細胞試驗室管理規(guī)定

1、細胞培養(yǎng)室管理規(guī)定1.本細胞培養(yǎng)室是進行各種細胞培養(yǎng)的凈化級實驗室， 所有進入實驗室的人員 都必須遵守實驗室有關的規(guī)章制度，按培養(yǎng)室管理規(guī)定操作。2.實驗人員進入該實驗室進行實驗工作時，必須更換、穿戴好工作服、鞋、帽、 口罩。有關細胞培養(yǎng)的操作均在超凈臺上進行，嚴格按無菌程序操作。3.嚴禁將與實驗無關的易燃、易爆及其他有毒有害物品帶入實驗室；在本實驗 室內不得進行微生物等其它易污染物的培養(yǎng)。4.實驗人員在進行實驗前必須熟悉實驗內容、 操作步驟及各類儀器的性能和操 作方法，嚴格執(zhí)行操作規(guī)程，并做好必要的安全防護。5.培養(yǎng)實驗所用試劑專人專用，以防止交叉污染。6.實驗室中的昂貴設備，未經許可，不得

2、擅自開關。精密儀器必須經過專門培 訓方能上機操作，并嚴格遵守操作規(guī)程。7.使用儀器前認真閱讀“操作規(guī)程”，并嚴格按“操作規(guī)程”進行操作，實驗 人員必須按規(guī)定的主要儀器參數(shù)進行操作，未經許可，不得隨意更改有關儀 器設備的技術參數(shù)，儀器設備出現(xiàn)故障或發(fā)生事故，應立即報告。8.進行無菌操作前，應用 75%酒精消毒桌面，打開無菌室、超凈工作臺及緩沖 間的紫外燈，以紫外線照射至少 30 分鐘，然后打開無菌室和超凈工作臺的 空氣過濾器，凈化 20 分鐘后再進入。9.每次實驗結束后，應及時清理桌面、臺面、地面，整理好用過的實驗器材，用 1%。的新潔爾滅溶液或 75%酒精擦臺面。觀察培養(yǎng)箱中 C02 的濃度、

3、溫 度、供氣壓力等參數(shù)，待正常后方可離開。實驗區(qū)用紫外線照射30 分鐘，并做好記錄。將廢棄物品帶出操作間。出門前注意關閉酒精燈、照明燈，超 凈臺。10. 進入細胞室的實驗人員必須遵守清潔衛(wèi)生值日安排。嚴禁隨意反復進出培養(yǎng) 室。每周做全面清潔消毒一次，超凈臺上濾網(wǎng)需每月清洗一次。在確認無菌 室無人后方可開紫外燈殺菌。11. 愛護實驗室公共財物；節(jié)約使用常規(guī)實驗耗材、節(jié)約用電；注意防火防盜，杜絕一切可能導致火災的行為。12. 實驗室的安全門是用來搬動大型儀器和處置緊急情況的通道，非緊急情況不 得隨意開啟安全門；如發(fā)生火警、氣體泄漏、漏電等緊急情況，室內人員應 迅速通過安全門離開實驗室。13. 嚴禁

4、在實驗室內吸煙和進餐；實驗過程中嚴禁喧嘩、閑聊。14. 本制度自公布之日起生效，解釋權歸實驗室。實驗室操作規(guī)范1.規(guī)定凈化系統(tǒng)使運轉時間要求每次實驗前應開啟凈化系統(tǒng)使運轉至少1 小時以上，同時開啟凈化臺和紫外燈。2.物品進入潔凈室（無菌室）基本要求：凡進入潔凈室（無菌室）的物品必須 先在第一緩沖間內對外部表面用消毒劑消毒滅菌，再經物流緩沖間、傳遞窗1 小時以上，及無菌空氣吹干后送入無菌室。注意帶纖維、易 發(fā)塵物品不得帶進凈化實驗室。無菌室內固定物品不得任意搬出。3.人員進入潔凈室（無菌室）要求：實驗人員進入潔凈室（無菌室）不得化妝、 帶手表、戒指等首飾;不得吃東西、嚼口香糖。應清潔手后進入第一

5、緩沖間更 衣，同時換上消毒隔離拖鞋，脫去外衣，用消毒液消毒雙手后戴上無菌手套， 換上無菌連衣帽（不得讓頭發(fā)、衣等暴露在外面），戴上無菌口罩。然后， 換或是再戴上第二副無菌手套，在進入第二緩沖間時換第二雙消毒隔離拖鞋。 再經風淋室 30 S風淋后進入無菌室。4.溫濕度觀察要求：觀察溫度計、濕度計上顯示的溫濕度是否在規(guī)定的范圍內， 并作為實驗原始數(shù)據(jù)記錄在案。如發(fā)現(xiàn)問題應及時尋找原因，及時報修和及 時報告實驗室主管，并將報修原因和結果記錄歸檔。5.沉降菌落計數(shù)與浮游菌測定要求：在每次實驗同時，對操作室和層流臺做微 生物沉降菌落計數(shù)，將結果記錄在使用登記本上，并作為實驗環(huán)境原始數(shù)據(jù) 記錄在實驗報告上

6、。每周 1 次，或在無菌檢查等必要時，在每次實驗同時對 操作室和凈化臺進行浮游菌測定，將結果記錄在使用登記本上，并作為實驗 環(huán)境原始數(shù)據(jù)記錄在實驗報告上。6.消毒要求：無菌室每周和每次操作前用 0.1%新潔爾滅或 2%甲酚液或其他適 宜消毒液（常用消毒劑的品種有：520 倍稀釋的碘伏水溶液、0.1%新潔爾 滅溶液、1 :50 的 84 消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（來 蘇兒）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（配方：對羥基苯甲 酸甲酯 21.5 g；對羥基苯甲酸丙酯 8.6 g, 75%乙醇 10 ml）等，所用的消毒 劑品種與使用要進行有效性驗證方可使用，并定期

7、更換消毒劑的品種）擦拭 操作臺及可能污染的死角，方法是用無菌紗布浸漬消毒溶液清潔超凈臺的整個內表面、頂面、及無菌室、人流、物流、緩沖間的地板、傳遞窗、門把手。 清潔消毒程序應從內向外，從高潔凈區(qū)到低潔凈區(qū)。逐步向外退出潔凈區(qū)域。然后開啟無菌空氣過濾器及紫外燈殺菌 12 小時，以殺滅存留微生物。在每 次操作完畢，同樣用上述消毒溶液擦拭工作臺面，除去室內濕氣，用紫外燈 殺菌 30 分鐘。7.其他要求：如遇停電，應立即停止實驗，離開無菌室。關閉所有電閘。重新 進入無菌室前至少開啟機房運轉 1h 以上。安全制度1.進入實驗室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。2.在進行高壓、干燥、消毒等工作時，工作人員不得擅自離現(xiàn)場，認真觀察溫 度、時間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時，不準直接加熱，應置水浴鍋上進行， 試驗過程中如產生毒氣時應在避毒柜內操作。3.嚴禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作進行，如發(fā)生菌液、病原體濺出 容器外時，應立即用有效消毒劑進行徹底消毒，安全處理后方可離開現(xiàn)場。4.工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時可用新潔