重感靈中的馬來酸氯苯那敏測定方法

1、重感靈中的馬來酸氯苯那敏測定方法實(shí)驗(yàn)藥品：馬來酸氯苯那敏；0.1mol/L鹽酸；溴麝香草酚藍(lán)；0.1mol/L檸檬酸；0.2mol/L磷酸氫二鈉；苯；重感靈片實(shí)驗(yàn)器材：電光分析天平；具塞離心管；紫外可見分光光度計；烘箱；100、200ml量瓶；超聲波振蕩器實(shí)驗(yàn)步驟：1、對照品溶液的制備 精密稱取在105干燥至恒重的馬來酸氯苯那敏20mg，置200ml量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液溶解后再加至刻度，搖勻，即得。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取對照品溶液10.0、20.0、30.0、40.0、50.0ml，分別置100ml量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液加至刻度，搖勻。再分別精密吸取上述溶液3m

2、l，分別置具塞離心管中，各精密加入溴麝香草酚藍(lán)溶液(精密稱取溴麝香草酚藍(lán)65mg，置250ml量瓶中，精密加入0.1mol/L檸檬酸溶液6.75ml，用0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液加至刻度，搖勻，即得)3ml，再精密加入苯10ml，振搖5分鐘，離心(2000r/min)5分鐘，吸取上層苯液。以0.1mol/L鹽酸溶液3ml，按同法操作所得的苯液為空白，照分光光度法(附錄B)，在406nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、測定法 n 取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于馬來酸氯苯那敏4mg)，置200ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸

3、溶液至刻度，充分振搖后超聲處理30分鐘，濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液。n 精密吸取續(xù)濾液3ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“分別置具塞離心管中”起，依法測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中馬來酸氯苯那敏的含量，計算，即得。注：本品每片含馬來酸氯苯那敏(C16H19ClN2.C4H4O4)應(yīng)為標(biāo)示量的90.0110.0。中國藥典4、PH的測定 5、電位測定6、吸收波長測定中國藥典 馬來酸氯苯那敏 拼音名：Malaisuan Lubennamin 英文名：Chlorphenamine Maleate 書頁號：2000年版二部49 C16H19ClN2.C4H4O4 390.87 本品為N,N

4、-二甲基 -(4-氯苯基)-2-吡啶丙胺順丁烯二酸鹽。按干燥品計算，含C16H19ClN2.C4H4O4 不得少于98.5。 【性狀】 本品為白色結(jié)晶性粉末；無臭，味苦。 本品在水、乙醇或氯仿中易溶，在乙醚中微溶。 熔點(diǎn) 本品的熔點(diǎn)（附錄 C）為131135 。 吸收系數(shù) 取本品，精密稱定，加鹽酸溶液（稀鹽酸1ml加水至100ml ）溶解并定量稀釋制成每1ml中約含20靏 的溶液，照分光光度法（附錄 A），在264nm 的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)（1% 1cm）為212222 。 【鑒別】 (1) 取本品約10mg，加枸椽酸醋酐試液1ml ，置水浴上加熱，即顯紅紫色。 (2) 取本品約20m

5、g，加稀硫酸1ml ，滴加高錳酸鉀試液，紅色即消失。 (3) 本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集61圖）一致。 【檢查】 酸度 取本品0.1g，加水10ml溶解后，依法測定（附錄 H），pH值應(yīng)為4.0 5.0 。 有關(guān)物質(zhì) 取本品，加氯仿制成每1ml 中含50mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加氯仿稀釋成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法（附錄 B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10靗 ，分別點(diǎn)于同一硅膠254 薄層板上，以醋酸乙酯甲醇稀醋酸(5:3:2) 為展開劑，展開后，晾干，在紫外光燈(254nm) 下檢視。供試品溶液除顯氯苯那敏與馬來酸兩個斑點(diǎn)外，如

6、顯其他雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。 易炭化物 取本品25mg，依法檢查（附錄 K），與黃色1號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。 干燥失重 取本品，在105 干燥至恒重，減失重量不得過0.5（附錄 L）。 熾灼殘渣 不得過0.1（附錄 N）。 【含量測定】 取本品約0.15g ，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1 滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.54mg的C16H19ClN2.C4H4O4 。儀器及方法：高效液相色譜法（1） 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有

7、不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后，依次進(jìn)入檢測器，色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。 1.對儀器的一般要求 所用的儀器為高效液相色譜儀。色譜柱的填充劑和流動相的組分應(yīng)按各品種項(xiàng)下的規(guī)定。常用的色譜柱填充劑有硅膠和化學(xué)鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。離子交換填充劑用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等填充劑用于分子排阻色譜等。除另有規(guī)定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。 在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應(yīng)符合紫外分光光度法（附錄 ）

8、項(xiàng)下對溶劑的要求。 正文中各品種項(xiàng)下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變, 以適應(yīng)具體品種并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。一般色譜圖約于20分鐘內(nèi)記錄完畢。 2.系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 按各品種項(xiàng)下要求對儀器進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對照品對儀器進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整,應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求；或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子。 (1) 色譜柱的理論板數(shù)(n) 在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項(xiàng)下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，量出供試

9、品主成分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時間t<R>（以分鐘或長度計，下同，但應(yīng)取相同單位）和半峰高寬（W<h/2> ）,按n5.54(t<R>/W<h/2>)<2>計算色譜柱的理論板數(shù)。如果測得理論板數(shù)低于各品種項(xiàng)下規(guī)定的最小理論板數(shù)，應(yīng)改變色譜柱的某些條件（如柱長、載體性能、色譜柱充填的優(yōu)劣等），使理論板數(shù)達(dá)到要求。 (2) 分離度 定量分析時，為便于準(zhǔn)確測量，要求定量峰與其他峰或內(nèi)標(biāo)峰之間有較好的分離度。分離度（R）的計算公式為：2(t<R2>t<R1>) R W<1>W<2> 式中 t<

10、R2>為相鄰兩峰中后一峰的保留時間； t<R1>為相鄰兩峰中前一峰的保留時間； W<1>及W<2>為此相鄰兩峰的峰寬。 除另外有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.5。 (3) 重復(fù)性 取各品種項(xiàng)下的對照溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0。也可按各品種校正因子測定項(xiàng)下，配制相當(dāng)于80、100和120的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別進(jìn)樣3次,計算平均校正因子，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差也應(yīng)不大于2.0。 (4) 拖尾因子 為保證測量精度，特別當(dāng)采用峰高法測量時，應(yīng)檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項(xiàng)

11、下的規(guī)定,或不同濃度進(jìn)樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為： W<0.05h> T 2d<1> 式中 W<0.05h>為0.05峰高處的峰寬； d<1>為峰極大至峰前沿之間的距離。 除另有規(guī)定外，T應(yīng)在0.951.05之間。 3.測定法 定量測定時，可根據(jù)供試品的具體情況采用峰面積法或峰高法。測定雜質(zhì)含量時，須采用峰面積法。 (1) 內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中某個雜質(zhì)或主成分含量 按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量對照品和

12、內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計算校正因子： A<s>C<s> 校正因子（f） A<R>C<R> 式中 A<s>為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高； A<R>為對照品的峰面積或峰高； C<s>為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度； C<R>為對照品的濃度。 再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測量供試品中待測成分（或其雜質(zhì)）和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計算含量： A<x> 含量（C<x>）f× A<s>C<s> 式中 A<x>為供

13、試品（或其雜質(zhì)）峰面積或峰高； C<x>為供試品（或其雜質(zhì)）的濃度； f、A<s>和C<s>的意義同上。 當(dāng)配制校正因子測定用的對照溶液和含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液使用同一份內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液時，則配制內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液不必精密稱（量）取。 (2) 外標(biāo)法測定供試品中某個雜質(zhì)或主成分含量 按各品種項(xiàng)下的規(guī)定,精密稱(量)取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品和供試品待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量： A<x> 含量（C<x>）C<R> A<R> 式中各符號意義同上 (3)

14、加校正因子的主成分自身對照法 測定雜質(zhì)含量時，可采用加校正因子的主成分自身對照法。在建立方法時，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取雜質(zhì)對照品和待測成分對照品各適量，配制測定雜質(zhì)校正因子的溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，按上述(1)法計算雜質(zhì)的校正因子。此校正因子可直接載入各品種正文中，用于校正雜質(zhì)的實(shí)測峰面積。 測定雜質(zhì)含量時，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的雜質(zhì)限度，將供試品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤鹤鳛閷φ杖芤?，進(jìn)樣，調(diào)節(jié)儀器靈敏度（以噪音水平可接受為限）或進(jìn)樣量（以柱子不過載為限），使對照溶液的主成分色譜峰高約達(dá)滿量程的1025或其峰面積能準(zhǔn)確積分（面積約為通常條件下滿量程峰積分值的10）。然后，取供試品

15、溶液和對照品溶液適量，分別進(jìn)樣，供試品溶液的記錄時間除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分保留時間的若干倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，分別乘以相應(yīng)的校正因子后與對照溶液主成分的峰面積比較，依法計算各雜質(zhì)含量。 (4) 不加校正因子的主成分自身對照法 當(dāng)沒有雜質(zhì)對照品時，可采用不加校正因子的主成分自身對照法。同上述(3)法配制對照溶液并調(diào)節(jié)儀器靈敏度后，取供試品溶液和對照溶液適量，分別進(jìn)樣，前者的記錄時間除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分保留時間的若干倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積并與對照溶液主成分的峰面積比較，計算雜質(zhì)含量。 若供試品所含的部分雜質(zhì)未與溶劑峰完全分離，則按規(guī)定先記錄供試品溶液的色

16、譜圖，再記錄等體積純?nèi)軇┑纳V圖。色譜圖上雜質(zhì)峰的總面積（包括溶劑峰），減去色譜圖上的溶劑峰面積，即為總雜質(zhì)峰的校正面積。然后依法計算。 (5) 面積歸一化法 由于峰面積歸一化法測定誤差大，因此，本法通常只能用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)含量。除另有規(guī)定外，一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。方法是測量各雜質(zhì)峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計算各峰面積占總峰面積的百分率，即得。 由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，當(dāng)采用外標(biāo)法測定供試品中某雜質(zhì)或主成分含量時，以定量環(huán)進(jìn)樣為好。儀器及方法:分光光度法（2） 分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的光吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定

17、量分析的方法。 常用的波長范圍為：(1)200400nm的紫外光區(qū)；(2)400760nm的可見光區(qū)， (3)2.525靘(按波數(shù)計為4000400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。 單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關(guān)系如下式： 1 A=1g =ECL T 式中 A 為吸收度； T 為透光率； E 為吸收系數(shù)，采用的表示方法是（E1 1cm）,其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1(g/ml)，液層厚度為1c