗原（HPA抗原）抗原）的的HPAHPA抗體（抗體（17-25%17-25%）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼260000017 260000017 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱血小板特異性和組血小板特異性和組織織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3

4、）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類甲。甲。參考文件：參考文件：浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，2005年版，第年版，第65頁(yè)。頁(yè)。浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，2010年年12月版，第月版，第44頁(yè)。頁(yè)。 2022-1-55一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（二）（二） 目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況：目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況： 1）血小板抗體檢測(cè)

5、試劑注冊(cè)時(shí)間：國(guó)家藥監(jiān)局，）血小板抗體檢測(cè)試劑注冊(cè)時(shí)間：國(guó)家藥監(jiān)局， 2011年年4月月3日。日。 2）我院開展時(shí)間：）我院開展時(shí)間：2011年年5月月26日；關(guān)注和準(zhǔn)備時(shí)間日；關(guān)注和準(zhǔn)備時(shí)間 約約10年。年。 3）現(xiàn)在杭州，浙一醫(yī)院、浙二醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省中醫(yī)院、）現(xiàn)在杭州，浙一醫(yī)院、浙二醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省中醫(yī)院、 浙浙江醫(yī)院等相繼開展。江醫(yī)院等相繼開展。2022-1-56一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（三）三點(diǎn)思考：（三）三點(diǎn)思考：思考思考1： 血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入支付范圍的器限列入支付范圍

6、的器官移植，合理？官移植，合理？思考思考2： 有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和醫(yī)保限定支付范圍，醫(yī)保限定支付范圍，據(jù)了解沒(méi)有征求醫(yī)院輸血科專家據(jù)了解沒(méi)有征求醫(yī)院輸血科專家的意見，的意見，合理？合理？ （據(jù)實(shí)地了解，浙江省（據(jù)實(shí)地了解，浙江省血型與配血的收費(fèi)是上海的血型與配血的收費(fèi)是上海的1/3，江西，江西1/3，且遠(yuǎn)低于西部，且遠(yuǎn)低于西部地區(qū)，地區(qū)，合理？合理？ ）思考思考3： 社會(huì)在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更新和創(chuàng)新？以適社會(huì)在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更新和創(chuàng)新？以適應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。2022-1-57

7、一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（四）我們的觀點(diǎn)：（四）我們的觀點(diǎn)： 1 患者和醫(yī)院的輸血安全重于泰山！患者和醫(yī)院的輸血安全重于泰山！ 2 輸注血小板是臨床治療的重要手段，今后輸注血小板是臨床治療的重要手段，今后 必將有更必將有更大發(fā)展。大發(fā)展。 3 大行何不做小微？大行何不做小微？2022-1-58二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義義 關(guān)于血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的說(shuō)明關(guān)于血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的說(shuō)明（2011-11-21） 院醫(yī)保辦：院醫(yī)保辦： 因血小板抗體引起的臨床問(wèn)題和疾病已引起全社會(huì)的因血小板抗體引起的臨床問(wèn)題和疾病已引起全社會(huì)的嚴(yán)重關(guān)注，成為臨床亟待解決的問(wèn)題

8、。嚴(yán)重關(guān)注，成為臨床亟待解決的問(wèn)題。 血小板抗體檢測(cè)（或篩選）包括白細(xì)胞特異性和組織血小板抗體檢測(cè)（或篩選）包括白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體和血小板特異性和組織相容性抗體。相容性抗體和血小板特異性和組織相容性抗體。 血小板抗體是引起臨床非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)的血小板抗體是引起臨床非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)的最主要原因，非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)是臨床很常見的輸血最主要原因，非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)是臨床很常見的輸血不良反應(yīng)，文獻(xiàn)報(bào)道輸注紅細(xì)胞為不良反應(yīng)，文獻(xiàn)報(bào)道輸注紅細(xì)胞為26%，輸注血小板為，輸注血小板為2030%，多次輸血患者高達(dá)，多次輸血患者高達(dá) 2763，而非溶血性，而非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)與血

9、小板抗體密切相關(guān)，是影響臨床安全輸發(fā)熱性輸血反應(yīng)與血小板抗體密切相關(guān)，是影響臨床安全輸血的嚴(yán)重因素。血小板抗體的檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和減少非溶血性血的嚴(yán)重因素。血小板抗體的檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和減少非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)非常有意義。發(fā)熱性輸血反應(yīng)非常有意義。2022-1-59二開展開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義二開展開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義 血小板抗體是臨床引起免疫性血小板輸注無(wú)效的最主要原因，文血小板抗體是臨床引起免疫性血小板輸注無(wú)效的最主要原因，文獻(xiàn)報(bào)道獻(xiàn)報(bào)道2080%多次輸血的患者出現(xiàn)免疫性血小板輸注無(wú)效，血小板輸多次輸血的患者出現(xiàn)免疫性血小板輸注無(wú)效，血小板輸注無(wú)效會(huì)導(dǎo)致昂貴的血液和醫(yī)療資源的極

10、大浪費(fèi)，同時(shí)給患者造成較大的注無(wú)效會(huì)導(dǎo)致昂貴的血液和醫(yī)療資源的極大浪費(fèi)，同時(shí)給患者造成較大的經(jīng)濟(jì)損失和身體損害。經(jīng)濟(jì)損失和身體損害。 血小板抗體的檢測(cè)是臨床診斷和治療與血小板抗體有關(guān)的疾病的血小板抗體的檢測(cè)是臨床診斷和治療與血小板抗體有關(guān)的疾病的重要依據(jù)。重要依據(jù)。 鑒于血小板抗體對(duì)臨床的重要價(jià)值，為此該項(xiàng)目得到今年鑒于血小板抗體對(duì)臨床的重要價(jià)值，為此該項(xiàng)目得到今年11月月1日衛(wèi)生廳質(zhì)量檢查組的充分肯定。目前我省兄弟醫(yī)院已相繼開展。日衛(wèi)生廳質(zhì)量檢查組的充分肯定。目前我省兄弟醫(yī)院已相繼開展。 輸血科輸血科 2011年年11月月21日日2022-1-510三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)

11、技術(shù)的簡(jiǎn)述（一）原理（一）原理（二）試劑組成（二）試劑組成（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（四）操作（四）操作2022-1-511三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述（一）原理（一）原理 1、基于固相紅細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)（、基于固相紅細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)（SPRCA）原理。）原理。 2、反應(yīng)板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液、反應(yīng)板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液經(jīng)經(jīng) 離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。 3、加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過(guò)孵育后，若該血清或、加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過(guò)孵育后，若該血清或血漿中含有血小板抗體，則該抗體與反應(yīng)孔

12、中的血小板血漿中含有血小板抗體，則該抗體與反應(yīng)孔中的血小板單層結(jié)合，未結(jié)合的成分通過(guò)洗滌被去除。單層結(jié)合，未結(jié)合的成分通過(guò)洗滌被去除。 4、加入抗人、加入抗人IgG及人及人IgG致敏紅細(xì)胞（指示紅細(xì)胞），致敏紅細(xì)胞（指示紅細(xì)胞），經(jīng)離心后指示紅細(xì)胞通過(guò)抗人經(jīng)離心后指示紅細(xì)胞通過(guò)抗人IgG的橋連與血小板單層的橋連與血小板單層上的血小板抗體結(jié)合，因此陽(yáng)性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞平鋪上的血小板抗體結(jié)合，因此陽(yáng)性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞平鋪在反應(yīng)孔底部表面。而陰性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞在離心力在反應(yīng)孔底部表面。而陰性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞在離心力的作用下聚集于反應(yīng)孔底部中央。的作用下聚集于反應(yīng)孔底部中央。2022-1-512三血

13、小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述（二）試劑組成（二）試劑組成1 低離子溶液（低離子溶液（L.I.M）2 反應(yīng)版：在加入干燥劑的自封袋中密封保存；保存溫度為反應(yīng)版：在加入干燥劑的自封袋中密封保存；保存溫度為28。3 25*濃縮洗滌液濃縮洗滌液4 抗人抗人IgG5 陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照6 陰性對(duì)照陰性對(duì)照7 指示紅細(xì)胞指示紅細(xì)胞2022-1-513（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（7）1 所有試劑平衡至室溫。所有試劑平衡至室溫。2 25*濃縮洗滌液：使用前用蒸餾水以濃縮洗滌液：使用前用蒸餾水以1：24稀釋成洗滌工作液。稀釋成洗滌工作液。3 血小板抗體篩檢細(xì)胞：血小板抗體篩檢細(xì)胞： 1）

14、為多人份）為多人份O型健康者血小板，經(jīng)冷凍干燥制成。型健康者血小板，經(jīng)冷凍干燥制成。 2）使用前每支加生理鹽水）使用前每支加生理鹽水500 l ，室溫（，室溫（1825）靜）靜置置5分鐘分鐘 3）溶解后的濃度為）溶解后的濃度為10020109個(gè)個(gè)/L 4）使用前應(yīng)充分溶解和混勻）使用前應(yīng)充分溶解和混勻 5）溶解后室溫可保存）溶解后室溫可保存24小時(shí)，但不可小時(shí)，但不可4保存保存4 指示紅細(xì)胞：指示紅細(xì)胞： 1）指示紅細(xì)胞的表面已致敏人）指示紅細(xì)胞的表面已致敏人IgG抗體抗體 2）使用前平衡至室溫（）使用前平衡至室溫（1825） 3）加樣時(shí)應(yīng)充分搖勻）加樣時(shí)應(yīng)充分搖勻 4）若指示紅細(xì)胞出現(xiàn)溶血、

15、細(xì)菌污染、過(guò)期則不能使用）若指示紅細(xì)胞出現(xiàn)溶血、細(xì)菌污染、過(guò)期則不能使用 5）加樣時(shí)沒(méi)有充分搖勻或離心不充分，可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果）加樣時(shí)沒(méi)有充分搖勻或離心不充分，可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果 三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-1-5145 制備血小板懸液：制備血小板懸液： 1）抗體檢測(cè)采用）抗體檢測(cè)采用3人份等比例混合人份等比例混合O型血小板懸液型血小板懸液 2）機(jī)采血小板需用生理鹽水進(jìn)行）機(jī)采血小板需用生理鹽水進(jìn)行5-10倍稀釋后混合倍稀釋后混合 3） 血小板懸液濃度約為血小板懸液濃度約為50150109個(gè)個(gè)/L 4）當(dāng)天采血）當(dāng)天采血8小時(shí)內(nèi)小時(shí)內(nèi)EDTA或枸櫞酸鈉抗凝血經(jīng)或

16、枸櫞酸鈉抗凝血經(jīng)200 g離心離心10分鐘分鐘 后，取上層后，取上層2/3富血小板血漿富血小板血漿(PRP)可直接使用可直接使用 5）交叉配血直接采用供者血小板）交叉配血直接采用供者血小板 6）血小板懸液應(yīng)貯存于塑料容器中，室溫可保存）血小板懸液應(yīng)貯存于塑料容器中，室溫可保存24小時(shí)，小時(shí)，但不可但不可 4保存保存6 待檢樣本：血清或血漿樣本應(yīng)新鮮，待檢樣本：血清或血漿樣本應(yīng)新鮮，3000rpm離心離心5min以去除以去除析出的纖維蛋白及其它有形成份，取上清進(jìn)行檢測(cè)。析出的纖維蛋白及其它有形成份，取上清進(jìn)行檢測(cè)。 7 打開水浴箱，將濕盒平衡至打開水浴箱，將濕盒平衡至37。（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（三）

17、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（7）三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-1-515（四）操作（四）操作1 依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣品孔，未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。品孔，未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。2 向反應(yīng)孔中加入向反應(yīng)孔中加入1滴（滴（50 l）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板10 秒鐘，使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。秒鐘，使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。3 用平板離心機(jī)將反應(yīng)板以用平板離心機(jī)將反應(yīng)板以50g （650rpm）離心）離心5分鐘，使血分

18、鐘，使血小板固定在微孔底部表面。小板固定在微孔底部表面。4 倒出反應(yīng)孔中的液體，并用滴管滴加洗滌工作液清洗倒出反應(yīng)孔中的液體，并用滴管滴加洗滌工作液清洗3次，洗滌次，洗滌過(guò)程中應(yīng)輕搖微孔板，然后再輕輕甩掉洗滌液。最后一次洗滌后過(guò)程中應(yīng)輕搖微孔板，然后再輕輕甩掉洗滌液。最后一次洗滌后將反應(yīng)板倒置于吸水紙上輕輕吸干殘余液體（切勿拍打）。將反應(yīng)板倒置于吸水紙上輕輕吸干殘余液體（切勿拍打）。5 立即向每個(gè)反應(yīng)孔中加入立即向每個(gè)反應(yīng)孔中加入2滴（滴（100 l）低離子溶液，并向相應(yīng)）低離子溶液，并向相應(yīng)孔中加入孔中加入1滴滴(50l)待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照。低離子待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照。

19、低離子溶液將由紫色變?yōu)樘焖{(lán)或青綠色，如仍為紫色可能漏加樣本。溶液將由紫色變?yōu)樘焖{(lán)或青綠色，如仍為紫色可能漏加樣本。三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-1-516（四）操作（四）操作6 用封口膠將反應(yīng)孔封好，輕搖微孔板混勻后置于濕盒中，用封口膠將反應(yīng)孔封好，輕搖微孔板混勻后置于濕盒中，37水浴孵育水浴孵育30分鐘。分鐘。7 按步驟按步驟5.4洗滌反應(yīng)板洗滌反應(yīng)板5次。次。8 立即加入立即加入1滴（滴（50 l）抗人）抗人IgG試劑及試劑及1滴（滴（50 l）指示細(xì)胞，）指示細(xì)胞，輕輕震蕩混勻。輕輕震蕩混勻。9 將反應(yīng)板以將反應(yīng)板以200g（1300rpm）離心）離心5分

20、鐘。將待檢孔與對(duì)照孔分鐘。將待檢孔與對(duì)照孔的結(jié)果進(jìn)行比較，判讀結(jié)果。的結(jié)果進(jìn)行比較，判讀結(jié)果。10 結(jié)果判定結(jié)果判定 10.1 陽(yáng)性或弱陽(yáng)性結(jié)果：陽(yáng)性或弱陽(yáng)性結(jié)果： 指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部平鋪形成細(xì)胞層為陽(yáng)性；若指示細(xì)胞只指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部平鋪形成細(xì)胞層為陽(yáng)性；若指示細(xì)胞只結(jié)合到部分孔底，并且結(jié)合的區(qū)域比陰性對(duì)照大為弱陽(yáng)性。表明結(jié)合到部分孔底，并且結(jié)合的區(qū)域比陰性對(duì)照大為弱陽(yáng)性。表明待檢者血清或血漿中含有血小板抗體。待檢者血清或血漿中含有血小板抗體。 10.2陰性結(jié)果：陰性結(jié)果： 指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部中央形成細(xì)胞聚集。表明待檢者血清或指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部中央形成細(xì)胞聚集。表明待檢者血清或血漿血

21、漿 中不含血小板抗體。中不含血小板抗體。三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-1-517 附附 血小板抗體檢測(cè)簡(jiǎn)易操作程序血小板抗體檢測(cè)簡(jiǎn)易操作程序 一、準(zhǔn)備工作：一、準(zhǔn)備工作： 1、試劑復(fù)溫；、試劑復(fù)溫； 2、濕盒在水浴箱中平衡至、濕盒在水浴箱中平衡至37； 3、配制洗滌工作液（蒸餾水；、配制洗滌工作液（蒸餾水；1：24）；）； 4、制備血小板懸液（加生理鹽水、制備血小板懸液（加生理鹽水500 l）；）； 5、待檢樣本、待檢樣本3000rpm離心離心5min。 二、操作步驟：二、操作步驟： 6、 標(biāo)記反應(yīng)板條標(biāo)記反應(yīng)板條 ； 7、加血小板懸液、加血小板懸液1滴（滴（5

22、0 l），輕搖反應(yīng)板），輕搖反應(yīng)板10秒鐘；秒鐘； 8、平板離心機(jī)、平板離心機(jī)50g （650rpm）離心）離心5分鐘；分鐘； 9、洗滌、洗滌3次；次； 10、加低離子溶液、加低離子溶液2滴（滴（100 l）；）； 11、加待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照、加待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照1滴滴(50l)； 12、封孔，輕搖反應(yīng)板、封孔，輕搖反應(yīng)板10秒鐘，濕盒中秒鐘，濕盒中37水浴孵育水浴孵育30分鐘；分鐘； 13、洗滌、洗滌5次；次； 14、加抗人、加抗人IgG試劑試劑1滴（滴（50 l）；）； 15、加指示細(xì)胞、加指示細(xì)胞1滴（滴（50 l），輕搖反應(yīng)板），輕搖反應(yīng)板10秒鐘；秒鐘； 16

23、、平板離心機(jī)、平板離心機(jī)200g（1300rpm）離心）離心5分鐘；分鐘； 17、判讀結(jié)果。、判讀結(jié)果。2022-1-518四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況1、2011年年6月月1日日12月月31日共計(jì)檢測(cè)日共計(jì)檢測(cè) 次，次， 月平均檢測(cè)月平均檢測(cè) 人次，平均月增加收入人次，平均月增加收入 元；計(jì)劃元；計(jì)劃 2012年有較大幅度的增年有較大幅度的增長(zhǎng)；社會(huì)效益明顯。長(zhǎng)；社會(huì)效益明顯。2、血小板抗體檢測(cè)總陽(yáng)性率。、血小板抗體檢測(cè)總陽(yáng)性率。3、反復(fù)輸血的血液病患者的血小板抗體陽(yáng)性率。、反復(fù)輸血的血液病患者的血小板抗體陽(yáng)性率。4、有妊娠史婦女的血小板抗體陽(yáng)性率。、有妊娠

24、史婦女的血小板抗體陽(yáng)性率。2022-1-519四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-1-520四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-1-521四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-1-522五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì) 抗抗HLA抗體、抗血小板抗體檢查結(jié)果（日本）抗體、抗血小板抗體檢查結(jié)果（日本）癥狀癥狀報(bào)告數(shù)報(bào)告數(shù)抗抗HLA抗體抗體抗血小板抗體抗血小板抗體蕁麻疹蕁麻疹37828/326(8.6%)5/296(1.7%)過(guò)敏反應(yīng)過(guò)敏反應(yīng)373/

25、36(8.3%)1/33(3.0%)過(guò)敏性休克過(guò)敏性休克11112/104(11.5%)2/96(2.1%)血壓降低血壓降低290/25(0.0%)0/23(0.0%)呼吸困難呼吸困難4611/43(25.6%)3/38(2.4%)發(fā)熱反應(yīng)發(fā)熱反應(yīng)15444/139(31.7%)9/115(7.9%)其它其它335/31(16.1%)2/26(7.7%)總計(jì)總計(jì)788103/704(14.6%)22/627(3.65)2022-1-523五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì)（一）輸注紅細(xì)胞懸液：（一）輸注紅細(xì)胞懸液：1、我們研究認(rèn)為：血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性

26、患者的非溶血性、我們研究認(rèn)為：血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的非溶血性 發(fā)熱反應(yīng)明顯高于血小板抗體檢測(cè)陰性患者；血小板發(fā)熱反應(yīng)明顯高于血小板抗體檢測(cè)陰性患者；血小板 抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者經(jīng)干預(yù)后非溶血性發(fā)熱反應(yīng)明顯下抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者經(jīng)干預(yù)后非溶血性發(fā)熱反應(yīng)明顯下降。降。2、干預(yù)措施：、干預(yù)措施： 1）建議使用去白的紅細(xì)胞（血庫(kù)型或床旁型白細(xì)胞）建議使用去白的紅細(xì)胞（血庫(kù)型或床旁型白細(xì)胞濾器）濾器） 2）建議使用洗滌的紅細(xì)胞）建議使用洗滌的紅細(xì)胞 3）使用藥物）使用藥物 4）配血報(bào)告的）配血報(bào)告的“備注備注”欄注明：欄注明：“請(qǐng)防范請(qǐng)防范FNHTR等等”。2022-1-524五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性

27、患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì)（二）（二） 輸注血漿：輸注血漿： 1）輸血性急性肺損傷）輸血性急性肺損傷(transfusion related acute lung injury， TRALI)：文獻(xiàn)報(bào)道，輸血后發(fā)生的一系列嚴(yán)重呼吸窘迫病文獻(xiàn)報(bào)道，輸血后發(fā)生的一系列嚴(yán)重呼吸窘迫病,其其80%病例病例 輸入的血液中含有血小板抗體。輸入的血液中含有血小板抗體。 研究已經(jīng)證實(shí)：血小板抗體是引起研究已經(jīng)證實(shí)：血小板抗體是引起TRALI的重要因素之一。的重要因素之一。 上海市血液中心楊穎教授認(rèn)為中國(guó)免疫性上海市血液中心楊穎教授認(rèn)為中國(guó)免疫性TRALI發(fā)病雖少，發(fā)病雖少，但但 嚴(yán)重型較多

28、。嚴(yán)重型較多。 2022-1-525 不同國(guó)家不同國(guó)家TRALI發(fā)生發(fā)生死亡率死亡率 UK SHOT 德國(guó)德國(guó) 丹麥丹麥 法國(guó)法國(guó) 加加拿大拿大 1996-2003 1995 2002 1999 2002 1994 98 2000 03 例數(shù)例數(shù) 139 101 6 34 21發(fā)生率發(fā)生率% 7 3 7 0-15 0-5死亡率死亡率% 9 NR NR 20 9五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)2022-1-526五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì) 2）僅輸注血漿患者的比例：）僅輸注血漿患者的比例： 每個(gè)醫(yī)院

29、的功能、理念、管理的差異性。每個(gè)醫(yī)院的功能、理念、管理的差異性。 我院輸注血漿患者的比例：我院輸注血漿患者的比例： 僅輸注血漿患者的比例為僅輸注血漿患者的比例為3.7% 3）對(duì)于特殊患者，檢測(cè)患者、供者血液的血小板抗體）對(duì)于特殊患者，檢測(cè)患者、供者血液的血小板抗體是可行的、必要的，目的是進(jìn)一步保證輸血安全。是可行的、必要的，目的是進(jìn)一步保證輸血安全。2022-1-527五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì)（三）輸注血小板（三）輸注血小板1.1.輸輸注注血小板是提高患者血小板計(jì)數(shù)，血小板是提高患者血小板計(jì)數(shù)，改善臨床改善臨床出血出血癥癥狀狀最為快速、有效

30、的方法和手段。最為快速、有效的方法和手段。2.2.輸輸注注血小板并不是每次都能達(dá)到滿意效果，血小板并不是每次都能達(dá)到滿意效果，研究已經(jīng)研究已經(jīng)證明證明反復(fù)多次隨機(jī)輸注血小板的患者，體內(nèi)極易產(chǎn)生血反復(fù)多次隨機(jī)輸注血小板的患者，體內(nèi)極易產(chǎn)生血小板抗體，小板抗體，引起引起血小板輸注無(wú)效。血小板輸注無(wú)效。HLAHLA和和HPAHPA抗體是引抗體是引起免疫性起免疫性 血小板輸注無(wú)效血小板輸注無(wú)效的主要原因，其中的主要原因，其中HPAHPA抗體可引起嚴(yán)抗體可引起嚴(yán)重血小板同種免疫反應(yīng)。重血小板同種免疫反應(yīng)。3 3 文獻(xiàn)報(bào)道，臨床血小板輸注無(wú)效發(fā)生率為文獻(xiàn)報(bào)道，臨床血小板輸注無(wú)效發(fā)生率為30%70%，其中免

31、疫因素引起的血小板輸注無(wú)效約為其中免疫因素引起的血小板輸注無(wú)效約為20%。4.4.我國(guó)目前絕大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)采用隨機(jī)輸注血小板，導(dǎo)我國(guó)目前絕大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)采用隨機(jī)輸注血小板，導(dǎo)致致 血小板輸注無(wú)效頻繁發(fā)生。血小板輸注無(wú)效頻繁發(fā)生。2022-1-528五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì)（三）輸注血小板（三）輸注血小板5.5.血小板輸注無(wú)效的后果：血小板輸注無(wú)效的后果： 1 1）患者發(fā)生免疫反應(yīng)，加重病情。）患者發(fā)生免疫反應(yīng)，加重病情。 2 2）患者病情得不到改善，病危甚至死亡。）患者病情得不到改善，病危甚至死亡。 3 3）浪費(fèi)財(cái)力、物力、寶貴的血小板資源

32、。）浪費(fèi)財(cái)力、物力、寶貴的血小板資源。 4 4）存在醫(yī)療糾紛隱患。）存在醫(yī)療糾紛隱患。 5 5）不利于采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)業(yè)務(wù)水平的提高。）不利于采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)業(yè)務(wù)水平的提高。2022-1-529五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì) （三）輸注血小板（三）輸注血小板6 處理處理/干預(yù)血小板輸注無(wú)效較切實(shí)、合理的方法：干預(yù)血小板輸注無(wú)效較切實(shí)、合理的方法：1）臨床評(píng)估和處理血小板消耗增多的因素）臨床評(píng)估和處理血小板消耗增多的因素2）血小板抗體篩查）血小板抗體篩查(HPA、HLA)3）血小板抗體交叉配型）血小板抗體交叉配型2022-1-530五五 如

33、何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)會(huì)（三）輸注血小板（三）輸注血小板 7 我們研究結(jié)果：我們研究結(jié)果： 1 ）我們研究結(jié)果顯示）我們研究結(jié)果顯示 ： 血小板抗體陽(yáng)性患者血小板交叉配型陽(yáng)性率。血小板抗體陽(yáng)性患者血小板交叉配型陽(yáng)性率。 輸注血小板交叉配型試驗(yàn)陰性的供者血小板的有效率。輸注血小板交叉配型試驗(yàn)陰性的供者血小板的有效率。 輸注陽(yáng)性的供者血小板的有效率。輸注陽(yáng)性的供者血小板的有效率。 血小板輸注采用隨機(jī)供者血小板有效率有效率。血小板輸注采用隨機(jī)供者血小板有效率有效率。 2） 我們研究結(jié)果表明：我們研究結(jié)果表明： 建議對(duì)于血小板抗體陽(yáng)性患者，應(yīng)進(jìn)行血小板交叉

34、配型試建議對(duì)于血小板抗體陽(yáng)性患者，應(yīng)進(jìn)行血小板交叉配型試驗(yàn)，驗(yàn)， 以選擇配型試驗(yàn)陰性的供者血小板。以選擇配型試驗(yàn)陰性的供者血小板。 為血小板輸注患者提供相容性血小板，可以減少血小板輸為血小板輸注患者提供相容性血小板，可以減少血小板輸注注 無(wú)效的發(fā)生，為社會(huì)節(jié)約寶貴的血小板資源。無(wú)效的發(fā)生，為社會(huì)節(jié)約寶貴的血小板資源。2022-1-531六六 血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展（一）自身抗體檢測(cè)（一）自身抗體檢測(cè) 1 自身結(jié)合抗體檢測(cè)自身結(jié)合抗體檢測(cè) 2 自身游離抗體檢測(cè)自身游離抗體檢測(cè)（二）藥物依賴性抗體檢測(cè)（二）藥物依賴性抗體檢測(cè)（三）交叉配型（三）交叉配型（四）臨床疾

35、病的實(shí)驗(yàn)診斷和篩查：如（四）臨床疾病的實(shí)驗(yàn)診斷和篩查：如輸血性急性肺損傷、輸血性急性肺損傷、習(xí)慣性習(xí)慣性 流產(chǎn)、胎母同種異體免疫血小板減少癥（流產(chǎn)、胎母同種異體免疫血小板減少癥（FMAIT）等。）等。2022-1-5322022-1-533一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（一）（一）血小板抗體的內(nèi)涵：血小板抗體的內(nèi)涵：1 1白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體：白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)HLA-類抗原（類抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量抗原和少量HLA-C抗原）抗原）的的 HLA-HLA-類抗體（類抗體（ 50-80%50-80% ）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼

36、）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼260000016 260000016 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱白細(xì)胞特異性和組白細(xì)胞特異性和組織織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無(wú)限定支付范圍；甲乙分類）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無(wú)限定支付范圍；甲乙分類甲。甲。2 2血小板特異性和組織相容性抗體：血小板特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)血小板特異性抗原（血小板特異性抗原（HPA抗原）抗原）的的HPAHPA抗體（抗體（17-25%17-25%）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼260000017 260000017 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱

37、血小板特異性和組血小板特異性和組織織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類甲。甲。參考文件：參考文件：浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，2005年版，第年版，第65頁(yè)。頁(yè)。浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，2010年年12月版，第月版，第44頁(yè)。頁(yè)。 2022-1-534一血小板

38、抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（三）三點(diǎn)思考：（三）三點(diǎn)思考：思考思考1： 血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入支付范圍的器限列入支付范圍的器官移植，合理？官移植，合理？思考思考2： 有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和醫(yī)保限定支付范圍，醫(yī)保限定支付范圍，據(jù)了解沒(méi)有征求醫(yī)院輸血科專家據(jù)了解沒(méi)有征求醫(yī)院輸血科專家的意見，的意見，合理？合理？ （據(jù)實(shí)地了解，浙江?。〒?jù)實(shí)地了解，浙江省血型與配血的收費(fèi)是上海的血型與配血的收費(fèi)是上海的1/3，江西，江西1/3，且遠(yuǎn)低于西部，且遠(yuǎn)低于西部地區(qū)，地區(qū)，合理？合理？ ）思考思考3： 社會(huì)

39、在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更新和創(chuàng)新？以適社會(huì)在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更新和創(chuàng)新？以適應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。2022-1-535（四）操作（四）操作1 依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣品孔，未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。品孔，未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。2 向反應(yīng)孔中加入向反應(yīng)孔中加入1滴（滴（50 l）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板10 秒鐘，使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。秒鐘，使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。3 用平板離心