緩激肽β2受體拮抗劑在兔體外循環(huán)中的腦保護(hù)作用

1、緩激肽2受體拮抗劑在兔體外循環(huán)中的腦保護(hù)作用         11-03-23 16:24:00     作者：蔣平，黃駿，姜敏炎    編輯：studa20【摘要】  目的： 探討緩激肽2受體拮抗劑HOE140在兔體外循環(huán)中的腦保護(hù)作用。方法： 實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分成深低溫停循環(huán)下選擇性逆行腦灌注組(DHCA+SCP,對(duì)照組,n=15)和深低溫停循環(huán)下選擇性逆行腦灌注+HOE140組(DHCA+SCPHOE140,實(shí)驗(yàn)組,n=15)

2、,復(fù)溫后開(kāi)顱取腦組織檢測(cè)超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、干濕重比（WDR）、腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素1（IL1）、血栓素B2(TXB2)和6酮前列腺素F1(6ketoPGF1)含量，進(jìn)行組間比較。結(jié)果： 與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組SOD活性明顯增強(qiáng),MDA和WDR均明顯下降（P<0.05）; TNF和IL1均明顯下降（P<0.05）；6ketoPGF1/TXB2比值明顯升高。結(jié)論： HOE140在深低溫停循環(huán)下選擇性逆行腦灌注中能明顯升高6ketoPGF1/TXB2比值，降低缺血再灌注損傷，有明顯的腦保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】  緩激肽2受體拮抗劑； 體外循環(huán)

3、； 深低溫停循環(huán)； 腦保護(hù)； 再灌注損傷AbstractObjective: To investigate the protective effects of a bradykinin 2 receptor antagonist(HOE： Thirty rabbits were randomly divided into 2 groups:control group(DHCA+SCP),and experiment group(DHCA+SCPHOE140).Brain specimens were harvested for measurement of the wettodry lung

4、weight ratio(WDR),SOD,MDA,TNF,IL1，6ketoPGF1,TXB2  after the experiment. Results： Compared with control group, SOD and 6ketoPGF1/TXB2 of the experiment group were significantly higher than control group(P<0.05), WDR，MDA, TNF,IL16ketoPGF1，TXB2 of experiment group was significantly lower than c

5、ontrol group. Conclusion： The bradykinin2 receptor antagonist, HOE140, can raise 6ketoPGF1/TXB2 ratio, ameliorate I/R injury in a rabbit DHCA+SCP model, and had a significant protection of brain.Key words  bradykinin 2 receptor antagonist； extracorporeal circulation；  brain protection； isc

6、hemia reperfusion injury； deep hypothermic circulatory arrest    中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙是主動(dòng)脈瘤等需要深低溫停循環(huán)（deep hypothermic circulatory arrest, DHCA）手術(shù)常見(jiàn)且嚴(yán)重的并發(fā)癥。由于DHCA的安全時(shí)限較短，因此延長(zhǎng)DHCA的時(shí)間，使停循環(huán)再開(kāi)放后的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能受損降低到最小，是體外循環(huán)的一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。DHCA后神經(jīng)系統(tǒng)功能受損一個(gè)非常重要的機(jī)制就是腦的缺血再灌注損傷，因此降低缺血再灌注損傷顯得至關(guān)重要。緩激肽是激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)中的一種主要的激

7、肽類(lèi)物質(zhì)，已證實(shí)體內(nèi)緩激肽受體有1和2兩種。2受體在外周分布較廣，血管/非血管平滑肌及心肌細(xì)胞上均有2 受體的存在。HOE140是一種選擇性的緩激肽2受體拮抗劑。Kumari等1在貓的心臟缺血再灌注模型中，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用緩激肽2 受體拮抗劑HOE140能夠減輕缺血再灌注損傷。Souza等2在腸系膜上動(dòng)脈缺血再灌注模型中，同樣證實(shí)了緩激肽2受體拮抗劑在缺血再灌注中的保護(hù)作用。既然HOE140在其他臟器的缺血再灌注損傷中發(fā)揮如此積極的作用，那么在深低溫停循環(huán)狀態(tài)下能否降低腦組織的缺血再灌注損傷呢？本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立兔深低溫停循環(huán)模型來(lái)證實(shí)HOE140的腦保護(hù)作用。    1&#

8、160; 材料和方法    1.1  材 料    健康新西蘭大白兔30只，雌雄不拘，體質(zhì)量2.33.1 kg(2.7±0.3） kg，由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物飼養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)均符合衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理實(shí)施細(xì)則（1998）的要求。實(shí)驗(yàn)前1天將兔領(lǐng)回，使其預(yù)先適應(yīng)環(huán)境。將30只兔按隨機(jī)數(shù)字表法分成對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。    1.2 實(shí)驗(yàn)方法    靜脈穿刺針經(jīng)耳緣靜脈緩慢注射1.25%戊巴比妥鈉2 ml/kg麻醉，固定，監(jiān)測(cè)心電圖(ECG)、體溫；頸前正中切

9、口，氣管切開(kāi)插管，以純氧710 ml/kg潮氣量，4060次/min的頻率機(jī)械通氣，氧流量1.52.5 L/min，右腹股溝切口分離右股動(dòng)脈，插管監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)；右鎖骨下切口分離右鎖骨下動(dòng)脈12 cm，置線備用。靜脈肝素化(500 U/kg)，胸前正中切口剪開(kāi)胸骨，切開(kāi)心包顯露心臟，右鎖骨下動(dòng)脈插動(dòng)脈灌注管(深度約達(dá)無(wú)名動(dòng)脈分叉處)，右心耳插房管建立體外循環(huán)，流量5080 ml·kg-1·min-1，并行下降溫度至鼻溫28，阻升主動(dòng)脈，心包腔內(nèi)置冰屑維持局部低溫，繼續(xù)降溫至鼻溫18、腦溫1820時(shí)停循環(huán)。轉(zhuǎn)流期間適當(dāng)從耳緣靜脈追加肝素用量，維持激活全血凝固時(shí)間&g

10、t;480 s。對(duì)照組于停循環(huán)后將右無(wú)名動(dòng)脈、左鎖骨下動(dòng)脈及左頸總動(dòng)脈阻斷，右鎖骨下動(dòng)脈插管和恒流儀輸出管連接，以12 ml·kg-1·min-1的流量行停循環(huán)，全程腦灌注；實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組基礎(chǔ)上停循環(huán),全程維持滴注緩激肽2受體拮抗劑HOE140(10 nmol/min)。40 min后恢復(fù)循環(huán)，體表、血液同時(shí)復(fù)溫至鼻溫30開(kāi)放升主動(dòng)脈；鼻溫36時(shí)開(kāi)顱取腦組織行各項(xiàng)檢查。    1.3  主要觀察指標(biāo)1.3.1  丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定 首先將標(biāo)本稱(chēng)重，冰浴中制成勻漿，用南京建成生物科技公司

11、提供的試劑盒測(cè)定MDA和SOD。1.3.2  腫瘤壞死因子（TNF）和白細(xì)胞介素1（IL1）的測(cè)定  取腦組織制成勻漿，以放射免疫法測(cè)定（南京建成生物科技公司提供的試劑盒）TNF和IL1。1.3.3  腦組織血栓素A2（TXA2）和前列環(huán)素（PGI2）的測(cè)定 取相同部位左側(cè)腦組織1 g，制成勻漿，3 000 r/min離心15 min，取上清液-20 保存?zhèn)錅y(cè)。由于TXA2和PGI2極不穩(wěn)定，故測(cè)其穩(wěn)定代謝產(chǎn)物血栓素B2(TXB2)和6酮前列腺素F1(6ketoPGF1)。1.3.4  腦干濕重比（WDR） 動(dòng)物處死后迅速取左側(cè)大腦中部腦組織，用