HER2在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義

1、HER2在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義【摘要】 目的 檢測(cè) HER2在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌、癌旁黏膜、正常膀胱黏膜組織中的表達(dá)，探討HER2表達(dá)與膀胱尿路上皮細(xì)胞癌臨床特征、病理分級(jí)、臨床分期間的關(guān)系，評(píng)價(jià)它是否可以作為判斷膀胱尿路上皮細(xì)胞癌生物學(xué)行為的指標(biāo)。方法 收集臨床病理資料完整的膀胱尿路上皮癌及相應(yīng)癌旁組織各50例，正常膀胱組織20例，應(yīng)用免疫組化法(SP法)檢測(cè)HER2蛋白的表達(dá)。結(jié)果 HER2蛋白在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌組織中的表達(dá)高于癌旁黏膜和正常膀胱黏膜中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HER2蛋白的表達(dá)和病理分級(jí)、腫瘤大小有相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P&am

2、p;lt;0.05)。結(jié)論 HER2蛋白表達(dá)和腫瘤的病理分級(jí)、腫瘤大小等有相關(guān)性，表明HER2蛋白過表達(dá)可能與膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。 【關(guān)鍵詞】 膀胱尿路上皮細(xì)胞癌;HER2基因;相關(guān)性【Abstract】 Objective To study the expression of HER2 in uroepithelium cell carcinoma of bladder,mucosa in the paracarcinoma and normal mucous of urinary bladder,and to explore its correlation with clinic

3、factors,grade and stage of the bladder carcinoma and evaluate whether HER2 can serve as marker to decide the biological behavior of bladder carcinoma.Methods 50 specimens of uroepithelium cell carcinoma of bladder,50 specimens mucosa in the paracarcinoma and 20 cases normal mucous of urinary bladder

4、 were collected.The protein expression of HER2 was detected by immunohistochemical staining SP method.Results The expression of HER2 protein in uroepithelium cell carcinoma of bladder tissues was significant higher than that in paracarcinoma mucosa and normal mucous of urinary bladder (P<0.05

5、). The expression of HER2 protein in uroepithelium cell carcinoma of bladder tissues had dependablity correlation with the grade and size of the tumors (P<0.05).Conclusion The expression of HER2 protein in uroepithelium cell carcinoma of bladder tissues had significant correlation with the gr

6、ade and size of the tumors. It illustrates that the over expression of HER2 protein maybe had highly correlation with the oncogenesis and development of bladder cancer.【Key words】 uroepithelium cell carcinoma of bladder;HER2 gene;dependablity膀胱尿路上皮細(xì)胞癌(uroepithelium cell carcinoma of bladder，UCCB)是我國(guó)

7、泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，年發(fā)病率約為6/10萬。該腫瘤的特點(diǎn)為：易復(fù)發(fā)，難以早期診斷和估計(jì)預(yù)后12。尋找有價(jià)值的用于癌的早期診斷和判斷預(yù)后的腫瘤標(biāo)志物成為當(dāng)前人們研究的熱點(diǎn)之一。HER2基因(亦作cerB2或Her2/neu)是人表皮生長(zhǎng)因子受體(Human Epidermal Growth Factor receptor，HEGFR)家族的第二號(hào)成員，體外細(xì)胞培養(yǎng)研究顯示HER2過度表達(dá)能促進(jìn)腫瘤發(fā)生和惡性轉(zhuǎn)化3，有研究表明，膀胱癌是除乳腺癌、大腸癌外，第三個(gè)有較高HER2表達(dá)的惡性腫瘤4。為探討HER2表達(dá)與膀胱尿路上皮細(xì)胞癌臨床特征、病理分級(jí)、臨床分期間的關(guān)系，我們檢測(cè)膀胱尿路上皮癌及

8、相應(yīng)癌旁組織HER2蛋白的表達(dá)，并與正常膀胱組織比較，報(bào)道如下。資料和方法1.臨床資料 收集2006年9月2008年9月住院并接受開放手術(shù)治療(所有病例術(shù)前均未經(jīng)任何抗癌藥物治療或放療)的50例膀胱尿路上皮細(xì)胞癌病人的癌組織及其相應(yīng)的癌旁組織(距離癌組織2 cm)，選取20例正常膀胱黏膜組織作為對(duì)照組。50例膀胱尿路上皮細(xì)胞癌患者中男性42例，女性8例，年齡879歲，60歲患者18例，>60歲的患者32例;按WHO標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)：G1 18例，G2 22例，G3 10例;按UICC標(biāo)準(zhǔn)分期：TaT1 32例，T2T4 18例。按腫瘤大小分：2 cm腫瘤17例，>2 cm腫

9、瘤33例。按單發(fā)和多發(fā)腫瘤分：?jiǎn)伟l(fā)腫瘤28例，多發(fā)性腫瘤22例，均為原發(fā)性膀胱尿路上皮癌。2.試驗(yàn)方法(1)蘇木素伊紅(HE)染色 全部的標(biāo)本均經(jīng)4%的中性甲醛液固定，梯度脫水，浸蠟，包埋，4 m連續(xù)切片，烤干，脫蠟，HE染色，透明和封片。用于腫瘤分級(jí)分期。(2)免疫組化SP法檢測(cè)及結(jié)果判斷 根據(jù)SP法說明書操作。每一批免疫組化染色均設(shè)有已知陽性和用PBS代替一抗的空白對(duì)照。由2位富有經(jīng)驗(yàn)的具有副高級(jí)以上職稱的病理醫(yī)師采用雙盲法，隨機(jī)觀察切片至少5個(gè)具有代表性高倍視野，不少于1000個(gè)細(xì)胞，對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)(按每張切片計(jì))56：0：完全沒有著色或少于10%腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞膜著

10、色;1+：大于10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)微弱不完整的細(xì)胞膜著色：2+：大于10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中度完整的細(xì)胞膜著色;3+：大于10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)的完整的細(xì)胞膜著色,其中2+和3+視為陽性。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)采用Spss11.0軟件和手工計(jì)算完成;樣本率比較采用R×C列表的2檢驗(yàn)、連續(xù)校正的2檢驗(yàn)及四格表的確切概率法;相關(guān)性分析采用Spearman分析;多個(gè)樣本均數(shù)間兩兩比較用方差齊性檢驗(yàn)(HonogeneityofVariance),當(dāng)總體方差齊時(shí)選擇NewmanKeuls法分析，當(dāng)總體方差不齊時(shí)，選用Tamhane法分析，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié) 果1.免疫

11、組化SP法檢測(cè)HER2蛋白表達(dá)情況 HER2蛋白在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌組織、癌旁組織、正常膀胱黏膜組織中的表達(dá)率分別為32.0%，12.0%，和5.0%。陽性染色主要位于胞膜，為棕黃色，顯色過強(qiáng)時(shí)呈棕褐色(見圖12)。應(yīng)用R×C表2檢驗(yàn)，三組間HER2蛋白表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，應(yīng)用Fisher確切概率法，癌旁組和正常組間HER2蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。在此基礎(chǔ)上將上述兩組合并，再與膀胱癌組比較，進(jìn)行R×C表分割計(jì)算，HER2蛋白在膀胱癌組織中的表達(dá)高于在非癌組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<

12、0.05)。表1 HER2蛋白在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌，癌旁黏膜和正常膀胱黏膜的表達(dá)注：三組間HER2蛋白陽性率比較：2=9.5634，P=0.0084<0.05;癌旁組與正常組間HER2蛋白陽性率比較：P2tail=0.6642>0.05;癌組和非癌組間HER2蛋白陽性率比較：2=9.1116，P=0.0025<0.05。2.HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌組織分化程度相關(guān)性分析 按組織病理學(xué)分級(jí)分為G1:18例，HER2蛋白陽性2例;G2:22例，HER2蛋白陽性8例;G3:10例,HER2蛋白陽性6例。采用Spearman相關(guān)分析，HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌組

13、織病理學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)(r=0.3843，P<0.01)。見表2。表2 HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌組織病理學(xué)分級(jí)相關(guān)性分析注：Spearman Correlation Coefficients:r=0.3843，P<0.01。3.HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌TNM分期的關(guān)系 TaT1期(非浸潤(rùn)型膀胱尿路上皮癌)32例，T2T4期(浸潤(rùn)型膀胱尿路上皮癌)18例。兩組間HER2蛋白陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。表3 不同TNM分期中膀胱癌中HER2蛋白的表達(dá)注：兩組間HER2蛋白陽性率比較：2=1.2357，P=0.2663>0.0

14、5。4.HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌患者年齡組的關(guān)系 膀胱癌患者年齡60歲HER2蛋白陽性率為22.22%;>60歲陽性率為37.50%;應(yīng)用R×C表2檢驗(yàn)，得出兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4表4 不同年齡的膀胱癌患者中HER2蛋白的表達(dá)注：兩年齡組HER2蛋白陽性率比較：2=0.849，P=0.357>0.05。5.HER2蛋白表達(dá)與膀胱癌患者性別的關(guān)系 男性患者42例，HER2蛋白陽性率為30.95%;女性患者8例，HER2蛋白陽性率為37.50%;兩組間HER2蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

15、表5 不同性別患者的膀胱癌中HER2蛋白的表達(dá)注：兩組間HER2蛋白陽性率比較：2=0.132，P=0.716>0.05。6.HER2蛋白表達(dá)與膀胱腫瘤大小的關(guān)系 按腫瘤大小分組：腫瘤直徑2.0 cm有17例，HER2蛋白陽性率為11.76%;腫瘤直徑>2.0 cm有33例，HER2蛋白陽性率為42.42%;兩組間HER2蛋白陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，腫瘤越大其陽性率越高。見表6。表6 不同腫瘤直徑的膀胱癌中HER2蛋白的表達(dá)注：兩組間HER2蛋白陽性率比較：2=4.8469，P=0.0277<0.05。討 論HER2是一個(gè)

16、在正常和腫瘤上皮細(xì)胞均有表達(dá)的跨膜生長(zhǎng)因子受體，主要是在人體的胚胎發(fā)育時(shí)期表達(dá),它參與多種組織器官的生長(zhǎng)發(fā)育,而在成人正常組織中此基因常以單拷貝存在,表達(dá)水平較低，與正常細(xì)胞的增殖，分化相關(guān)，并且調(diào)控腫瘤發(fā)生、生長(zhǎng)和侵襲?；罨问街饕赃^表達(dá)和基因擴(kuò)增為主，突變則少見。在人類多種腫瘤中特別是乳腺癌中可檢測(cè)到該基因的擴(kuò)增和過度表達(dá)，研究表明，大約25%30%的浸潤(rùn)性乳腺癌和80%的乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌患者有HER2基因擴(kuò)增和蛋白過表達(dá)，而這些患者可能預(yù)后不佳、激素治療和常規(guī)化療效果差78。膀胱癌是繼乳腺癌、大腸癌之后第三個(gè)有較高HER2蛋白表達(dá)的腫瘤，近年來，許多學(xué)者研究報(bào)告指出，膀胱癌HER2蛋白表達(dá)

17、陽性率的平均值約為29.8%，中位值約為31.5%，最高值約為37%912。本研究免疫組化結(jié)果表明，HER2蛋白陽性染色主要定位于胞膜，少數(shù)位于胞漿內(nèi)，為棕黃色，顯色過強(qiáng)時(shí)呈棕褐色，大多數(shù)為片狀分布，少數(shù)為局灶性、彌漫性分布，在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌組織中的陽性表達(dá)率為32.00%，而在正常膀胱黏膜與癌旁黏膜組織中的陽性率分別為5%和12.00%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，HER2蛋白在膀胱癌組織中的表達(dá)高于在非癌組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P2 cm的腫瘤HER2表達(dá)率為42.42%，直徑2 cm的腫瘤HER2表達(dá)率為11.76%(P總結(jié)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1Lee R,Droller MJ.The nat

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