醫(yī)學分子生物學總結(jié)

1、醫(yī)學分子生物學資料小結(jié)1、質(zhì)粒 是細菌細胞內(nèi)攜帶的染色體外的 DNA 分子，是共價閉合的環(huán)狀 DNA 分子，能獨立進行復制。質(zhì)粒 只有在宿主細胞內(nèi)才能夠完成自己的復制。2、基因 指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或 RNA 序列及表達這些信息所需的全部核苷酸序列，是核酸分子中貯 存遺傳信息的遺傳單位。3、癌基因 是細胞內(nèi)控制細胞生長和分化的基因，具有潛在的誘導細胞惡性轉(zhuǎn)化的特性，它的結(jié)構(gòu)異?；虮磉_ 異常，可以引起細胞癌變。4、基因克隆 是指把一個生物體的遺傳信息（基因片段）轉(zhuǎn)入另一個生物體內(nèi)進行無性繁殖，得到一群完全相 同的基因片段，又稱 DNA克隆。5、抑癌基因 是指存在于正常細胞內(nèi)的一大類可抑制細

2、胞生長并具有潛在抑癌作用的基因，當這類基因在發(fā)生 突變、缺失或失活時可引起細胞惡性轉(zhuǎn)化而導致腫瘤發(fā)生。6、基因診斷 是以 DNA 和 RNA 為診斷材料， 通過檢查基因的存在、 缺陷或表達異常，對人體狀態(tài)和疾病作出 診斷的方法和過程。7、管家基因 是在生命過程都是必需的，是在一個生物個體的幾乎所有細胞中持續(xù)表達的基因，它較少受環(huán)境 因素的影響，其表達方式為組成性基因表達。8、klenow 片段亦稱 DNA 聚合酶 1大片段，為 DNA 聚合酶 I 經(jīng)枯草桿菌蛋白酶裂解后產(chǎn)生的大片段，它除 了保留 5 3聚合酶活性及 3 5外切酶活性外， 失去了 5 3 外切酶活性， 它具有的 3 5外切酶 活

3、性能保證 DNA 復制的準確性，把 DNA 合成過程中錯誤配對的堿基去除，再把正確的核苷酸接上去。9、核蛋白體 系 tRNA 與蛋白質(zhì)結(jié)合生成的一種復合體，是蛋白質(zhì)生物合成的場所。10、限制性內(nèi)切核酸酶 能識別 DNA 的特異序列，并在識別位點或其附近切割雙鏈 DNA 的一類內(nèi)切核酸酶， 是基因克隆中最重要的工具酶，通常所說的限制酶是指 2 型酶。 主要從原核細胞中提取， 大多數(shù)限制性內(nèi)切酶是 錯位切割雙鏈 DNA ，產(chǎn)生粘性末端，部分酶則沿對稱軸切割 DNA 而產(chǎn)生平端。11、Tm 值 DNA 變性是在一個相當窄的溫度范圍內(nèi)完成的，在這一范圍內(nèi)，紫外吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為 DN

4、A 的解鏈溫度，又稱融解溫度（ Tm ），其大小與 G+C 含量成正比?；?:雙鏈 DNA 變性一半所需 要的溫度叫 DNA 的融解溫度 .12、DNA 的甲基化 是指 DNA 的一級結(jié)構(gòu)中，有一些堿基可以通過加上一個甲基而被修飾，其作用是對自身DNA 產(chǎn)生保護作用。13、原位雜交 是核酸保持在細胞或組織切片中，經(jīng)適當方法處理細胞或組織后，將標記的核酸探針與細胞或 組織中的核酸進行雜交的方法。14、DNA微陳列 系直接將大量 DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面所組成的微陳列（基因芯片）稱為 DNA微陳列。 .15、順序作用元件 是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達調(diào)控相關(guān)，能被基因調(diào)控蛋白異性

5、識別和結(jié)合的 DNA 序列 ,抱括 啟動子 .上游啟動子元件 .增強子 .加尾信號和一些反應(yīng)元件。16轉(zhuǎn)位因子 是指能夠在一個 DNA 分子內(nèi)或 2個 DNA 分子之間移動的 DNA 片段。17、基因治療 - 是指通過在特定靶細胞中表達該細胞本來不表達的基因，或采用特定方式關(guān)閉和抑制異常表達基 因，達到治療疾病目的的治療方法。二、綜合內(nèi)容1、DNA 的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及特點一級結(jié)構(gòu)是指 DNA 分子中核苷酸的排列順序，二級結(jié)構(gòu)是指兩條 DNA 單鏈形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)、三股螺旋結(jié)構(gòu)和四股螺旋結(jié)構(gòu)； 三級結(jié)構(gòu)是指雙鏈 DNA 進一步扭曲盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)。 DNA 一級結(jié)構(gòu)的基本特點：4 種脫氧核糖核苷

6、酸以 3 ， 5 磷酸二酯鍵相連，形成長鏈，鏈中的脫氧核糖和磷酸都是相同的。組成DNA的堿基有腺嘌呤（ A ）、鳥嘌呤（ G）、胞嘧啶（ C）和胸腺嘧啶（ T）。 DNA 是由兩條單鏈結(jié)合在一起形成的 雙鏈分子，兩條單鏈都是由A 、T、G、C 以千變?nèi)f化的排列組合而形成的。大多數(shù)生物的遺傳信息都是儲存在DNA 分子中。 DNA 分子主要攜帶兩類遺傳信息， 即有功能活性的 DNA 序列所攜帶的信息和調(diào)控信息。 DNA 二級結(jié)構(gòu)是指 DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)，其特點為：脫氧核糖與磷酸交替排列構(gòu)成了 DNA 主鏈；兩條脫氧核苷酸鏈 是反向平行排列，一條是5 3方向，另一條為 3 5方向；以右手方向盤繞成

7、雙螺旋構(gòu)型；A 配 T，G配 C 。生物體的閉環(huán) DNA 都以超螺旋形式存在，如細菌質(zhì)粒、一些病毒、線粒體的 DNA 等。2、RNA 的結(jié)構(gòu)、功能、特點 由 4 種基本的核苷酸以 3，5-磷酸二酯鍵連接而成的長鏈， 堿基中沒有 T ，而為尿嘧啶 （U）。分為 mRNA （信使 RNA ）， tRNA （轉(zhuǎn) RNA ，轉(zhuǎn)運氨基酸）和核蛋白體 RNA （ rRNA ）。 mRNA 結(jié)構(gòu)特點：不穩(wěn)定、代謝活 躍，更新迅速，壽命短。原核生物 mRNA 具有操縱子結(jié)構(gòu)，主要是多順反子， mRNA5 端無帽子結(jié)構(gòu)， 3端 一般無多聚 A 尾巴，沒有修飾堿基；真核 mRNA5 端有帽子結(jié)構(gòu)、 3端大多有多聚

8、腺苷酸尾巴、分子中可能 有修飾堿基，主要有甲基化、有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。tRNA 的結(jié)構(gòu)特點及作用：作用：在蛋白質(zhì)合成過程轉(zhuǎn)運氨基酸，參與蛋白質(zhì)的翻譯。一級結(jié)構(gòu)含有稀有堿基如DHU ，3端為 3 個同樣的核苷酸序列（ CCA ）序列，此序列是 tRNA 結(jié)合和轉(zhuǎn)運安基酸而生成氨酰 tRNA 所必需的。 5端為 G、具有 T C；二級結(jié)構(gòu)為三葉草形，三級 結(jié)構(gòu)為倒 L 形； C、rRNA 即核蛋白體 RNA ：為細胞內(nèi)含量最豐富的 RNA ，約占細胞總 RNA 的 80%以上,參與 組成核蛋白體，作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。原核生物核糖體的沉降系數(shù)為70S，由 50S和 30S兩個大小亞基組成， 3

9、0S 小亞基含 16SrRNA 和 21 種蛋白質(zhì) ,50S 大亞基含 23S 和 5SrRNA 以及 34 種蛋白質(zhì)；真核生物細胞核糖 體的沉降系數(shù)為 80S，由大小亞基組成， 40S 小亞基含 18SrRNA 及 30 多種蛋白質(zhì)， 60S 大亞基含 3 種 rRNA 以 及大約 45 種蛋白質(zhì)。 hnRNA 即核內(nèi)不均 -RNA ，為真核生物轉(zhuǎn)錄生成的 mRNA 前體。 SnRNA 即小分子核內(nèi) RNA ，不單獨存在，常與多種特異的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成小分子核內(nèi)核蛋白顆粒，在mRNA 的剪接中起重要作用。反義 RNA ，又稱調(diào)節(jié) RNA ，主要封閉 RNA。3、參與蛋白質(zhì)合成的氨基酸在

10、特異的氨基酰 tRNA 合成酶催化下，與其相應(yīng)的 tRNA 結(jié)合成氨基酰 tRNA 。 真核生物起始 tRNA 結(jié)合的氨基酸為蛋氨酸，結(jié)合形成Met-tRNA imet，翻譯起始時首先與 40S 核糖體小亞基結(jié)合形成復合物。原核生物的起始氨基酸為甲酰化蛋氨酸，結(jié)合形成 fMet-tRNA f fmet。導致 DNA 變性的常用方法有熱 變性、堿變性和化學試劑變性。 DNA 變性的結(jié)果：粘性降低，密度增加， A260 紫外吸收值增加。4 、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能特點 蛋白質(zhì)又稱為“功能分子”，根據(jù)功能分為結(jié)構(gòu)蛋白、活性蛋白和信息蛋白。蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指蛋白 質(zhì)多肽鏈中氨基酸排列的順序。蛋白質(zhì)一級結(jié)

11、構(gòu)發(fā)生改變，可以使蛋白質(zhì)的功能發(fā)生改變，嚴重時可導致疾病的 發(fā)生。 因基因突變而導致的蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)改變后表現(xiàn)出生理功能的異常，使機體出現(xiàn)病態(tài)現(xiàn)象， 稱為分子病。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)單元（形式）有a-螺旋、 -折疊、 - 轉(zhuǎn)角、無規(guī)則卷曲。一級結(jié)構(gòu)的化學鍵是肽鍵及二硫鍵；二級結(jié)構(gòu)主要化學鍵為氫鍵；三級結(jié)構(gòu)的主要靠疏水作用、離子鍵、氫鍵和范得華力等；四級結(jié)構(gòu)的結(jié)合力 主要是疏水作用、氫鍵和離子鍵。5 、端粒的主要特點和功能： 特點為：位于真核生物染色體末端、端粒酶催化端粒 DNA 延長、在決定細胞壽 命中起重要作用、含短的高度重復序列。其主要功能有：保護線性 DNA 的完整復制、保護染色體末端、決定

12、細 胞的壽命。6、DNA 聚合酶（ DNApol ）作用是催化 DNA 合成，其活性需要 Mg 2+的存在。大腸桿菌 DNA 聚合酶有 I-II 、II3 種（即原核生物 DNA 聚合酶）。 DNApolI 的功能有： a、聚合作用，使 DNA 鏈沿 5 3方向延伸， b 、 3 5外切酶活性，即 能從 DNA 鏈 3端開始沿 3 5進行水解反應(yīng)， 產(chǎn)生 5單核苷酸， 糾正復制過程中的錯誤， 保證 DNA 復制 的正確性，因而具有校對功能； C、5 3外切酶活性，參與 RNA 生物的切除、填補岡崎片段間的空隙以及DNA 損傷的修復。 DNApolII ：具有 5 3 DNA 聚合酶活性及 3

13、5外切核酸酶活性， 可能參與 DNA 損 傷的應(yīng)急狀態(tài)修復。 DNApolII ：亞基具有催化合成 DNA 的功能； 亞基具有 3 5 外切酶活性及編輯和 校對功能，則為裝配所必需，是原核生物復制延長中真正起催化作用的酶。 DNA 聚合酶的共同性質(zhì)是：需要 DNA 模板； RNA 或 DNA 作為引物； ATP 與 Mg 2+的參與；以 dNTP 作底物； DNA 合成的方向是 5 3 。反 應(yīng)特點： 新生鏈的延伸方向為 5'3'；半保留方式合成子代 DNA 雙鏈； 反應(yīng)需要 DNA 引物。共同具有的酶活性： 5' 3'聚合酶活性； 3'5'核酸

14、外切酶活性。7、RNA 聚合酶 RNA 聚合酶也稱依賴 DNA 的 RNA 聚合酶，能以 DNA 為模板，四種核苷三磷酸為底物，按照堿基配對原 則，從 5 3方向延長 RNA 鏈。原核生物的 RNA 聚合酶只有一種，是由四種亞基2 '組成的五聚體蛋白質(zhì)，稱為全酶。去掉亞基后，剩下的2 '稱為核心酶?；罴毎霓D(zhuǎn)錄起始，需要全酶；而核心酶負責催化 RNA鏈的延伸。 真核生物 RNA聚合酶有三種，即 RNA聚合酶 I 、 II 、III 。 RNA聚合酶 I 定位在核仁，主 要轉(zhuǎn)錄、 18S、 28S-rRNA 基因；酶 II 定位在核漿，主要轉(zhuǎn)錄編碼蛋白質(zhì)的基因，即主要轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mR

15、NA；酶 III定位在核漿，主要轉(zhuǎn)錄 tRNA和5S-rRNA基因。RNA聚合酶催化聚合反應(yīng)時需要有Mg2+或 Mn2+的存在，無3' 5'外切酶海性，無校對功能。8、密碼子分為 起始密碼和終止密碼，起始密碼為AUG，終止密碼為 UAA、 UAG和 UGA，共有 64 種不同的密碼?？勺鳛樵松锲鹗济艽a的是：。9、遺傳密碼具有以下特點：A 、連續(xù)性：兩個密碼子之間沒有任何核苷酸加以分隔，即密碼是無標點的。B、方向性： mRNA中密碼子的排列是有方向性的，即起始密碼子總是位于編碼區(qū)5'末端，而終止密碼子位于3'末端。每個密碼子的三個核苷酸也是 5' 3&

16、#39;方向閱讀，不能倒讀。 C、簡并性：是指遺傳密碼中除色氨酸和甲硫氨酸僅有一個密碼子外，其 余氨基酸有 26 個密碼子為其編碼。 D、通用性：從最簡單的病毒、原核生物、直至人類，都使用同一套遺傳密 碼。 E、擺動性：翻譯過程中，氨基酸的正確加入，要靠mRNA上的密碼子與 tRNA 上的反密碼子相辯認。密碼子與反密碼子配對辯認時，有時不完全遵守堿基互補規(guī)律，即使不嚴格互補也能辯認配對，這種現(xiàn)象稱為擺動。10、轉(zhuǎn)錄的過程及特點轉(zhuǎn)錄是以 DNA為模板，以 4 種 NTP為原料，依堿基配對規(guī)律，在DNA指導的 RNA聚合酶催化下合成 RNA的過程，其過程包括：起始、延長和終止三個階段。轉(zhuǎn)錄的特點：

17、A、對于一個基因組來說，轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因，而且每個基因的轉(zhuǎn)錄都受到相對獨立的控制。B、轉(zhuǎn)錄是不對稱的。 C、轉(zhuǎn)錄時不需要引物，而且 RNA鏈的合成是連續(xù)的。 D、轉(zhuǎn)錄的單向性，即 RNA生物合成時，只能向一個方向進行聚合，所依賴的模板DNA鏈的方向為 3' 5'，而 RNA鏈的合成方向為 5' 3'。 E、有特定的起始和終止位點。參與轉(zhuǎn)錄終止的因素為因子 或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的 3' 端發(fā)夾結(jié)構(gòu) , 轉(zhuǎn)錄終止的修飾點 :AATAAA+GT序列。11、原核生物 DNA復制的過程及特點復制過程包括：起始（復制起始位點識別、解螺旋酶解開DNA雙鏈，引發(fā)體合成 RN

18、A引物）延伸（ DNA聚合酶催化聚合反應(yīng)，連續(xù)合成前導鏈，不連續(xù)合成隨從鏈）。終止（RNA引物去除、岡崎片段連接、在特殊的終止結(jié)構(gòu)區(qū)域停止）。復制的共同特點為：半保留復制和半不連續(xù)復制、聚合反應(yīng)都需要模板、底物、DNA聚合酶及其它酶和蛋白質(zhì)。12 、真核生物染色體 DNA復制的特點：（原核相反）復制起始點為多個；復制叉移動速度慢；復制方向大多數(shù)為雙向；RNA引物短；岡崎片段短，不可連續(xù)復制13 、翻譯的主要過程及特點起始：形成翻譯起始復合物延長：指每加一個氨基酸經(jīng)過進位、成肽和轉(zhuǎn)位，使肽鏈從N 端向 C 端延長。終止（當 mRNA分子中的終止密碼子出現(xiàn)后，多肽鏈合成停止，肽鏈從肽酰-tRNA

19、中釋出， mRNA、核蛋白體等分離）。蛋白制合成是一個耗能過程，每生成一個肽鍵，要消耗 2 個高能磷酸鍵，氨基酸活化要消耗 2 個高能磷 酸鍵，整個過程可能多于 4 個高能磷酸鍵。 14 、原核生物 mRNA的加工： 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA分子不需加工。 tRNA 結(jié)構(gòu)基因的初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物需要加工，才能成為具有生物功能的成熟分子。 tRNA 前體的加工包括剪切作用（切除多 余核苷酸）、添加和修復 3' 端 CCA序列，某些堿基的化學修飾（成熟tRNA 分子中有稀有堿基）。15 、翻譯后的加工修飾：加工包括： A、去掉 N-甲酰基、 N-蛋氨酸或 N端序列。 B、個別氨基酸的修飾（羥化、 磷酸

20、化形成 -S-S- 等）。 C、多蛋白水解修飾， D、分子伴侶，蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶，肽- 脯氨酰順反異構(gòu)酶輔助折疊成空間構(gòu)象。E、亞基聚合， F、輔基的結(jié)合（糖基化等）。其中A、B、 C 屬一級結(jié)構(gòu)修飾， D、E、F 屬空間結(jié)構(gòu)修飾。多肽鏈形成后，氨基酸殘基可進行多種共價修飾，包括；磷酸化，羥基化，ADP-核糖基化，形成胱氨酸及乙?；７g過程涉及多種分子之間的相互作用，可以歸納為：RNA-蛋白質(zhì)相互作用，蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用及 RNA-RNA相互作用。參與翻譯終止的蛋白質(zhì)因子包括：RF、 PR、 IF 。廣義的核蛋白體循環(huán)包括：翻譯起始，進位，成肽，轉(zhuǎn)位和翻譯終止。16 、真核生物 m

21、RNA的加工包括： 5 端加帽（由加帽酶催化 5端加入 7- 甲苷烏苷酸，形成帽子結(jié)構(gòu) m7GpppmNP）- 。 3端加入 Poly（A） 尾（ A、組蛋白的成熟 mRNA無需加 polyA 尾； B、加尾信號包括 AAUAAA和富含 GU的序列； C、加尾不需模板； D 剪切過程需要多種蛋白質(zhì)因子的輔助）。mRNA前體的剪接（剪接加工以除去內(nèi)含子序列，并將外顯子序列連接成為成熟的有功能的 mRNA分子。內(nèi)含子兩端的結(jié)構(gòu)通常是5 -GU AG-3。選擇性剪接的作用機制包括；A使用不同的剪接位點， B 選擇使用外顯子， C、反式剪接， D、使用不同的啟動子， E、使用不同的多腺苷酸化位 點）。

22、 RNA的編輯（發(fā)生于轉(zhuǎn)錄后水平，改編mRNA序列， C U 或 A G，增加遺傳信息容量）。17、基因表達是 指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白 質(zhì)，進而發(fā)揮特定的生物學功能和生物學效應(yīng)的全過程。但并非所有基因表達過程都產(chǎn)生蛋白質(zhì)， tRNA 、rRNA 編碼基因轉(zhuǎn)錄生成 RNA 的過程也屬于基因表達。 基因表達受到多級水平的調(diào)控， 具有階段特異性 （時間特異性） 和組織特異性（空間特異性）?；虮磉_分為幾個階段：基因活化、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯、翻譯后加工等、 產(chǎn)物是 RNA 和有功能的蛋白質(zhì)。18、原核生物基因表達調(diào)控的環(huán)節(jié)，主要在轉(zhuǎn)錄水平，

23、其次是翻譯水平。原核生物基因多以操縱子的形式存在，轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控涉及到啟動子、因子（能與 RNA 聚合酶結(jié)合）、阻遏蛋白 （負調(diào)控 ）、正調(diào)控蛋白、倒位 蛋白、 RNA 聚合酶抑制物、衰減子等多種因素。而翻譯水平的調(diào)控涉及到 SD 序列（位于 AUG 前）、 mRNA 的 穩(wěn)定性（不穩(wěn)定，其 5端和 3端的發(fā)夾結(jié)構(gòu)可保護其不被酶水解，mRNA 的 5端與核糖體結(jié)合，可明顯提高其穩(wěn)定性）、翻譯產(chǎn)物及小分子 RNA 的調(diào)控作用。19、真核生物基因表達的調(diào)控環(huán)節(jié)較多， 在 DNA 水平可通過染色體丟失，基因擴增、基因重排、 DNA 甲基 化以及染色體結(jié)構(gòu)改變影響基因表達，在轉(zhuǎn)錄水平則主要通過反式作用

24、因子的作用調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子與TATA 盒的結(jié)合、 RNA 聚合酶與轉(zhuǎn)錄因子 -DNA 復合物的結(jié)合及轉(zhuǎn)錄起始復合物的形成； 在轉(zhuǎn)錄后水平主要通過 RNA 修飾、 剪接及 mRNA 運輸?shù)目刂苼碛绊懟虮磉_；影響翻譯水平的因素有影響起始翻譯的阻遏蛋白、5AUG 、5端非編碼區(qū)的長度、 mRNA 的穩(wěn)定性調(diào)節(jié)及小分子 RNA 等。真核基因調(diào)控中最重要的環(huán)節(jié)是基因轉(zhuǎn)錄，真核生物 基因表達需要轉(zhuǎn)錄因子、啟動子、沉默子和增強子。20、反式作用因子： 指能直接或間接辨認和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA 的蛋白質(zhì)， 其主要特點包括三個功能結(jié)構(gòu)域（ DNA 識別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄活性域、結(jié)合其它蛋白的結(jié)合域）、能識別并結(jié)合上游

25、調(diào)控區(qū)的順式作用元件、對 基因表達有正性和負性調(diào)控作用。其活性調(diào)節(jié)方式：表達式調(diào)節(jié)，共價修飾，配體結(jié)合及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。作用方式 :成環(huán)、扭曲、滑動、 Oozing 。DNA 結(jié)構(gòu)域包括：鋅指、螺旋轉(zhuǎn)角螺旋、亮氨酸拉鏈和螺旋 環(huán)螺旋。轉(zhuǎn)錄激活域富含：酸性氨基酸、脯氨酸和谷氨酰胺。21、參與 DNA復制（合成）的物質(zhì)包括：模板（解開成單鏈的 DNA母鏈）。引物（提供 3' OH未端使 dNTP可以依次聚合）。底物（ dATP， dGTP， dCTP和 dTTP）。聚合酶（依賴 DNA的 DNA聚合酶（ DNA pol ）。其它的酶和蛋白質(zhì)因子。DNA復制 的基本過程包括： DNA

26、雙鏈解開， RNA引物的合成， DNA 鏈的延長，切除引物，填補缺口，連接相鄰DNA片段，切除和修復錯配堿基。22、結(jié)構(gòu)基因突變的類型包 括點突變、缺失、插入和倒位四類，遺傳密碼的改變分為錯義突變、無義突變、同義 突變和移碼突變。23、癌基因惡性激活的機制包括：原癌基因點突變，原癌基因獲得外源啟動子而激活，原癌基因因甲基化程度降低而激活，基因易位或重排使原癌基因激活。24、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 是基因治療中最常用的載體。造血肝細胞是基因治療中最重要的靶細胞，禁用生殖細胞?；蜣D(zhuǎn)移技術(shù) （ 基因治療技術(shù) ） 包括生物學方法和非生物學方法 : 生物學方法有 : 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 . 腺病毒載體 . 腺相

27、關(guān)病毒載體 . 單純皰疹病毒載體 ; 非生物學方法有：脂質(zhì)體、直接注射、受體介導基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、DNA磷酸鈣沉淀法、電穿孔法、顯微注射、顆粒轟擊。25、DNA甲基化 的一個特點是它們經(jīng)過細胞許多代分裂之后仍保持穩(wěn)定。在真核生物 DNA中， 幾乎所有甲基化均發(fā)生于二核苷酸序列 5' mCG 3'上。26、一個基因所 包括的序列有：編碼蛋白質(zhì)肽鏈或RNA的核酸序列、保證轉(zhuǎn)錄所必需的調(diào)控序列、位于編碼區(qū)5'端上游的非編碼序列、內(nèi)含子、位于編碼區(qū) 3' 端下游的非編碼序列。27、啟動子 是 RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的 DNA序列 , 啟動子具有方向性，真核生物的啟動子

28、必須與轉(zhuǎn)錄因子結(jié) 合后，才能被 DNA聚合酶識別和結(jié)合， 真核生物的啟動子元件是TATA蓋,TATA 盒的核心序列是 TATA（A/T）A（A/T） ，位于轉(zhuǎn)錄起始點上游 25bp 處,啟動子決定轉(zhuǎn)錄方向 .模板鏈及轉(zhuǎn)錄效率。上游啟動子元件包括：CAAT盒， CACA盒和 GC盒。28、逆轉(zhuǎn)錄： 是指以 RNA為模板，利用宿主細胞中 4 種 dNTP為原料，在引物的 3' 端以 5' 3' 方向合成與 RNA互 補的 DNA鏈的過程，此過程與中心法則方向相反，故稱為逆轉(zhuǎn)錄。29 、原癌基因產(chǎn)物的類型及細胞定位 生長因子及其類似物，由細胞分泌，如 C-sis 家族 （ s

29、is 編碼血小板源生長因子，表達產(chǎn)物與PDGF鏈結(jié)構(gòu)同源）?？缒どL因子受體型的酪氨酸蛋白激酶，如 erb-B, 表皮細胞生長因子（ EGF）受體； fims, 巨噬細胞 集落刺激因子受體；定位于質(zhì)膜。細胞內(nèi)信號傳導分子，定位于胞夜 , 包括 A、低分子量 G蛋白，如 H-ras 等 基因表達產(chǎn)物； B、胞內(nèi)蛋白激酶（包括與膜結(jié)合的蛋白酪氨酸激酶和胞漿絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶），如 src 、abl 。核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子：如 myc、 fos 等，定位于細胞核內(nèi)。胞漿調(diào)節(jié)蛋白，如 crk 的產(chǎn)物是存在于胞漿中的調(diào) 節(jié)蛋白，定位于胞漿?？扇苄缘鞍桌野彼峒っ甘荏w和非蛋白激酶受。30 、細胞周期的主要調(diào)控點

30、細胞周期的運行受多種因素所調(diào)控， 有 2 個主要調(diào)控點， 亦稱為檢測點。 G1/S 期檢測點： 在酵母中稱起點， 在哺乳細胞中稱限制點 ,是控制細胞進入 S期檢測點（ G1期檢測點） ,cycli nB與CDK4和CDK6結(jié)合， cyclinE 與 CDK2， CDK3結(jié)合，通過磷酸化使它們活化。 cycli n-CDK復合物可使 Rb 蛋白磷酸化，從而釋放轉(zhuǎn)錄因子E2F，促進 DNA復制相關(guān)基因的表達。 CDK2也可和 cycli nA、cycli nA1結(jié)合，促進早 S期DNA合成的起始。 G2/M 期檢 測點：是控制細胞進入 M期檢測點（ G2 期檢測點），促有絲分裂因子（ MPF）由

31、cyclinB 和 CDK1組成，是啟動有 絲分裂的關(guān)鍵因子。細胞何時進入M期取決于 Cdc2 的磷酸化狀態(tài)。31 、真核細胞轉(zhuǎn)染的基本方法： 磷酸鈣沉淀法。電穿孔法。脂質(zhì)體介導的基因?qū)敕?。DEAE-葡聚糖法。顯微注射法。32 、 DNA損傷的主要類型堿基和糖基破壞錯配 DNA鏈斷裂：電離輻射致 DNA損傷的主要形式 DNA變聯(lián)。上述 DNA損傷可導致 DNA 模板發(fā)生堿基的置換、插入、缺失、鏈的斷裂，并可影響到染色體的高級結(jié)構(gòu)。DNA鏈中一種嘌呤被另一種嘌呤取代，或嘧啶被另一種嘧啶所取代，稱為轉(zhuǎn)換；嘌呤被嘧呤取代，或反之，稱為顛換；轉(zhuǎn)換和顛換在DNA復制時可引起堿基錯配，導致基因突變；堿基

32、的插入和缺失可引起移碼突變。33 、 DNA修復機制的主要類型光修復；切除修復；重組修復；SOS修復；錯配修復。34 、基因文庫篩選的主要方法及原理（1） 根據(jù)抗藥性標志篩選：對于帶有某種抗藥性標志基因，只有轉(zhuǎn)化成功的受體菌才可能在含該抗生素的培養(yǎng)基中 生存并形成菌落；而沒有轉(zhuǎn)化成功的受體菌，不能在培養(yǎng)基中生長，以此可選擇陽性菌。 （2） 根據(jù)菌落的呈色反 應(yīng)篩選（互補、藍 - 白篩選）：根椐菌落的顏色并結(jié)合插入片段的序列測定篩選。 （3） 營養(yǎng)缺陷型標記法 :（4） 核酸 分子雜交法：即采用與目的基因部分互補的DNA片段作為探針，與含有重組體的細菌菌落進行雜交，以確定重組體中帶目的基因。包括

33、原位雜交和 southern 印跡雜交。（ 5）遺傳互補法：載體上的營養(yǎng)代謝標記可以對宿主細免疫學方法：如果克隆基因的產(chǎn)物是已知的，通過放射免疫、 化學發(fā)光或顯色反應(yīng)進行胞的營養(yǎng)代謝缺陷進行互補，以此作為篩選重組體的標記。（6 ）并且在菌落或噬菌斑中表達，因而可以用相應(yīng)的抗血清或單克隆抗體， 篩選。35 、 PCR的主要步驟及引物設(shè)計的基本要求 PCR的主要步驟： PCR又稱聚合酶鏈式反應(yīng)，是在體外進行的 鏈 DNA模板加熱變性成單鏈 （ 變性 ）, 溫度 95 度左右。 B、在低溫下引物與單鏈 延伸：在四種 DNTP底物及 Mg2+存在條件下， TaqDNA聚合酶在最適作用溫度（ 則，從特異

34、結(jié)合到 DNA模板上的引物 3-OH 端開始摻入單核苷酸，合成新的 A、引物長度一般為 1530 個核苷酸。 B、引物中的堿基組成盡可能隨機分布，DNA復制反應(yīng)過程。其基本過程包括：A、雙DNA互補配對 （退火 ）,85-90 度。C、 7075）下，根據(jù)堿基互補配對原 DNA分子。 引物設(shè)計的基本要求：避免出現(xiàn)嘌呤、 嘧啶堿基堆積現(xiàn)象，引物與非尤其在 3端避免連續(xù) 3 個 G或 C。C、引物自身不應(yīng)存在互補序列以避免折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，引物自身存在的連續(xù) 互補序列，一般不超過 3bp。 D、兩個引物之間不應(yīng)存在互補序列，尤其應(yīng)避免3端的互補重疊。 E、F、特異擴增區(qū)的序列的同源性不要超過70%，

35、引物 3末端連續(xù) 8 個堿基在待擴增區(qū)以外不能有完全互補序列。引物與模板結(jié)合時，引物的 5端可以修飾。36 、乳糖操縱子的正、負調(diào)節(jié)機制乳糖操縱子包含 3個結(jié)構(gòu)基因 （編碼 - 半乳糖苷酶， -半乳糖苷通透酶和轉(zhuǎn)乙?；福?操縱基因和 CAP結(jié)合位點）和 1 個調(diào)節(jié)基因（編碼阻遏蛋白）。乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄起始是由、3 個調(diào)控元件啟動子、CAP和阻遏蛋白兩種RNA聚合酶結(jié)合啟動子，調(diào)控因子來調(diào)控的。（ 1）阻遏蛋白的負調(diào)控：無乳糖時，阻遏蛋白結(jié)合操縱基因，妨礙 從而抑制結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄。有乳糖時，生成半乳糖（誘導劑）結(jié)合阻遏蛋白，使阻遏蛋白構(gòu)象改變，變構(gòu)的阻遏蛋 白不能與操縱序列結(jié)合，阻遏機制解除，結(jié)

36、構(gòu)基因可以轉(zhuǎn)錄，基因得以表達。cAMP-CAP復合物的正調(diào)控 : 無葡萄糖時， cAMP濃度高，形成的 cAMP-CAP復合物結(jié)合于 CAP結(jié)合位點，增強啟動子轉(zhuǎn)錄活性，促進下游基因得以 表達；有葡萄糖時， cAMP濃度低， cAMP-CAP復合物形成受阻， 影響轉(zhuǎn)錄活性。 正、負調(diào)控機制相輔相成： cAMP-CAP 復合物是轉(zhuǎn)錄必需的，同時阻遏蛋白進一步控制轉(zhuǎn)錄啟動。綜上， 乳糖操縱子最強的表達條件是有乳糖而無葡萄37、雙脫氧末端終止法 DNA測序的主要步驟： 雙脫氧末端終止法是以單鏈或雙鏈DNA為模板，采用 DNA引物引導新生 DNA的合成，又稱為引物合成法，或酶促引物合成法。其主要步驟為

37、：制備單鏈模板。模板與測序引物 結(jié)合。摻入法標記反應(yīng)。延伸 - 終止反應(yīng)。 變性膠電泳。放射自顯影。閱讀測序結(jié)果。38 、常用的分子生物學技術(shù)的原理、過程及特點 核酸分子雜交技術(shù)：基本原理是：具有互補序列的兩條單鏈核酸分子在一定條件下堿基互補配對結(jié)合，重 新形成雙鏈；在這一過程中，核酸分子經(jīng)歷了變性和復性的變化，以及復性過程中各分子間鍵的形成和斷裂等。 特點：直接檢測血清中病毒基因組，無須擴增，靈敏度較PCR低。在雜交體系中已知的核酸序列稱作探針。 聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR）： PCR的原理是根據(jù)待測 DNA片段兩端的核苷酸序列，設(shè)計并人工合成兩個分別與DNA片段兩端互補的寡聚核苷酸引物，在有過

38、量的引物、過量的底物（4 種 dNTP ）、DNA聚合酶以及模板（待擴增片段的 DNA分子）的反應(yīng)體系中，經(jīng)過高溫變性（使DNA鏈解開）、低溫退火（使引物與模板結(jié)合）和適溫延伸（新合成的 DNA片段）三個階段的循環(huán)周期，對DNA分子進行擴增。特點 : 極強的擴增能力 , 度高靈敏性 , 高度特異性，只需微量模板 ,只需數(shù)小時 ,擴增產(chǎn)物量大 ,變性.復性.延伸三個步聚循環(huán)進行 ,操作簡便， 適用廣泛， 但可出現(xiàn)假 陽性. DNA序列測定： DNA序列測定是在高分辨率變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的，包括Sanger雙脫氧鏈末端終止法和化學降解法。 Sanger 法的基本原理是：雙脫

39、氧核苷酸（ ddNTP ）在 DNA 合成過程中代替 相應(yīng)的脫氧核苷酸（ dNTP ）作為底物，不能形成 3， 5-磷酸二酯鍵而導致鏈延伸終止?；瘜W降解法：是采用 化學試劑處理末端放射性標記的 DNA 單鏈片段，造成堿基特異性切割，由此產(chǎn)生一組具有不同長度的 DNA 鏈 的反應(yīng)混合物，經(jīng)凝膠電泳按分子大小分離和放射自顯影，直接讀出待測 DNA 的核苷酸順序。 DNA 芯片技術(shù)： DNA 芯片技術(shù)是一種大規(guī)模集成的固相核酸分子雜交，以大量已知堿基序列的寡核苷酸 片段為探針，檢測樣品中哪些核酸序列與其互補，然后通過定性、 定量分析得出待測樣品的基因序列及表達的信 息。 DNA 芯片的主要技術(shù)流程包

40、括：芯片的設(shè)計與制備、靶基因的標記（常用熒光色素.生物素或放射性核素標記 dNTP ）、芯片雜交與雜交信號檢測。特點：高通量. 鑒別診斷。酶： DNA 聚合酶。所需探針：合成的寡核苷酸片段， cDNA ，已克隆的基因片段，雙鏈或單鏈 DNA 或 RNA ，肽核酸。 基因克隆技術(shù) （重組 DNA 技術(shù)） ：基因克隆是指某種目的基因的擴增與分離過程， 具體是從基因組或 DNA 大片段中分離并獲得某一特定的基因或 DNA 片段，再通過 DNA 序列擴增形成由眾多拷貝組成的 DNA 拷貝群體 的過程。其基本過程為： A- 目的基因的制備；栽體的選擇與制備； B-DNA 分子的體外連接； C- 將外源

41、DNA 導入 宿主細胞； D- 目的基因的篩選與鑒定； E-DNA 重組體的擴增與表達39、原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控的特點比較：兩者均涉及 RNA 聚合酶和轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列（啟動子等）的相互作用。真核需要多種轉(zhuǎn)錄因子輔助、原核不 需要。真核以正調(diào)控為主，原核以負調(diào)控為主。真核 3 種 RNA 聚合酶負責不同種類基因的轉(zhuǎn)錄，原核只有 1 種 RNA 聚合酶。40、原核生物和真核生基因表達調(diào)控特點的比較。相同點：轉(zhuǎn)錄起始是基因表達調(diào)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)不同點：A、原核基因表達調(diào)控主要包括轉(zhuǎn)錄和翻譯水平；真核基因表達調(diào)控主要包括染色質(zhì)活化、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯、翻譯后加工多個層次。B、原核基因表達調(diào)控主要為

42、負調(diào)節(jié)，真核主要為正調(diào)節(jié)。C、原核轉(zhuǎn)錄起始不需要轉(zhuǎn)錄因子，RNA 聚合酶直接結(jié)合啟動子，由因子決定基因表達的特異性； 真核轉(zhuǎn)錄起始需要基礎(chǔ)、 特異兩類轉(zhuǎn)錄因子， 依賴 DNA-蛋白質(zhì)、 蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用， 調(diào)控轉(zhuǎn)錄激活。 D、原核基因表達調(diào)控主要采用操縱子模型，轉(zhuǎn)錄出多順反子RNA，實現(xiàn)協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)；真核基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子 RNA，功能相關(guān)蛋白質(zhì)的協(xié)調(diào)表達機制更為復雜。41、質(zhì)粒的特征：原核細胞中染色體外的共價閉合的環(huán)狀DNA 分子。能獨立于細胞的染色體而進行復制，并依賴于宿主細胞。在同一宿主中具有不相容性， 即具有相同復制起始位點和分配區(qū)的兩種質(zhì)粒不能共存于一個宿主菌。 具有嚴 格

43、的遺傳控制系統(tǒng)（復制調(diào)控系統(tǒng)，分配系統(tǒng)，細胞分裂控制系統(tǒng) ，位點特異重組系統(tǒng)）。其所攜帶的遺傳 信息能賦予宿主細胞特定的遺傳性狀。 是 DNA重組技術(shù)中所使用的主要載體。 作為克隆載體的質(zhì)粒具有的特點： 分子量較小，能在細菌內(nèi)穩(wěn)定存在，有較高的拷貝數(shù)；具有一個以上的遺傳標志；具有多個限制酶的單一切點， 稱為多克隆位點，便于外源基因的插入。42、真核生物基因組結(jié)構(gòu)與功能的特點。每一種真核生物都有一定的染色體數(shù)目， 體細胞一般為雙倍體。真核基因組遠遠大于原核生物的基因組，具 有許多復制起點。真核基因組由一個結(jié)構(gòu)基因與相關(guān)的調(diào)控區(qū)組成，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子，即一分子mRNA只能翻譯一種蛋白質(zhì)。真核生物

44、分子含有大量重復順序。真核生物基因組內(nèi)非編碼的順序占90%以上。真核基因是斷裂基因。功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族。真核生物基因組中也存在一些可移動的遺傳因素。43、蛋白質(zhì)生物合成后的靶向輸送過程及特點： 蛋白質(zhì)合成后，定向地被輸送到最終發(fā)揮生物學功能的部位稱為靶向輸送。靶向輸送的蛋白質(zhì)的 N 端往往有 一些特異的氨基酸序列，稱為信號序列，是決定蛋白質(zhì)靶向輸送特性的重要元件，通過信號序列引導蛋白質(zhì)從胞 漿進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) .線粒體 .葉綠體和核內(nèi)，靶向不同的蛋白質(zhì)各有特異的信號序列。分泌型蛋白合成后進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，經(jīng)加工，包裝成分泌小泡，再轉(zhuǎn)移 . 融合到靶部位或分泌出細胞，其靶向輸送主要靠信號肽與胞漿

45、中的信號肽識 別粒子（ SRP）識別并特異結(jié)合，然后再通過SRP 與膜上的對接蛋白（ DP）識別并結(jié)合后，將所攜帶的蛋白質(zhì)送出細胞；線粒體蛋白的靶向輸送靠導肽與多種蛋白復合體介導進入基質(zhì)和膜間腔， 然后自發(fā)的或在分子伴侶 HSP70 幫助下折疊形成有功能的蛋白質(zhì)；而細胞核蛋白的靶向輸送則通過核定位信號與核輸入受體結(jié)合形成核蛋白 - 受 體復合物，被導出核孔，再與核孔復合體結(jié)合后進入細胞核。44 、核酸分子雜交的基本方法 包括： Southern 印跡雜交（鑒別 DNA靶分子的雜交、待測核酸是DNA片段）、Northern 印跡雜交（鑒別 RNA靶分子、待測核酸是 RNA）、斑點雜交、原位雜交和

46、液相雜交。45 、 DNA復制與轉(zhuǎn)錄的異同。相同點：模板是 DNA遵守堿基互補規(guī)律新鏈合成方向為5' 3' 催化核苷酸以磷酸二酯鏈連接合成部位在細胞核。不同點：復制的原材料是dNTP，轉(zhuǎn)錄的原料是 NTP復制的主要酶類是 DNA聚合酶，轉(zhuǎn)錄酶是 RNA聚合酶復制需要 RNA引物， 轉(zhuǎn)錄不需要引物復制的產(chǎn)物是雙鏈DNA，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是單鏈 RNA復制的模板是 DNA雙鏈（半保留復制），轉(zhuǎn)錄的模板是 DNA單鏈（不對稱轉(zhuǎn)錄）復制的功能是傳遞遺傳信息給子代, 轉(zhuǎn)錄是表達信息所需步聚.46、雙脫氧核苷酸末端終止法 DNA序列測定中所需要的順序試劑：M13載體、 dNTP、 DNA聚合酶

47、I 的 klenow 片段，逆轉(zhuǎn)錄酶， TqaDNA聚合酶（耐熱 DNA聚合酶），經(jīng)過修飾的 T7 噬菌菌體 DNA聚合酶，測序酶版，雙脫氧核苷三 磷酸（即 2',3'-ddNTP ）、 dNTP類似物，放射性標記的 a -32 PdNTP。47、PCR體系的主要成分。引物、 TaqDNA聚合酶、 dNTP、模板核酸、緩沖液。48、DNA聚合酶 I 的作用特點： 模板為 DNA，底物為 4 種脫氧核苷酸（ dATP、dCTP、dGTP、dTTP）， Mg2+參與， DNA合成方向為 5' 3' ，具有 DNA聚合酶活性， 3' 5' 及 5

48、9; 3' 核酸外切酶活性， 其 5' 3' 核酸外切酶活性， 用于缺口平移法標記 DNA 探針。基因治療的方法有兩種：體內(nèi)直接轉(zhuǎn)基因，稱為體內(nèi)法；細胞介導的基因治療，稱為回體法。基因滅活技術(shù)有： 反義核酸技術(shù)，核酶技術(shù)，三鏈技術(shù)，干擾RNA技術(shù)。人的 DNA端粒含有 TTAGGG重復序列。49. 信號肽的特點 :能與細胞質(zhì)中的信號識別顆粒結(jié)合 ,SRP受體是蛋白質(zhì)進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所必需的 ,N 端一小段富含蔬 水氨基酸的序列 , 翻譯的同時引導新生多肽鏈穿過內(nèi)質(zhì)網(wǎng) .基因組文庫采用限制酶將基因組DNA切成片段，每一 DNA片段都與一個載體分子拼接成重組DNA，將全部 DNA

49、分子都引入宿主細胞并擴增所得到的分子克隆混合體叫基因組文庫。50. 基因重組是指 DNA之間的共價連接 . 在分子克隆中的克隆是指無性繁殖DNA?；蚬こ讨心康幕虻膩碓纯梢允?化學合成 .PCR合成. 細胞 DNA.組織文庫。分子生物學需要掌握的重點：DNA 、 RNA、蛋白質(zhì)、質(zhì)粒、基因、端粒、聚合酶、密碼子、突變、變性的概念或結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及特點； 復制、轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工修飾、靶向輸送的主要過程及特點； 癌基因的概念、原癌基因產(chǎn)物的類型及細胞定位、癌基因活化致癌的主要機制； 常用分子生物學技術(shù)的原理、主要步驟、酶學及特點； 基因表及其調(diào)控的原理、主要過程或步驟，乳糖操縱子的正、負調(diào)節(jié)

50、機制； 常用的基因診斷及基因治療技術(shù)；基因克隆、基因診斷、基因治療、管家基因、抑癌基因、 Klenow 片段、核蛋白體、限制性內(nèi)切核酸酶、人類 基因組計劃、原位雜交的概念；雙脫氧末端終止法 DNA測序、重組 DNA技術(shù)的主要步驟；結(jié)構(gòu)基因、順式作用元件、啟動子、遺傳密碼、反式作用因子、氨基酰 -tRNA 、基因組文庫、 DNA多態(tài)性、轉(zhuǎn) 位因子、探針、 Tm值、 DNA微陣列、 DNA甲基化的概念、性質(zhì)；核酸分子雜交的主要類型、 PCR的主要步驟及引物設(shè)計；DNA 、 RNA及多肽鏈的合成方向； 真核細胞轉(zhuǎn)染的基本方法； 細胞周期的主要調(diào)控點；DNA 損傷及修復的主要類型和機制； 基因文庫篩選

51、的主要方法及原理。醫(yī)學分子生物學主要內(nèi)容1、醫(yī)學分子生物學：醫(yī)學分子生物學是分子生物學的一個重要分支，是從分子水平研究人體在正常和 疾病狀態(tài)下生命活動及其規(guī)律的一門科學。2、基因的概念、功能 基因：是貯存遺傳信息的核酸（DNA或 RNA）片段，包括編碼 RNA和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因以及轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列兩部分。基因的功能： 1、利用 4 種堿基的不同排列荷載遺傳信息；2、通過復制將所有的遺傳信息穩(wěn)定、忠實地遺傳個子代細胞； 3、作為基因表達的模版。3、DNA、RNA的結(jié)構(gòu)和功能功能： DNA:DNA的基本功能是以基因的形式荷載遺傳信息，并作為基因復制和轉(zhuǎn)錄的模板。它是生命遺 傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是個體生命活

52、動的信息基礎(chǔ)。RNA:1、 mRNA：攜帶蛋白質(zhì)的序列信息，在翻譯過程作為模板指導蛋白質(zhì)的合成2 、tRNA: 在蛋白質(zhì)生物合成時運輸氨基酸3 、核蛋白體：介導 rRNA 與 mRNA的結(jié)合rRNA與核蛋白體蛋白的結(jié)合rRNA與 tRNA 的相互識別和相互作用4、小分子 RNA：參與 mRNA的剪接、加工U3與 rRNA 加工有關(guān)4、不同生物基因的基本結(jié)構(gòu)特點原核生物： 5'- 啟動子 -結(jié)構(gòu)基因 -轉(zhuǎn)錄終止子 -3 '真核生物：由 1 個結(jié)構(gòu)基因 +轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列組成， mRNA多是單順反子， rRNA 基因結(jié)構(gòu)是多順反子 病毒：與真核基因相比很小，一般沒有內(nèi)含子，調(diào)控序列較少

53、，有不規(guī)則基因5、原核、真核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列有哪些（1）原核生物：啟動子、終止子、操縱原件、正調(diào)控蛋白結(jié)合位點； 啟動子：提供轉(zhuǎn)錄起始信號，其本身不出現(xiàn)于 RNA 產(chǎn)物中。其中有著 “TATAAT”的共有特征序列，稱 為普里布諾盒。 終止子：提供 RNA合成終止信號。其含有 GC 富集區(qū)組成的回文特征序列。 操縱元件：被阻遏蛋白識別與結(jié)合。與啟動子通常有部分重疊。 正調(diào)控蛋白結(jié)合位點：加強下游結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。 （2）真核生物：啟動子、上游啟動子元件、增強子、加尾信號和一些反應(yīng)元件等。 啟動子：提供轉(zhuǎn)錄起始信號，啟動子本身通常不被轉(zhuǎn)錄，除了編碼 tRNA 基因的啟動子。分為三類：I 類啟動

54、子富含 GC堿基對，編碼 rRNA的基因，除了 5SrRNA。II 類啟動子具有 TATA盒特征結(jié)構(gòu) , 編碼 蛋白質(zhì)（ mRNA）的基因和一些小 RNA基因。 III 類啟動子包括 A盒、B盒、 C盒，編碼 5SrRNA、tRNA、 U6snRNA。 增強子：順式作用元件，增強鄰近基因的轉(zhuǎn)錄。 沉默子：負性調(diào)控元件，可抑制基因轉(zhuǎn)錄的特定序列。6、操縱子、啟動子、增強子、斷裂基因、內(nèi)含子和外顯子的概念 操縱子：功能上相關(guān)聯(lián)的數(shù)個結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，由一套轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列控制其轉(zhuǎn)錄， 構(gòu)成的基因表達單位。啟動子：指結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄起始位點附近的一段DNA序列，它結(jié)合 RNA聚合酶 （真核生物還需要結(jié)合

55、其他蛋白質(zhì)因子）后能夠開放基因轉(zhuǎn)錄。增強子：是可以增強真核生物基因啟動子的工作效率的順式作用元件。 斷裂基因：真核生物的結(jié)構(gòu)基因中，編碼區(qū)與非編碼區(qū)間隔排列。 內(nèi)含子：指在真核生物的斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中出現(xiàn)，但在成熟RNA中被剪接除去的核酸序列。外顯子：指在真核生物的斷裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列。7、基因組的定義和功能 定義：細胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。 功能：儲存和表達遺傳信息8、真核生物基因組的特點 真核生物的基因組龐大， 出了結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)與原核生物大不相同以外， 還存在大量的非結(jié)構(gòu)基因區(qū)域。真核細胞基因組具有結(jié)構(gòu)基因呈斷裂基因形式、以單順反子轉(zhuǎn)錄、

56、結(jié)構(gòu)基因在基因組中所占比例小于 非編碼區(qū)域的特點。真核細胞基因組存在大量重復序列，可以分為高度重復序列、中毒重復序列和單 拷貝或低度重復序列等 3 種。真核基因組的另一特點是存在多基因家族。9、原核生物基因組的特點 原核生物的基因組主要是染色體DNA。特點： 1、基因組中很少有重復序列；2、編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因多為單拷貝基因，但編碼rRNA 的基因仍然是多拷貝基因； 3、結(jié)構(gòu)基因在基因組中所占的比例遠遠大于真核基因組，但小于病毒基因組；4、許多結(jié)構(gòu)基因在基因組中以操縱子為單位排列。10、質(zhì)粒、基因重疊、基因組、假基因、核酶 質(zhì)粒：細菌細胞內(nèi)的、染色體外的DNA 分子，是共價閉合的環(huán)狀 DNA

57、分子，能夠獨立于細胞的染色質(zhì)DNA而進行復制。 基因重疊：同一 DNA片段可以是 2 種甚至 3 種蛋白質(zhì)分子的部分編碼區(qū)。 基因組：細胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。 假基因：與有功能的基因同源，但不能產(chǎn)生有功能的基因產(chǎn)物的基因。 核酶：指具有催化活性的 RNA，其作用底物是 RNA，主要參與 RNA的加工成熟。11、DNA復制過程的共同特點1 、半保留復制方式保證了遺傳信息的忠實傳遞；2、基因組 DNA都有固定的復制起始點； 3 、復制子是基本復制單位； 4、雙向復制形成復制泡和復制叉；5 、半不連續(xù)復制方式克服了DNA空間結(jié)構(gòu)對DNA新鏈合成的制約。12、DNA復制保真性的機制1 、 DNA聚合酶對堿基配對的選擇作用，保證嚴格的堿基配對規(guī)律；2、DNA聚合酶對模板的識別作用； 3、 DNA聚合酶 3' 5'外