三葉青對CCl4致肝損傷大鼠血清五項生化指標(biāo)水平的影響

1、三葉青對CCl4致肝損傷大鼠血清五項生化指標(biāo)水平的影響                作者：伍昭龍，呂江明，李春艷，彭英福   摘要：目的：研究三葉青水煎液對CCl4致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法：將40只SD大鼠隨機分為5組，即正常對照組，模型對照組，高、低劑量治療組及陽性對照組，分別灌胃等容積(10 mL/kg)的生理鹽水、三葉青水煎液(1.6 g/mL、0.16 g/mL)和聯(lián)苯雙酯（0.000208 g/mL），連續(xù)6 d，每

2、天1次。末次給藥后，除正常組外其他各組腹腔注射CCl4原液1次，造成大鼠急性肝損傷模型，檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST )、堿性磷酸酶（ALP）、丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）水平。結(jié)果：與模型組比較，三葉青高、低劑量治療組ALT、AST、ALP 及MDA含量均明顯降低(P0.05或P0.01)，但SOD活性明顯升高(P0.05或 P0.01)；高劑量組與陽性對照組比較，AST、ALP 及MDA水平差異顯著（P0.05）。結(jié)論：三葉青對CCl4造成的大鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用，且三葉青高劑量保護(hù)損傷肝的效果優(yōu)于聯(lián)苯雙酯。    關(guān)鍵詞：三葉青；

3、水煎液；肝損傷；CCl4   三葉青為葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤（Tetrastigma Hemsleyanum Diels et Gilg），主要分布于長江以南各地，藥源十分豐富。全草含有槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-新橙皮糖苷等多種黃酮類化合物1-3，具有清熱解毒、活血祛風(fēng)的功效，民間用于治療黃疸及急、慢性肝炎有較好的療效。藥理實驗表明，三葉青能促進(jìn)家兔肝細(xì)胞吸收和吞噬放射性四碘四氯熒光素，有加強肝臟功能的作用。在此基礎(chǔ)上，我們研究了對CCl4造成的大鼠急性肝損傷5項血清生化指標(biāo)水平的影響, 以探討其作用機制，為臨床應(yīng)用三葉青治療肝病提供實驗依據(jù)。 

4、60; 1  材料與方法    1.1   材料   1.1.1   實驗動物   SD大鼠40只，質(zhì)量(180±20)g，由中南大學(xué)實驗動物學(xué)部提供。   112  藥品與試劑   三葉青（塊根）采自湖南吉首市郊區(qū)，由李春艷副教授進(jìn)行生藥學(xué)鑒定；聯(lián)苯雙酯（浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠），批號：050604。ALT試劑盒，批號：010021；AST試劑盒，批號：020071；ALP試劑盒，批號：030261，以上均為北京中生

5、北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品。MDA試劑盒，批號：20051202； SOD試劑盒，批號：20051212，均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。   113  三葉青水煎液的制備   取三葉青干燥塊根320 g，搗碎，加水1000 mL浸泡0.5 h后再煎煮2 h，濾過。濾渣再加水1000 mL，煎煮1.5 h，濾過，合并濾液并濃縮到200 mL。制得三葉青水煎液，每1 mL含生藥1.6 g。    114  儀器   YS-2000 III半自動生化分析儀（深圳越華科技發(fā)展有限公司）；723可見分

6、光光度計（上海光譜儀器有限公司）；80-2B離心機（湖南星科科學(xué)儀器有限公司）；HHW2120電熱恒溫水箱（天津泰斯特儀器有限公司）。   12  方法   121  實驗大鼠分組、給藥及血清的制備   SD大鼠隨機分為5組，每組8只，雌雄各半。分別為正常對照組、模型對照組，灌胃10 mL/kg生理鹽水;三葉青高、低劑量治療組，灌胃等容積的三葉青水煎液，濃度分別為1.6 g/mL、0.16 g/mL,給藥劑量為16 g/kg和1.6 g/kg，后者根據(jù)成人用量以K折算系數(shù)法換算確定；陽性對照組，灌胃等容積的聯(lián)苯雙酯

7、，質(zhì)量濃度為0.000208 g/mL，給藥劑量為0.00208 g/kg。以上各組均每天給藥1次，連續(xù)6 d。末次給藥后，除正常對照組外，其余大鼠按2 mL/kg腹腔注射CCl4原液1次，建立急性肝損傷模型。該劑量由預(yù)實驗確定，為文獻(xiàn)的2倍。禁食24 h后，稱體重，以3 %戊巴比妥鈉按1 mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，腹主動脈取血，3500 r/min離心10 min取血清，待測。   122  血清生化指標(biāo)的檢測   血清ALT、AST、ALP活性的檢測按試劑盒要求采用YS2000 III半自動生化分析儀進(jìn)行測定，檢測方法為連續(xù)監(jiān)測法，溫度3

8、7 ；血清MDA濃度及總SOD活性的檢測按試劑盒要求，采用723-可見分光光度計進(jìn)行測定，檢測方法分別為TBA（thibabituric acid，硫代巴比妥酸）法和羥胺法。   123數(shù)據(jù)統(tǒng)計   實驗數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。各組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間比較采用t檢驗。所有統(tǒng)計均用SPSS11.5統(tǒng)計軟件分析。         1李瑛琦，陸文超，于治國三葉青的化學(xué)成分研究J 中草藥，2003，34(11)：982-983Abdul

9、L. Flavonols, ellagic acid and anthocyaanidins in leaves of some malaysian vitaceaeJ. Malays. J. Sci, 1980, (6): 95.劉東，鞠建華，林耕，等 三葉崖爬藤中的新黃酮碳甙J植物學(xué)報，2002，44(2)：227-229江蘇新醫(yī)學(xué)院中藥大辭典(下冊)M上海：上海人民出版社，1977：2123Cai X. L. A study of Tetrastigma hemsleyanum on liver functions of rabbit by the application of 131I

10、rose bengalJ. Chin. Tradit. Herb Drugs, 1980, 11(1):38-39.陳奇中藥藥理研究方法學(xué)M北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：726-727徐叔云，卞如濂，陳修藥理實驗方法學(xué)M第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2001：1346Rouach H, Fataccioli V, Gentil M, et al. Effect of chronic ethanol feeding on lipid peroxidation and protein oxidation in relation to liver pathologyJ . Hepatology, 1997, 25(2):351-355.Bohm K. H, Lotter H, Seligmann O, et al. Antihepatotoxic Cglyco sylflavones from the leaves of Allophyllus ed ulis lis and gracilisJ . Planta. Med., 1992, 58(6):544.10Budzianowski J, Pakulski G, Robak J. Studies on antioxidative activity of some Cglycosyl flavon