新TPSA方法學(xué)驗證報告

1、正確度驗證試驗數(shù)據(jù)記錄表總前列腺特異性抗原TPSA僉測系統(tǒng)/方法的分析性能驗證評價驗證的內(nèi)容：正確度、精密度、線性范圍的確認(rèn)、可報告范圍的驗證、干擾物質(zhì)及參考區(qū)間的確認(rèn)驗證人員：王愛林 馬力 張衛(wèi) 李琳一、檢測系統(tǒng)信息項目：TPSA義器名稱 全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀儀器型號Cobas e601試劑及廠商：德國羅氏診斷有限公司檢測方法：雙抗體夾心法廠商提供的相關(guān)參數(shù)需驗證參數(shù)）商參數(shù)驗證結(jié)果分析靈敏度0.003 ng/ml沿用廠家試劑說明書線性范圍0.1-50 ng/ml0.0288.80ng/ml可報告范圍0.1-50 ng/ml0.02-97.68ng/ml。參考區(qū)間0-4 ng/ml已驗

2、證三、驗證過程1、正確度：目的：評價儀器測量結(jié)果與真值的一致程度。 通過實驗室檢測數(shù)據(jù)的 偏倚從而評價和驗證實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。評價方法：參加衛(wèi)生部臨檢中心的室間質(zhì)評， 本組參加室間質(zhì)評的項 目一律用回報結(jié)果作為評價標(biāo)準(zhǔn)，最近一次參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評項目名稱/單位前列腺特異性抗原(TPSA) / ng/ml檢測設(shè)備/編號Roche E601/103檢測試劑/批號Roche 試劑/161439校準(zhǔn)品/批號Roche 校準(zhǔn)品/158270質(zhì)控品/批號Roche 質(zhì)控品（PC TM）/158274檢測方法雙抗體夾心法最次參加的衛(wèi)生部室間質(zhì)評回報日期：樣本 編號我室 結(jié)果靶值PT允許范 圍PT得分與

3、靶值 偏倚VIS允計范圍VIS得分2011113.83.83.0-4.6100%0.00-20111142.541.633.3-49.5100%2.16-20111130.930.124.1-36.1100%2.66-20111115.014.311.4-17.2100%4.9-2011112.52.52.0-3.0100%0.00-判斷標(biāo)準(zhǔn)：1/2CV總誤差：12.5%止確度驗證結(jié)果：滿足要求口不滿足要求結(jié)論：Cobas e 601分析檢測系統(tǒng)所檢測的項目TPSA正確度在允許 范圍內(nèi)，保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可以滿足臨床需求。統(tǒng)懵h統(tǒng)計日期：2 精密度(Precision)批內(nèi)精密度目的：考察

4、儀器檢測方法的隨機誤差原理：在檢測系統(tǒng)處于優(yōu)良的條件下，連續(xù)測定 20個結(jié)果，判斷這20個獨立結(jié)果間的一致程度。方法：選擇新鮮混合血清標(biāo)本（病人高值、低值） 20份，測量前先定標(biāo)，再做質(zhì)控，質(zhì)控結(jié)果在控制范圍內(nèi)，連續(xù)重復(fù)測定 10 次，測量結(jié)束后再做質(zhì)控，質(zhì)控結(jié)果在控制范圍內(nèi)，計算 SD, CM得到批內(nèi)精密度。標(biāo)本來源：高低值標(biāo)本均為混合血清結(jié)果：本室TPSA批內(nèi)精密度低值 CV為：1.4% 高值CV為：1.3% 結(jié)果判斷方式：依據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)的總誤差（CV總誤差）為評判標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)性精密度驗證試驗數(shù)據(jù)記錄表項目名稱/單位前列腺特異性抗原（TPSA） / u/nl檢測設(shè)備/編

5、號Roche E601/103檢測試劑/批號Roche 試劑J/161439校準(zhǔn)品/批號Roche 校準(zhǔn)品/158270質(zhì)控品/批號Roche 質(zhì)控品（PC TM）/158274檢測方法雙抗體夾心法重復(fù)性精密度數(shù)據(jù)低值樣本條碼號：混合樣本高值樣本條碼號：混合樣本測定 次數(shù)測定 結(jié)果測定 次數(shù)測定 結(jié)果測定 次數(shù)測定 結(jié)果測定 次數(shù)測定 結(jié)果11.24111.23116.911117.3421.26121.26217.561217.0531.23131.25317.061317.3241.28141.27417.391416.9051.23151.24516.971517.3561.27161.

6、26617.131617.0871.23171.23717.241717.5681.28181.27817.121816.8791.24191.25917.531917.34101.27201.271016.942016.93低濃度均值：1.25標(biāo)準(zhǔn)差：0.02變異系數(shù)：1.4%局濃度均值：17.18標(biāo)準(zhǔn)差：0.23變異系數(shù)：1.3%判斷標(biāo)準(zhǔn)：1/4CV總誤差：6.25%重復(fù)性精密度驗證結(jié)果：滿足要求口/、滿足要求結(jié)論：本室所檢測項目TPSA低值、高值重復(fù)性精密度均在允許范圍內(nèi)，可接 受。檢測者：王宏林、李琳檢測日期：2011-07審核者：審核日期：日間精密度：目的：考察目前實驗室檢測方法批間

7、精密度原理：在檢測系統(tǒng)處于優(yōu)良的條件下，連續(xù)測定 20天，取得20個結(jié)果，判斷這20個獨立結(jié)果間的一致程度。方法：新鮮混合血清（高值、低值）分裝 20份冷凍，每天取兩份隨標(biāo)本連續(xù)測定10天，測定前定標(biāo)做質(zhì)控，測定結(jié)束做質(zhì)控，且結(jié)果在控制范圍內(nèi)，計算 CV, SD,得到日間精密度。結(jié)果：本室TPSA日間精密度平均低值 CV: 2.3%平均高值CV :2.2%結(jié)果判斷方式：依據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)的總誤差（CV總誤差）為評判標(biāo)準(zhǔn)日間精密度驗證試驗數(shù)據(jù)記錄表3 線性范圍(Linearity range,AMR )項目名稱/單位前列腺特異性抗原（TPSA） /ng/ml檢測設(shè)備/編號Ro

8、chej E601/103檢測試劑/批號Roche 試劑/161439校準(zhǔn)品/批號Roche 校準(zhǔn)品/158270質(zhì)控品/批號Roche 質(zhì)控品(PC TM)/158274檢測方法雙抗體夾心法低值質(zhì)控品批號：混合樣本高值質(zhì)控品批號：混合樣本測定 天數(shù)測定 結(jié)果測定 天數(shù)測定 結(jié)果測定 天數(shù)測定 結(jié)果測定 天數(shù)測定 結(jié)果11.49111.46112.431112.8221.50121.48212.581212.4631.44131.45312.321312.5341.46141.48412.471412.6451.52151.48512.381512.8661.47161.42611.95161

9、2.5271.42171.46712.261712.0681.38181.48812.181811.9791.44191.43912.441912.28101.46201.411012.02012.04低濃度均值：0.46標(biāo)準(zhǔn)差：0.03變異系戮：2.3%高濃度均值：12.36標(biāo)準(zhǔn)差：0.27變異系數(shù):2.2 %判斷標(biāo)準(zhǔn)：1/3CV總誤差:8.33%日間精密度驗證結(jié)果:滿足要求口/、滿足要求結(jié)論：本室所檢測項目TPSA低值、高值日間精密度均在允許范圍內(nèi)0檢測者王友林、李琳檢測日期：審核者審核日期：目的：在確定某項目檢測上限的同時檢測其上下限是否呈線性關(guān)系,從而保證該濃度范圍檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。標(biāo)

10、本要求：高值標(biāo)本可使用病人混合血清。一般地樣本的高值推薦在 AMR上限的90%,低值推薦在AMRF限的10%,但這不是絕對的規(guī) 則。最好有5個或以上的系列濃度的實驗樣品，數(shù)據(jù)點數(shù)不得低于4個，濃度范圍遍布整個預(yù)期可報告范圍。方法：a）以50ul為一個體積單位，將高值標(biāo)本與低值標(biāo)本以 3: 1、2: 2、1: 3的體積比例混合，加上高低值標(biāo)本共 5個標(biāo)本按照由低到高 測定，記錄結(jié)果。b）線性統(tǒng)計：以直接測定結(jié)果計算得出的相應(yīng)濃度為X,以通過稀釋測定結(jié)果為Y,回歸方法學(xué)統(tǒng)計，得到a、b及值。c）結(jié)果判斷：若b在0.97-1.03范圍內(nèi)，r2>0.95,作a與0有無顯著性差異的t檢驗，如果P&

11、gt;0.05,則可直接判斷線性范圍在實驗已涉及濃度。若b不在0.97-1.03范圍內(nèi)，a較大，舍去高值或低值組數(shù)據(jù)，另 做回歸統(tǒng)計，直至縮小的分析范圍其回歸方程的a和b的判斷符合 要求，則該范圍為線性范圍。線性范圍驗證試驗數(shù)據(jù)記錄表項目名稱/單位前列腺特異性抗原（TPSA） / ng/ml檢測設(shè)備/編號Roche E601/103檢測試劑/批Roche 試齊 iJ/161439校準(zhǔn)品/批號Roche 校準(zhǔn)品/158270質(zhì)控品/批號Roche 質(zhì)控品（PC TM）/158274檢測方法雙抗體夾心法廠家聲明線性范圍：0120 ng/ml ,線性方程：Y=bX+a , R2>0.95樣本編

12、配制比測定值1測定值2測定均預(yù)期值差值4L3L+1H2L+2HL+3H4H0.020.020.020.0223.2346.1268.2388.7924.6623.9522.221.7347.5246.8244.412.4169.1168.6766.602.0788.8188.8088.801.174線性回歸平均斜采用線性回歸，以預(yù)期值為X,以按比例稀釋的實測均值為 Y,得線性方程:Y=1.0015X+1.174線性回歸散點圖:y = 1.0015x + 1.174R = 0.9989計算每一稀釋度測定均值和預(yù)期值的差值。以預(yù)期值為橫軸，差值為縱軸, 制作線性差異圖。線性差異圖回歸方程：Y=1.

13、0015X+1.174b在 0.97-1.03范圍內(nèi) Ub不在 0.97-1.03范圍內(nèi)a的P值：0.3395 a與0無顯著性差異Ua與0有顯著性差異R2: 0.9985BR2>0.95口R2V0.95直線回歸方程是否可接受可接受口不可接受線性范圍延伸：在直線回歸方程可接受基礎(chǔ)上，如果驗證的線性范圍小于廠家申明的線性范圍，將驗證的上限擴展為（上限 +上限*10%）,驗證下限擴展為（下 限-下限*90%）;若驗證上限超出廠家聲明上限，以廠家線性范圍為準(zhǔn)，若沒有超出廠家聲明上限，以自行驗證為準(zhǔn)；擴展后的線性范圍：0.02-97.68ng/ml。結(jié)論：在標(biāo)本狀態(tài)良好無干擾的情況下，已驗證TPS

14、A測定結(jié)果在0.0288.80ng/ml范圍內(nèi)呈線性，進行線性范圍延伸后，可使用的線性范圍為0.02-97.68ng/ml。檢測者：李琳王友林檢測日期：審核者：審核日期：4 臨床可報告范圍(Clinical reportable range ,CRR )目的：分析各稀釋濃度的線性關(guān)系，確定最高稀釋倍數(shù)，從而確保高值樣本報告的準(zhǔn)確性。原理： 未經(jīng)過任何處理的病人檢驗標(biāo)本，通過檢測系統(tǒng)檢測得到的可靠結(jié)果范圍。方法；本實驗室制定的PSA的可報告范圍(CRR)沿用項目的檢出限 范圍，以滿足臨床需求，不予以驗證5 分析靈敏度(Analytical Sensitivity ) :直接引用羅氏試劑說明書上提

15、供的分析靈敏度：0.600 U/ml6 干擾物質(zhì)干擾物質(zhì)對本項目的影響大小沿用廠商參數(shù)，詳細(xì)內(nèi)容見本項目SOP。7 參考區(qū)間(Reference intervals ) :目的：選擇20 份體檢合格的健康人標(biāo)本，在檢測系統(tǒng)上進行測定，對結(jié)果進行統(tǒng)計并與儀器說明書提供的參考區(qū)間進行比較。原理：收集20 例正常健康人血清標(biāo)本及時檢測，要求其年齡，性別等均勻分布，對參考范圍進行驗證，只允許10%的數(shù)據(jù)超過所驗證的參考范圍，否則需建立參考范圍。驗證范圍：0-4ng/ml方法：PSA標(biāo)本的要求1、 體檢合格健康的篩選者2、 脂血、溶血均勿用3、 禁止在臨床檢查(肛診，尿道插管等)之后檢驗4、結(jié)果：統(tǒng)計方

16、式R=測定的結(jié)果在參考范圍例數(shù)A 90%即合格總測定例數(shù)生物參考區(qū)間數(shù)據(jù)及驗證記錄表項目名稱/單位總前列腺特異性抗原（TPSA）/ng/ml檢測設(shè)備/編號Roche E601/103檢測試劑/批號Roche 試劑/159299校準(zhǔn)品/批號Roche 校準(zhǔn)品/161204質(zhì)控品/批號Roche 質(zhì)控品（PC TM）/158274檢測方法雙抗體夾心法試劑說明書提供參考范圍：0-4ng/ml各編號樣本測定情況J*六 丁 P條形碼號性別年齡（歲）測定結(jié)果11004419335男321.0821004419199男560.81331004419509男561.0341004419967男371.1951

17、004419659男360.34761004419284男541.1171004420811男780.69781004419236:男551.1891004419408男610.779101004419775男361.21111004419852男370.464121004419839男411.01131004419209男403.90141004419280男590.340151004427258男500.645161004427438男560.975171004427309男450.876181004380611男401.08191004429415男700.807201004430111男391.04結(jié)果判斷