分析方法驗證指南

1、強(qiáng)降解實驗 c.儀器輸出/原始資料 i. 有機(jī)雜質(zhì) ii.原料藥. iii.制劑. (2各類檢測的推薦驗證項目. a. 鑒別. b. 雜質(zhì). c. 含量. d.特定實驗. B藥典分析方法(21CFR 211.194(a(2. 八. 統(tǒng)計分析. A基本原則 B:對比研究 C:統(tǒng)計 九、 再驗證 十、 分析方法驗證資料：內(nèi)容和數(shù)據(jù)處理. A分析方法驗證資料. B：樣品的選擇和運(yùn)輸. C：各方職責(zé). 1.申請人. 2.化學(xué)評審官. 3.FDA 實驗室. 4.檢查官. 十一、 方法學(xué) A高效液相色譜(HPLC. 1.色譜柱. 2.系統(tǒng)適應(yīng)性研究. 3.操作參數(shù). B氣相色譜(GC. 1.色譜柱. 2.

2、操作參數(shù). 3.系統(tǒng)適應(yīng)性實驗. C：分光光度法，光譜法和相關(guān)的物理方法 D：毛細(xì)管電泳(CE E：旋光度 F：和粒徑分析相關(guān)的分析方法 G：溶出度. H：其它儀器分析方法 附錄A. 附錄B. 術(shù)語表. 本指南旨在為申請者提供建議，以幫助其提交分析方法，方法驗證資料和樣品用于支持原料藥和制劑的認(rèn)定，劑量，質(zhì)量，純度和效力方面的文件。 本指南旨在幫助申請者收集資料，遞交樣品并資料以支持分析方法。這些建議適用于 NDA，ANDA，BLA，PLA 及其它們的補(bǔ)充中所涉及的原料藥和制劑。 這些原則同樣適用于二類DMF 所涉及的原料藥和制劑。如果使用了其它方法，鼓勵申請者事先和FDA 藥品評審中心的官員

3、進(jìn)行討論，以免出現(xiàn)這種情況，那就是花了人力物力所準(zhǔn)備起來的遞交資料后來發(fā)現(xiàn)是不可用的。 本指南中所述的分析方法驗證的原則適用于各種類型的分析方法。但是，本指南中特定的建議可能不適用于有些產(chǎn)品所用的特殊分析方法，如生物藥，生物技術(shù)藥，植物藥或放射性藥物等。 比如說，許多生物分析是建立在動物挑戰(zhàn)模式，免疫原性評估或其它有著獨(dú)特特性的免疫分析基礎(chǔ)上的，在遞交分析方法和分析方法驗證資料時需考慮這些獨(dú)特的性質(zhì)。 而且，許多原料藥和制劑的界定和質(zhì)量控制所需的生物和免疫化學(xué)檢測并不在本指南的范圍之內(nèi)。 盡管本指南并不專門敘述原料，中間體，賦形劑，包裝材料及原料藥和制劑生產(chǎn)中所用的其它物料的分析方法及分析方法

4、驗證資料的遞交，但是應(yīng)該應(yīng)用驗證過的分析方法來分析檢測這些物質(zhì)。 對于本指南中未提及的關(guān)于分析方法驗證和資料提交方面的問題，請向FDA 相關(guān)的化學(xué)評審人員咨詢。 本指南，一旦定稿，將取代FDA 于1987 年2 月份發(fā)布的工業(yè)指南：分析方法驗證所需提交的樣品和分析資料。 每個NDA 和ANDA 都必需包括必要的分析方法以確保原料藥和制劑的認(rèn)定，劑量，質(zhì)量，純度和效力，還包括制劑的生物利用度(21 CFR 314.50(d(1 和314.94(a(9(i。 FDA 驗證文件現(xiàn)場備查，可以不與DMF 一起交。 必須要有資料來論證所用的分析方法是符合一定的準(zhǔn)確度和可靠性標(biāo)準(zhǔn)的。 分析方法驗證是論證某

5、一分析方法適用于其用途的過程。分析方法的驗證過程是從申請者有計劃地系統(tǒng)性收集驗證資料以支持分析方法開始的。 審評化 學(xué)家會對NDA 或ANDA 中的分析方法和驗證資料進(jìn)行評審。 一旦FDA 有要求，則NDA 或ANDA 的申請者必須提交制劑，原料藥，非藥典對照品和空白以使 FDA 實驗室能對申請者所用分析方法進(jìn)行評審(21 CFR 314.50(e and 314.94(a(10。 FDA 實驗室的分析會論證該分析方法在實驗室內(nèi)是可以重現(xiàn)的。審評化學(xué)家和實驗室分析家會從法規(guī)的角度確定該分析方法的適用性。 FDA 檢查官會對分析實驗室進(jìn)行檢查確保用于放行和穩(wěn)定性實驗的分析方法符合現(xiàn)行的GMP（2

6、1CFR part 211 和GLP (21 CFR part 58。 每個BLA 和PLA 都必須要有詳細(xì)的生產(chǎn)工藝描述，包括分析方法，以說明所生產(chǎn)的產(chǎn)品是符合規(guī)定睥安全，純充和效力標(biāo)準(zhǔn)的(21 CFR 601.2(a and 601.2(c(1(iv。 第 1 頁必須要有資料證明所用的分析方法是符合一定的準(zhǔn)確度和可靠性要求的(21 CFR 81211.194(a(2。對于BLA，PLA 及它們的補(bǔ)充，在所提交的許可證申請中應(yīng)當(dāng)要有分析方法和方法驗證這部分的資料，審評委員會會對這部分資料進(jìn)行評審。 需提供代表性樣品及該樣品所代表批號的檢測結(jié)果總結(jié)(21 CFR 601.2(a and 601

7、.2(c(1(vi。評審委員會主席會要求CBER 實驗室的分析人員進(jìn)行分析實驗對申請者的分析方法進(jìn)行評估，并確認(rèn)其分析結(jié)果。 從驗證的角度來看，所有的分析方法有著同樣的重要性。一般來說，應(yīng)當(dāng)要應(yīng)用已驗證過的分析方法，而不論其是被用于過程控制，放行，合格或穩(wěn)定性實驗。高等每個定量分析方法時都應(yīng)當(dāng)要減少其分析誤差。 分析方法和驗證資料應(yīng)當(dāng)擺在申請的分析方法和控制章節(jié)中提交。本指南的第 III 到 IX 章和 XI 章給出了所需提供資料方面的建議。向 FDA 實驗室提供樣品和遞交 NDA 和 ANDA 中的分析方法驗證資料的信息見第X 章。 A. 法定分析方法 法定分析方法是被用來評估原料藥或制劑的

8、特定性質(zhì)的。USP/NF 中的分析方法是法定的用于藥典項目檢測的分析方法。為了確認(rèn)符合法規(guī)，需使用法定分析方法。 B. 替代分析方法 替代分析方法是申請者提出用于代替法定分析方法的分析方法。只有當(dāng)一替代分析方法相當(dāng)于或優(yōu)于法定分析方法時，才可以應(yīng)用驗證過的替代分析方法。 如果提交了替代分析方法，申請者還應(yīng)當(dāng)提供其理由，并標(biāo)明其用途（如，放行，穩(wěn)定性實驗），驗證資料及其與法定分析方法的對比資料。 C. 穩(wěn)定性指示分析 穩(wěn)定性指示分析是能檢測出原料藥或制劑的某些性質(zhì)隨著時間的延長而出現(xiàn)的變化的定量分析方法。 穩(wěn)定性指示分析能不受降解產(chǎn)物，工藝雜質(zhì)，賦形劑或其它潛在雜質(zhì)的影響而準(zhǔn)確測定其中的活性成分

9、。 如果申請者遞交了用于放行檢測的非穩(wěn)定性指示分析方法，則應(yīng)當(dāng)要有能定性 和定量地監(jiān)測雜質(zhì)，包括降解產(chǎn)物，的分析方法對其進(jìn)行補(bǔ)充。穩(wěn)定性試驗中所用的含量分析方法應(yīng)當(dāng)要有穩(wěn)定性指示能力，除非有科學(xué)的理由能證明其合理性。 A標(biāo)準(zhǔn)品的類型 可以從USP/NF 處或其它官方(比如說，CBER，21CFR 610.20獲得標(biāo)準(zhǔn)品 (也就是一級對照品。如果不能確定一標(biāo)準(zhǔn)品的來源是否會被FDA 認(rèn)為是官方來源，申請者應(yīng)當(dāng)要向適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)評審人員咨詢。如果沒有官方來源，則被用來作標(biāo)準(zhǔn)品的物質(zhì)應(yīng)當(dāng)要有盡可能高的純度，并得到充分界定。 工作對照品 (也就是內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品或二級標(biāo)準(zhǔn)品是根據(jù)一級對照品標(biāo)定的，并用來代替一級

10、對照品的。 第 2 頁 B分析報告單 對于非官方標(biāo)準(zhǔn)品，在申請的分析方法和控制章節(jié)中應(yīng)當(dāng)要提供該標(biāo)準(zhǔn)品的分析報告單。對于從官方獲得的標(biāo)準(zhǔn)品，用戶應(yīng)當(dāng)要確保標(biāo)準(zhǔn)品的適用性。應(yīng)當(dāng)正確儲存標(biāo)準(zhǔn)品并在已確定的時間段內(nèi)使用該標(biāo)準(zhǔn)品。 C標(biāo)準(zhǔn)品的界定 從USP/NF 及其它官方來源獲得的標(biāo)準(zhǔn)品是不需要進(jìn)一步界定的。非官方對照品要有盡可能高的純度，并進(jìn)行充分地界定以確保其結(jié)構(gòu)，劑量，質(zhì)量，純度和效力。 用于界定標(biāo)準(zhǔn)品的定性和定量分析方法應(yīng)當(dāng)要不同于用于控制原料藥或制劑的結(jié)構(gòu)，劑量，質(zhì)量，純度和效力的分析方法，要比它們更深入。用于標(biāo)準(zhǔn)品界定的分析方法不應(yīng)僅僅是和先前的指定標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較實驗。 一般來說，界定資

11、料應(yīng)當(dāng)要包括： 標(biāo)準(zhǔn)品的簡單工藝描述，如果其生產(chǎn)工藝是否于其相應(yīng)的原料藥的話。應(yīng)當(dāng)要敘述制備標(biāo)準(zhǔn)品時所用的補(bǔ)充精制過程。 相關(guān)光譜圖，色譜圖，TLC 照片及其它儀器輸出的清晰復(fù)印件。建立純度的資料。應(yīng)當(dāng)要應(yīng)用適當(dāng)?shù)臋z測方法來獲得這些資料，比如說TLC，GC，HPLC，相溶解分析，適當(dāng)?shù)臒岱治龇椒捌渌匾姆治龇椒ā?適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)性質(zhì)資料，比如結(jié)構(gòu)式，經(jīng)驗式和分子量等。結(jié)構(gòu)確證資料應(yīng)當(dāng)要包括適當(dāng)?shù)姆治鰷y試，比如元素分析，IR，UV,NMR 和MS，及適用的官能團(tuán)分析。還應(yīng)當(dāng)要提供具體的結(jié)構(gòu)解析資料。 物理性質(zhì)的描述，包括顏色和物理形態(tài)。 適當(dāng)?shù)奈锢沓?shù)，比如說熔程，沸程，折射率，離解常數(shù)(pK

12、值和旋光度。用于界定標(biāo)準(zhǔn)品的分析程序的詳細(xì)敘述。 至于生物技術(shù)/生物產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)當(dāng)要考慮上述建議，可能可以應(yīng)用。然而，其它確定物理化學(xué)性質(zhì)，結(jié)構(gòu)特性，生物活性和/或免疫化學(xué)活性的補(bǔ)充檢測和/或其它檢測將是非常重要的。 物理化學(xué)性質(zhì)包括異構(gòu)體，電泳和液相色譜行為及光譜性質(zhì)等。結(jié)構(gòu)界定可能包括氨基酸序列，氨基酸組成，縮氨酸圖和碳水結(jié)構(gòu)。確定生物和/或免疫化學(xué)活性的分析方法應(yīng)當(dāng)要和用來確定 產(chǎn)品效力的分析方法一樣。 這些分析方法可以包括基于動物的，細(xì)胞培養(yǎng)的，生物化學(xué)的或配位體/接受體螯合的分析方法。如果這些檢測需用于某些標(biāo)準(zhǔn)品的界定，生物和免疫化學(xué)檢測的分析方法驗證方面的特殊建議并不在本指南的

13、范圍之內(nèi)。 對于IND 而言，每個階段的研究都需要有足夠的資料以確保合適的認(rèn)定，質(zhì)量，純度，劑量和/或效力。所需的分析方法和方法驗證方面的資料會隨著研究的階段變化而變化(21 CFR 312.23(a(7。 關(guān)于在第1 階段研究所需提交的分析方法和方法驗證資料方面的指南，發(fā)起人可以參考 FDA 的指南：藥品（包括結(jié)構(gòu)確定的，有療效的，生物技術(shù)產(chǎn)品）第1 階段研究的IND 申請的內(nèi)容和格式（1995 年11 月）。 第2 和第3 階段研究所需提交的分析方法和方法驗證資料方面的指南，發(fā)起人將可以參考 FDA 的指南：藥品（包括結(jié)構(gòu)確定的，有療效的，生物技術(shù)產(chǎn)品）第 1 階段研究的 IND 申請的C

14、MC 內(nèi)容和格式（草案，1999 年4 月）。 在遞交NDA，ANDA，BLA 或PLA 時，所有的分析方法都應(yīng)當(dāng)要開發(fā)出來，并得到驗證。 第 3 頁 NDA，ANDA，BLA 和 PLA 中所提交的任一分析方法都應(yīng)當(dāng)要有詳細(xì)的描述，以使合格的分析人員能重現(xiàn)出所需的實驗條件并獲得和申請者相當(dāng)?shù)膶嶒灲Y(jié)果。應(yīng)當(dāng)要敘述分析方法中需要特殊注意的地方。 如果所用的分析方法是USP/NF 或其它FDA 認(rèn)可參考文獻(xiàn)（如，<>）中且所參考的分析方法未經(jīng)過修改的話，則需提供該分析方法的參引，而不用提供該分析方法的描述（21 CFR 211.194）。 對于從其它公開發(fā)表的文獻(xiàn)上獲得的分析方法，應(yīng)當(dāng)

15、要對其進(jìn)行敘述，因為評審官可能并不能很方便的獲得這些文獻(xiàn)。 分析方法描述中需要包括的典型內(nèi)容如下所示： A基本方法 HPLC 進(jìn)行分離的，檢測器為UV 檢測器。 B取樣 需要敘述的有：所選樣品的數(shù)目（比如，瓶，片等），它們是如何使用的（也就是，單獨(dú)的或是混合樣品），每個樣品分析的重復(fù)次數(shù)。 C儀器和儀器參數(shù) 需要的有：儀器列表（比如，儀器類型，檢測器，柱子類型，尺寸等）和儀器參數(shù)（比如，流速，溫度，運(yùn)行時間和設(shè)定波長等）。如果必要的話，還要提供實驗結(jié)構(gòu)示意圖（比如，闡述噴灑式分析方法的位置）。 D試劑 需要敘述的有：試劑列表及其相應(yīng)的規(guī)格（比如：USP/NF，美國化學(xué)社（ACS）分析試劑）。如

16、果使用的是自制試劑或更改過的商業(yè)試劑，則應(yīng)當(dāng)要有其制備方法。對于不穩(wěn)定的或有潛在危險的試劑，應(yīng)標(biāo)明其儲存條件，安全使用說明和使用周期。 E系統(tǒng)適應(yīng)性實驗 系統(tǒng)適應(yīng)性實驗參數(shù)和合格標(biāo)準(zhǔn)是建立基礎(chǔ)是：儀器，電子元件，分析操作和待測 樣品是個不可分割的整體。系統(tǒng)適應(yīng)性實驗確保系統(tǒng)在樣品分析的時候能很好地運(yùn)行。在分析方法中應(yīng)當(dāng)要包括適當(dāng)?shù)南到y(tǒng)適應(yīng)性合格標(biāo)準(zhǔn)。 所有的色譜分析方法都應(yīng)當(dāng)要有系統(tǒng)適應(yīng)性實驗及相應(yīng)的合格標(biāo)準(zhǔn)。CDER 評審官指南<< 色譜分析方法的驗證>>（1994 年11 月）對用于評估系統(tǒng)適應(yīng)性的典型參數(shù)進(jìn)行了定義和討論。 建議系統(tǒng)適應(yīng)性實驗應(yīng)成為所有分析方法的一

17、部分，而不僅僅是色譜分析方法。無論是哪類分析方法，都要采用實驗來證實該系統(tǒng)能不受環(huán)境條件的影響而正確地運(yùn)行。比如說，滴定法一般來說需要進(jìn)行空白實驗。 F標(biāo)準(zhǔn)品的制備 要有所有標(biāo)準(zhǔn)品溶液（比如，儲備液，工作對照品溶液，內(nèi)部對照品溶液）的配制方法。 G.樣品的制備 單項檢測所需的樣品制備應(yīng)作清晰的描述。非常規(guī)樣品的制備（比如，固相提取，衍生第 4 頁法制備）應(yīng)有詳細(xì)的細(xì)節(jié)描述。 H.操作過程 應(yīng)當(dāng)要按操作步驟對操作過程進(jìn)行逐步敘述。敘述應(yīng)當(dāng)要適當(dāng)包括如下信息：平衡時間，樣品進(jìn)樣順序和系統(tǒng)適應(yīng)性或啟動參數(shù)。非正常不可預(yù)測因素也應(yīng)標(biāo)明。 I計算 應(yīng)當(dāng)要提供代表性計算公式，并要列表說明所有符號和數(shù)字系數(shù)

18、，及計算降解產(chǎn)物和雜質(zhì)的特殊使用說明。所有用于數(shù)據(jù)分析的數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換或公式應(yīng)詳細(xì)描述。這些包括對數(shù)轉(zhuǎn)換以獲得指數(shù)數(shù)據(jù)的線性關(guān)系，或多元回歸分析的使用。 J.結(jié)果報告 1通則 應(yīng)該規(guī)定關(guān)鍵計算步驟中的數(shù)字單位（例如，標(biāo)簽標(biāo)示量的百分比，W/W，W/L，ppm 等） 2雜質(zhì)分析規(guī)程 在有關(guān)原料藥和產(chǎn)品的雜質(zhì)檢測規(guī)程中，應(yīng)當(dāng)包括雜質(zhì)的名稱和檢測位/標(biāo)志（例如，保留時間RT，相對保留時間RRT），以及雜質(zhì)的種類（比如工藝降解產(chǎn)物，賦形劑降解產(chǎn)物），如有可能，還應(yīng)當(dāng)指明檢測限D(zhuǎn)L 或定量限QL。也可以在原料藥檢測中設(shè)置DL 和QL。 有機(jī)雜質(zhì)的報告中，應(yīng)當(dāng)包括：1、有記載的已經(jīng)過確認(rèn)的雜質(zhì)的名稱；2、有記載

19、但未經(jīng)過確認(rèn)雜質(zhì)的（檢測）位/標(biāo)志；3、所有的沒有記載的雜質(zhì)，以及；4、總雜質(zhì)?？傆袡C(jī)雜質(zhì)是指所有達(dá)到或超過其自身定量限度的雜質(zhì)的總量。在這里可以參考FDA 雜質(zhì)指南文章中有關(guān)判定定量限度的內(nèi)容（看后面的參考）。無機(jī)雜質(zhì)和溶劑的殘留，也應(yīng)該被提到。 對于產(chǎn)品以及原料藥的工藝雜質(zhì)也可以不包括在報告中，除非分析規(guī)程和控制環(huán)節(jié)中描敘了一個可以被接受的原則，那么，在產(chǎn)品制造和包裝過程中（包括貼簽）產(chǎn)生的雜質(zhì)就要被提到。 并不是所有產(chǎn)品（比如，生物制劑、生物工藝制劑、植物制劑、放射制劑）的報告都必須嚴(yán)格按照以上談到的內(nèi)容來寫，但是所有關(guān)鍵的工序以及產(chǎn)品相關(guān) 和實驗結(jié)果。而代表性儀器輸出（如：色譜圖）和/

20、或其它資料（強(qiáng)降解實驗中所得的降解信息）應(yīng)當(dāng)要提供在分析方法第 6 頁和控制一章中。 c.儀器輸出/原始資料 i. 有機(jī)雜質(zhì) 應(yīng)當(dāng)要提供代表性資料以支持有機(jī)雜質(zhì)的評估。一般來說，是不需要?dú)埩羧軇┑拇硇再Y料的。儀器輸出和原始數(shù)值（比如，峰面積）及合適的標(biāo)記和標(biāo)注（比如，色譜峰的保留時間，核磁共振的化學(xué)位移和耦合常數(shù)）都應(yīng)當(dāng)要提供。根據(jù)所提供的定量限和儀器輸出對雜質(zhì)情況進(jìn)行評估。還應(yīng)當(dāng)要提供其它資料以確認(rèn)雜質(zhì)情況得到了充分地界定。比如說，比如說，代表性圖譜選用的檢測波長是205nm，則可以將擬定的運(yùn)行時間延長至兩倍以支持分析方法的專屬性。 在定量分析時，原料藥的響應(yīng)因子可用于沒有相應(yīng)對照品的雜質(zhì)

21、。如果響應(yīng)因子不接近的話，只要應(yīng)用了較正因子或或者雜質(zhì)實際上是被高估的話，這樣做也是可行的。用于評估指定雜質(zhì)或未指定雜質(zhì)的合格標(biāo)準(zhǔn)和分析方法經(jīng)常都是基于分析假設(shè)的（比如，相當(dāng)?shù)臋z測器響應(yīng)）。應(yīng)當(dāng)要對這些假設(shè)進(jìn)行討論和合理性說明。 ii.原料藥 ANDA 和相關(guān)的遞交，用于生物利用度研究的批次（biobatch）或者提交批次（submission batch）的相關(guān)資料應(yīng)當(dāng)要提供。所有的響應(yīng)（比如，色譜峰）都應(yīng)當(dāng)要進(jìn)行標(biāo)注。所用的分析方法應(yīng)當(dāng)要有能力區(qū)分先前批次和當(dāng)前批次之間的變化，如果有這些變化的話。應(yīng)當(dāng)要說明定量限和有機(jī)雜質(zhì)的類型（比如：降解物，工藝雜質(zhì)）。還需提供分析方法編號，批號，生產(chǎn)日

22、期和生產(chǎn)地點(diǎn)及分析日期。 iii.制劑 在制劑的分析方法和控制一章中，應(yīng)要當(dāng)提供的資料有：代表性批號在長期和加速穩(wěn)定性實驗條件下及強(qiáng)降解實驗條件下的儀器輸出（如，圖譜）和原始資料（如峰面積）。對于 ANDA 和相關(guān)遞交，應(yīng)當(dāng)要提供生物利用度實驗批次或遞交批次的適當(dāng)資料。在申請的穩(wěn)定性章節(jié)中應(yīng)當(dāng)要引用原始資料（比如：圖譜）。 至少，遞交材料中應(yīng)當(dāng)要包括放行檢測(Release testing的儀器輸出和原始資料. 需標(biāo)注所有的響應(yīng)信號（如色譜峰）。此外，還要提供，分析方法編號，制劑的批號，生產(chǎn)日期，分析日期，原料藥的來源和批號，生產(chǎn)地點(diǎn)及容器/密閉系統(tǒng)信息。如在過往批次和現(xiàn)批次之間存在差異的話，

23、所用的分析方法應(yīng)當(dāng)要有能力區(qū)分出來。應(yīng)當(dāng)要報告檢測限和類型（如，降解物，包裝時的漏出物）。 1. 各類檢測的推薦驗證項目 表 1 概述了在不同分析方法的驗證過程中所需要的驗證項目。同一分析方法可用于多個用途。驗證資料需要能支持該分析方法的擬定用途。比如說，如果拉曼光譜用于定量分 要確定用于驗證資料分析的統(tǒng)計方法。還應(yīng)當(dāng)要規(guī)定所要遵循的程序，包括所需采集的數(shù)據(jù)量和確定分析方法合適性的合格標(biāo)準(zhǔn)。 應(yīng)當(dāng)要在分析方法和控制章節(jié)中提供和討論分析方法驗證原始資料和所用的統(tǒng)計方法。所有用于數(shù)據(jù)分析的統(tǒng)計程序都應(yīng)當(dāng)是科學(xué)的，并適用于評估該數(shù)據(jù)群的。 B:對比研究 開展對比研究以評估中間精密度(如，不同設(shè)備，不

24、同分析員，不同天等。當(dāng)一分析方法會在多個實驗室應(yīng)用時，或要比較和評估兩個分析方法(比如，法定分析方法和替代分析方法的精密度和準(zhǔn)確度時，也會進(jìn)行對比研究以評估實驗室間的差異(也就是，重現(xiàn)性。在進(jìn)行對比研究時，應(yīng)當(dāng)要盡可能地使用同一批號的均勻樣品。需對對比研究的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析和討論，并對偏差進(jìn)行解釋。 C:統(tǒng)計 關(guān)于用于對比分析的統(tǒng)計技術(shù)資料，和用于分析數(shù)據(jù)處理和解析的其它基本資料，可參見相關(guān)的文獻(xiàn)(見參考文獻(xiàn)。 當(dāng)發(fā)起人對分析方法，原料藥(比如，合成路線，或制劑(比如，組分作了更改的話，則需要對分析方法進(jìn)行重驗證。進(jìn)行重驗證是為了確保該分析方法仍然保持其特性(比如，專屬性，并論證說明該分析方法

25、仍然能確保原料藥和制劑的同一性，濃度/劑量，質(zhì)量，純度和功效，及制劑的生物利用度。重驗證的程序取決于該變更的性質(zhì)。當(dāng)使用了另一個法定分析程序的話(比如，用HPLC 代替了滴定法，則新的分析方法也需要驗證(見第VII 章。 如果在每次使用時，都必須要對分析方法中所述的操作條件進(jìn)行反復(fù)調(diào)整，才能使其符合系統(tǒng)適應(yīng)性要求的話，則該分析方法需要適當(dāng)進(jìn)行重新評估，修正和重驗證。 FDA 實驗室的分析以論證說明某一分析方法是能被重現(xiàn)的。在這個過程中將會需要分析方法驗證資料(見X.A和樣品(見X.B。 分析方法驗證資料通常會包括申請中的相關(guān)章節(jié)。為了便于評審化學(xué)家進(jìn)行評審，這些資料應(yīng)當(dāng)要和其在原來申請中一樣，

26、包括內(nèi)容和形式(archival copy和其它副本。對于仿制藥申請和其相關(guān)的補(bǔ)充申請，需要提交一份分析方法驗證資料的存檔副本(archival copy和第 9 頁另外兩份副本。對于新藥申請及其相關(guān)補(bǔ)充申請，需要提交一份分析方法驗證資料的存檔副本(archival copy和另外三份副本。對于 BLA 和 PLA，則不需要單獨(dú)遞交分析方法驗證資料。類似的資料應(yīng)當(dāng)擺在BLA 和PLA 申請中。 分析方法驗證資料應(yīng)當(dāng)要包括： 1所需遞交樣品的列表清單(化學(xué)名和結(jié)構(gòu)式，包裝類型和大小，生產(chǎn)日期，樣品量。 2分析方法 FDA 實驗室分析人員根據(jù)這個描述進(jìn)行操作。(見第VI 章 3驗證資料 (見第VI

27、I 章。 4結(jié)果 應(yīng)當(dāng)要提供申請者對 所提供樣品所做分析的分析結(jié)果，或者提供其相應(yīng)的分析報告單。需說明分析日期。 5組分 需說明制劑的組分和組成。 6質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 需提供原料藥和制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 7安全數(shù)據(jù)表 申請者應(yīng)當(dāng)要提供所有樣品，標(biāo)準(zhǔn)品和試劑的安全數(shù)據(jù)表(MSDS(29CFR 1910.1200(g。還要適當(dāng)提供分析方法驗證中所列各分析方法所有的其它物料的安全數(shù)據(jù)表(MSDS。如果是毒性物料或危險性物料，則在外包裝上要貼上MSDS，以便于安全處理。 NDA 或ANDA 申請者必須要根據(jù)藥品評審和研究中心(CDER的要求遞交制劑，原料藥，非藥典對照品和空白，以使FDA 實驗室可以評估申請者所用

28、制劑和原料藥分析方法的適用性。 (21CFR 314.50(e 和314.94(a(10。對于BLA 和PLA，需提交產(chǎn)品的代表性樣品，并提供所提交樣品批次的檢測結(jié)果。(21CFR601.2(a和601.2(c(1(vi. 對于CDER 產(chǎn)品，F(xiàn)DA 實驗室會告訴申請者所需遞交樣品的量。一般來說，樣品量應(yīng)當(dāng)是實驗用量的兩倍。除了遞交原料藥和制劑樣品之外，申請者還應(yīng)當(dāng)要遞交內(nèi)部對照品，非美國藥典對照品，雜質(zhì)樣品，降解物和非常用試劑。應(yīng)當(dāng)要向每個指定的實驗室寄送一系列樣品。 CBER 咨詢關(guān)于樣品和支持資料的遞交。 除非評審官另有說明，任一批次的樣品，最好是較早批次，都可以用于新藥申請及其補(bǔ)充申請

29、。所遞交的制劑樣品必須是根據(jù)擬定的上市配方生產(chǎn)的。對于仿制藥申請及其相關(guān)的補(bǔ)充，應(yīng)當(dāng)要提交用于支持申請批準(zhǔn)的制劑批次的樣品。如果樣品是來自于一申請中未提及的批次的話，則在ANDA 中還應(yīng)當(dāng)要補(bǔ)充一份批記錄和分析報告單的復(fù)印件。對于不需要遞交申請和不需要審閱批記錄及相關(guān)資料的補(bǔ)充，可遞交任一商業(yè)批次的樣品。對于生物制品，應(yīng)當(dāng)要提交連續(xù)幾個生產(chǎn)批次的樣品。 應(yīng)當(dāng)要以其原包裝提供制劑樣品。而像原料藥，雜質(zhì)，賦形劑等，則應(yīng)當(dāng)要保存在不透明的惰性容器中。為了防止在運(yùn)輸過程中泄露，樣品應(yīng)當(dāng)要裝在耐用的容器中。如果是美國國外的樣品，則應(yīng)當(dāng)要有適當(dāng)?shù)暮ｊP(guān)單據(jù)，以減少耽擱。 如果樣品需要特殊的儲存條件(比如，冷

30、凍，惰性氣體保護(hù)，則要事先和驗證實驗室聯(lián)系以第 10 頁安排直接遞送。如果是毒性樣品或危險性樣品，則在容器的顯著位置標(biāo)明警示標(biāo)志和預(yù)防措施。 1.申請人 FDA 可以向其發(fā)送提交樣品的要求。如果沒有提供這些信息的話，則會用 NDA，ANDA，BLA 或PLA 申請中所寫地址和聯(lián)系人信息進(jìn)行聯(lián)系。 NDA 或ANDA 資料一起編寫和遞交。對于BLA 和PLA，則不需要遞交單獨(dú)的分析方法驗證資料。 一旦 FDA 實驗室要求申請人提交樣品的話，申請人應(yīng)當(dāng)要在 10 個工作日將樣品提供給 FDA 實 驗室。除了樣品運(yùn)送之外，所有關(guān)于在 FDA 實驗室進(jìn)行驗證的交流工作都要當(dāng)要讓 CDER 申請的化學(xué)評

31、審官知道，如果是CBER 申請，則要讓BLA/PLA 委員會主席知道。 2.化學(xué)評審官 化學(xué)評審官負(fù)責(zé)審核分析方法驗證報告（包括鑒別，濃度/劑量，質(zhì)量，純度和功效。對申請進(jìn)行評審后，如要對分析方法作必要修改的話，則需要重新遞交分析方法驗證資料?；瘜W(xué)評審官會和相關(guān)的FDA 實驗室進(jìn)行討論，確定需要對哪個分析方法進(jìn)行驗證?；瘜W(xué)評審官會將FDA 實驗室對所做研究的意見轉(zhuǎn)給申請人。 3.FDA 實驗室 FDA 實驗室會和申請者聯(lián)系，告知樣品遞交程序和注意事項及郵寄地址。FDA 實驗室會所遞交的分析方法對樣品進(jìn)行檢測，以確定該分析方法是否適用于質(zhì)量控制，并符合法規(guī)要求。在完成研究之后，F(xiàn)DA 實驗室會將

32、結(jié)果和意見轉(zhuǎn)給化學(xué)評審官。 4.檢查官 檢查官會對進(jìn)行放行檢測和穩(wěn)定性實驗的分析實驗室進(jìn)行檢查，以確保所做的分析檢測能符合CGMP/GLP。 第II 章到第IX 章提供了分析方法和分析方法驗證資料方面的基本信息，包括驗證項目。下文就一些具體的方法給出了說明： HPLC 分析方法的廣泛應(yīng)用及色譜柱和柱填充的眾多來源都經(jīng)常會給可比性評估帶來很多問題。如下這些要點(diǎn)中，很多都適用于其它色譜分析方法。 1.色譜柱 在定義某一色譜柱時，如下這些性質(zhì)是很有用的，也應(yīng)當(dāng)要包括在分析方法描述中。如果分析方法開發(fā)表明只有某一商業(yè)來源的色譜柱是適用的，則在分析方法中應(yīng)當(dāng)要包括這些資料。如果有多種色譜柱都是適用的話，則應(yīng)當(dāng)要包括等效色譜柱列表。 a 色譜柱參數(shù) 1.材質(zhì)：玻璃，不銹鋼，塑料 2.尺寸：長度，內(nèi)徑 3.熔封尺寸 第 11 頁 4.過濾類型 5.預(yù)柱和/或保護(hù)柱（如使用） b.色譜柱填充物 1.顆粒類型：尺寸，形狀，孔徑 2.表