糖耐康顆粒對胰島素抵抗3T3–L1脂肪細胞炎癥因子的影響 醫(yī)學(xué)論文_第1頁
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文檔簡介

1、    糖耐康顆粒對胰島素抵抗3T3L1脂肪細胞炎癥因子的影響 醫(yī)學(xué)論文                                           &

2、#160; 作者:牛潔 劉銅華 王志程 楊麗霞本文由中國論文范文收集整理。【摘要】   目的:探討糖耐康顆粒對胰島素抵抗3T3L1 脂肪細胞炎癥因子的影響。方法:通過地塞米松與胰島素共同誘導(dǎo)3T3L1 脂肪細胞建立胰島素抵抗模型,檢測中藥糖耐康對細胞上清中TNF、IL6、CRP 水平的影響。結(jié)果:與正常組比較,模型組TNF、IL6、CRP 水平明顯升高;經(jīng)中藥糖耐康以及西藥吡格列酮干預(yù)后,TNF、IL6、CRP 水平顯著下降,與模型組比較有顯著差異。結(jié)論:TNF、IL6、CRP 參與胰島素抵抗的發(fā)生,中藥糖耐康可能通過降低炎癥因子的水平發(fā)揮改善胰島素抵抗的作用。 【關(guān)鍵詞】 

3、0; 糖耐康;3T3L1 脂肪細胞;胰島素抵抗;炎癥    Abstract Objective To study the effect of Tangnaikang granule on inflammatory factor of insulin-resistant3T3-L1 adiopocytes. Methods After utilizing dexamethasone and insulin to establish insulin-resistant modle byinduced 3T3L1 adipocyte, the levels of tu

4、mor necrosis-alpha(TNF),interleukin6(IL6) and Creactive protein(CRP) of cell supernatant were detected. Results The levels of TNF, IL-6 and CRP of model group weresignificantly increased compared with those of normal group.After intervention of Tangnaikang and Pioglitazone, thelevels of TNF, IL6 and

5、 CRP were obviously decreased compared with those of model group. Conclusion Theinflammatory factor of TNF, IL6 and CRP participated the formation of insulin resistance,Tangnaikang coulddegrade the inflammatory factor levels to improve the insulin resistance.    Key Words Tangnaikang;

6、 3T3L1 adipocyte; Insulin Resistance; Inflammation    胰島素抵抗(Insulin Resistance, IR)是2 型糖尿?。═ype 2 Diabetes Mellitus,T2DM)發(fā)病中的主要環(huán)節(jié),其形成機制復(fù)雜,近年來研究提示IR 是個慢性非特異性炎癥過程,慢性炎癥參與了IR 的發(fā)生與 發(fā)展 。因此,干預(yù)炎癥過程,改善IR 將成為防治T2DM 的新趨勢。故本實驗以炎癥IR 為切入點,通過觀察中藥復(fù)方糖耐康對胰島素抵抗3T3L1脂肪細胞中炎癥因子水平的影響,為其防治IR 及T2DM 提供可靠依據(jù)。

7、60;    1 材料與方法     1.1 主要材料    3T3L1 前脂肪細胞株購自ATCC;DMEM 高糖培養(yǎng)基,新生牛血清均購自GIBCO 公司;牛胰島素,3 異丁基1 甲基黃嘌呤(IBMX),地塞米松(DEX),油紅“O”染劑均購自Sigma 公司;葡萄糖檢測試劑盒購自國藥集團化學(xué)試劑北京有限公司;TNF 抗體試劑盒,IL6 抗體試劑盒,CRP 抗體試劑盒均購自美國RB 公司。    1.2 實驗藥品    糖耐康顆粒(人參、夏枯草、女貞子、番

8、石榴葉、三白草組成):9 g/ 袋,由四川美大康佳樂藥業(yè)有限公司生產(chǎn)提供;鹽酸吡格列酮片(艾汀):15 mg/ 片,購自北京太洋藥業(yè)有限公司。    1.3 主要儀器    CO2 孵育箱:BB16/BB5060 型, 德國Heraeus公司;超凈工作臺:半導(dǎo)體設(shè)備一廠生產(chǎn);臺式高速冷凍離心機:ST21 型,美國索福公司;高壓蒸汽消毒器:HVE50 型, 日本HIRAYAMA 公司;電熱恒溫培養(yǎng)箱:HHB11420 型,天津?qū)嶒瀮x器廠生產(chǎn);低速自動平衡微量離心機:LDZ40.8 型,北京醫(yī)用離心機廠生產(chǎn);倒置顯微鏡:日本Nikon 公

9、司;酶標儀:Multiscan MK3 型;實驗耗材:美國COSTAR 公司。    1.4 方法    1.4.1 3T3L1 前脂肪細胞誘導(dǎo)分化 將3T3L1 前脂肪細胞置于含10% 新生牛血清的DMEM 高糖培養(yǎng)基中,37,5%CO2 飽和濕度下培養(yǎng)。細胞狀態(tài)良好時接種于培養(yǎng)板,待細胞融合2 d 后,換用含10% 新生牛血清、0.5 mmol/L IBMX、10 g/mL 胰島素、0.25 mol/L DEX 的DMEM 高糖培養(yǎng)基(即誘導(dǎo)溶液1)培養(yǎng)48 h,后換用含10% 新生牛血清、10 g/mL 胰島素(即誘導(dǎo)溶液2)再

10、培養(yǎng)48 h,隨后以10% 新生牛血清的DMEM 高糖培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),2 d 換1 次培養(yǎng)液,誘導(dǎo)分化812 d 的3T3L1前脂肪細胞90% 以上可分化為成熟的脂肪細胞,進行油紅“O”染色鑒定為脂肪細胞后,方可用于實驗。    1.4.2 脂肪細胞鑒定 采用油紅“O”染色法,具體過程如下:將誘導(dǎo)分化結(jié)束的脂肪細胞,先用PBS 洗3 次以除去培養(yǎng)基;中性甲醛固定10 min,然后水洗,將細胞晾干20 min;加入油紅“O”染液染色30 min(密封);再用60% 異丙醇沖洗,以除去多余的染料,然后水洗;加入蘇木素復(fù)染細胞核2 min,用水沖洗;稍干后以甘油明膠封固;在倒置顯微鏡下觀察。 關(guān)鍵詞:細胞,因子,影響,脂肪,抵抗,醫(yī)學(xué)論文,糖耐康顆粒對胰島素抵抗3T3L1脂肪細胞炎癥因

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