肝癌組織survivin的表達(dá)及其與HBV感染的關(guān)系

1、肝癌組織survivin的表達(dá)及其與HBV感染的關(guān)系 作者：馬楠 馮英明 張賀龍 紀(jì)統(tǒng)理 張偉 張惠中 【摘要】 目的：研究肝癌組織中的survivin的表達(dá)與HBV感染的關(guān)系. 方法：應(yīng)用免疫組化法檢測原發(fā)性肝癌組織45例，癌旁肝硬化組織25例，肝硬化組織18例，肝炎組織5例，正常肝組織10例中survivin的表達(dá)，同時(shí)檢測原發(fā)性肝癌中HBsAg的表達(dá). 結(jié)果：在45例肝癌組織中survivin陽性34例(75.5)，陽性率高于癌旁肝硬化組織（44.4），肝硬化組織（0），肝炎組織（0）和正常肝組織(0，P<0.001）. 肝癌中survivin的表達(dá)在Edmondson分級(jí)

2、級(jí)高于級(jí)（P=0.014），而在年齡、性別、腫瘤大小、臨床分期、是否有門脈轉(zhuǎn)移方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），survivin與HBsAg的表達(dá)呈正相關(guān)（P=0.014）. 結(jié)論：肝癌組織中survivin高表達(dá)說明其在肝癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用，同時(shí)HBV感染對(duì)于survivin表達(dá)上調(diào)有一定作用. 【關(guān)鍵詞】 存活素 癌 肝細(xì)胞 肝炎表面抗原 乙型 細(xì)胞凋亡 基因 0引言 肝細(xì)胞性細(xì)胞癌(HCC)是肝臟最常見的惡性腫瘤. 肝細(xì)胞的正常凋亡和增殖的平衡被打破會(huì)促使HCC的發(fā)生和發(fā)展1. Survivin屬凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein

3、，IAP)家族新成員，在多數(shù)惡性腫瘤組織中高表達(dá)2. 我們采用免疫組化法檢測survivin和HBsAg在肝癌組織中的表達(dá)，并探討survivin與HCC臨床病理特征、HBsAg的相關(guān)性及其臨床意義. 1材料和方法 1.1材料1993/2003經(jīng)手術(shù)切除并經(jīng)病理學(xué)證實(shí)的HCC標(biāo)本45例(其中帶有癌旁肝硬化組織25例)，肝硬化組織18例，肝炎組織5例，所有病例術(shù)前均未行化療和其它治療. HCC標(biāo)本中，男38例，女7例，年齡2761（中位46.4）歲；腫瘤直徑5 cm者15例，5 cm者30例；門脈癌栓者15例，陰性者30例. Edmondson分級(jí)級(jí)16例，級(jí)29例；TNM臨床期16例，期29例

4、. 標(biāo)本經(jīng)40 g/L甲醛固定，石蠟包埋，4 m厚連續(xù)切片. 10例正常肝臟組織標(biāo)本作為對(duì)照組. 鼠抗人survivin mAb，鼠抗人HBsAg mAb，免疫組化SP法檢測試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司. 1.2方法采用鏈霉抗生物素蛋白一過氧化物酶(SP)免疫組織化學(xué)方法檢測survivin與HBsAg表達(dá). 肝癌組織survivin蛋白表達(dá)的免疫組織化學(xué)染色按照SP法常規(guī)操作進(jìn)行，以試劑公司提供的陽性對(duì)照片作為陽性對(duì)照，PBS代替一抗作陰性對(duì)照. 光鏡下觀察免疫組化染色切片的顯色反應(yīng)，survivin染色定位于胞質(zhì)，呈棕黃色，隨機(jī)選擇5個(gè)腫瘤區(qū)內(nèi)200倍(20×10倍)視

5、野，計(jì)算每個(gè)視野陽性細(xì)胞率，l0判為陽性，<10判為陰性. HBsAg染色定位于胞質(zhì)，棕黃色為陽性，其陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)同survivin. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件處理. Survivin的表達(dá)及其與各臨床病理特征之間的關(guān)系采用2 進(jìn)行檢驗(yàn)分析，與HBsAg的相關(guān)分析采用spearman秩相關(guān). 2結(jié)果 2.1Survivin在HCC中的表達(dá)Survivin蛋白主要表達(dá)于肝癌細(xì)胞質(zhì)，SP染色可見胞質(zhì)內(nèi)棕黃色顆粒，陽性細(xì)胞在肝癌組織內(nèi)呈散在分布. 在45例HCC中survivin陽性34例(75.5%, 圖1A)，癌旁肝硬化組織25例survivin陽性11例

6、(44.4%)，肝硬化組織，肝炎組織均無survivin陽性病例，正常肝組織survivin為陰性（圖1B）. HCC組織survivin的陽性率高于癌旁組織和肝硬化組織和肝炎組織(P<0.001). Edmondson分級(jí)級(jí)16例，survivin陽性8例，陽性率50, 級(jí)29例，陽性26例(89.6%)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）. Survivin表達(dá)與病理分級(jí)有關(guān)而與年齡、性別、分期、腫瘤大小、轉(zhuǎn)移無關(guān)（表1）. 2.2Survivin表達(dá)與HBsAg的關(guān)系HBsAg表達(dá)于HCC細(xì)胞，陽性細(xì)胞胞質(zhì)呈棕黃色顆粒. 在45例HCC中HBsAg陽性30例

7、(66.7%, 圖2)，其中surivin陽性34例中HBsAg陽性26例. 采用spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出survivin與HBsAg表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.366, P=0.014）.表1Survivin表達(dá)與HCC臨床病理特征的關(guān)系 3討論 凋亡在維持正常細(xì)胞的生長和組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起重要的平衡作用3. Survivin是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凋亡抑制因子，在多種腫瘤組織中均有高表達(dá)4-5. 我們發(fā)現(xiàn)肝癌中survivin陽性率顯著高于癌旁組織、 肝硬化組織、 肝炎及正常肝組織(P<0.001). 與既往在其他類型腫瘤組織中對(duì)survivin表達(dá)的研究結(jié)果相類

8、似6. 除腫瘤細(xì)胞分化程度外，survivin與其余臨床病理特征均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在Edmonson分級(jí)級(jí)患者，其表達(dá)顯著低于Edmonson分級(jí)級(jí)患者，說明Survivin基因的表達(dá)上調(diào)可能與肝癌的惡性程度有關(guān)，但其表達(dá)與年齡、性別、腫瘤大小、臨床分期以及門靜脈癌栓及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移無關(guān)，這些結(jié)果都說明在肝癌的發(fā)生發(fā)展中，survivin基因的高表達(dá)可能是引起肝細(xì)胞凋亡機(jī)制失調(diào)，進(jìn)而發(fā)展成HCC的因素之一.在對(duì)肝細(xì)胞凋亡的調(diào)控方面，HBx的作用還有爭議7-8. 本結(jié)果表明，HBx與肝癌中survivin表達(dá)的上調(diào)存在著一定的關(guān)系，在正常細(xì)胞中，survivin的功能是調(diào)控細(xì)胞染色體分離和胞質(zhì)分裂，但是

9、，當(dāng)survivin的表達(dá)上調(diào)就會(huì)在胞質(zhì)中蓄積，通過抑制多種因素如p53, caspases等產(chǎn)生抗凋亡作用.【參考文獻(xiàn)】 1 Duan XX，Ou JS，Li Y，et al. Dynamic expression of apoptosisrelated genes during development of laboratory hepatocellular carcinoma and its relation to apoptosisJ. World J Gastroenterol,2005,11(30):4740-4744.2 Marusawa H, Matsuzawa S, Wels

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