系膜增殖性腎炎白細胞介素6表達與細胞外基質(zhì)產(chǎn)生的研究

1、    系膜增殖性腎炎白細胞介素6表達 與細胞外基質(zhì)產(chǎn)生的研究        關(guān)鍵詞系膜增殖性腎炎白細胞介素6細胞外基質(zhì) 系膜細胞增生、細胞外基質(zhì)（ECM）聚積和擴張是系膜增殖性腎小球腎炎（MsPGN）發(fā)生發(fā)展的重要病理基礎(chǔ)1。研究表明，系膜細胞可分泌具有生物活性的白細胞介素6(IL-6)，IL-6又可促進系膜細胞生長2。人類MsPGN中IL-6的表達及其與ECM之間的關(guān)系國內(nèi)外研究較少，我們觀察了MsPGN患者腎小球內(nèi)IL-6基因及蛋白表達狀況，分析其與系膜擴張，

2、系膜基質(zhì)成分型膠原（CIV）和纖維連接蛋白（FN）之間的關(guān)系。1材料和方法1.1腎組織標本制備3MsPGN組12例，男9例、女3例，平均年齡26.8歲。所選病例經(jīng)腎活檢、按1982年WHO制定的腎小球疾病形態(tài)學分類確診為MsPGN。對照組8例，為男性移植腎供腎者，腎活檢證實為正常腎組織。腎組織按參考文獻3處理備用。1.2IL-6 mRNA原位雜交參照參考文獻4制備IL-6 cDNA探針（寡核苷酸特異探針序列由上海細胞生物研究所合成，DIG寡核苷酸3?末端標記試劑盒購自BM公司）4。按蔡文琴法3將4多聚甲醛固定后的冰凍切片常規(guī)處理后行原位雜交，陰性對照以不加探針的雜交液同法操作。1.3IL-6、

3、CIV和FN免疫組化染色按參考文獻3進行。兔抗人IL-6多克隆抗體購自美國SantaGruze公司，鼠抗人FN、鼠抗人CIV以及三抗、二抗均購自北京中山生物試劑公司。1.4ECM嗜銀染色按常規(guī)進行。1.5半定量分析采用EIG綜合象分析系統(tǒng)(重慶大學ICT中心)對照片上的陽性雜交信號或染色信號進行半定量分析。1.6統(tǒng)計學處理2結(jié)果詳見表1表4。表1MsPGN腎小球與正常腎小球內(nèi)IL-6 mRNA表達的比較(陽性信號面積占腎小球總面積百分比)組別nIL-6 mRNA（）MsPGN組12*正常對照組8     *P0.01與正常對照組比較 表2MsPGN組與正

4、常對照組腎小球內(nèi)IL-6、CIV和FN蛋白表達結(jié)果比較(陽性信號面積占腎小球總面積百分比)組別nIL-6(%)CIV(%)FN(%)MsPGN組12*正常對照組8     P0.01，*P0.05與對照組比較 表3MsPGN與正常腎組織腎小球ECM擴張程度比較(ECM面積占腎小球總面積百分比)組別nECM面積占腎小球總面積百分比(%)MsPGN組12正常對照組8     P0.001與對照組比較 表4IL-6表達與CIV、FN表達以及ECM擴張的相關(guān)性（r）CIVFNECMIL-6蛋白表達IL-6 mRNA表達IL

5、-6蛋白表達     P0.01 3討論系膜細胞可分泌IL-62，IL-6反過來又可刺激系膜細胞增生，表明在腎臟局部IL-6可能以自分泌和旁分泌的方式影響系膜細胞的生物特性和ECM的變化。本實驗發(fā)現(xiàn)在生理和病理狀態(tài)下，腎小球系膜細胞均可表達IL-6(在分子和蛋白水平表達一致，二者顯著正相關(guān))，但在MsPGN中的表達顯著高于正常對照組，且在MsPGN中CIV和FN的表達也明顯增高，ECM擴張明顯；CIV、FN的表達和ECM的擴張與IL-6在分子和蛋白水平的表達都有顯著正相關(guān)。提示腎小球系膜細胞異常自分泌的IL-6，可能是刺激系膜基質(zhì)成分過度增生和聚積的重要

6、介質(zhì)之一，從而導(dǎo)致了ECM的異常擴張，形成了腎小球硬化的病理基礎(chǔ)5。作者單位：第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所腎內(nèi)科(重慶，400042)參考文獻1FogoA.Internephronheterogeneityofgrowthfactorandsclerosis.KidneyInt，1994，45（Suppl 45）：S-242HoriiY，MuraguchiA，IwanoMetal.InvolvementofIL-6inmeasangialproliferativeglomerulonephritis.JImmunol，1989，143：39493蔡文琴，王伯云主編.實用免疫細胞化學與核酸分子雜交技術(shù).重慶：四川科技出版社，19944譚駿主編.DNA重組技術(shù).第三軍醫(yī)大學分子遺傳學教研室，1993