大腸桿菌ppt課件

1、獸醫(yī)生物制品學-分論大腸桿菌原子力顯微鏡圖片原子力顯微鏡圖片1 2 3麥康凱培養(yǎng)基伊紅美藍培養(yǎng)基血液培養(yǎng)基鞭毛抗原（鞭毛抗原（H）菌體抗原（菌體抗原（O）K或或Vi抗原抗原5 5、(UPEC)(UPEC)。 整體看，發(fā)病以幼畜為主仔豬大腸桿菌病 主要是通過消化道感染，其次是通過臍部感染，也有部分是通過呼吸道感染。流行特點 發(fā)病特點及臨床癥狀 羔羊發(fā)生一種以口鼻流沫、呼吸困難和胸膜肺炎為主要特征的疾病。發(fā)病的羔羊據(jù)統(tǒng)計有121只，病羊多為420日齡的羔羊，死亡54只，死亡率約44.6%，病程短，如不及時治療，約30min到數(shù)小時便死亡。發(fā)病的羔羊在剛開始時體溫升高，達4142，精神委頓，食欲不振

2、，腹部脹氣，繼之出現(xiàn)呼吸困難，脈搏快而弱，口流白沫，鼻流黏液，運動失調，臥地磨牙，頭彎向一側，最后在昏迷中死亡，很少見有腹瀉病羔。羔羊大腸桿菌病 本病一年四季均可發(fā)生，但冬春季節(jié)雞群。主要表現(xiàn)為嚴重的呼吸道癥狀，而夏秋季節(jié)則以腹瀉癥狀為主。 發(fā)病范圍廣，死亡嚴重，幾乎所有的養(yǎng)殖戶的肉雞都受到了大腸桿菌的感染。 各日齡肉雞均易感，但高發(fā)病日齡主要集中在以下二個階段：1025日齡和35日齡以上。 發(fā)病率為20%40%，平均25%左右，病死率在10%以上。 雞大腸桿菌病發(fā)病特點 由一定血清型 ( 010、085、O101 )的大腸桿菌引起,以拉黃、白 、紅痢和死亡率高為特征的一種急性傳染病。 兔大腸

3、桿菌病 由于大腸桿菌廣泛地分布于自然界，仔兔出生后很短時間即可隨乳汁或其他食物進人胃腸道,成為正常菌。新生仔兔在抵抗力降低或發(fā)生消化障礙時,就可能引起發(fā)病。大腸桿菌生物制品類型：類毒素菌苗大腸桿菌疫苗（主）乳酸菌微生態(tài)制劑（大腸桿菌）大腸桿菌多克隆抗體等等 大腸桿菌引起的腹瀉已經(jīng)成為一個全球性的公共衛(wèi)生問題,無論在發(fā)達國家還是發(fā)展中國家,都受到廣泛關注。目前,該病的防治以藥物和疫苗為主,但因藥物治療價格昂貴,而且隨著耐藥菌株的增多,發(fā)展致瀉性大腸桿菌疫苗具有特殊的意義。 特別是新近出現(xiàn)的DNA疫苗、轉基因植物疫苗和ghost疫苗技術為大腸桿菌疫苗的研制提供了許多新的思路, 顯示出良好的應用前景

4、 。 目前國內外研制的目標多集中于ETEC和EHEC,有的已進人期或期臨床試驗階段。 1、ETEC疫苗（2）DNA疫苗 （1）載體疫苗 2 、EHEC疫苗（1）多糖結合疫苗（2）亞單位疫苗3、轉基因植物疫苗4、細菌ghost疫苗研 究 進展載體疫苗多為口服活菌苗,是利用微生物（載體菌多為志賀菌和沙 門氏菌）作載體,將保護性抗原基因重組到質粒上,通過平衡致死系統(tǒng)使其穩(wěn)定存在于微生物中,或重組到微生物染色體的特定位置上,表達保護性抗原 。 DNA疫苗 直接將含編碼外源蛋白抗原基因的質粒DNA導人機體組織 中表達,被提呈的表達產物,與主要組織相容性復合物(MHC)結合,刺激機體產生相應的抗體和細胞毒

5、性T淋巴細胞(cLT s),分別介導體液免疫和細胞免疫應答,即DNA疫苗 。2005年，Piller 等發(fā)展了表達大腸桿菌K99fmabriae的轉基因大豆，小鼠口服后能產生抗原特異的高水平抗體和CD4+T淋巴細胞。目前的研究重點在于開發(fā)出一種能生吃的植物如水果，并且盡量提高蛋白的表達量?，F(xiàn)在有人將ETEC的LTB或者霍亂弧菌的CTB基因轉入番茄植物中，雖然香蕉是最理想的植物疫苗對象，但是還有待于技術上的突破。大腸桿菌生物制品使用現(xiàn)狀目前常見的主要有仔豬、禽、羊、兔的各類大腸桿菌疫苗。各種動物大腸桿菌疫苗仔豬大腸桿菌疫苗禽大腸桿菌病疫苗兔大腸桿菌病疫苗羊大腸桿菌病疫苗等等仔豬疫苗多為仔豬大腸桿

6、菌病三價滅活疫苗仔豬常用疫苗1. 例如：仔豬大腸桿菌基因工程K88ST1LTB三價滅活疫苗，由遼寧省益康生物制品廠生產。2. 接種對象：仔豬3. 使用方法：頸側肌肉注射，每次間隔7天, 三次免疫量分別為5mL、0mL、20mL；第2次和第3次免疫應分點注射。4. 效果：仔豬大腸桿菌疫苗常用：仔豬大腸桿菌基因工程K88ST1LTB三價滅活疫苗仔豬大腸桿菌病K88-K99-987P-F41四價亞單位疫苗禽大腸桿菌病疫苗（一）滅活疫苗：1、滅活蜂膠苗2、滅活油乳劑苗3、滅活鋁膠苗（二）亞單位疫苗（三）弱毒疫苗1、菌毛亞單位疫苗2、莢膜亞單位疫苗O2(NorrChls)、O78(ChlsNorr)單價

7、弱毒苗、以雞大腸桿菌病滅活疫苗制備為例：1、菌種 病原性大腸桿菌EC24、EC30、EC45、EC50、EC44麥康凱氏培養(yǎng)基培養(yǎng)2、制造要點 (1)、種子繁殖： 馬丁肉湯培養(yǎng)-劃線接種麥康凱氏培養(yǎng)基培養(yǎng)-接種馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)-作為一級種子-取一級種子接種馬丁肉湯培養(yǎng)-得到二級種子。 (2)、菌液制備：用玻璃瓶或培養(yǎng)罐通氣培養(yǎng)，按容積裝入70%培養(yǎng)基及花生油消泡劑。 (3)、配苗與封裝： 配苗：每5份菌液加1份氫氧化鋁膠，同時按總量的0.005%加硫柳汞，充分震蕩，28 靜置，抽棄上清液濃縮成全量的60%。 封裝：檢驗合格，混合分裝3、質量標準 (1)、安全檢驗 (2)、效力檢驗4、保存與使用

8、 保存：28 保存，為期1a。 使用：頸背側皮下注射0.5ml,1月齡雞 接種對象：1月齡雞以上的雞免疫期為4個月附：附： 禽大腸桿菌病禽大腸桿菌病主要病型和特征：胚胎和幼稚死亡、敗血癥、氣囊炎、包括心包炎、臍炎、卵巢炎、輸卵管炎、腸炎或慢性腫瘤樣肉芽腫等。 病原： 腸桿菌SEPEC中O1、O2、O36、O78等血型免疫： SEPEC的毒力因子為F11和F1黏附因子-黏附因子具有良好的抗原性，刺激機體產生特異性抗體。疫苗：目前國內外對雞大腸桿菌病的免疫預防，主要基于以黏附素免疫為基礎的含單價或多價菌毛抗原的滅火菌苗、菌毛亞單位疫苗等。大腸桿菌生物制品與人有關如：國外人類腹瀉的 ETEC 基因工

9、程疫苗的研究進展以腸毒素疫苗為例腸毒素疫苗1984年，美國杜蘭大學醫(yī)學中心試驗得到菌株SE12。小鼠和豚鼠試驗表明，SE12菌株口服時是安全的，并能產生明顯的抗毒素免疫反應。重組菌株可以作為預防傷寒和霍亂-大腸桿菌相關腹瀉的二價口服活疫苗。2001年，巴西圣保羅大學將編碼ETEC鞭毛蛋白和熱穩(wěn)定腸毒素的基因進行連接，插入載體pCDNA3中，構建質粒pCDNA3FLA-STmt，轉化至減毒沙門菌SL3261中，制成活載體疫苗。1994年，英國坎特伯雷肯特大學將含LTB基因的重組質粒轉化海產弧菌，LTB表位融合蛋白在海產弧菌中成功分泌表達，該方法可能會廣泛應用于 LTB疫苗的制備2006年，巴西圣

10、保羅大學將枯草芽孢桿菌作為表達載體表達 LTB，對致病菌或內源性感染的條件致病菌均有明顯的抑制作用。2005年，伊朗塔比阿特莫達勒斯大學構建了 LTB 蛋白的 酵母表達體系，構建 pLTB83 質粒，將重組質粒轉化至釀酒酵母菌，重組酵母菌表達 LTB 的新型疫苗。O157：H7大腸桿菌H7大腸桿菌是數(shù)百種大腸桿菌中的一個亞型。雖然生長在健康人類和動物的腸道內的絕大多數(shù)菌種都是無害的，但這一菌種卻會產生強烈的毒素，并引發(fā)嚴重的疾病。O157:H7大腸桿菌是在1982年的一次嚴重出血性腹瀉爆發(fā)期間被首次確認為致病菌的；該次疾病爆發(fā)的根源已被證明是受到污染的漢堡包所致。因食用漢堡包引起的食物中毒的病

11、人糞便中被分離并命名的。O157：H7大腸桿菌的魔爪1982199619972011201420162017在1996年5一8月間,在日本流行過歷時 3個月的0157大腸桿菌性食物中毒，波及30個都府縣，中毒人數(shù)超過9000人 , 有10余人死亡 , 引起世界震驚 。為弄清根源 , 由日本專門機構 , 對各種食品進行檢驗 , 結果從小蘿卜菜 、牛肝 、牛肉中均檢出了O157: H7 瑞大腸桿菌。1982年美國俄勒崗州和密執(zhí)安州， O157:H7大腸桿菌是在1982年因食用漢堡包引起的食物中毒的病人糞便中被分離并命名的。1997年5月下旬，日本岡山、廣島等縣幾十所中學和幼兒園相繼發(fā)生6起集體食物

12、中毒事件，人數(shù)多達1600人，導致3名兒童死亡，住院兒童達80人。同時日本仙臺和鹿兒島形成中毒人數(shù)過萬人，死亡11人，波及44個都府縣的爆發(fā)性食物中毒，引起全世界的關注。2011年5月26日，德國明斯特大學醫(yī)院26日宣布，該院衛(wèi)生研究所經(jīng)調查確認，近日在德國暴發(fā)的腸出血性大腸桿菌（EHEC）疫情是由一種名為“Husec41”的腸出血性大腸桿菌變種引起。這一少見的變種對很多抗生素具有抗藥性。與此同時，德國漢堡衛(wèi)生研究所已查明這種病菌的一個來源是產自西班牙的黃瓜。2014年 新華社東京8月10日電 日本靜岡市政府9日宣布，在該市發(fā)生大規(guī)模食物中毒事件后，醫(yī)生已從患者體內檢測出腸出血性大腸桿菌O157。截至9日，患者已達449人，這是日本10年來由腸出血性大腸桿菌O157導致的最大規(guī)模的食物中毒事件。靜岡市于7月26日舉行煙火大會，很多觀眾食用了路邊小攤出售的冰鎮(zhèn)黃瓜，導致大規(guī)模食物中毒。不過，醫(yī)務人員并未從制作冰鎮(zhèn)黃瓜的餐具中檢測出腸出血性大腸桿菌O157。2016年，據(jù)媒體報道，近日英國暴發(fā)大腸桿菌O157疫情，感染人數(shù)過百。英國政府表示，本次