專題2細(xì)胞工程知識點(diǎn)

1、專題2 細(xì)胞工程 （一）植物細(xì)胞工程 1. 植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)（基礎(chǔ)）和 植物體細(xì)胞雜交2.全能性高低：受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞；植物細(xì)胞動物細(xì)胞3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)（1）理論基礎(chǔ)（原理）：細(xì)胞全能性（2過程：離體的器官、組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化（光照） 有根芽的胚狀體 - 植株（3用途：微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。（4地位：是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（1）理論基礎(chǔ)（原理）：細(xì)胞膜的流動性，植物細(xì)胞的全能性（2）過程：（3） 方法：物理法包括離心、振動、電激?；瘜W(xué)法用聚乙二

2、醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（3）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。（二）動物細(xì)胞工程 1. 動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有：動物細(xì)胞培養(yǎng)（基礎(chǔ)）、核移植、動物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備。2. 動物細(xì)胞培養(yǎng)（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程（2）原代培養(yǎng)的特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁和接觸抑制。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造

3、成危害。營養(yǎng)：氨基酸、葡萄糖、維生素、促生長因子，通常需要加入血清、血漿等天然成分。溫度、pH： 36±0.5，PH:7.2-7.4（胃蛋白酶在此條件下失活）氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。3.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物（1）哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植核移植（較易）和體細(xì)胞核移植（較難）。 （2）原理：動物細(xì)胞核的全能性（3）體細(xì)胞核移植的大致過程是：以克隆羊多利（右圖） （4）供體和受體的選擇：供體：一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。受體：去核的減中期的卵母細(xì)

4、胞。原因：卵(母)細(xì)胞比較大，容易操作； 卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富；含有促進(jìn)供體核表達(dá)全能性的物質(zhì)。去核的原因：保證克隆動物的遺傳物質(zhì)最大程度的來自有重要利用價值的動物。（5）克隆屬于無性繁殖，克隆動物性狀與供體基本相同。原因：細(xì)胞核基因來自供體動物?？寺游锏募?xì)胞質(zhì)基因來自受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)。生物的性狀還受環(huán)境的影響。 4.動物細(xì)胞融合（1）動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。但滅活的病毒只能誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合。（2）動物細(xì)胞融合的意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為研究細(xì)胞遺

5、傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。5.單克隆抗體（1）單克隆抗體的制備過程： （2）促融方法有： 物理法、化學(xué)法、生物法（滅活的病毒動物細(xì)胞促融特有）（3）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。（4）該過程有兩次篩選，第一次是選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是選出 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。（5）該過程使用了 動物細(xì)胞融合和 動物細(xì)胞培養(yǎng)兩種細(xì)胞工程的技術(shù)手段，及體液免疫的原理。（6）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。（7）單克隆抗體的應(yīng)用： 作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥治療，可制成“生物導(dǎo)彈”，也有少量用于治療其它疾病。關(guān)于細(xì)胞工程技術(shù)手段的總結(jié)：植物組織培養(yǎng)和動