直腸粘膜下注射重組白細(xì)胞介素-2治療直腸癌的臨床研究

1、直腸粘膜下注射重組白細(xì)胞介素-2治療直腸癌的臨床研究目的觀察不同途徑應(yīng)用重組白細(xì)胞介素-2(rIL-2)對(duì)患者全身及腫瘤局部免疫的影響。方法對(duì)45例直腸癌患者給予肌肉或直腸粘膜下注射rIL-2。結(jié)果直腸粘膜下應(yīng)用rIL-2不僅提高患者全身免疫功能，而且能激活腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)天然殺傷細(xì)胞(natural killer,NK)和淋巴因子激活殺傷細(xì)胞(lymphokine-activated killer,LAK)活性，促進(jìn)淋巴結(jié)生發(fā)中心增生、漿細(xì)胞反應(yīng)和竇組織細(xì)胞增生增強(qiáng)。結(jié)論直腸粘膜下注射rIL-2是治療直腸癌的一種安全有效的新方法。關(guān)鍵詞直腸腫瘤白細(xì)胞介素-2淋巴結(jié)免疫，細(xì)胞 Clinical

2、study on treatment of rectal carcinoma by systemic or regional administration of rIL-2 Liu lianjie,Li Jieming,Tu Yue,et al.Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433.ObjectiveTo observe the effect of rIL-2 by different administration on the systemic cellular immunity and tu

3、mor regional lymph nodes(RLN) immunity in patients with rectal carcinoma.MethodrIL-2 was administered via instramuscular injection or rectal-submucosal injection in 45 cases.ResultIt was showed that systemic administration of rIL-2 can improve NK and LAK activity of patients peripheral blood lymphcy

4、tes. However,regional administration of rIL-2 can not only enhance systemic immunity but also increase NK activity and LAk activity of tumor regional lymph nodes(RLN),and promote the germinal center hypertrophy,plasma cell reaction and sinus histocytosis.ConclusionSubmucosal administration of rIL-2

5、is a new and effective modality in the treatment of rectal carcinoma.Key wordsRectal neoplasmsInterleukin-2Lymph nodesImmunity,cellular免疫治療已成為消化道惡性腫瘤輔助治療的主要方法之一，白細(xì)胞介素-2 (Interleukin-2,IL-2) 是機(jī)體腫瘤免疫網(wǎng)絡(luò)中起調(diào)節(jié)作用的最重要的淋巴因子。大劑量全身應(yīng)用重組白細(xì)胞介素-2(recombinant interleukin-2，rIL-2)雖有一定抗腫瘤作用，但副作用較大，局部應(yīng)用小劑量rIL-2 可在腫瘤區(qū)域

6、達(dá)到較高濃度，激活局部免疫參與細(xì)胞、免疫效應(yīng)細(xì)胞反應(yīng)1,2。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)直腸癌患者肌肉和直腸粘膜下注射rIL-2，觀察rIL-2 對(duì)機(jī)體全身及直腸腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)（regional lymph nodes，RLN）免疫功能及結(jié)構(gòu)的影響。材料與方法1.臨床資料：經(jīng)纖維結(jié)腸鏡及病理證實(shí)直腸腺癌患者45 例，年齡50.410.7歲。入院前均未經(jīng)手術(shù)、放療、化療或免疫治療。按病情和一般情況較為接近的原則分為3組，每組15例。A 組(全身治療組)：術(shù)前10日開(kāi)始每日肌肉注射rIL-2 50萬(wàn)U，連續(xù)10日。B組(局部治療組)：術(shù)前10日開(kāi)始經(jīng)肛門(mén)鏡在齒狀線上4cm 直腸粘膜下每日注射rIL-250萬(wàn)U連續(xù)

7、10日。C組(對(duì)照組)：術(shù)前10日開(kāi)始每日粘膜下注射生理鹽水5ml，連續(xù)10日。2.外周血及RLN淋巴細(xì)胞NK 活性、LAK活性 測(cè)定：患者均于手術(shù)前10日及手術(shù)當(dāng)日晨分別取外周靜脈血3ml，用淋巴細(xì)胞分離液制取淋巴細(xì)胞懸液。所有患者手術(shù)中均取腸系膜下動(dòng)脈附近淋巴結(jié)12枚，經(jīng)機(jī)械解聚、酶消化、梯度離心制取淋巴細(xì)胞懸液。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 K562 細(xì)胞和Raji細(xì)胞分別作為檢測(cè)NK 活性、LAK活性的靶細(xì)胞。效靶比例為 501，以3HTdR 釋放法3測(cè)定NK及LAK活性。3.直腸腫瘤RLN組織病理學(xué)檢查：淋巴結(jié)依全國(guó)大腸癌病理研究統(tǒng)一規(guī)范4判斷生發(fā)中心增生、皮質(zhì)旁區(qū)增生、漿細(xì)胞反應(yīng)、竇組織細(xì)胞增生

8、程度。4.統(tǒng)計(jì)方法：自身對(duì)照t檢驗(yàn)和配對(duì)t檢驗(yàn)。結(jié)果1.rIL-2治療前后外周血 NK活性、LAK活性變化：治療組與對(duì)照組治療前差異無(wú)顯著意義(P0.05);全身應(yīng)用rIL-2 和局部應(yīng)用rIL-2 治療后患者外周血淋巴細(xì)胞NK活性、LAK活性較治療前都明顯提高 (P0.01或P0.05)，見(jiàn)表 1。表1組別例數(shù)NK活性LAK活性治療前治療后差值治療前治療后差值A(chǔ)組1520726106721728779*B組1520727107921727767C組151972071221822814 2.rIL-2對(duì)直腸癌患者RLN淋巴細(xì)胞NK活性、LAK活性的影響:全身應(yīng)用rIL-2治療組同對(duì)照組比較差異

9、無(wú)顯著意義(P0.05)。局部應(yīng)用rIL-2治療后直腸腫瘤RLN淋巴細(xì)胞NK活性、LAK活性較全身應(yīng)用rIL-2 組和對(duì)照組NK活性、LAK活性都明顯提高(P0.05)。見(jiàn)表2。表2組別例數(shù)NK活性LAK活性A組15145288B組15196*348*C組15146287 注:*P0.05 同其它組相比 3.rIL-2對(duì)直腸癌患者RLN組織結(jié)構(gòu)的影響：3組患者直腸腫瘤RLN組織學(xué)檢查結(jié)果見(jiàn)表 3。局部治療組生發(fā)中心增生較全身治療組及對(duì)照組明顯（P0.05)，皮質(zhì)旁區(qū)增生無(wú)明顯差別。局部治療組漿細(xì)胞反應(yīng)明顯增強(qiáng)（P0.05)，竇組織增生也明顯增強(qiáng)(P0.05)見(jiàn)表3。表3全身或局部應(yīng)用rIL-2

10、對(duì)直腸癌區(qū)域淋巴結(jié)增殖的影響(每組分別15例)組別生發(fā)中心皮質(zhì)旁區(qū)漿細(xì)胞竇組織(+)(+)(-)(+)(+)(-)(+)(+)(-)(+)(+)(-)A組16825812122211B組744276285285C組15906904111311 注：+反應(yīng)明顯，有反應(yīng)，反應(yīng)不明顯討論直腸癌最主要的轉(zhuǎn)移途徑是淋巴路轉(zhuǎn)移，直腸的淋巴網(wǎng)主要位于粘膜下層和漿膜下層，肌層較少5。直腸粘膜下注射rIL-2 可使rIL-2 按腫瘤淋巴流向達(dá)到轉(zhuǎn)移、未轉(zhuǎn)移的RLN。腫瘤RLN在腫瘤免疫的啟動(dòng)、腫瘤免疫維持、抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)中均發(fā)揮重要作用，是阻止腫瘤擴(kuò)散的重要屏障。許多研究表明，RNL增生情況同大腸癌Duke

11、s分期、腫瘤分化程度有關(guān)，生發(fā)中心增生反應(yīng)、竇組織增生反應(yīng)同5年生存率呈正相關(guān)6。 Bier等2予荷瘤豚鼠RLN周?chē)鷳?yīng)用低劑量rIL-2 ，發(fā)現(xiàn)可明顯減少鏡下微小轉(zhuǎn)移灶。Cortesina等7給31例頭頸部復(fù)發(fā)鱗狀細(xì)胞癌患者RLN周?chē)⑸涞蛣┝縭IL-2 ，取得良好臨床效果。局部應(yīng)用rIL-2 的優(yōu)點(diǎn)是1：可減少rIL-2用量，費(fèi)用低；避免全身用藥時(shí)所出現(xiàn)的嚴(yán)重副作用；在腫瘤部位RLN濃度較高，顯著增強(qiáng)局部免疫狀態(tài)。局部注射方法:直腸鏡下消毒，于齒狀線上約4 cm處的粘膜下注射,腫瘤位置低時(shí)可注射于腫瘤周?chē)驅(qū)?cè)粘膜,除直腸炎癥明顯者適用于各期病人,梗阻病人亦可。本組2例出現(xiàn)中度發(fā)熱,1例有輕

12、度下墜感,對(duì)癥處理后繼續(xù)應(yīng)用。如何進(jìn)一步提高腫瘤病人全身和局部免疫功能，以配合手術(shù)治療，減少腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，提高病人生存率，是目前免疫治療的重要課題。參考文獻(xiàn) 1Maas RA,Dullens HF,Den Otter W. Interleukin-2 in cancer treatment:disappointing or (still) promising?A review.Cancer Immunol Immunother,1993,36:141. 2Bier H,Haas I,Koldowski P. Regional low-dose interleukin-2 immunother

13、apy of lymph node micrometastasis in a guinea pig tumor model. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec,1994,56:96.3HTdR 釋放法 測(cè)量細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒功能.上海免疫學(xué)雜志，1987，7:230. 4大腸癌病理研究協(xié)作組.全國(guó)大腸癌病理研究統(tǒng)一規(guī)范.中華腫瘤雜志，1986，8:156. 5戴勇,胡繼康.直腸癌淋巴引流顯影定位及初步臨床應(yīng)用.實(shí)用外科雜志，1993，13:89. 6大腸癌病理與預(yù)后關(guān)系研究協(xié)作組.大腸癌區(qū)域淋巴結(jié)免疫反應(yīng)的預(yù)后意義 附2502 例分析.中華腫瘤雜志，1986，8:140. 7Cortesina G , Stefani AD,Galeazzi E ,et al.Temporary regression of recur