裙帶菜配子體 基因工程 啟動子 熒光蛋白 鱟素多肽 瑞替普酶論文

1、 裙帶菜配子體論文：裙帶菜配子體轉(zhuǎn)基因研究【中文摘要】本文以裙帶菜配子體為材料,從轉(zhuǎn)化方法、篩選標記的選擇、功能基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)化和內(nèi)源啟動子克隆四個方面對裙帶菜的基因工程進行了深入研究。建立了穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系,進一步充實了大型海藻轉(zhuǎn)基因的研究,為裙帶菜的育種工作提供了新的手段,使得利用裙帶菜生產(chǎn)外源活性物質(zhì)成為可能。本文具體的研究結(jié)果為:1.利用基因槍法將熒光標記基因(EGFP)載體導入裙帶菜配子體中,通過共聚焦熒光顯微鏡觀察,找到了表達綠色熒光蛋白的配子體,實現(xiàn)了EGFP基因在裙帶菜配子體中的瞬間表達,確定了基因槍法的轉(zhuǎn)化條件,驗證了所用表達質(zhì)粒載體在裙帶菜配子體轉(zhuǎn)基因研究中的有效性。2.利用

2、基因槍法將鱟素多肽基因(tac)和草丁膦抗性基因(bar)導入配子體,通過草丁膦篩選和配子體恢復生長,挑選到抗性克隆,PCR檢測顯示有60%的抗性克隆含有bar基因,由此證明bar基因是裙帶菜配子體基因工程有效的篩選標記。此外,利用PCR方法從轉(zhuǎn)化組中擴增出tac基因,成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)化鱟素多肽(tac)基因的配子體。3.在鱟素多肽基因成功轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)上,利用基因槍法將溶栓藥物瑞替普酶基因(rt-pa)和草丁膦抗性基因(bar)導入裙帶菜配子體中,篩選后獲.【英文摘要】Using Undaria pinnatifida gametophytes, the transformation method,

3、 selectable marker, functional genes stable transformation and promoter cloning were investigated and a stable transformation system was constructed in this paper. Based on the research, a new method for U. pinnatifida breeding was provided and make it possible to produce outer bioactive material wi

4、th U. pinnatifida in the future. The specific results are as follows:1. Enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene has been transformed in.【關(guān)鍵詞】裙帶菜配子體 基因工程 啟動子 熒光蛋白 鱟素多肽 瑞替普酶【英文關(guān)鍵詞】Undaria pinnatifida gametophytes genetic engineering promoter EGFP tachyplesin gene peptide(tac) reteplase (rt-pa)【

5、目錄】裙帶菜配子體轉(zhuǎn)基因研究摘要5-6Abstract6第一章 前言10-19第一節(jié) 裙帶菜生物學特性10-111 裙帶菜生活史102 裙帶菜配子體無性繁殖系10-11第二節(jié) 海藻基因工程11-151 微藻基因工程11-132 大型海藻基因工程13-15第三節(jié) 藻類基因組測序15-181 藻類基因組測序概況15-172 褐藻基因組測序進展17-18本論文研究目的及意義18-19第二章 綠色熒光蛋白基因(EGFP)在裙帶菜配子體中的表達19-34第一節(jié) 綠色熒光蛋白基因(EGFP)表達載體的構(gòu)建19-291 材料與方法19-272 結(jié)果27-283 討論284 小結(jié)28-29第二節(jié) 綠色熒光蛋白

6、基因(EGFP)表達載體的轉(zhuǎn)化和檢測29-341 材料與方法29-322 結(jié)果32-333 討論334 小結(jié)33-34第三章 功能基因在裙帶菜配子體中的轉(zhuǎn)化34-50第一節(jié) 瑞替普酶（rt-pa）基因和鱟素（tac）基因轉(zhuǎn)化裙帶菜配子體34-401 材料與方法34-372 結(jié)果37-403 討論404 小結(jié)40第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因裙帶菜配子體的鑒定40-501 材料與方法40-452 結(jié)果45-483 討論48-494 小結(jié)49-50第四章 葉綠素a/c 結(jié)合蛋白基因（lhcf）啟動子的克隆50-64第一節(jié) 裙帶菜配子體lhcf 基因序列的克隆51-541 材料與方法51-522 結(jié)果52-543 討論544 小結(jié)54第二節(jié) lhcf 基因上游5調(diào)