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1、2020屆一輪復(fù)習(xí) 人教版微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案最新考綱全國(guó)卷考情1 .微生物的分離和培養(yǎng)2 .培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用3 .某種微生物數(shù)量的測(cè)定4 .微生物在其他方面的應(yīng)用2018全國(guó)卷 I (37)、2018全國(guó)卷 11(37)、 2018全國(guó)卷IH(37)、2017.全國(guó)卷 I (37)、 2016全國(guó)卷(39)、2016全國(guó)卷 111(39)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)|考點(diǎn)自主族理|夯基固本提精華1 .培養(yǎng)基(1)概念:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁脂的營(yíng)養(yǎng)基 質(zhì)。(2)營(yíng)養(yǎng)組成:一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。此外,還需要滿(mǎn)足微生物生 長(zhǎng)對(duì)過(guò)1、氧氣以及特殊營(yíng)養(yǎng)
2、物質(zhì)的要求。種類(lèi)按照物理性質(zhì)可分為液健培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。按照成分的來(lái)源可分為天然培養(yǎng)基和金或培養(yǎng)基。按照功能用途可分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。2 .無(wú)菌技術(shù)(1)含義:在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防止雜菌污染的方法。(2)常用方法區(qū)別:俄否殺死費(fèi)沸消毒法化學(xué)藥劑消毒法 紫外線(xiàn)消毒法3 .大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基-WE - WI-(2)純化大腸桿菌的方法純化培養(yǎng)原理:想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的菌 密,即可獲得較純的菌種。純化大腸桿菌的關(guān)鍵步驟:接種。常用的微生物接種方法有兩種a.平板劃線(xiàn)法:是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃
3、線(xiàn)的操作,將聚集的 菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。如圖所示:B區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落.正常情況下. 產(chǎn)生每個(gè)菌落的般初細(xì)函數(shù)U是J.在培養(yǎng)基上劃線(xiàn)接種時(shí),劃線(xiàn)的順 序依次是A-C-B,b.稀釋涂布平板法:是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液 分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。(3)菌種的保存方法對(duì)于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。點(diǎn)悟:(1)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中菌落的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目“低”。這是 因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落。而顯微計(jì)數(shù)法由于不能區(qū)分死菌與活菌,故所得數(shù)值可能比實(shí)
4、際值“偏高”。平板劃線(xiàn)法只適用于微生物的提純,不適用于微生物的計(jì)數(shù),并且在最后一次 劃線(xiàn)的末端處的菌種最純。提升探究下圖中圖1為“倒平板”相關(guān)操作,圖2為微生物接種方法。請(qǐng)思考:(1)請(qǐng)用文字和箭頭寫(xiě)出圖1中正確的倒平板操作流程。提示 Cf Bf Af D圖示B為何需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?為何需進(jìn)行D操作? 提示B操作是通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。D操作是平板冷 凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置, 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基, 造成污染。(3)圖2中E、F依次利用何種方法進(jìn)行接種?其接種工具依次是什
5、么?其接種后 效果圖解應(yīng)如下圖中a還是b?提示平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法接種環(huán)涂布器Ea、F-b|應(yīng)試對(duì)接高胤感悟高考找規(guī)律命題角度微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)及無(wú)菌操作技術(shù)1.(2018.全國(guó)卷H , 37)生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?;卮鹣铝?問(wèn)題:(1)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線(xiàn)照射消毒,其原因是紫外線(xiàn)能。在照 射前,適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠(chǎng)供應(yīng)的自
6、來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)(填“氯氣”“乙醇”或“高鋅酸鉀”) 消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相 應(yīng)溫度,最可能的原因是 o解析(1)在實(shí)驗(yàn)室中,能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬材 質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時(shí) 消毒法與煮沸消毒法相比,其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)為在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失 較少。(3)紫外線(xiàn)照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細(xì)胞中的DNA分子。在 利用紫外線(xiàn)照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可強(qiáng)化消毒效果。 自來(lái)水通常采用氯氣消毒。(5)采用高壓蒸汽滅菌時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求
7、,而 溫度未達(dá)到相應(yīng)要求,最可能的原因是沒(méi)有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。答案可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少破壞DNA結(jié) 構(gòu) 消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡2.(2019.東北師大附中調(diào)研)大腸桿菌是遺傳學(xué)和微生物學(xué)中經(jīng)典的模式生物???研人員要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行研究,首先要純化大腸桿菌,請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí),回答下 列問(wèn)題:(1)純化大腸桿菌首先需要制備 培養(yǎng)基。在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮、溫度等條件。(2)可以估算出樣品中大腸桿菌密度的接種培養(yǎng)方法是,估算值一般比實(shí) 際值偏(填“大”或“小”)。(3)濾膜法可計(jì)數(shù)水樣中的大腸桿菌。將過(guò)濾過(guò)待測(cè)水樣的濾
8、膜緊貼在培養(yǎng)基上, 這屬于微生物培養(yǎng)中 操作。根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)分,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(4)如圖是大腸桿菌的純化培養(yǎng)的一種方法,1一234-5表示操作順序,培養(yǎng) 后可觀(guān)察到所需菌落的區(qū)域是,接種結(jié)束后將培養(yǎng)皿 放入恒溫箱中培養(yǎng)。解析(1)純化大腸桿菌首先需要制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基。大腸桿菌的培養(yǎng) 過(guò)程中,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)接種大 腸桿菌最常用的是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法,其中可以估算出樣品中大腸桿 菌空度的是稀釋涂布平板法。由于兩個(gè)或兩個(gè)以上細(xì)胞聚集在一起,觀(guān)察到的往 往是一個(gè)菌落,故估計(jì)數(shù)值一般偏小。(3)過(guò)濾過(guò)待測(cè)水樣的濾膜緊貼在培養(yǎng)基
9、上, 是將樣品中的大腸桿菌接種到培養(yǎng)基上,固體培養(yǎng)基適于計(jì)數(shù)。(4)圖中5區(qū)域就 可得到所需要的菌落。接種結(jié)束后要將平板倒置放入恒溫箱中培養(yǎng)。答案(1)牛肉膏蛋白陳固體 滲透壓(或酸堿度)(2)稀釋涂布平板法小接種固體(4)5倒置I歸納提升I1.無(wú)菌技術(shù)X條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化僅殺死物體表面或內(nèi)部煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體學(xué)方法的部分微生物化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手,用氯氣消毒水源滅菌強(qiáng)烈理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和泡子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器2 ,兩種純化細(xì)菌的方法的比較匕破項(xiàng)目平板劃線(xiàn)
10、法稀釋涂布平板法關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)一系列的梯度稀釋涂布平板法操作注意事項(xiàng)每次劃線(xiàn)前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高,為確保實(shí)驗(yàn)成功可以增加稀釋度的范圍菌體獲取在具有顯著菌落特征的區(qū)域的菌落中擬緘菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點(diǎn)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌洛,又能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)操作復(fù)雜,需要涂布多個(gè)平板考點(diǎn)二微生物的篩選和計(jì)數(shù)I考點(diǎn)自主族理I夯基固本提精華1 .土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)原理與流程G L能合成蛛前的細(xì)菌才分解尿素實(shí)臉L原期配制以顯堂為唯一氮源的培養(yǎng)基.能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌丫就是能分解尿
11、素的細(xì)菌宜接計(jì)數(shù)法(顯微鏡下用特定細(xì)菌濘數(shù)板或血細(xì)胞需P數(shù)板)Y 間接ii效法:能擇涂布平板法磁L土地取樣一配制土地溶液和制備培養(yǎng)基型掩隹 將程廠(chǎng)一涂而平板與培養(yǎng)一菌落11邀(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的1個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中L個(gè)活菌。 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(3)從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)的計(jì)算方法是(平均菌落數(shù)C.涂 布的稀釋液體積V)X稀釋倍數(shù)M點(diǎn)悟:利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是恰當(dāng)?shù)南♂尪取?4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)行區(qū)產(chǎn)隨現(xiàn)防邈也 未被雜菌污染 (圾當(dāng)尸數(shù)鶴_.被雜曲污染基具作,、稀華養(yǎng)否選工品評(píng)格是黛也L
12、樣祥選擇培養(yǎng)基上的菌落 數(shù)目遠(yuǎn)少于牛肉房培 養(yǎng)基匕的菌落數(shù)目得到2個(gè)或2個(gè)以上.菌落 數(shù)目在30-300的平板可復(fù)組、_比較各的結(jié)梟L垂第組選擇培養(yǎng)基具篩選 作用操作成功若選取同一種土樣.統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng) 接近2 .分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶及纖維素分解菌篩選原理、方法組成:纖維素酶是一種復(fù)領(lǐng).一般認(rèn)為它至少包、括三種組分,即C與、Q分和福菊糖/酶作用:纖維素露纖維二糖我國(guó)及0絲鋤的糖 纖維素分解菌_原理剛果紅)紅色凝合物空照紅色消失.選維分前前纖素解纖維素j二上上山也出現(xiàn)透明圈赭選方法:剛果紅染色法,即通過(guò)是否產(chǎn)生.透明圖 來(lái)篩選纖維素分解菌一培養(yǎng)基:以組螳為唯一碳源的選擇培養(yǎng)呈(2)
13、實(shí)驗(yàn)流程士壤取樣:富含睜索的環(huán)境I :漁燮疑卜用選擇培養(yǎng)一培界.以增加纖維素分解菌的濃度:I悌度-擇卜制備系列稀一液I :涂一平板一將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上I挑選菌落一挑選產(chǎn)生邈膽的菌落(3)分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選拄培養(yǎng)基,再用鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基為靖培養(yǎng)基,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng), 而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)。鑒別培養(yǎng)基含瓊脂,為固體培養(yǎng)基,細(xì)菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見(jiàn)的菌落。 剛果紅染色法應(yīng)用于鑒別(選擇、鑒別)培養(yǎng)基。3 .菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細(xì)菌選擇培養(yǎng)基的成分:尿素作為唯一的 氮源鑒定
14、方法:在培養(yǎng)基中加入酚紅指示 劑,若pH升高,指示劑變紅,說(shuō)明細(xì) 菌能分解尿素分解纖維素的微生物選擇培養(yǎng)基的成分:纖維素作為唯一 的碳源鑒定方法:剛果紅染色法,即 剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖 維素被分解后,培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分 解菌為中心的透明圈I應(yīng)試對(duì)接高胤感悟高考找規(guī)律1.(2018.全國(guó)卷I , 37)生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出 液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?;卮鹣铝袉?wèn)題:(DM培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制 的生長(zhǎng),加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基
15、中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類(lèi)型 除氮源外還有(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大 分子有(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長(zhǎng)出菌落后 可通過(guò)加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方 法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理是(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一 稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:中同學(xué)涂布了 3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133; 乙同學(xué)涂布了 3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有 人認(rèn)為這
16、兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是O解析(1)在微生物學(xué)中,將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種 類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱(chēng)做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選,則應(yīng) 加入鏈霉素以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、 蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、水等多種物質(zhì),因此,除氮源外其中還有微生物生長(zhǎng)所 需要的碳源、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)要素。進(jìn)入細(xì)胞的氮源可參與合成蛋白質(zhì)、核酸(DNA、 RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入顯色劑碘液后,淀粉遇碘變藍(lán),而淀粉的水 解產(chǎn)物則不發(fā)生這種反應(yīng)。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培 養(yǎng),土壤中能產(chǎn)生淀粉酶的微
17、生物可將淀粉分解,菌落周?chē)蜁?huì)出現(xiàn)透明圈,這 樣,我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選能產(chǎn)生淀粉酶的微生物了。(4)乙同學(xué) 的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,結(jié)果的重復(fù)性太差,不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯 藍(lán)色,產(chǎn)生淀粉酶的菌落周?chē)矸郾凰猓纬赏该魅Γ?)乙同學(xué)的結(jié)果中,1 個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差2.(2019.山東湖北部分重點(diǎn)中學(xué)聯(lián)考)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌,具有下列類(lèi)似的操作過(guò)程:制備培養(yǎng)基獲取土 壤樣品梯度稀釋選擇鑒別尿
18、素分解 并接種 f培養(yǎng)一菌,挑取單菌落制備培養(yǎng)基獲取土 壤樣品a I梯度稀釋 I培養(yǎng)11并接種鑒別纖維素分解 菌,挑取單菌落(1)在過(guò)程的選擇培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,過(guò)程的選擇培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基。(填“固體”或“液體”)。的具體措施是:的選擇措施是O(2)在過(guò)程樣品梯度稀釋后,一般只將稀釋度為104106分別接種到3個(gè)平板培 養(yǎng)基上。接種的常用方法為,(3)過(guò)程采用 的鑒別方法較簡(jiǎn)單。周?chē)霈F(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落,原因是:O 解析(1)將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),才能形成菌落,可見(jiàn),過(guò)程的選 擇培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。進(jìn)行梯度稀釋并接種前要進(jìn)行過(guò)程所示的選擇培養(yǎng), 因此過(guò)程的選
19、擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌, 所以具體的措施是應(yīng)以尿素為唯一氮源選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌, 所以的選擇措施是以纖維素為唯一碳源。(2)常采用稀釋涂布平板法(或平板劃線(xiàn) 法)法,將稀釋度為1爐 倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基上。(3)剛果紅 可與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏 色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后,剛果紅一千維素復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng) 基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈??梢?jiàn),過(guò)程采用倒平板時(shí)加入剛 果紅染液的鑒別方法較簡(jiǎn)單。由于不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物 菌落也可能出現(xiàn)透明圈,所以周?chē)霈F(xiàn)透
20、明圈的菌落,不能100%確定為纖維素 分解菌。答案(1)固體液體以尿素為唯一氮源以纖維素為主要碳源(2)稀釋涂布 平板法(或平板劃線(xiàn)法)(3)倒平板時(shí)加入剛果紅染液不分解纖維素(或分解剛 果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈I題后歸納I選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較種類(lèi)制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)依據(jù)某些微生 物對(duì)某些物質(zhì) 或環(huán)境條件的 嗜好、抗性而 設(shè)計(jì)從眾多微生物 中“分離”所 需的微生物, 淘汰不需要的 微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品依據(jù)微生物產(chǎn) 生的某種代謝 產(chǎn)物與培養(yǎng)基 中的特定試劑 或化學(xué)藥品反 應(yīng),產(chǎn)生明
21、顯 的特征變化而 設(shè)計(jì)“鑒別”不同 種類(lèi)的微生物 (注:未淘汰其 他微生物)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌澄清易混易錯(cuò)強(qiáng)化科學(xué)思維易錯(cuò)易混易錯(cuò)點(diǎn)1 “生長(zhǎng)因子”是否為所有微生物所必需?其是否在所有培養(yǎng)基中均需加入?點(diǎn)撥 碳源、氮源、水分、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子是微生物生長(zhǎng)必需的五大營(yíng)養(yǎng)成分, 但大多數(shù)培養(yǎng)基中都含碳源、氮源、水分、無(wú)機(jī)鹽四類(lèi)物質(zhì),可能不需額外添加 “生長(zhǎng)因子(如維生素)”,這是因?yàn)樵S多微生物可自行合成這些生長(zhǎng)因子,而對(duì)那 些合成能力有限或不能合成生長(zhǎng)因子的微生物(如乳酸菌),則需在培養(yǎng)基中添加 諸如維生素等生長(zhǎng)因子。易錯(cuò)點(diǎn)2進(jìn)行微生物分離或計(jì)數(shù)時(shí)如何設(shè)計(jì)“三組”(兩種對(duì)照組與重復(fù)組)
22、? 其作用是什么?點(diǎn)撥(1)兩種對(duì)照組作用比較判斷培養(yǎng)基的制備是否合格即“是否有雜菌污染”,需將“未接種”的培養(yǎng)基 同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。(此培養(yǎng)基若無(wú)菌落生長(zhǎng)則合格)判斷選擇培養(yǎng)基“是否具有篩選作用”,需設(shè)立牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行接種后 培養(yǎng),觀(guān)察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目,進(jìn)行對(duì)比得出結(jié)論。(若選擇培養(yǎng)基上菌落種 類(lèi)遠(yuǎn)少于對(duì)照組,則其可具“篩選”作用)重復(fù)組的設(shè)置及作用為排除“偶然因素”對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,在每一稀釋度下宜設(shè)置3個(gè)平板作重復(fù) 組,選擇菌落數(shù)均在30 300且數(shù)目相差不大的三個(gè)平板,用“平均值”代入計(jì) 數(shù)公式予以計(jì)算菌落數(shù)。易錯(cuò)點(diǎn)3進(jìn)行平板劃線(xiàn)時(shí),劃線(xiàn)前、劃線(xiàn)結(jié)束及中間各區(qū)劃線(xiàn)時(shí)是否均需灼燒
23、 接種環(huán)?其目的是否相同?點(diǎn)撥 平板劃線(xiàn)法純化大腸桿菌時(shí)不同階段均需灼燒接種環(huán)但其目的有所差異。第一次操作:殺死接種環(huán)上原有的微生物。每次劃線(xiàn)之前:殺死上次劃線(xiàn)后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線(xiàn)的菌種直接 來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端。劃線(xiàn)結(jié)束后:殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避免菌種污染環(huán)境和感染操作者。易錯(cuò)點(diǎn)4不明確“自養(yǎng)”與“異養(yǎng)”型微生物其培養(yǎng)基成分的顯著差異點(diǎn)撥 自養(yǎng)型微生物所需的主要是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)鹽,碳源可來(lái)自大氣中的CO2 ,氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。(2)異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物,即碳源必須由含碳有機(jī)物提供,氮源也主要是由含氮有機(jī)物提供,部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。規(guī)范答
24、題甲醛是一種來(lái)源廣泛的揮發(fā)性有機(jī)污染物,具有強(qiáng)烈的致癌和致畸作用,利用微 生物降解中醛來(lái)治理甲醛污染,具有高效、環(huán)保、無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)。如圖甲為 采集活性污泥作為優(yōu)良菌源,通過(guò)篩選分離出能以甲醛為唯一碳源的高效降解菌 的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:5比機(jī)液體培養(yǎng)展) 理酹.振茂培養(yǎng)取樣測(cè)定甲R(shí)5/度(1)上述實(shí)驗(yàn)材料中,不需要進(jìn)行滅菌處理的是,培養(yǎng)基滅菌的常用方法 為。該實(shí)驗(yàn)過(guò)程所用的選擇培養(yǎng)基只能以中醛作為唯一碳源,其原因是O(2)應(yīng)如何確認(rèn)添加中醛的培養(yǎng)基是否起到了篩選作用? (3)由一的分離活性污泥中細(xì)菌的接種方法(如圖乙)為 法,接種時(shí),對(duì)接種環(huán)應(yīng)進(jìn)行,在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí),總是從上
25、一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始,這樣做的目的是。(4)為研究甲醛初始濃度對(duì)菌株降解甲醛能力的影響,進(jìn)行了相應(yīng)實(shí)驗(yàn)。當(dāng)甲醛的初始濃度小于1 200 mg/L時(shí)菌株可以完全降解甲醛;當(dāng)甲醛的初始濃度增高至1 600 mg/L時(shí)。,48小時(shí)后菌株對(duì)甲醛的降解能力很弱,甚至失去降解能力,其原因可能是 O為了使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果準(zhǔn)確可靠,還應(yīng)該設(shè)置 的對(duì)照實(shí)驗(yàn),以排除甲醛自然揮發(fā)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。(5)純化菌株時(shí),通常使用的劃線(xiàn)工具是 o劃線(xiàn)的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一 劃線(xiàn)區(qū)域的劃線(xiàn)上都不間斷地長(zhǎng)滿(mǎn)了菌,第二劃線(xiàn)區(qū)域所劃的第一條線(xiàn)上無(wú)菌落, 其他劃線(xiàn)上有菌落。造成劃線(xiàn)無(wú)菌落可能的操作失誤有 O答卷采樣錯(cuò)因分析G誨性訪(fǎng)%,?
26、拄力戈& 4間卬磁妁融叫長(zhǎng) 熬a答題不規(guī)范,記憶不準(zhǔn)確。正確答案:高壓蒸汽滅菌。混淆兩種對(duì)照組用途正確答案:制備一個(gè)接種的牛肉接蛋白牛培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng), 觀(guān)察這兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)口彳事落概念理解不透,混淆“消毒”與“滅菌”。 正確答案:灼燒滅菌甲輪凝嗾軌蒯抬審題缺陷,解答失誤:看到“對(duì)照實(shí)驗(yàn)”即盲目作答,未 看到問(wèn)題后面的“以排除甲醛自然揮發(fā)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干 擾”。正確答案:不接種中醛降解菌if)晶橋環(huán)。佳鐘環(huán)灼人后同;®戈旗打4/我探索高考命題的奧秘(十)教材原型1 .(人教版選修一P2I “內(nèi)文第三自然段”)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選,人為提供有利 于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生 長(zhǎng)。在微生物學(xué)中,將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物 生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱(chēng)做選擇培養(yǎng)基(selective medi
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