PCR項目及臨床意義

1、PCR檢驗室常規(guī)項目簡介序號種類檢測項目定量/定性簡稱取樣1RNA艾滋病毒定量HIV血清、抗凝全血2DNA乙肝病毒定量/定性HBV血清、抗凝全血3RNA丙肝病毒定量/定性HCV血清、抗凝全血4DNA結(jié)核桿菌定性TB痰液、胸腹水5DNA人乳頭瘤病毒定性/分型HPV分泌物拭子、病損組織6DNA淋球菌定性NG分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）7DNA沙眼衣原體定性CT分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）8DNA解脲脲原體定性UU分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）9RNA甲型流感病毒定性-咽部拭子、肺灌洗液10RNA乙型流感病毒定性-咽部拭子、肺灌洗液11DNA肺炎支原體定性MP咽部拭子、肺灌洗液12DNA單

2、純皰疹病毒定性HSV分泌物拭子、皮損組織精品13DNA巨細胞病毒定量/定性CMV血清、血漿或尿液14DNA梅毒螺旋體定性TP皮損刮出液、抗凝全血15DNAEB病毒定性EB分泌物拭子、組織等16DNA幽門螺旋桿菌定性HP口腔含漱液、胃粘膜17RNA腸道病毒71定性EV71大便樣本等18RNA柯薩奇病毒A16定性CA16大便樣本等1. 乙型HBV-DNA定量HBV-DNA定量檢測方法的出現(xiàn)從根本上突破了免疫學方法間接檢測的局限性， 通過直接檢測病毒的核酸水平真實地反映病毒的情況從而對于HBV的準確診斷、有效治療、精確預后及新藥研制等各個方面具有重大意義：1）判斷疾病的嚴重程度和傳染性。HBV-DN

3、A是直接反映HBV復制狀態(tài)及傳染 性的最佳指標。2） PCR定量結(jié)果與血清免疫學結(jié)果的綜合評價。采用FQ-PCR定量檢測乙肝病 毒DNA，結(jié)合“二對半”檢測結(jié)果，對于機體乙肝病毒感染狀態(tài)尤其變異株發(fā) 生和病人預后的評估更為科學。3） 觀察抗病毒藥物療效，指導藥物用量。直接檢測血清中的 HBV-DNA是監(jiān)控 HBV傳染和觀察抗病毒藥物療效的最可靠的方法。根據(jù)2000拉米夫定臨床應 用指導意見中國慢性乙型肝炎病人治療的目的之一就是要降低血清 HBV-DNA。同時血清HBV-DNA滴度的動態(tài)變化還可在臨床上對用藥的劑量、用藥時間是否需要聯(lián)合用藥以及用藥的效果等提供參考。4）獻血員窗口期病毒核酸的篩查

4、及早期診斷。 HBsAg 在血清中的檢出通常在乙 肝病毒感染后的 2 4月出現(xiàn)，平均為 56天左右。而 HBV-DNA 的檢出可以將該 所謂窗口期提前6-15天，對于早期診斷和提高輸血安全有著重要的意義。5）預測病情、判斷預后。通常 HBV-DNA 持續(xù)陽性超過 6 個月的會轉(zhuǎn)為慢性肝 炎?？? HBe 陽性患者血清 HBV-DNA 持續(xù)陽性常提示肝損嚴重。6）對阻斷母嬰傳播的監(jiān)測。聯(lián)合應用高價免疫球蛋白和乙肝疫苗有效地阻斷母 嬰傳播，但仍有 5-10%嬰兒對疫苗呈低反應，熒光定量 PCR 可對此進行監(jiān)測。7）器官移植中的作用。肝臟器官移植是目前肝硬化晚期治療的唯一方法，定量 檢測 HBV-D

5、NA 為肝移植術(shù)后的跟蹤觀測具有較好的臨床價值。乙肝病毒定量相關(guān)檢測還有：乙肝標志物定性， 乙肝標志物定量， 乙型 HBV-DNA定量，肝臟功能檢測。2. 乙型 HBV-DNA 定性HBV-DNA 是乙肝病毒基因，其有無、多少是乙肝病毒存在及有無復制能力的直 接標志。 早期診斷乙肝病毒感染的直接證據(jù)， 提高乙肝病毒檢測的陽性率， 用于 乙肝病毒治病機理的研究，作為乙肝病毒分子流行病學研究。乙肝病毒相關(guān)檢測還有：乙肝標志物定性，乙肝標志物定量，乙型 HBV-DNA 定量，肝臟功能檢測。3. 丙肝病毒 RNA 定量HCV RNA 定量檢測有助于預測、 監(jiān)測抗病毒治療的效果， HCV 病毒核酸的定量

6、 檢測在一定程度上能反應肝臟炎癥活動程度， 分析抗病毒治療后 HCV RNA 血清 水平有助于總結(jié)抗病毒制劑的療效，為調(diào)整劑量、確定療程提供依據(jù)。 丙肝病毒相關(guān)檢測還有：丙肝抗體檢測，肝臟功能檢測。4. 結(jié)核桿菌 DNA 定性根據(jù)臨床表現(xiàn)， 常規(guī)痰涂片或分離培養(yǎng)對某些結(jié)核病人可能造成誤診或漏診。 熒 光PCR理論上可檢出一個結(jié)核桿菌，特異性好，且時間短至1-2小時即可出報告。 可以對結(jié)核病人早期診斷， 可以鑒別診斷肺結(jié)核和肺癌。 作為抗癆治療的療效評 價；結(jié)核病的分子流行病學研究。結(jié)核桿菌的相關(guān)檢測還有：結(jié)核抗體檢測， ADA ，結(jié)核桿菌芯片檢測，抗酸染 色， OT 試驗， PPD 試驗，放免

7、分析，結(jié)核培養(yǎng)。5. HPV 基因分型宮頸癌是人類所有癌癥中唯一病因明確的癌癥， 即人乳頭瘤病毒的感染是宮頸癌 發(fā)生的必要條件和主要病因， 99.7%的宮頸癌患者都能發(fā)現(xiàn)高危型 HPV 感染，從 HPV 感染到宮頸癌的發(fā)生需要經(jīng)過多年甚至數(shù)十年的時間，這為宮頸癌篩查指 明了方向。因此早期定期進行 HPV 感染的篩查，對預警癌變傾向，及時發(fā)現(xiàn)、 預防和早期診斷及臨床治療具有非常重要的意義。相關(guān)檢查項目：組織原位雜交，基因芯片技術(shù)，液基細胞學試驗6. 乳頭瘤病毒 DNA 定性 HPV16，18 病毒 DNA 通常整合到人基因中，可能是宮頸癌的啟動癌基因，對于 婦產(chǎn)科的防癌普查有指導意義，而 HPV

8、6.11 ?？烧T發(fā)良性濕疣或?qū)m頸糜爛。因 此，HPV的檢查非常重要。相關(guān)檢查項目：組織原位雜交，基因芯片技術(shù)，液基細胞學試驗。7. 梅毒螺旋體 DNA 定性FQ-PCR檢測人體不同來源標本中TP-DNA的結(jié)果，實際上是反映了梅毒螺旋體 在這些部位的載量及其消長規(guī)律。梅毒血清學檢查比如 RPR、TPPA，是診斷各 期梅毒最常用的實驗室檢查手段，但其陽性結(jié)果不代表體內(nèi)有活的 TP 存在。 相關(guān)檢查項目： RPR、 TPPA、 TPHA8. 淋球菌 DNA 定性 傳統(tǒng)的涂片、培養(yǎng)等方法，靈敏度不高，女性病人檢出率僅 50%淋球菌感染，男 性可發(fā)生尿道炎。 女性可引起尿道炎及子宮頸炎。 不經(jīng)治療或治療

9、不徹底， 可致 慢性感染。 胎兒經(jīng)產(chǎn)道時， 可感染淋病性急性結(jié)膜炎。 因此，在淋病的早期診斷， 對該病有重大意義。淋球菌相關(guān)檢查項目：淋球菌培養(yǎng)，涂片革蘭氏染色，基因探針技術(shù)。9. 沙眼衣原體 DNA 定性 非淋球菌感染的尿道炎、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、急性輸卵管炎及盆腔炎，有超過 50%是由沙眼衣原體感染所致，同時可引起不孕不育。因此，在婦產(chǎn)科和男性生殖泌尿科，同時檢測UU和CT很有必要?？芍律逞邸⒊扇撕托律鷥喊w結(jié)膜 炎。沙眼衣原體相關(guān)檢查項目：細胞培養(yǎng)，免疫熒光法，沙眼衣原體抗體檢測。10. 解脲支原體 DNA 定性解脲支原體在非淋球菌性尿道炎中， 有 50%是由本病引起的。 如果孕婦生殖

10、道帶 有解脲支原體， 可通過胎盤感染胎兒引起早產(chǎn)、 死胎，分娩時可引起新生兒呼吸 道感染。另外還可導致不孕不育。 因此，婦產(chǎn)科普查解脲支原體有很重要的意義。 相關(guān)檢查項目： 解脲支原體培養(yǎng)， 解脲支原體抗體 ,生長抑制試驗 ,代謝抑制試驗。11. EB 病毒 DNA 定性EB 病毒屬于皰疹病毒，可引起增殖性感染和非增殖性感染。特別是非增殖性感 染，可導致細胞癌變。被認為與傳染性單核細胞增多癥。淋巴癌、胃咽癌、何杰 金氏癌、慢性疲勞綜合癥有關(guān)。相關(guān)檢查項目： EB 病毒特異性抗體或異嗜性抗體凝集試驗。12. 單純皰疹病毒 DNA 定性HSV-1 型：主要侵犯口、唇的皮膚黏膜，可引起腦炎，偶爾可見

11、于外生殖系統(tǒng)。HSV-2 型：一般與外生殖系感染和新生兒感染有關(guān)?？梢鹋K器的病變（包括腦 炎）偶見于口腔病變。相關(guān)檢查項目：單純皰疹病毒抗體檢測。13. 肺炎支原體 DNA 定性 肺炎支原體是原發(fā)性非典型肺炎和急性呼吸道感染的病原體， 尤其是兒童和青少 年中常見。常在軍營和中小學生中流行。每隔 3-5 年流行一次。許多患者癥狀較 輕，只有頭疼、發(fā)熱、咳嗽等呼吸道癥狀，也有個別引起死亡的報道。有時合并中耳炎、心血管、 神經(jīng)癥狀和皮疹。 肺炎支原體感染是在治療上與其它微生物感染是治療不盡相同，為避免濫用抗生素， 應早期、快速、準確的檢測肺炎支原體。相關(guān)檢查項目：肺炎支原體抗體檢測；補體結(jié)合試驗；肺炎支原體培養(yǎng)。14. 幽門螺旋桿菌 DNA 定性幽門螺桿菌感染是慢性活動性胃炎、 消化性潰瘍、 胃黏膜相關(guān)淋巴組織 (MALT ) 淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。 1994 年世界衛(wèi)生組織 / 國際癌癥研究機構(gòu)(WHO/IARC )將幽門螺桿菌定為I類致癌原?，F(xiàn)在 PCR可通過鼻胃管收集 5ml胃液作PCR檢測。采用膠囊包裹的尼龍線取胃液標本的方法， 使這一診斷性