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文檔簡介
1、選修一專題訓(xùn)練(十)血紅蛋白的提取和分離A卷1. 分離不同種類的蛋白質(zhì)依據(jù)的原理不包括()A. 分子的形狀和大小B.所帶電荷的性質(zhì)和多少、吸附性質(zhì)C.對其他分子的親和力D.蛋白質(zhì)分子的組成元素2. 如圖能正確表示相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進過程的是()3. 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,凝膠的種類較多,但其作用的共同點是()A. 改變蛋白質(zhì)分子通過凝膠時的路徑B. 吸附一部分蛋白質(zhì),從而影響蛋白質(zhì)分子的移動速度C. 將酶或細胞固定在凝膠中D. 與蛋白質(zhì)分子進行化學(xué)反應(yīng),從而影響其移動速度4. 在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A. 防止血紅蛋白被氧化B. 血紅蛋白
2、是一種兩性物質(zhì),需要酸中和C. 加速血紅蛋白的提取過程D. 讓血紅蛋白處在穩(wěn)定pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能5. 下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是()A. 是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法B. 在洗脫過程中,大分子不能進入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,以致最后流出C. 凝膠內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系D. 般情況下,凝膠對待分離的物質(zhì)沒有吸附作用,因此所有待分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出 來6. 將處理破裂后的紅細胞混合液以2 000 r/min的速度離心10 min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依
3、次是()A. 血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細胞破碎物沉淀層B. 甲苯層、細胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層C. 脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細胞破碎物沉淀層D. 甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細胞破碎物沉淀層7. 血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,負責(zé)血液中Q和部分CQ的運輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離回答問題:(1) 凝膠色譜法的基本原理是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。(2) 洗滌紅細胞的目的是去除 ,洗滌次數(shù)過少,無法除去 ;離心速度過高和時間過長會使 等一同沉淀,達不到分離的效果。洗滌干凈的標志是 。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 m
4、mol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是,如果紅色區(qū)帶,說明色譜柱制作成功。8. 凝膠色譜技術(shù)不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。下圖甲為凝膠色譜柱分離蛋白質(zhì)的示意圖,圖乙為幾種被分離蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小與洗脫液的洗脫體積的關(guān)系,請據(jù)圖分析回答a b c- d利對井皿乙(1) 圖甲a、b均為蛋白質(zhì)分子,其中先從層析柱中洗脫出來的是 ,原因是(2) 自己制作凝膠色譜柱時,在色譜柱底部d位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由 替代。(3) 裝填凝膠色譜柱時,色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,原因是。(4) 若圖乙被分離的蛋白質(zhì)混合液中含有肌紅蛋白(相對分子質(zhì)量為16 900)、血清蛋白(相對分
5、子質(zhì)量為68 500)、牛乳球蛋白(相對分子質(zhì)量為35 000)、牛胰島素(相對分子質(zhì)量為5 700),則圖乙中 A、BC、D代表的物質(zhì)依次是 。(5 )洗脫液能不能用清水代替 ?并說明原因。9. 血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,負責(zé)血液中Q或CQ的運輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。(1) 將實驗流程補充完整:A為,B為。凝膠色譜法是根據(jù)而分離蛋白質(zhì)的有效方法。(2) 洗滌紅細胞的目的是去除 ,洗滌次數(shù)過少,無法除去 ;離心速度過高和時間過長會使 一同沉淀,達不到分離的效果。洗滌干凈的標志是。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是 。在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 m
6、mol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是。如果紅色區(qū)帶 ,說明色譜柱制作成功。10. 蛋白質(zhì)分子中,氨基酸的a -氨基和a -羧基雖然大部分都能結(jié)合形成肽鍵,但是蛋白質(zhì)分子內(nèi)仍含有各種酸性基團和堿性基團,如肽鏈末端的a -氨基和a -羧基、天冬氨酸和谷氨酸殘基中的羧基、賴氨酸和組氨酸殘基中的各種堿性基團,所以蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在酸性溶液中,堿性基團的解離程度增大,使蛋白質(zhì)帶正電荷;在堿性溶液中,酸性基團的解離 程度增大,使蛋白質(zhì)帶負電荷。當(dāng)溶液到達某一pH時,蛋白質(zhì)可因內(nèi)部酸性或堿性基團的解離程度相等而呈等電狀態(tài),這時溶液的pH叫做蛋白質(zhì)的等電點。不處于等電點狀態(tài)的蛋白 質(zhì)分子的正、負
7、電荷量是不相同的。試回答下列問題。多數(shù)蛋白質(zhì)的等電點近于5, 一般含堿性基團較多的蛋白質(zhì)的等電點 (填“偏高”或“偏低”)。(2) 根據(jù)等電點的不同,你能用方法將不同種類的蛋白質(zhì)分子分離開。(3) 簡述根據(jù)等電點分離不同種類的蛋白質(zhì)分子的原理。A卷答案1. D 2. 選 B 3. 選 A 4. D 5 C 6 選 D7 答案 :(1) 相對分子質(zhì)量的大小(2) 雜蛋白 ( 血漿蛋白 ) 血漿蛋白 白細胞 離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色 蒸餾水和甲苯(3) 準確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境 ,保持體外的 pH 和體內(nèi)的一致 均勻一致地移動8 答案 :(1)a a 相對分子質(zhì)量較大 , 無法進入凝膠內(nèi)部的通
8、道 , 只能在凝膠外部移動 ,路程較 短,移動速度較快(2) 尼龍網(wǎng)和 100 目的尼龍紗(3) 氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 ,降低分離效果(4) 牛胰島素、肌紅蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白(5) 不能。洗脫液是磷酸緩沖液 , 可以防止溶液 pH 劇烈變化對蛋白質(zhì)活性的影響 , 清水則 沒有此作用 , 因此不能換成清水。9 答案 :(1) 血紅蛋白的釋放 樣品的加入和洗脫 相對分子質(zhì)量的大小(2) 雜蛋白 ( 血漿蛋白 ) 血漿蛋白 白細胞和淋巴細胞離心后的上清液中沒有黃色 蒸餾水和甲苯(3) 準確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境 ,保持體外的 pH 和體內(nèi)一致 均勻一致地移動10 答案:(1)
9、偏高 (2)電泳(3) 調(diào)節(jié)電泳槽中緩沖液的 pH, 使某種蛋白質(zhì)處于等電點狀態(tài) ,而其他蛋白質(zhì)帶有電荷 ,在電場作用下 ,帶有正、負電荷的蛋白質(zhì)分別移向兩極,而不帶電荷的蛋白質(zhì)留在原處。B卷1.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是 ()A. 增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量B.改變蛋白質(zhì)的形狀C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別D.減少蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量2. 下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過程及原理敘述,正確的是 ()A. 為防止血液凝固,應(yīng)在采血容器中預(yù)先加入抗凝劑檸檬酸鈉B. 紅細胞的洗滌使用5倍體積的蒸餾水,直到離心后上清液不呈現(xiàn)黃色為止C. 利用質(zhì)量分數(shù)為 0.9%的NaCI溶液對血
10、紅蛋白溶液透析 12小時,可以去除小分子雜質(zhì)D. 在凝膠柱中加入蛋白樣品后即可連接緩沖液洗脫瓶進行洗脫和收集樣品3. 下列是關(guān)于血紅蛋白的提取和分離實驗中的關(guān)鍵步驟,其中正確的是()A.蛋白質(zhì)的提取和分離一般可分為粗分離、樣品處理、純化、純度鑒定4步B. 蛋白質(zhì)的提取和分離實驗可以以豬、牛、羊、蛙等動物的血液為材料分離血紅蛋白C. 對樣品的處理過程分為紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、透析和分離血紅蛋白溶液D. 對蛋白質(zhì)的純度鑒定的方法中使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳4. 有關(guān)凝膠色譜法和電泳法的說法正確的是()A.它們都是分離蛋白質(zhì)的重要方法B.它們的原理相同C. 使用凝膠色譜法需要用緩
11、沖溶液而電泳不需要D. 以上說法都正確5. 下列樣品的加入和洗脫的操作不正確的是()A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面B. 用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面C. 加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)D. 等樣品完全進入凝膠層后,關(guān)閉下端出口6. 已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情相對分子質(zhì)雖 T戊IIIb電荷量況如下圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是 ()A.若將樣品以 2 000 r/mi n 的速度離心10 min,分子戊在沉淀中,則丙也一定在沉淀中B.若用
12、凝膠色譜法分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快C. 將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋內(nèi),則乙也一定保留在袋內(nèi)D. 若用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子丁形成的電泳帶相距最遠7. 下圖為凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)示意圖和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是 ()武白質(zhì)凝含狗團甲圖巴A. 在裝填圖甲中凝膠色譜柱時一旦發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)有氣泡存在,就需要重裝B. 圖甲中大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動慢,所以最后從層析柱中流出來C圖乙凝膠中加入的 SDS可以使蛋白質(zhì)的遷移速率完全取決于分子大小D.已知凝膠中的SDS帶負電,則應(yīng)在電泳槽的處接電源負極,處接
13、電源正極8. 紅細胞含有大量血紅蛋白,紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶Q或CQ。我們可以選用豬、牛、羊等動物血液進行實驗來提取和分離血紅蛋白。請 回答下列有關(guān)問題:(1) 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:、和。(2) 實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進行離心加蒸餾水和甲苯處理,收集血紅蛋白溶液。 加入檸檬酸鈉的目的是 。 以上所述的過程即是樣品處理,它包括、分離血紅蛋白溶液。樣品純化的目的是。9.如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題I(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細 胞的主要組成成分,其在紅細胞中的作
14、 用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有功能。我們通常選用豬、牛、羊等動物的 血液進行實驗,實驗前取新鮮的血液時 要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸 鈉,取血回來,馬上進行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是;乙裝置中,C溶液的作用是 甲裝置用于 ,目的是。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫 ,是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。 在操作 中加樣(下圖)的正確順序是最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進行(或沉淀),隨著硫10.已知蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度的不同可以使不同種類的蛋白質(zhì)析出 酸銨濃度的增加,混合液中蛋白質(zhì)析出的種類和總量增加。下表是某蛋白質(zhì)混合液中的不同 蛋白質(zhì)從開始析出到完
15、全析出所需要的蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度范圍。蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度()析出的蛋白質(zhì)15 20甲蛋白23 30乙蛋白25 35丙蛋白38 40丁蛋白請據(jù)表回答(1) 若只完全析出甲蛋白,混合液中最合適的硫酸銨濃度應(yīng)為 。(2) 向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液(或硫酸銨),使混合液中的硫酸銨濃度達到30%,會析出若干種蛋白質(zhì),它們分別是。(3) 通過改變混合液中的硫酸銨濃度 (填“能”或“不能”)從混合液中得到所有的、不含有其他蛋白質(zhì)的乙蛋白,原因是_。(4) 如果蛋白質(zhì)析出物中還含有一定量的硫酸銨,可用半透膜除去析出物中的硫酸銨。用半透膜能除去析出物中硫酸銨的原理是 B卷答案1.選C 2選A 3選D 4選A 5選A 6選A 7選B8答案:
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