三波長紫外分光光度法測定紅車軸草異黃酮含量的研究

1、 流速為ml/min其保留時間為10.9m i n1000峰面積與氯霉素濃度呈良好的線性關(guān)系(r 2=0.9994g/g精密度(RSD小于5%發(fā)現(xiàn)在本檢出水平下被檢的幾種魚和蝦樣品大多含有氯霉素檢測結(jié)果表明氯霉素殘留超標問題仍相當嚴重1D'AoustJ -Y.S almonellaa ndt hei nternationalf oodt radeJ.IntJFoodMicrobiol,1994,24:11-31.2MasahikoTakino,ShigekiDaishima,TaketoshiNakahara金征宇(江南大學食品學院紅車軸草乙醇提取液背景吸收較大色素和醇溶性蛋白等雜質(zhì)干

2、擾嚴重能有效扣除色素和醇溶性蛋白等雜質(zhì)的干擾平均加樣回收率為103.95%本方法具有簡便準確等特點紅車軸草異黃酮三波長紫外分光光度法StudyonDeterminationofTrifoliumpratense IsoflavonesbyThree-wavelengthUVSpectrophotometryCHENHan-qingThree-wavelengthUVspectrophotometrywasestablishedtodeterminethecontentoftotalisoflavonesinTrifoliumpratense.Thismethodcouldeliminatein

3、terferenceofpigmentsandethanol-solubleproteinsintheethanolextractofTrifolium pratense .Therelativestandarddeviation(RSDofprecisiontestwas0.85%,theaveragerecoveryofaddingsampletestwas103.95%andRSDwas1.82%.Itwasasimple,fastandaccuratemethodfordeterminationofTrifoliumpratenseisoflavones.Keywordsdetermi

4、nationR282.71文獻標識碼1002-6630(200505-0194-04收稿日期陳寒青(1970-講師研究方向為天然活性物質(zhì)的研究與開發(fā)又名紅三葉紅菽草金雀菜屬車軸草屬(TrifoliumL.1蛋白質(zhì)糖類和維 ÆäÖÐÒì»ÆͪÒò¾ßÓиÄÉƸ¾Å®¸üÄêÆÚ×

5、19;ºÏÖ¢ÌرðÊǽµµÍ³±Èȵķ¢²¡ÂÊ25 7胃癌9改善動脈血管的柔順性12 拓撲異構(gòu)酶14 3-羥基甾醇脫氫酶15活性等多種生理功能而格外受人關(guān)注目前國外多采用高效液相色譜法16高效液相色譜法雖然能測定紅車軸草中各種異黃酮的含量設備運行費用較高紫外分光光度法由于所用儀器簡單準確度高用乙醇從紅車軸草中提取異黃酮時提取液

6、屬多組分混合體系由于這些雜質(zhì)的存在雜質(zhì)將嚴重干擾異黃酮含量的測定三波長分光光度法是在1980年提出的250分光光度計上采用而成為一種新方法20目前國內(nèi)鞠興榮等(200123首次采用三波長紫外分光光度法測定大豆異黃酮含量油脂等干擾物質(zhì)以及吸收峰不對稱給定量分析造成的影響有效地扣除色素和醇溶性蛋白等雜質(zhì)的干擾目前國內(nèi)外還沒有簡易的定量方法然后分別在紫外范圍內(nèi)掃描用作圖法確定三波長的組合可以最大限度地消除紅車軸草異黃酮提取液中其它雜質(zhì)對異黃酮測定的干擾1材料與方法1.1實驗原料紅車軸草產(chǎn)于湖北恩施將紅車軸草曬干粉碎機篩孔直徑為0.6m m上海振興試劑廠中國醫(yī)藥集團上?；瘜W試劑公司中國醫(yī)藥集團上海化學

7、試劑公司青島海洋化工有限公司純度97%紅車軸草異黃酮提取液干物質(zhì)由本實驗室自制ZF-90型暗箱式紫外透射儀上海顧村電光儀器廠3000紫外可見光掃描儀和上海尤尼柯UV1.3三波長的選擇取100mg紅車軸草異黃酮提取液干物質(zhì)溶于25ml甲醇中l(wèi)點于 10用CHCl3:CH3OH于254nm紫外透射儀下觀察用10ml80%乙醇浸泡12h后過濾用15ml80%乙醇浸泡12h后過濾3000紫外可見光掃描儀掃描1.4標準曲線的制作精確稱取干燥至恒重的BiochaninA5.07mg準確吸取00.21.5精密度實驗和加樣回收率實驗取1.6中的紅車軸草提取液5份測定其異黃酮含量取1.6中的紅車軸草提取液共5份

8、用三波長分光光度法測定異黃酮含量1.6紅車軸草異黃酮提取液準確稱取紅車軸草粉2g于100ml平底燒瓶中在 85每次3h過濾并用70%乙醇定容至100m l在紅車軸草提取液干物質(zhì)的紫外掃描圖譜中(圖1紅車軸草異黃酮的最大吸收波長為262n m若采用262nm為測定波長測定異黃酮在262nm附近因此可采用作圖法確定三波長的組合連接這兩點在這三個波長處A 值較大(其中A262A282/2A值幾乎等于零262nm和282nm為測定波長 2.2標準曲線的制作以Fluka公司的BiochaninA為標準樣品(biochaninA紫外掃描圖譜如圖2所示262和282nm三個波長處的吸光度A(見表1A其中C是

9、紅車軸草異黃酮的濃度g/ml標準曲線具有顯著相關(guān)性122.3精密度實驗和加樣回收率實驗精密度實驗共進行5次g/ml說明三波長紫外分光光度法測定紅車軸草異黃酮含量具有很好的重復性回收率的平均值為103.95%表明三波長紫外分光光度法測定紅車軸草異黃酮含量具有很高的準確度 0.666 0.85次數(shù)加入量測出量回收率平均值R S D(g(%(%(%表3三波長紫外分光光度法加樣回收率實驗Table3Therecoveryofaddingsampletestofthree-wavelengthUVspectrophotometry3結(jié)論本文建立的三波長紫外分光光度法對紅車軸草異黃酮含量的測定精密度實驗的

10、相對標準偏差為0.85%加樣回收率的相對標準偏差為1.82%快速特別適合于紅車軸草異黃酮提取分離工藝探討中大量快速檢測異黃酮含量參考文獻 and17 ºÍÆäËûÒÔÅëµ÷µÄ¿¾Ïä²»Ò»ÑùÅëµ÷ʱԤÏÈÏòË

11、74;ÏäÖÐ×¢Èë×ÔÀ´Ë®µÄ¸ßÎÂË®ÕôÆûÒÔʹʳÎï¾ùÔȼÓÈÈ»áÊͷų

12、46;¶îÍâµÄÄý½áÈÈÊÔÑé±íÃ÷ÿÁ¢·½Ã×ÕôÆûÊͷŵÄÈÈÁ¿ÕâÑù¾ÍÄ

13、20;¸üºÃµØȼÉÕʳÎïË®¿¾ÏäÖеÄË®ÕôÆûÄÜÏ¡ÊÍÑõ·Ö×ÓµÄŨ¶È´Ó¶ø