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1、選修第二講 一、選擇題1(2013·蘇北八校聯(lián)考)微生物培養(yǎng)過(guò)程中,要十分重視無(wú)菌操作,現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無(wú)菌操作,防止雜菌污染,請(qǐng)分析下列操作中錯(cuò)誤的是()煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行無(wú)菌繁殖脫毒苗時(shí),植物的外植體要進(jìn)行消毒家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌ABC D解析:無(wú)菌操作包括消毒和滅菌。需進(jìn)行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等,需進(jìn)行滅菌的有器皿、培養(yǎng)基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢,屬于消毒;為防止空

2、氣中雜菌污染,接種時(shí)要在酒精燈火焰附近進(jìn)行;家庭制作葡萄酒時(shí)所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能滅菌;培養(yǎng)基常進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。故操作錯(cuò)誤。答案:D2用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)()可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌A BC D解析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基;平板劃線法采用接種針進(jìn)行操作,而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作;純化時(shí),要進(jìn)行無(wú)菌操作,需要在酒精燈火焰旁接種,以避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基;平板劃線法一般用于分離而不是用于計(jì)數(shù)。答案:C3下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

3、)成分NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4(CH2O)H2O青霉素含量3 g1 g0.5 g0.5 g0.01 g30 g1 000 mL0.1萬(wàn)單位A.依物理性質(zhì)劃分,該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B依用途劃分,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C培養(yǎng)基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3D若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌,則應(yīng)除去(CH2O),再添加纖維素解析:由于配方中沒(méi)有瓊脂,所以從物理性質(zhì)上劃分為液體培養(yǎng)基;由于配方中含有青霉素,對(duì)微生物有一定的篩選作用,所以從用途上劃分為選擇培養(yǎng)基;由于培養(yǎng)基中含有青霉素,纖維素分解菌不能生存,除去(CH2O)外,還應(yīng)除去青霉素

4、,同時(shí)添加纖維素和瓊脂。答案:D4(2012·全國(guó)高考)下列關(guān)于細(xì)菌的敘述,正確的是()A不同種類細(xì)菌的生長(zhǎng)均需要相同碳源B常用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落C細(xì)菌大量培養(yǎng)過(guò)程中,芽孢形成于細(xì)菌生長(zhǎng)的調(diào)整期D培養(yǎng)基中含有高濃度NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選解析:細(xì)菌所需的碳源與其新陳代謝的類型有關(guān);分離細(xì)菌單菌落時(shí)需要固體培養(yǎng)基;芽孢是細(xì)菌在不利環(huán)境中形成的休眠體,其在細(xì)菌衰亡期時(shí)大量形成;金黃色葡萄球菌能耐高濃度NaCl,因此高濃度NaCl的培養(yǎng)基可以篩選金黃色葡萄球菌。答案:D5(2012·北京高考)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)

5、是()A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上解析:在新鮮葡萄汁中加入酵母菌,控制無(wú)氧條件發(fā)酵時(shí)會(huì)產(chǎn)生酒精,酒精對(duì)其他雜菌有一定的抑制作用,因此不進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較??;日常將毛霉菌液接種在豆腐上進(jìn)行發(fā)酵,發(fā)酵時(shí)溫度為1518 ,不利于其他雜菌生長(zhǎng),同時(shí)腌制時(shí)加入食鹽和酒精也可以起到一定的抑制其他微生物的作用;轉(zhuǎn)基因植物接種過(guò)程中如果被微生物感染將無(wú)法獲得轉(zhuǎn)基因幼苗,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗;由于培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,可以抑制其他微生物的生長(zhǎng),所以不進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較小。答案

6、:C6下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述,其中錯(cuò)誤的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上C將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置,37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D確定對(duì)照組無(wú)菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析:采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。答案:D7分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是()A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B富集培養(yǎng)這一步可省略,但培養(yǎng)纖維素分解菌少C經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色D對(duì)照組可用同

7、樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上解析:經(jīng)選擇培養(yǎng)后,再經(jīng)稀釋,才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上;富集培養(yǎng)可省略;經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色;設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。答案:A二、非選擇題8(2011·新課標(biāo)全國(guó)卷)有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?;卮饐?wèn)題:(1)在篩選過(guò)程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即_和_。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周

8、圍分解圈的大小,分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。解析:(1)欲篩選出能高效降解原油的菌株,培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無(wú)其他碳源,這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存,這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)分離純化菌種時(shí),常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落,以便于純化菌種。(3)降解原油能力越強(qiáng)的菌株,在菌落周圍形成的分解圈越大。(4)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌(如接種環(huán))

9、、干熱滅菌(如培養(yǎng)皿)和高壓蒸汽滅菌(如培養(yǎng)基)等。無(wú)菌技術(shù)要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行,以避免周圍微生物的污染。答案:(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(qiáng)(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰9現(xiàn)在大力提倡無(wú)紙化辦公,但是每年仍然不可避免地產(chǎn)生大量的廢紙。廢紙的主要成分是木質(zhì)纖維,人類正努力將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源乙醇。如圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程,請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題:(1)自然界中環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在_的環(huán)境中。將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以_為唯一碳源并加入_的培養(yǎng)基上,篩選周圍有_的菌落。(2)在如上所述的篩選過(guò)程中獲得了三個(gè)菌落,對(duì)它

10、們分別培養(yǎng),并完成環(huán)節(jié),且三種等量酶液中酶的濃度相同,則你認(rèn)為三種酶液的活性_(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”),可以通過(guò)_進(jìn)行定量測(cè)定。(3)根據(jù)測(cè)定結(jié)果,環(huán)節(jié)常選擇木霉,則中獲得的酶是_酶。(4)生產(chǎn)中可以滿足環(huán)節(jié)的常見(jiàn)菌種是_,為了確保獲得產(chǎn)物乙醇,環(huán)節(jié)要注意_。(5)該技術(shù)雖然有廣闊的前景,但存在酶的成本高等問(wèn)題,為了降低成本可利用_等技術(shù)使酶能夠重復(fù)利用。解析:(1)富含纖維素的土壤中,含有大量以纖維素為碳源的纖維素分解菌。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素分解后,復(fù)合物無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過(guò)此方法來(lái)篩選纖維素分解菌。(2)酶液中蛋白質(zhì)的濃度相同,酶的活性不一定相同,可通過(guò)分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖量是否相等來(lái)鑒定其活性是否相同。(3)木霉能產(chǎn)生纖維素酶,可以將纖維素分解。(4)在酒精發(fā)酵中常用的微生物是酵母菌,在接種過(guò)程中一定要避免

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