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1、總結(jié)提升知識建網(wǎng)】【要語必背丨1植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的理論基礎(chǔ)都有細(xì)胞的全能性,后者還有細(xì)胞 膜的流動性;動物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動物細(xì)胞核的全能性。2人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心、振動、電激)和化學(xué)法(聚乙二醇處理),而動物細(xì)胞融合還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)。3 植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,甚至無病毒,因此用分生區(qū)組織進(jìn)行組織培養(yǎng), 再生的植株就不會或極少感染病毒。4.動物細(xì)胞培養(yǎng)一般選用胚胎或幼齡動物的組織, 細(xì)胞在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)細(xì)胞貼壁 (生長) 和接觸抑制的現(xiàn)象。培養(yǎng)的條件包括:無菌、無毒的環(huán)境,適宜的營養(yǎng)、溫度和pH及氣體環(huán)境。5雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免
2、疫的 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的,具有既能無限增殖又能 產(chǎn)生專一抗體的能力。6.制備單克隆抗體過程中第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選是為了獲得能產(chǎn) 生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。7單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高,并可大量制備。主要用途有:作為診 斷試劑、用于治療疾病和運載藥物。一、植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較及植物激素在組織培養(yǎng)中的作用1植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)技術(shù)花藥離體培養(yǎng)技術(shù)選材體細(xì)胞生殖細(xì)胞(精子)生殖方式無性生殖有性生殖相同點植物細(xì)胞全能性;外植體T愈傷組織T叢芽T生根T移栽;無菌技術(shù); 接種等2植物激素在組織培養(yǎng)過程
3、中的重要作用生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素, 其作用及特點如下表:激素使用實驗結(jié)果使用順序先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素細(xì)胞既分裂也分化生長素與細(xì)胞分裂素同時使用分化頻率提高生長素用量與該比值高時有利于根的分化,抑制芽的形成細(xì)胞分裂素用量的比例該比值低時有利于芽的分化,抑制根的形成該比值適中時促進(jìn)愈傷組織的形成例1 請回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題:(1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為 。2組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為(3)在再分化階段所用的培養(yǎng)基中,含有植物激素X和植物激素Y。逐
4、漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比,未分化細(xì)胞群的變化情況如圖所示。 據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比 與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系。 當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時,< 當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時,< 當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時,<(4)生產(chǎn)上用試管苗保存植物的優(yōu)良性狀,其原因是 。答案(1)外植體(2)脫分化(或去分化)(3)未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織未分化細(xì)胞群分化形成芽未分化細(xì)胞群分化形成根(4)組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性繁殖,后代不發(fā)生性狀分離解析(1)植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體。(2)植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再
5、分化,脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài),再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)。(3)仔細(xì)分析所給示意圖,可知植物激素 X與植物激素Y濃度比為1時,利于愈傷組織的形成;大于 1 時利于細(xì)胞群分化出芽;小于 1時利于細(xì)胞群分化出根。(4)植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖 技術(shù),有利于保持親本的優(yōu)良性狀。二、單克隆抗體制備的關(guān)鍵思路及篩選原因1. 關(guān)鍵思路及操作依據(jù)(1)關(guān)鍵思路 克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群。 將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得雜交瘤細(xì)胞。用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因 每一個B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體;不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。 B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時不能無限增殖;
6、骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。2. 單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,因為有三種融合情況 (只考慮細(xì)胞兩 兩融合):B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,而只有 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。(2) 第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng),在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個雜交瘤細(xì)胞克隆來的,所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的單克隆抗體。特別提醒】上述B淋巴細(xì)胞為經(jīng)過免疫的 B淋巴細(xì)胞。例 21975年科學(xué)家首
7、次利用 B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請據(jù)圖回答下列問題:(1) 病原體注入小鼠體內(nèi)后,要經(jīng)過 細(xì)胞處理后,才能被免疫細(xì)胞識別。(2) 制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞一般從脾中采集,然后以 作誘導(dǎo)劑,使B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。通過篩選和克隆培養(yǎng),獲得的雜交瘤細(xì)胞具有的特點。(3) 單克隆抗體的特點是 。根據(jù)圖示寫出應(yīng)用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法 。答案吞噬(2)滅活的病毒或聚乙二醇既能產(chǎn)生特異性抗體,又能無限增殖特異性強,純度高、并可大量制備 (或?qū)R恍詮姟㈧`敏度高)體外培養(yǎng)法和動物體內(nèi)培養(yǎng)法解析 滅活的病毒和聚乙二醇均可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合;雜交瘤細(xì)胞同時具有兩個親代細(xì)胞
8、的遺傳特性;可以在體外培養(yǎng)也可以在體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆抗體。1 關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素,下列說法正確的是()A 不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同B .在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中必須添加植物激素C.植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素的作用是相互獨立的D . pH、溫度、光照條件等對植物組織培養(yǎng)特別重要答案 D解析不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料也會因年齡、保存時間的長短等導(dǎo)致培養(yǎng)的難易程度不同;在植物組織培養(yǎng)中, 培養(yǎng)基中常常要添加植物激素,但不是都必須添加植物激素,如菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易,不必添加植物激素; 各種植物激素的作用是相互聯(lián)系的
9、,而不是相互獨立的。2.為了培育菊花新品種,科學(xué)家利用二倍體野生夏菊和六倍體栽培秋菊進(jìn)行雜交,培育過程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是()A . d植株含有夏菊和秋菊的遺傳物質(zhì)B .與過程有關(guān)的細(xì)胞器只有高爾基體比較活躍C.過程常選擇酶解法去壁,一般在低滲溶液中進(jìn)行D .野生夏菊和栽培秋菊自然雜交后是四倍體,屬于同一物種答案 A解析 d植株含有野生夏菊和栽培秋菊的遺傳物質(zhì),A正確;過程是雜種細(xì)胞形成細(xì)胞壁,有關(guān)的細(xì)胞器有高爾基體、線粒體等,B錯誤;過程為去除細(xì)胞壁的過程,植物體細(xì)胞雜交的實質(zhì)是植物原生質(zhì)體的融合,所以在融合前需要使用酶解法(纖維素酶和果膠酶 )去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁, 獲得植物的原
10、生質(zhì)體, 此操作一般在等滲溶液中進(jìn)行, 如在低滲溶液中進(jìn)行,則去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體會因吸水而漲破,C 錯誤; 野生夏菊和栽培秋菊自然條件下不能雜交,存在生殖隔離,屬于不同物種,D 錯誤。3 下列生物技術(shù)不屬于細(xì)胞工程領(lǐng)域的是()A .植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)C.克隆技術(shù)D.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)答案 B解析 細(xì)胞工程是在細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上進(jìn)行的操作。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的操作對象為基因,即 DNA 分子水平上的操作技術(shù),屬于基因工程。4用甘薯的莖尖分生組織離體培養(yǎng),可快速繁殖脫毒的種苗。下列說法不正確的是()A 該過程依據(jù)的主要原理是植物細(xì)胞的全能性B 形成脫毒的種苗只經(jīng)過細(xì)胞分裂,沒有細(xì)胞分化的
11、發(fā)生C.顯微鏡下觀察處于細(xì)胞周期中的細(xì)胞,在多數(shù)細(xì)胞中看不到染色體D 甘薯的莖尖細(xì)胞中含有甘薯的全套遺傳物質(zhì)答案 B解析 植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性, A 正確; 該過程中細(xì)胞都通過有絲分裂方 式增殖,由莖尖分生組織到脫毒苗經(jīng)過植物組織培養(yǎng),要發(fā)生細(xì)胞分化過程,B 錯誤;細(xì)胞周期包括分裂間期和分裂期, 其中分裂間期所占的時間長, 因此顯微鏡下觀察細(xì)胞周期中的 細(xì)胞,絕大多數(shù)細(xì)胞處于分裂間期,看不到染色體, C 正確;甘薯的莖尖細(xì)胞是由受精卵有 絲分裂形成的,含有甘薯的全套遺傳物質(zhì), D 正確。5.實驗小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng) (非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是(TI皮膚細(xì)胞
12、一亠 培養(yǎng)細(xì)胞1A 甲過程需要對實驗小鼠進(jìn)行消毒B 乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶處理C.丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D 丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性答案 C解析 動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌無毒的環(huán)境,甲過程是指從實驗小鼠身上取下皮膚組織,該過程需要對小鼠進(jìn)行消毒處理,A項正確;乙過程表示將得到的皮膚組織分散成單個細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理,B項正確;丙過程表示原代培養(yǎng),此時的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型,C項錯誤;丁過程表示傳代培養(yǎng), 少部分細(xì)胞會克服細(xì)胞壽命的自然極限, 獲得不死性,這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展,D項正確。6美國得克薩斯州科學(xué)家
13、培育出世界上第一只克隆貓,這只小貓毛色花白,看上去完全不像生養(yǎng)它的花斑貓媽媽,也不完全像為它提供細(xì)胞核的基因貓媽媽。對該克隆貓毛色的解釋合理的選項是()基因重組所造成的結(jié)果提供卵細(xì)胞的雌貓細(xì)胞質(zhì)基因表達(dá)的結(jié)果表現(xiàn)型是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果生養(yǎng)它的花斑貓媽媽的基因表達(dá)的結(jié)果A .B.C.D.答案 B解析 細(xì)胞核移植沒有發(fā)生基因重組,因而不是基因重組所造成的結(jié)果,錯誤;由于動物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的線粒體內(nèi)含有少量的遺傳物質(zhì)DNA,所以提供卵細(xì)胞的雌貓細(xì)胞質(zhì)基因能表達(dá)出性狀,正確;基因的表達(dá)受環(huán)境因素的影響,所以表現(xiàn)型是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果,正確;生養(yǎng)它的花斑貓媽媽與小貓之間只有營養(yǎng)物質(zhì)的交換
14、,沒有基因的交流,錯誤。因此對該克隆貓毛色的解釋合理的是,選B。7 獲得大量單克隆抗體必須用單個的B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,形成細(xì)胞群。其原因是( )A 在體外培養(yǎng)條件下 B淋巴細(xì)胞可以無限增殖B每一個B淋巴細(xì)胞都參與特異性免疫反應(yīng)C.單個的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力強D .在動物體內(nèi) B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的抗體,而每一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體答案 D解析 在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中,體內(nèi)的 B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異 性抗體,但是每一個 B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。因此,要想獲得大量的單一抗體, 必須用單個的 B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,也就是通過克隆形成細(xì)胞群,這
15、樣的細(xì)胞群就有 可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體一一單克隆抗體。&核苷酸合成有兩個途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑 (如下圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?,F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“ HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。關(guān)于篩選原理的敘述,正確的是()A 免疫的B淋巴細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖B 骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因無法進(jìn)行上述兩個途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖C.雜交瘤細(xì)胞因為可以進(jìn)行上述兩個途徑所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖D HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有
16、雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體答案 B解析 免疫的B淋巴細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞均屬于成熟細(xì)胞,不能增殖,A錯誤;骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶,又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì) A阻斷了全合成途徑,所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖,B正確;雜交瘤細(xì)胞因為可以進(jìn)行補救合成途徑,故能夠在HAT培養(yǎng)基上大量增殖,C錯誤;HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞能大量增殖,也能產(chǎn)生抗 體,但不一定產(chǎn)生特異性抗體,D錯誤。9. (2019廣東,29節(jié)選)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下:新生營養(yǎng)芽誘
17、導(dǎo)>PLBs增殖培養(yǎng)> 不冋時間PLBs取樣、檢測>實驗結(jié)果在固體培養(yǎng)基上, PLBs 的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,請回答下列問題:(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是 ,誘導(dǎo)外植體形成 PLBs 的過程稱 。(2)與黑暗條件下相比, PLBs 在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在 , , 。答案 (1)營養(yǎng)芽細(xì)胞分裂能力強,幾乎不含病毒脫分化(2) 開始增重的時間早增重持續(xù)的時間長 PLBs 增重的量更多解析 (1) 選用新生營養(yǎng)芽為外植體是因為其分裂能力旺盛且?guī)缀醪粩y帶病毒。誘導(dǎo)外植體 形成類似愈傷組織的 PLBs 的過程稱為脫分化。 (2)分析曲線圖可知,在
18、光照條件下 PLBs 開 始增重的時間早,增重持續(xù)的時間長,增重的量更多。10美國科學(xué)家已經(jīng)在實驗室中成功培育出膀胱,并順利移植到 7 名患者體內(nèi)。 這種技術(shù)為那些急需器官移植的患者帶來福音?;卮鹣铝袉栴}:(1)科學(xué)家從患者的膀胱上取下一小塊活細(xì)胞樣本,將其中的肌肉細(xì)胞和膀胱上皮細(xì)胞分別 置于不同的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。 在培養(yǎng)之前, 需用 處理以分散細(xì)胞, 細(xì)胞在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)過程屬于 代培養(yǎng)。 與植物組織培養(yǎng)相比, 動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的主要不同點是含有 。(2) 約 1 周后將培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞放在由膠原質(zhì)制成的支架上繼續(xù)培養(yǎng),再過7 周左右,原先的數(shù)萬個細(xì)胞已經(jīng)繁殖到 15 億個左右,布滿支架,膀胱上皮在內(nèi),肌肉在外,形成新膀胱。 細(xì)胞數(shù)目大量增加, 其增殖方式是 ,這些細(xì)胞形成肌肉和膀胱上皮的過程中要經(jīng)過 。(3) 醫(yī)生將新膀胱移植到患者膀胱的上面,這樣新器官會繼續(xù)生長并與老器官重組取代老器 官中喪失功能的部分。新器官與老器官的重組 (填“是”或“不是” )基因重組;新膀胱移植后, (填“會”或“不會” ) 引起免疫排斥反應(yīng)。(4) 除上述方法外, 還可將患者的體細(xì)胞核移入去核的 中,利用體細(xì)胞 技術(shù),形成相應(yīng)組織、器官用于疾病的治療。答案 (1) 胰蛋白酶 (或膠原蛋白酶 ) 原 動物血清、血漿 (2) 有絲分裂 細(xì)胞分化 (3)
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