大孔樹脂使用方法

1、WORD格式大孔樹脂使用方法一、大孔吸附樹脂的預處理：大孔樹脂在試驗中使用時間較長， 必須保證不受霉菌污染。 新購樹脂一般用氯化鈉及硫 酸鈉處理過，但樹脂內部存在未聚合的單體殘存的致孔劑、引發(fā)劑、分散劑等用前必須除掉。預處理的流程簡述如下：以 0.5BV 的乙醇浸泡樹 24h （ 1BV 為 1 個樹脂床體（1 ） 脂 積）用 2BV 的乙醇以 流速通過樹脂柱，并浸泡4-5（ 2 ） 2BV/h h（3 ）再用水以同樣流速洗凈（ 4 ）用乙醇洗至流出液加水不呈白色混濁為止。（ 5 ） 用 2BV 的 5%HCL 溶液以 4-6 BV/h 的流速通過樹脂層。并浸泡樹脂 2-4h 。 而后用水以同

2、樣流速洗至出水 pH 中性溶液 以 4-6（ 6 ） 用 2BV 的 2%NaOH BV/h 的流速通過樹脂層 并浸泡樹脂 2-4h 而后用水以同樣流速洗至出水 pH 中性。也可采用下列程序： 在潔凈的分離柱內， 放入已去除外來雜質， 體積恒定的大孔吸附樹脂加 入相當于樹脂體積 0.4- 倍的乙醇（或甲醇）浸24 h ，然后用樹脂體積的 2-3 倍的0.5 泡 乙2-3 次，至最終以水洗脫后，保持分離使用前 醇（或甲醇）與水交替反復洗脫交替洗脫 的 狀態(tài)。醇洗脫液加水不顯混濁。也可用電導率、熒光和紫外吸收等作為前處理的標 準。二、大孔樹脂的使用 大孔樹脂是大孔徑的高分子分離材料，中草藥有效成分

3、在大孔樹脂上的 吸附 是大孔樹 脂與有效成分形成以范德華力和氫鍵為主的一分子間作用力的結 果。 大孔樹脂依據(jù)其聚合物 的單體組成不同， 可以分成非極性和極性兩大 非極性吸附樹脂適合從極性溶液 類。 中（如水溶液） 中吸附非極性物質。 中等極性樹脂可從極性溶液中吸附非極性物 質， 還能從非極性溶 液中吸附極性物質。大孔樹脂的孔徑和比表面積是影響大孔樹脂對物質的吸附的主要因素。 大孔樹脂比表面 積越大，單位質量大孔樹脂吸附的作用面積越大，單位質量大孔樹脂吸附有效成分就越 大。而大孔樹脂的比表面積還包括內孔網的面積。樹脂孔徑過小有效成分分子不能進入樹 脂內因此選擇的時候應該根據(jù)目標物的選擇適用的樹脂

4、， 采用合理的實驗 用吸附曲線解析曲線具體地應該通過實部，只能在樹脂外表面吸 相應的比表面積就比較小 附， 分子量選擇合適孔徑的樹脂才能使吸附的有效面積增 大。設計和方法工藝條件才能充分發(fā)揮大孔樹脂的作 用。驗確定。2.1 樹脂型號的確定 考察某種樹脂是否適合于該產品。首先考察該樹脂的吸附率和吸附量。即樹脂對所純化分離的有效成分要有較大的吸附量。 然后，需考察樹脂對所分離的有效成分有良好的 分離性能 目標成分能比較集中的被洗脫出來。采用的方法如下吸附率和吸附量的測定：吸附率專業(yè)資料整理E% =C 0 Ce / C 0 ×100%C0 吸附前溶液的濃 度E% 吸附率吸附量 C0 Ce

5、)Q= ( × V/Wmg/ml Ce 吸附后溶液濃度Q 吸附 量mg/g W 干樹脂重V 溶液體積A 靜態(tài)吸附以葛根素中黃酮提取為例 將 10g 處理好的各種樹脂分別加入葛根素水溶液 30ML 總黃酮濃度為 9.4mg /mL 每 5min 振搖 1 次，2h 小時后分別取各樹脂的吸附溶液1ML進行吸光度的分析，計算各種樹脂對葛根素總黃酮的吸附率。B 靜態(tài)解析：將靜態(tài)吸附的樹脂過濾抽干，加 30 ml 70% 乙醇解析每 5 分鐘振一次 2h 后分別取 各解析液測定黃酮的濃度。以計算各種樹脂對黃酮的解析率。C 動態(tài)吸附準確稱取 10ml 或 20ml 樹脂在干凈的 2 ×

6、 20cm 色譜柱內， 加入葛根素的水溶液總 黃酮的濃度為 9.4mg/ml 于柱頂，以 2BV/h 的流速進行動態(tài)吸附，收集流出液。按床體 積收集進行分析， 測出目標物的濃度黃酮含量， 然后以洗脫液體積為橫坐標， 流出液中的目 標物含量為縱坐標繪制動態(tài)吸附曲線， 計算飽和動態(tài)吸附量。 并計算達到吸附飽和時， 所吸 附的目標物的量。可以比較出何種樹脂的吸附量大。2.1 吸附工藝的確定A 上樣液 pH 值的選擇和鹽的濃度的影響 改變溶液 pH 值可以影響有效成分在大孔樹脂上的吸附。溶液的 pH 值可以體現(xiàn)在下列幾 方面 , 改變有效成分在溶液中的的存在形式 , 例如生物堿在堿性溶液中以游離態(tài)形式

7、存在，而 在酸性溶液中以離子形式存在。 再次，溶液 pH 值改變可以影響有效成分在溶液中的溶解度。值改變可以改變溶液的極性，影 溶液 pH 值升高皂苷在溶液中的溶解度增大。溶液 pH 響 有效成分和大孔樹脂間的分子間作用力。如生物堿等堿性有效成分在溶液變成酸 性后 , 會改 變生物堿等堿性成分在溶液中的存在形式 , 降低其在大孔樹脂上的吸附。實驗發(fā)現(xiàn)，隨著溶 液的 pH 增加，生物堿的吸附量增加。羅漢果皂甙 選用 pH9-10 時吸附性能最好。這和羅 漢果皂甙是非離子性物質是相一致的。在提取羅漢果的時候色素也會提取出來. 這些色素為酚類物質和羅漢果的極性相似很難分離但在堿性條件下色素轉化為鹽而

8、溶于水, 不易被樹脂吸附 . 另外羅漢果皂甙在堿性條件下比較穩(wěn)定因此羅漢果溶液采用 pH9-10 為宜。酸性有效 成分應該在酸性條件下吸附，堿性有效成分應該在堿性條件下吸附。反之在解析洗脫階段， 酸性有效成分使用戶堿性洗脫液洗脫效果好，堿性有效成分使用酸性洗脫液效果 好。鹽離子濃度對吸附影響： 無機鹽可以降低有機質的水溶 性， 可以增加很多有機化合物對吸附 劑的親和力?？赏ㄟ^實驗求得吸附量最大之最佳鹽濃 度。B 溫度對大孔樹脂提取有效成分效果的影響 由于黃酮、 皂甙、生物堿等有效成分在大孔樹脂是通過分子間作用 力， 屬于物理吸附。 溫度 升高， 一方面有效吸附作用降低。另一方 面，有效成分在溶

9、液中的溶解度增大。綜合結果溫度升高可使有效成分在大孔樹脂上的吸附速度和吸附量降 低。 實驗證明， 溫度升高葛根素的 吸附量減少，反之在解析階段，應該升高溫 度。C 進柱液濃度 從物理吸附的等溫方程 由于黃酮、 皂苷、生物堿等有效成分在大孔樹脂吸附是物理吸附，可一般低濃度下進行比較 以發(fā)現(xiàn)，初始濃度增加吸附率降低。 平衡時間延長，吸附率降低。有利。如果進柱液濃度過高則泄漏早處理量小樹脂使用周期短。但如果濃度偏低則耗時增加， 工作效率過低也不可取。如果取葛根素的水溶液分別加水稀.5 ，10 ，15 ，釋。20倍后上樣以 2BV/h 的流速進行吸100ML 于 250nm 計算吸光度計0.5g/mL

10、 藥液濃度上樣即可。附后先以 5BV 水洗脫再用 70% 乙醇洗脫， 收集洗脫液 至 算總黃酮的含量。即多篇文獻研究結果表示當總黃酮濃度D 吸附速率的確定皂甙溶液通過玻璃柱內考察不同流速對流速對吸附的影響： 將濃度為 7.96 mg/ml pH =9.0吸附量的影響。 流速過大會使樹脂的工作吸附量下降提早泄漏。 且樹脂壓力增大能量損失。皂甙吸附以 3BV /h為宜。黃酮吸附以 2BV/h 時效果最好E 洗脫劑濃度 中草藥有效成分從大孔樹脂上洗脫，是利用有效成分在洗脫液中的溶解 作用 大于有效成分在大孔樹脂間的吸附作用。使用的吸脫液應該對有效成分具有良好的溶解 作用。吸附目標物后可選用對目標物溶

11、解度較高的溶劑如乙醇作為解析劑， 采用不同濃度的乙 醇作為解析劑。分析洗脫液中目標物濃度。求得最佳的濃 度。黃酮、皂苷、生物堿以及其他苷類物質在乙醇類溶液中溶解度較 大。 常使用乙醇作為洗脫液。一方面乙醇濃度不同乙醇溶液 乙醇溶液從兩方面影響有效成分在大孔吸附樹脂上的吸附。 的 極性不同。 乙醇溶液的極性不同影響有效成分和大孔吸附樹脂間的作用 力。另一方面乙醇濃度不同影響有效成分在大孔樹脂上的解吸作 用。 是兩者作用相互作用相互競爭的結果。 如分 離大豆皂苷時， 洗脫液中的研究結果是洗脫液中的皂苷含量隨洗脫液乙醇濃度增加先 增加后 降低。在乙醇濃度 為 50% 時，洗脫液中總皂苷含量最大。而分離羅漢果皂甙時，采用 60% 乙醇水溶液進行洗脫效果最好。