飼料中酵母的微生物學(xué)檢驗(yàn)

1、飼料中酵母的微生物學(xué)檢驗(yàn)www.飼料檢測網(wǎng).中國www. 飼料檢測網(wǎng).cn1 范圍本方法規(guī)定了微生物飼料中釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母的檢測方法及鑒定程序。本方法適用于微生物飼料中釀酒酵母和產(chǎn)朊假絲酵母的檢測。2 設(shè)備和材料2.1恒溫培養(yǎng)箱：23。2.2冰箱：04。2.3吸管：容量為1、10、25 mL。2.4三角瓶：容量為500 mL。2.5平皿：直徑為9 cm。2.6試管：18×180 mm。2.7顯微鏡。2.8高壓滅菌鍋。2.9烘箱。3 培養(yǎng)基和試劑3.1 麥芽粉的制法取新鮮大麥（或小麥）若干，去雜，用水洗凈，浸漬612 h，使其發(fā)芽，但芽不能過長。然后將發(fā)芽之麥粒曬干或烘干，磨成粉

2、末即得麥芽粉。3.2 麥芽汁的制法稱取一定量的干麥芽粉，加適當(dāng)體積的水，在5865下糖化34 h，每隔一定時(shí)間用碘液測定藍(lán)色反應(yīng)，如顯藍(lán)色，說明還沒糖化徹底，直到加碘液無藍(lán)色反應(yīng)為止。使得到的麥芽汁糖度為12（勃力克氏）。煮沸后用紗布過濾。3.3 麥芽汁培養(yǎng)基3.3.1 成分120Be麥芽汁 1000mL 葡萄糖 20g 瓊脂20g 青霉素：5萬單位3.3.2 制法將上述成分（青霉素除外）溶解至水中，調(diào)節(jié)pH值至6.87.2，121滅菌25min。冷至4550時(shí)，加入青霉素，混勻后倒平板。4 酵母菌數(shù)的測定4.1 檢驗(yàn)程序如下：試料作成幾個適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液選擇23個適當(dāng)稀釋度，各以1 mL之量

3、加入滅菌平皿內(nèi)每皿內(nèi)加入適量麥芽汁培養(yǎng)基72 h28菌落計(jì)數(shù)報(bào)告4.2 操作步驟4.2.1 以無菌操作將經(jīng)過充分搖勻的試料25 mL（或25 g）放入含有225 mL無菌鹽水的滅菌三角瓶內(nèi)作成1:10的均勻稀釋液。4.2.2 用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL無菌水的試管內(nèi)（注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液）。4.2.3 另取1 mL滅菌吸管，按上述操作順序，作10倍遞增稀釋液，如此每遞增一次，即換用1支1 mL滅菌吸管。如此反復(fù)進(jìn)行系列稀釋，直至所需濃度。4.2.4取適宜稀釋度的溶液滴加至滅菌平皿上，每個稀釋度二個平皿。4.2.5 取100mL液化的麥芽汁培

4、養(yǎng)基（加溫至4550）。每個培養(yǎng)皿中傾注1012 mL，先向一個方向搖動，然后再向另一個方向搖動，使之充分混合均勻。注意避免培養(yǎng)基濺至平皿外或蓋子內(nèi)側(cè)。靜置，待固化。翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿28培養(yǎng)72 h。4.2.5計(jì)數(shù)對有效平皿進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)（取菌落30300的平板）。4.2.6鑒定必要時(shí)要進(jìn)行鑒定。酵母菌的生物學(xué)特性：啤酒酵母菌在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，菌落形態(tài)與細(xì)菌相似，但比細(xì)菌大而厚，不透明，表面光滑，濕潤粘稠，呈乳白色，形成假菌絲。菌體為單細(xì)胞，形狀有圓形、橢圓形等，大小不一，2.210.5×3.5-21 m。產(chǎn)朊假絲酵母的生物學(xué)特性：個體形態(tài)：細(xì)胞卵圓形到長形，3.08.0×4.011.5m，成假絲狀排列。群體形態(tài)：