平肝潛陽藥物對偏頭痛肝陽上亢證患者的臨床療效及其對血淋巴細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的影響

1、    【摘要】    目的：觀察平肝潛陽藥物對偏頭痛肝陽上亢證患者的臨床療效和對血淋巴細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的影響，為深入研究偏頭痛肝陽上亢證病理生理機(jī)制及平肝潛陽法治療作用的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法：32例偏頭痛肝陽上亢證患者隨機(jī)分為治療組和對照組。治療組口服平肝潛陽方，對照組口服氟桂利嗪片劑。治療2個(gè)療程。觀察患者治療前后的中醫(yī)癥狀積分、止痛療效和不良反應(yīng)；采用雙向凝膠電泳、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法分離和鑒定偏頭痛患者外周血淋巴細(xì)胞和正常人之間差異蛋白表達(dá)，并觀察應(yīng)用平肝潛陽方干預(yù)后，各組差異蛋白質(zhì)表達(dá)水平的

2、變化。    結(jié)果：平肝潛陽方有明顯止痛效果（87.5%），與氟桂利嗪片（75.0%）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P    結(jié)論：平肝潛陽中藥復(fù)方有良好的止痛作用，能改善中醫(yī)癥狀；可能通過調(diào)節(jié)部分血淋巴細(xì)胞蛋白質(zhì)的表達(dá)治療偏頭痛肝陽上亢證。    【關(guān)鍵詞】 平肝; 潛陽; 肝陽上亢; 蛋白質(zhì)組學(xué); 偏頭痛; 隨機(jī)對照試驗(yàn) Zhong GW, Li W, Luo YH, Chen GL, Yi ZJ, Hu JJ, Zhang Y, Yin YH, Zhang L. J Chin

3、 Integr Med. 2009; 7(1):2533. Received July 30, 2008; accepted August 12, 2008; published online January 15, 2009. Indexed/abstracted in and full text linkout at PubMed. Journal title in PubMed: Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao. Free full text (HTML and PDF) is availyang in treatment of migraine with hype

4、ractive liveryang sydrome and its effects on lymphocyte protein expression: a randomized controlled trial Guangwei ZHONG1, Wei LI1, Yanhong LUO2, Guolin CHEN1, Zhenjia YI1, Jianjun HU1, Ying ZHANG1, Yaohui YIN1, Le ZHANG3 1. Research Institute of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine,

5、Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan Province 410008, China 2. Department of Emergency, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan Province 410008, China 3. Department of Neurology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan Province 410008, C

6、hina Objective: To observe the efficacy of herbs for calming liver and suppressing liveryang in treatment of migraine patients with hyperactivity of liveryang syndrome and to investigate its effects on the lymphocyte protein expression. This approach may lay a foundation for the further investigatio

7、n of pathogenic mechanisms in migraine with hyperactive liveryang sydrome and the curative mechanisms of calming liver and suppressing liveryang treatment. Methods: A total of 32 migraine patients with hyperactivity of liveryang syndrome were randomly divided into treatment group (16 cases) and cont

8、rol group (16 cases). The patients in the treatment group were treated with herbs for calming liver and suppressing liveryang in accordance with traditional Chinese medicine (TCM) theory and the patients in the control group were treated with Flunarizine Capsules for two courses of treatment. The th

9、erapeutic effects, the score of TCM symptom and the changes of headache attack were observed in both groups before and after the treatment. The side effects were also observed in both groups. The level of differential protein expression was analyzed by twodimensional electrophoresis and matrixassist

10、ed laser desorption/ionization timeofflight mass spectrometry (MALDITOFMS). Results: The herbs for calming liver and suppressing liveryang had better effects on headache improvement than the Flunarizine Capsules (P0.01). The cure rates in the treatment and control groups were 87.5% and 75.0% respect

11、ively. Vertigo, restlessness and tantrum, and prosopoheat in the treatment group were also improved as compared with those in the control group (P0.05). After treatment, the score of TCM symptom in the two groups were all decreased (P0.01), and there was a significant difference between the treatmen

12、t group and the control group (P0.01). The herbs for calming liver and suppressing liveryang had no side effects. The average protein spots in the blood lymphocyte of normal people, migraine patients with hyperactivity of liveryang syndrome in the treatment group before and after the treatment were

13、(534±42), (552±54) and (529±55) spots respectively. Six downregulated protein expressions and 14 upregulated protein expressions were obtained in the treatment group. Four strengthened protein expressions in the six downregulated proteins and 11 low protein expressions in the 14 upreg

14、ulated proteins were also obtained after treatment. Ten of the total 12 differential protein spots were successfully identified by MALDITOFMS. The functions of these proteins were involved in metabolism, energy generation, transportation, antioxidation, signal transduction and immune, etc. According

15、 to information provided by NCBI and MSDB database, there were some proteins closely related to migraine with hyperactivity of liveryang syndrome, such as peroxiredoxin 2, heat shock protein 27 and annexin A1. Conclusion: Herbs for calming liver and suppressing liveryang is effective in treating mig

16、raine, and can improve TCM symptoms. The effects on migraine patients with hyperactivity of liveryang syndrome may be related to regulating the blood lymphocyte protein expression. Keywords: calming the liver; suppressing liveryang; liveryang hyperactivity; proteomics; migraine disorder; randomized

17、controlled trials 偏頭痛（migraine）在以頭痛為癥狀的疾病中占有很重要的地位，在美國約17.2%的女性和6%的男性曾有偏頭痛發(fā)作，但僅有48%的患者就診。肝陽上亢證是偏頭痛的常見證型。平肝潛陽藥物治療偏頭痛肝陽上亢證有較好的療效。但平肝潛陽藥物治療偏頭痛肝陽上亢證的作用機(jī)制目前尚未闡明。我們應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究了平肝潛陽藥物對偏頭痛肝陽上亢證患者血淋巴細(xì)胞表達(dá)的影響。 1 資料與方法 1.1 研究對象 1.1.1 偏頭痛肝陽上亢證患者 32例偏頭痛肝陽上亢證患者（2005年8月2007年12月中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科門診及住院病人）按就診順序隨機(jī)分為治療組和對照組各1

18、6例，其中治療組男性5例，女性11例，年齡1863歲，平均年齡（34.7± 6.2）歲，平均病程（2.1±0.6）年；對照組男性                 6例，女性10例，年齡1963歲，平均年齡（33.8±7.1）歲，平均病程（2.2±0.5）年。兩組在年齡和病程方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 1.1.2 正常人 選取年齡、性別與治療組、對照組相匹配的健康人10例，并經(jīng)病史調(diào)查、

19、體格檢查、心電圖及胸片等檢查排除心腦血管疾病病史，均為中南大學(xué)湘雅醫(yī)院健康體檢中心體檢者和本院健康職工。其中男性3例，女性7例，年齡2165歲，平均年齡（33.3±7.4）歲，與上述治療組和對照組的年齡和性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2004年第2版國際頭痛疾病分類標(biāo)準(zhǔn)，排除繼發(fā)性偏頭痛。中醫(yī)辨證及證候判定標(biāo)準(zhǔn)參考中醫(yī)肝臟象現(xiàn)代研究與臨床。主癥：（1）眩暈；（2）頭痛；（3）面部烘熱；（4）煩躁易怒；（5）口苦而渴；（6）脈弦。兼證：（1）耳鳴；（2）五心煩熱；（3）失眠；（4）心悸；（5）肢麻；（6）震顫。具備主癥中的4項(xiàng)和12項(xiàng)兼癥

20、者可診斷為肝陽上亢證。納入病例標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡1865歲；（2）符合西醫(yī)偏頭痛診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辨證肝陽上亢證者。 1.3 觀察指標(biāo)及療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 1.3.1 頭痛平均發(fā)作次數(shù)和平均持續(xù)時(shí)間 參考國際頭痛疾病分類標(biāo)準(zhǔn)。頭痛持續(xù)時(shí)間：記錄頭痛發(fā)作至停止的時(shí)間，如果患者疼痛時(shí)入睡，到醒來時(shí)頭痛已消失，則醒來的時(shí)間為頭痛停止的時(shí)間（以小時(shí)為計(jì)算單位）。無疼痛發(fā)作記0分，輕度頭痛（發(fā)作持續(xù)時(shí)間12 h）記2分，中度頭痛（發(fā)作持續(xù)時(shí)間在1248 h）記4分，重度頭痛（發(fā)作持續(xù)時(shí)間48 h）記6分。頭痛發(fā)作次數(shù)：記錄治療前后2個(gè)月及隨訪2個(gè)月內(nèi)頭痛發(fā)作次數(shù)（以月為計(jì)算單位）。無疼痛發(fā)作記0分，輕度疼痛發(fā)作（2

21、次/月）記2分，中度疼痛發(fā)作（34次/月）記4分，重度疼痛發(fā)作（5次/月）記6分。 1.3.2 止痛療效判定標(biāo)準(zhǔn) 臨床控制為疼痛完全消失；顯效為疼痛強(qiáng)度減輕兩級，或頭痛持續(xù)時(shí)間縮短2/3；有效為疼痛強(qiáng)度減輕一級，或頭痛持續(xù)時(shí)間縮短2/3；無效為疼痛強(qiáng)度減輕不足一級，或頭痛持續(xù)時(shí)間縮短1/3或頭痛加重，持續(xù)時(shí)間延長。頭痛起效和消失時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)以首次服藥時(shí)間為基準(zhǔn)（以小時(shí)為計(jì)算單位）。 1.3.3 中醫(yī)癥狀評分 眩暈、頭痛、煩躁易怒、面目紅赤或面部烘熱和口苦而渴等主癥以及耳鳴、五心煩熱、失眠、心悸、肢麻、震顫和腰膝酸軟等兼癥均按無、輕、中、重、嚴(yán)重評為0、1、2、3和4分。 1.3.4 證候療效判定標(biāo)

22、準(zhǔn) 參考中醫(yī)肝臟象現(xiàn)代研究與臨床。臨床痊愈：中醫(yī)臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候積分減少91%；顯效：中醫(yī)臨床癥狀、體征明顯改善，證候積分減少70%90%；有效：中醫(yī)臨床癥狀、體征均好轉(zhuǎn)，證候積分減少35%69%；無效：中醫(yī)臨床癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，證候積分減少不足35%。積分評分方法采用尼莫地平法，證候積分=（治療前積分值治療后積分值）/治療前積分值×100%。 1.3.5 不良反應(yīng) 全部患者治療前后均進(jìn)行血、尿、糞便常規(guī)和心肝腎功能檢測，用藥后隨訪期間詳細(xì)記錄可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)，包括癥狀以及發(fā)生、持續(xù)和消退的時(shí)間。 1.4 治療藥物 治療組患者服用平肝潛陽中藥復(fù)方湯

23、劑。平肝潛陽方（自擬方）由天麻12 g，鉤藤10 g，石決明20 g，牡蠣30 g，川芎10 g組成，為深圳市三九中藥現(xiàn)代有限公司提供的中藥顆粒劑型。根據(jù)處方劑量將單味顆粒調(diào)配成湯劑，200 ml溫開水沖服，分2次口服（100 ml/次），2次/d，14 d為1個(gè)療程，2個(gè)療程結(jié)束后統(tǒng)計(jì)療效。對照組患者服用氟桂利嗪片劑（西比靈片劑，5 mg/片，批準(zhǔn)文號為國藥準(zhǔn)字h10910003），由西安揚(yáng)森公司提供，5 mg/次，每晚睡前口服1次，10 d為1個(gè)療程，2個(gè)療程結(jié)束后統(tǒng)計(jì)療效。 1.5 試劑 人淋巴細(xì)胞分離液，產(chǎn)自天津?yàn)笊镉邢薰?；丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺、固化pH梯度（immobili

24、zed pH gradient, IPG）干膠條（IPG strip pH310NL，24 cm）均由Amersham Biosciences公司提供；二硫蘇糖醇（dithiothreitol, DTT）、甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮胰蛋白酶、乙腈、三氟乙酸和基質(zhì)氰基4羥基肉桂酸（cyano4hydroxycinnamic acid, CCA）均由Sigma公司提供。 1.6 儀器 Ettan DALTSystem垂直電泳槽（Amersham公司），PDQuest 7.0分析軟件（BioRad公司），Image Scanner掃描儀（Amersham公司），EXL800自動(dòng)酶標(biāo)儀（BilTek In

25、strument，Inc），VoyagerDE STR 4307 MALDITOFMS質(zhì)譜儀（Applied Biosystem公司）。 1.7 研究方法 1.7.1 樣本的收集和制備 1.7.1.1 樣本的收集 5 ml靜脈血用等量Hanks液稀釋后加在淋巴細(xì)胞分離液上。離心速度為1 8002 000 r/min，20 min，4 。洗滌2次，離心速度為1 5001 800 r/min，10 min，4 。沉淀物用RPMI1640稀釋成適用濃度的淋巴細(xì)胞懸液（2×106/ml），隨后放入80 冰箱中保存?zhèn)溆谩?1.7.1.2 淋巴細(xì)胞蛋白質(zhì)的抽提 淋巴細(xì)胞懸液（2×106

26、/ml）加入200 l細(xì)胞裂解液57 mol/L尿素，2 mol/L硫尿素，10 mmol/L DTT，4% 33(膽酰胺基丙基)二甲氨基丙磺酸鹽，1 mmol/L乙二胺四乙酸，40 mmol/L三羥甲基氨基甲烷，1 mmol/L苯甲基磺酰氟，40 mmol/L Trisbase。室溫下靜置1 h，4 12 000×g離心60 min，吸取上清液作為細(xì)胞的總蛋白。取少許上清液用二喹啉甲酸測血淋巴細(xì)胞蛋白濃度，采用Amersham 2D Quant Kit。其余上清液凍存于80 備用。 1.7.2 雙向凝膠電泳 1.7.2.1 第一向IPG等電聚焦 IPGDALT主要按IPGphor操

27、作說明進(jìn)行。淋巴細(xì)胞總蛋白質(zhì)（500 g）與水化液充分混合，加入IPG strip持膠槽，IPG干膠條置入Holder中，再加上覆蓋液，以膠條剛好蓋住為宜。置于IPGphor等電聚焦儀的電極板上，總電壓時(shí)間為70 020 Vh，其中水化在30 V低電壓進(jìn)行14 h，然后經(jīng)過100 V 1 h、500 V 1 h、1 000 V 1 h，最后穩(wěn)定在8 000 V 8.5 h。 1.7.2.2 第二向垂直十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳 等電聚焦結(jié)束后，取出一向IPG膠條，沖洗水化液，置于平衡液A50 mmol/L pH 8.8 TrisHCl，6 mol/L尿素，30%甘油，1%十二烷基硫酸鈉（

28、sodium dodecyl sulfate, SDS），0.2% DTT和平衡液B（50 mmol/L pH 6.8 TrisHCl，6 mol/L尿素，30%甘油，1%SDS，3%碘乙酰胺，痕量溴酚藍(lán)）中分別平衡15 min。從平衡管中取出膠條，沖洗。將平衡后的膠條移至0.75 mm厚的12.5%均勻分離膠上端，在其酸性端放置SDS標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)，用瓊脂糖封膠，先設(shè)置恒功率2.5 W/塊膠電泳30 min，再改用恒功率17 W/塊膠電泳至溴酚藍(lán)離膠最底端約1 mm處停止電泳。 1.7.2.3 考馬斯亮藍(lán)染色 將經(jīng)過第二向垂直板十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠（sodium dodecyl sulf

29、atepolyacrylamide gel electrophoresis, SDSPAGE）電泳的12.5%丙烯酰胺膠從制膠板中分離出來，用雙蒸水漂洗；再加入考馬斯亮藍(lán)染液，水平搖床上染色過夜。 1.7.3 凝膠圖像分析 用Image Scanner掃描儀及LabScan掃描軟件進(jìn)行掃描，獲取圖像。以PDQuest 7.0分析軟件進(jìn)行圖像分析。蛋白質(zhì)表達(dá)水平上升或下降200%的點(diǎn)作為目標(biāo)點(diǎn)，進(jìn)行鑒定。 1.7.4 質(zhì)譜分析 1.7.4.1 蛋白質(zhì)的膠內(nèi)酶解 蛋白質(zhì)的膠內(nèi)酶解參照Fernandez等6的方法并加以改進(jìn)。將差異顯示蛋白質(zhì)斑點(diǎn)，分別從凝膠上切割下來，用超純水振動(dòng)洗滌3次，加入100

30、 l新鮮配制的凝膠脫色液，37 水浴30 min，脫色至凝膠粒無色，小心吸出脫色液，然后加入100%乙氰100 l脫水2次，15 min/次，膠粒置于冷凍抽干儀中抽干，加入510 l胰蛋白酶酶解液，冰上吸脹1 h，每點(diǎn)加入30 l酶解覆蓋液37 水浴過                 夜。取上清收集于0.5 ml EP管中，每膠點(diǎn)加入萃取工作液30 l，37 水浴1 h，取上清與前上清混合，冷凍抽干儀抽干后用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間

31、質(zhì)譜（matrixassisted laser desorption/ionization timeofflight mass spectrometry, MALDITOFMS）測定肽質(zhì)量指紋圖譜。 1.7.4.2 MALDITOFMS 將萃取后凍干的樣品用萃取工作液約4 l溶解，用Tips反復(fù)在樣品液中吸進(jìn)壓出，進(jìn)行多次循環(huán)操作，使樣品充分混勻，取0.6 l點(diǎn)于點(diǎn)樣板上，每點(diǎn)再加0.6 l CCA基質(zhì)工作液置空氣中自然風(fēng)干。肽段樣品用MALDITOFMS檢測，質(zhì)譜檢測是在正離子反射模式中進(jìn)行，N2激光源，波長337 nm，飛行管長3 m，加速電壓20 kV，反射電壓23 kV，質(zhì)譜使用基質(zhì)峰

32、和胰酶自動(dòng)降解離子峰作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)校正。 1.7.5 數(shù)據(jù)庫查詢 采用Matrixscience公司的Mascot軟件搜索數(shù)據(jù)庫。肽質(zhì)量控制在8004 000，肽片段質(zhì)量最大誤差控制在0.05%，酶解片段不完全選擇為1個(gè)，物種來源為人體，離子選擇M+H和monoisotopic，半胱氨酸經(jīng)碘乙酰胺處理，信號峰采用Mascot Distiller軟件識別。 1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0，計(jì)量資料均以x±s表示，采用方差分析；等級計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)。 2 結(jié) 果 2.1 頭痛平均發(fā)作次數(shù)和平均持續(xù)時(shí)間 治療組和對照組治療后頭痛平均發(fā)作次數(shù)和平均持

33、續(xù)時(shí)間較治療前均明顯改善（P 2.2 止痛療效 32例患者均完成2個(gè)療程的治療，治療組總有效率為87.5%，對照組為75.0%，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 2.3 中醫(yī)癥狀改善情況 治療組和對照組治療后各癥狀均較治療前明顯緩解，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 2.4 中醫(yī)癥狀積分的變化 治療組和對照組治療后中醫(yī)癥狀積分均下降，與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 2.5 不良反應(yīng) 在臨床觀察過程中，治療組和對照組心、肝、腎功能均未發(fā)現(xiàn)明顯異常。對照組部分患者服藥后出現(xiàn)輕微嗜睡和無力現(xiàn)象，但尚可耐受，未有因不能耐受而退出試驗(yàn)者，其中1例有胃部燒灼感，除外原發(fā)胃腸疾病，予以對癥處理后癥狀消失；治療組未出現(xiàn)

34、明顯不良反應(yīng)。 2.6 血淋巴細(xì)胞雙向凝膠電泳圖譜及差異蛋白質(zhì)點(diǎn)分析 在相同條件下分別對10例正常人和10例治療組偏頭痛肝陽上亢證治療前及治療后的血淋巴細(xì)胞總蛋白質(zhì)進(jìn)行雙向凝膠電泳，采用Image Scanner掃描儀掃描獲取圖像，然后通過ImageMaster 2D Elite 4.01分析軟件對其進(jìn)行點(diǎn)檢測，獲得正常人血淋巴細(xì)胞和治療組偏頭痛肝陽上亢證治療前后血淋巴細(xì)胞的雙向凝膠電泳圖譜，其平均蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)依次為（534±42）、（552±54）和（529±55）。分別將其中的一塊膠定為參考膠進(jìn)行3塊凝膠間的蛋白質(zhì)點(diǎn)的匹配，平均匹配點(diǎn)數(shù)為（466±51

35、），其匹配率為86.6%。由此獲得了重復(fù)性較好的正常人血淋巴細(xì)胞和治療組偏頭痛肝陽上亢證治療前后血淋巴細(xì)胞的雙向凝膠電泳圖譜。見圖1。經(jīng)圖像分析統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)，與正常人比較，偏頭痛肝陽上亢證患者有6個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，14個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)；偏頭痛肝陽上亢證治療前后比較發(fā)現(xiàn)表達(dá)下調(diào)的6個(gè)蛋白質(zhì)中有4個(gè)表達(dá)增強(qiáng)，而表達(dá)上調(diào)的14個(gè)蛋白質(zhì)中有11個(gè)表達(dá)降低。見表5。表5 相關(guān)蛋白點(diǎn)在正常組和治療組凝膠中的相對表達(dá)強(qiáng)度 2.7 差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)的MALDITOFMS質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫查詢 選取圖像分析統(tǒng)計(jì)后的差異大于2倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)，膠內(nèi)酶切提取蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。共得到12個(gè)肽質(zhì)量指紋圖譜，其中2個(gè)無質(zhì)譜結(jié)果，

36、搜索到10個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白質(zhì)。7號蛋白質(zhì)點(diǎn)的肽質(zhì)量指紋圖見圖2；經(jīng)Mascot軟件搜索到的7號蛋白質(zhì)點(diǎn)的評分見圖3。初步鑒定的蛋白質(zhì)按功能進(jìn)行初步分類，主要有通道蛋白、抗氧化蛋白、專利蛋白、代謝相關(guān)蛋白、免疫相關(guān)蛋白和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白等。其中鑒定的蛋白分別為乙醇脫氫酶3、免疫球蛋白重鏈區(qū)域、中性粒細(xì)胞防御素4前體、黑素瘤相關(guān)性E2抗原、專利LOC339483蛋白、免疫球蛋白重鏈片斷、熱休克蛋白27、膜聯(lián)蛋白A1、硫氧還蛋白過氧化物酶2和谷胱甘肽合成轉(zhuǎn)移酶片斷。見表6。圖2 MALDITOFMS檢測的7號差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)肽指紋圖譜 表6 Mascot軟件在數(shù)據(jù)庫中檢索到的有意義的蛋白 3 討 論 偏頭痛是一種常見病、多發(fā)病。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，女性的患病率為3.3%21.9%，男性為0.7%16.1%。其臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作、單側(cè)搏動(dòng)性頭痛，可伴有惡心、嘔吐、視物異常、耳鳴等癥狀。偏