雙氧水微生物限度檢查方法驗(yàn)證方案20121112

1、5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗(yàn)證方案編碼： VP/QBV-12-T090-00頁(yè)碼：7/7項(xiàng)目人員 ItemPersonnel部門(mén)/崗位Dept./Position簽名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/檢驗(yàn)員年 月 日 (Y) (M) (D) 方案審核Reviewed byQC/經(jīng)理助理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副經(jīng)理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/經(jīng)理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批準(zhǔn)Approved by質(zhì)量受權(quán)人 年 月 日 (Y) (M) (D)頒發(fā)部門(mén)Issued byQA生效日期Effective Date 年

2、月 日 (Y) (M) (D)分發(fā)部門(mén)Distributed to QC制作備份：1份Copies prepared: 1pcs目 錄1.概述32.目的33.依據(jù)及參考文件34.驗(yàn)證小組和各部門(mén)職責(zé)35.驗(yàn)證時(shí)間安排46.驗(yàn)證內(nèi)容47.偏差情況68.變更79.驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)內(nèi)容7附件1：培訓(xùn)確認(rèn)表1附件2：文件檢查確認(rèn)表2附件3：設(shè)備確認(rèn)結(jié)果2附件4：試驗(yàn)器材確認(rèn)結(jié)果4附件5：試驗(yàn)用菌種確認(rèn)結(jié)果4附件6：培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果5附件7：試劑確認(rèn)結(jié)果5附件8：器皿確認(rèn)結(jié)果6附件9：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)果記錄71.概述5%雙氧水溶液是本公司車(chē)間使用的消毒劑種類(lèi)之一。因需建立5%雙氧水的微生物檢驗(yàn)方法

3、，所以需對(duì)其微生物限度檢查方法進(jìn)行驗(yàn)證。按中國(guó)藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢查法”要求，結(jié)合5%雙氧水溶液本身的性質(zhì)，本次確認(rèn)將采用以下微生物檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)取2ml 5%雙氧水溶液置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，用封閉式薄膜過(guò)濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度，檢測(cè)細(xì)菌平皿培養(yǎng)72小時(shí)，檢測(cè)霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時(shí)，測(cè)定菌數(shù)。2.目的根據(jù)中國(guó)藥典2010年版的要求確定本公司使用的5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法。 3.依據(jù)及參考文件3.1中國(guó)藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢

4、查法”3.2中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范2010年版“微生物限度檢查法”3.3藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）3.4 微生物限度檢查法 SOP-QC-0213-V013.5 驗(yàn)證管理規(guī)程 SOP-QA-017-V023.6QC消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-216-V004.驗(yàn)證小組和各部門(mén)職責(zé)4.1驗(yàn)證小組及對(duì)應(yīng)職責(zé)職位姓名部門(mén)具體職責(zé)組長(zhǎng)代珊QC確認(rèn)總協(xié)調(diào)工作，并審核確認(rèn)的數(shù)據(jù)組員許維雅QC負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告的起草，負(fù)責(zé)檢品的檢測(cè)與確認(rèn)記錄的填寫(xiě)，負(fù)責(zé)確認(rèn)數(shù)據(jù)的收集。辛海安黃微QC負(fù)責(zé)檢品的檢測(cè)與確認(rèn)記錄的填寫(xiě)。林明鳳吳東丹劉利袁碧芳彭艷妃QC監(jiān)督確認(rèn)過(guò)程實(shí)施及確認(rèn)過(guò)程中的偏

5、差及OOS處理。吳東琴Q(mào)A負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告的歸檔保存。監(jiān)督確認(rèn)過(guò)程實(shí)施及確認(rèn)過(guò)程中的偏差及OOS處理。4.2驗(yàn)證委員會(huì)姓名職務(wù)職責(zé)顏杰質(zhì)量受權(quán)人1.負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報(bào)告的批準(zhǔn)；2.負(fù)責(zé)確認(rèn)過(guò)程中出現(xiàn)的偏差/OOS的批準(zhǔn)放行。馬立如QA經(jīng)理1.負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報(bào)告的審核；2.負(fù)責(zé)確認(rèn)過(guò)程中出現(xiàn)的偏差/OOS的評(píng)估。張德志QA副經(jīng)理5.驗(yàn)證時(shí)間安排時(shí) 間工作內(nèi)容2012年11月方案起草、審批2012年11月12月標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)、檢驗(yàn)方法確認(rèn)2012年12月完成報(bào)告6.驗(yàn)證內(nèi)容6.1驗(yàn)證前準(zhǔn)備6.1.1培訓(xùn)確認(rèn)本次驗(yàn)證內(nèi)容是否已對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)，檢查確認(rèn)結(jié)果記錄在附件1培訓(xùn)確認(rèn)表。6.1.2文件確認(rèn)本

6、次驗(yàn)證前驗(yàn)證方案及相關(guān)指導(dǎo)的SOP是否已經(jīng)批準(zhǔn)。檢查確認(rèn)結(jié)果記錄在附件2文件檢查確認(rèn)表。如無(wú)相關(guān)文件，則需要增加發(fā)放。6.1.3儀器設(shè)備確認(rèn)檢查所涉及的設(shè)備是否符合實(shí)驗(yàn)要求，確認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件3 設(shè)備確認(rèn)結(jié)果中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：設(shè)備應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證，在校準(zhǔn)有效期內(nèi)。6.1.4試驗(yàn)器材確認(rèn)檢查所涉用試驗(yàn)器材，確認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件4試驗(yàn)器材確認(rèn)結(jié)果中，可接受標(biāo)準(zhǔn)：試驗(yàn)器材各配件應(yīng)齊全，無(wú)損壞。6.1.5試驗(yàn)用菌種確認(rèn)檢查所涉及的試驗(yàn)用菌種是否符合實(shí)驗(yàn)要求，確認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件5 試驗(yàn)用菌種確認(rèn)結(jié)果中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：菌種形態(tài)特征應(yīng)良好、菌種代數(shù)不得超過(guò)第五代。6.1.6培養(yǎng)基確認(rèn)檢查所涉及的培養(yǎng)基是否符合實(shí)驗(yàn)要求，確

7、認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件6 培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)在有效期內(nèi)，應(yīng)做培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查。6.1.7試劑確認(rèn)檢查所涉用試劑是否符合實(shí)驗(yàn)要求，確認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件7試劑確認(rèn)結(jié)果中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：試劑應(yīng)在有效期內(nèi)。6.1.8器皿確認(rèn)檢查所涉用器皿是否符合實(shí)驗(yàn)要求。確認(rèn)結(jié)果填寫(xiě)在附件8器皿確認(rèn)記錄中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：一般玻璃器皿要求潔凈，無(wú)破損，量筒要進(jìn)行校準(zhǔn)。6.1.9驗(yàn)證用培養(yǎng)基、緩沖液應(yīng)置121濕熱滅菌30分鐘，平皿、刻度吸管應(yīng)置200干熱滅菌2小時(shí)。6.2驗(yàn)證方法6.2.1 菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，3035培養(yǎng)1

8、824小時(shí)；接種白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上， 2328培養(yǎng)2448小時(shí)。上述培養(yǎng)物分別用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50100cfu 的菌懸液。取黑曲霉菌經(jīng)2328培養(yǎng)57天新鮮改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液洗下孢子吸出，轉(zhuǎn)移至空試管中作為菌懸液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液進(jìn)行10倍梯度稀釋至含孢子數(shù)50100cfu/ml的孢子懸液。6.2.2菌液計(jì)數(shù)：分別取上述3種細(xì)菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過(guò)45營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，于3

9、035倒置培養(yǎng)48小時(shí)。分別取上述2種真菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過(guò)45玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，于2328倒置培養(yǎng)72小時(shí)。6.2.3 5%雙氧水的配制：按照QC消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-216-V00配制上述5%雙氧水。6.2.4細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)回收率測(cè)定：驗(yàn)證試驗(yàn)每種5%雙氧水應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)，并計(jì)算各試驗(yàn)菌每次試驗(yàn)的回收率。要求回收率不低于70%。用薄膜過(guò)濾進(jìn)行驗(yàn)證，具體擬定方法如下：6.2.4.1試驗(yàn)組：取2ml5%雙氧水和1ml驗(yàn)證用菌液（含50100CFU試驗(yàn)菌）置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，

10、用封閉式薄膜過(guò)濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度培養(yǎng)4872小時(shí)，測(cè)定菌數(shù)。6.2.4.2供試品組：按試驗(yàn)組檢驗(yàn)方法（不加試驗(yàn)菌）測(cè)定供試品本底細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)，檢測(cè)細(xì)菌平皿培養(yǎng)72小時(shí)，檢測(cè)霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時(shí)，測(cè)定菌數(shù)。6.2.4.3菌液組：測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。6.2.4.4稀釋劑對(duì)照組：用相應(yīng)的稀釋液替代5%雙氧水，按試驗(yàn)組的制備方法和菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定菌數(shù)。6.2.4.5試驗(yàn)結(jié)果：結(jié)果見(jiàn)附件9細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)果記錄6.2.4.6結(jié)果判斷：稀釋劑對(duì)照組的菌回收率均應(yīng)不低于70%。若試驗(yàn)組的菌回收率均不低

11、于70%，則可按該供試液制備方法和計(jì)數(shù)法測(cè)定供試品的細(xì)菌、霉菌或酵母菌數(shù)；若任一次試驗(yàn)中試驗(yàn)組的菌回收率低于70%，需分析原因，采取適當(dāng)方法重新驗(yàn)證。注：試驗(yàn)組回收率（%）=（試驗(yàn)組平均菌落數(shù)-供試品對(duì)照組平均菌落數(shù)）菌液組平均菌落數(shù)100%稀釋劑對(duì)照組回收率（%）= 稀釋劑對(duì)照組平均菌落數(shù)菌液組平均菌落數(shù)100%6.2.4.7結(jié)果統(tǒng)計(jì) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)填寫(xiě)在附件9細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)果記錄7.偏差情況驗(yàn)證過(guò)程中如果有任何偏差應(yīng)及時(shí)記錄，分析原因，評(píng)價(jià)是否是關(guān)鍵偏差，并提出整改措施，并將偏差附于驗(yàn)證報(bào)告中。8.變更驗(yàn)證過(guò)程中是否有變更，如有變更在再驗(yàn)證報(bào)告中進(jìn)行說(shuō)明。9.驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)內(nèi)容對(duì)

12、驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，內(nèi)容包括但不限于：確認(rèn)實(shí)驗(yàn)是否有遺漏；確認(rèn)驗(yàn)證過(guò)程中是否有偏差，偏差是否已經(jīng)采取糾偏措施和預(yù)防措施；確認(rèn)記錄是否完整；是否需要進(jìn)一步補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)。評(píng)價(jià)必須以書(shū)面形式寫(xiě)出報(bào)告。附件1：培訓(xùn)確認(rèn)表培訓(xùn)確認(rèn)表培訓(xùn)人/培訓(xùn)日期培訓(xùn)對(duì)象部門(mén)職責(zé)簽名代珊QC確認(rèn)總協(xié)調(diào)工作，并審核確認(rèn)的數(shù)據(jù)彭艷妃QC監(jiān)督確認(rèn)過(guò)程實(shí)施及確認(rèn)過(guò)程中的偏差及OOS處理。辛海安QC負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告的起草，負(fù)責(zé)檢品的檢測(cè)與確認(rèn)記錄的填寫(xiě)，負(fù)責(zé)確認(rèn)數(shù)據(jù)的收集。黃微QC負(fù)責(zé)檢品的檢測(cè)與確認(rèn)記錄的填寫(xiě)。吳東丹QC劉利QC袁碧芳QC林明鳳QC吳東琴Q(mào)A負(fù)責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告的歸檔保存。監(jiān)督確認(rèn)過(guò)程實(shí)施及確認(rèn)過(guò)程中的偏

13、差及OOS處理。確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期： 3硫酸氫氯吡格雷片微生物限度檢查方法確認(rèn)編碼：R/QBV-11-T008-00頁(yè)碼：3/8附件2：文件檢查確認(rèn)表文件檢查確認(rèn)表SOP名稱(chēng)SOP編號(hào)是否已批準(zhǔn)消毒劑管理規(guī)程SOP-PR-007-V02是 否驗(yàn)證管理規(guī)程SOP-QA-017-V02是 否生測(cè)室管理規(guī)程SOP-QC-005-V01是 否微生物限度檢查法SOP-QC-0213-V01是 否培養(yǎng)基管理規(guī)程SOP-QC-017-V01是 否菌種管理規(guī)程SOP-QC-012-V02是 否XG1.D型脈動(dòng)真空滅菌柜使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-0343-V01是 否培養(yǎng)箱使用操作規(guī)程SO

14、P-QC-303-V00是 否電子天平使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-317-V01是 否潔凈工作臺(tái)使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 藥品保存箱使用及保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QC-0395-V00是 否評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期： 25%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗(yàn)證編碼：R/QBV-11-T016-00 頁(yè)碼：3/7附件3：設(shè)備確認(rèn)結(jié)果 設(shè)備確認(rèn)結(jié)果設(shè)備名稱(chēng)型 號(hào)生產(chǎn)廠(chǎng)家及出廠(chǎng)編號(hào)校準(zhǔn)有效期至驗(yàn)證編號(hào)霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0812240005)

15、霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(1005240001)生化培養(yǎng)箱SPX-300BS- II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0405011)電熱恒溫培養(yǎng)箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脈動(dòng)真空滅菌柜XG1.DTX-0.24山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20122024）脈動(dòng)真空滅菌柜XG1.DTX-0.36B山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司（J10060421）生物安全柜BSC-1300A2蘇州安泰空氣

16、技術(shù)有限公司（J10050341）電子天平GF-200日本AND(14678558)電子天平HF-200日本AND(12850048)評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA 復(fù)核人/日期：75%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗(yàn)證編碼：R/QBV-11-T016-00頁(yè)碼：7/7附件4：試驗(yàn)器材確認(rèn)結(jié)果試驗(yàn)器材確認(rèn)結(jié)果名稱(chēng)型 號(hào)來(lái) 源檢查項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果光學(xué)顯微鏡YS100Nikon各配件應(yīng)齊全，無(wú)損壞封閉式無(wú)菌檢查薄膜過(guò)濾器STV2、STV3型浙江寧海白石藥檢儀器廠(chǎng)完整，潔凈，無(wú)破損微孔濾膜孔徑0.45m，直徑50mm杭州高得泰林有限公司完整，無(wú)破損評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件5：試驗(yàn)用菌

17、種確認(rèn)結(jié)果試驗(yàn)用菌種確認(rèn)結(jié)果菌種名稱(chēng)及編號(hào)來(lái) 源保存方法及條件菌種代數(shù)（不得超過(guò)第五代）/形態(tài)特征金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中國(guó)藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28大腸埃希菌CMCC（B）44102中國(guó)藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中國(guó)藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28白色念珠菌CMCC（F）98001中國(guó)藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28黑曲霉CMCC（F）98003廣州市藥品檢驗(yàn)所培養(yǎng)基斜面28評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件6：培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)果培養(yǎng)基名稱(chēng)來(lái) 源檢查項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)批號(hào)/有效期至營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司1

18、.應(yīng)在有效期內(nèi)2.應(yīng)做適應(yīng)性檢查玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司1.應(yīng)在有效期內(nèi)2.應(yīng)做適應(yīng)性檢查評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件7：試劑確認(rèn)結(jié)果試劑確認(rèn)結(jié)果試劑名稱(chēng)規(guī)格來(lái) 源檢查項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)批號(hào)/有效期至pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液250g/瓶北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司應(yīng)在有效期內(nèi)氯化鈉500g/瓶廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)應(yīng)在有效期內(nèi)苯扎溴銨溶液（新潔爾滅溶液）500ml/瓶廣東恒健制藥有限公司應(yīng)在有效期內(nèi)洗必泰5kg/箱錦州九泰制藥有限責(zé)任公司應(yīng)在有效期內(nèi)吐溫80500ml/瓶天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng)應(yīng)在有效期內(nèi)雙氧水應(yīng)在有效期內(nèi)評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：附件8：器皿確認(rèn)結(jié)果器皿確認(rèn)結(jié)果容器名稱(chēng)規(guī)格型號(hào)檢查項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)檢查結(jié)果培養(yǎng)皿90mm潔凈，無(wú)破損燒杯1000ml、500ml潔凈，無(wú)破損試管18mm180mm、30 mm200mm潔凈，無(wú)破損刻度吸管10 ml 、5 ml2 ml、1ml潔凈，無(wú)破損量筒500ml、100ml潔凈，無(wú)破損應(yīng)校準(zhǔn)評(píng)價(jià)：確認(rèn)人/日期： QA復(fù)核人/日期：885%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗(yàn)證編碼：R/QBV-11-T016-00頁(yè)碼：8/7附件9：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)果記