高效液相色譜法測(cè)定痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿的含量

1、    高效液相色譜法測(cè)定痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿的含量        摘要目的：采用反相高效液相色譜法，測(cè)定痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿的含量。方法：色譜條件為，流動(dòng)相：甲醇-0.4mol.L-1硝酸銨（5248），檢測(cè)波長(zhǎng)348nm。結(jié)果：樣品萃取回收率99.14%，加樣回收率98.83%，日內(nèi)日間RSD%分別為4.2%(n=12)和3.6%(n=9)。測(cè)定3批痛風(fēng)靈貼劑的含量，在0.85151.1035mg.g-1范圍。結(jié)論：本文方法可用于痛風(fēng)靈貼劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞痛風(fēng)靈貼劑

2、；RP-HPLC；鹽酸小檗堿中分類(lèi)號(hào)R914.1 DETERMINATION OF BERBERINE IN TONG FENG-LING THE JI BY RP-HPLCWu Sucheng，Jiang Yunping，Zeng Renjie，Li Jingang(General Hospital of Chengdu Command PLA,Section of Clinical Pharmacology, Chengdu610083)AbstractsAIM Determination of berberine in Tong Feng-ling Tie Ji by RP-HPLC w

3、as developed in this paper.METHODS The chromatography consisted of Elite Test RP-C18 column (4.6×220mmI.D.)with methanol-0.4mol.L-1 Ammonium nitrate (5248) as the mobile phase at the flow rate of 0.8ml.min-1.The spectrophotometric detection was at 348nm.RESULTS The recovery of extraction and re

4、covery of spiked samples were 99.14% and 98.83%, respectively.Within day and day-to-day RSD% were 4.2%(n=12) and 3.6%(n=9).The contents of berberine in three batches samples were in the range of 0.85151.1035mg.g-1.CONCLUSION The method developed in this paper is useful in quality control for Tong Fe

5、ng-Ling Tie JiKey WordsTong Feng-ling Tie Ji; RP-HPLC; Berberine痛風(fēng)靈貼劑以黃柏為君藥，具有瀉火解毒，抗菌消炎等功效。本文在文獻(xiàn)方法1基礎(chǔ)上，采用反相高效液相色譜法，以外標(biāo)峰高法測(cè)定黃柏中鹽酸小檗堿含量。該法操作簡(jiǎn)便，快速，靈敏，結(jié)果較為滿(mǎn)意。1實(shí)驗(yàn)材料1.1儀器高效液相色譜儀SP8800泵，SP200檢測(cè)器，SP4600積分儀(美國(guó)光譜物理公司)；ELITE-TEST RP-C18 10（4.6×220mm I.D.)色譜柱；CQ250型超聲波清洗器（上海超聲波儀器廠(chǎng)）。1.2藥品及試劑對(duì)照品鹽酸小檗堿（衛(wèi)生部中國(guó)藥品

6、生物制品鑒定所提供）；黃柏藥材及痛風(fēng)靈貼劑樣品（華西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院提供）。甲醇(AR)，經(jīng)重蒸鎦收集64.5鎦分；硝酸銨（AR，成都化學(xué)試劑廠(chǎng)）。2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱為Elite Test RP-C18 10(4.6×220mm I.D.)，流動(dòng)相為甲醇-0.4mol.L-1硝酸銨（5248），流速為0.8ml.min-1。檢測(cè)波長(zhǎng)348nm，紙速0.25mm.min-1， 0.01AUFS，鹽酸小檗堿保留時(shí)間11min。2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密稱(chēng)取對(duì)照品10mg，用甲醇配成1mg.ml-1儲(chǔ)備液，備用。精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用甲醇配成2.5、5.0、10.0、25.

7、0、50.0、100.0g.ml-1溶液，進(jìn)樣10l，得回歸方程H=-479.58+57.01C，r=0.999 2。線(xiàn)性范圍為2.5100g.ml-1。2.3精密度試驗(yàn)精密量取對(duì)照品溶液適量，用甲醇配成4、40、80g.ml-1溶液，于日內(nèi)和日間期按標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)項(xiàng)下方法測(cè)定，其日內(nèi)和日間RSD%分別為4.2%（n=12）和3.6%（n=9）。2.4提取方法分別稱(chēng)取供試品、陰性對(duì)照（缺黃柏藥材）、黃柏藥材粉末（過(guò)40目篩）0.5、0.5、0.1g，加50%甲醇8ml，混勻后超聲提取1h，定量轉(zhuǎn)入10ml容量瓶，用50%甲醇定溶。取上清液5ml，用50%甲醇稀釋至10.0ml，9 000r.min-

8、1離心，5min取上清液10l進(jìn)樣，見(jiàn)1。1痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿色譜A 黃柏生藥中鹽酸小檗堿色譜B 痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿色譜C 缺黃柏陰性對(duì)照色譜2.5回收率試驗(yàn).ml-1.ml-1，按前述方法預(yù)處理并測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。表1痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿回收率(n=9)標(biāo)準(zhǔn)品加入量（g）測(cè)得量（g）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）8.008.33104.1340.0038.7596.8898.832.0580.0076.3895.482.6供試品測(cè)定精密稱(chēng)取3批供試品0.5g各3份，按前述方法預(yù)處理并測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。 表2痛風(fēng)靈貼劑中鹽酸小檗堿含量（±s，n=3）批號(hào)含量（mg.g-1）9503080.8515±5.29503151.1035±1.79504130.9637±5.23討論流動(dòng)相中加入適量離子對(duì)試劑硝酸銨可改善峰型和小檗堿的保留時(shí)間，當(dāng)小檗堿保留時(shí)間為11.00min時(shí)，可消除供試品中其他成份的干擾。本文經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，選擇50%甲醇超聲提取1h，簡(jiǎn)化了預(yù)處理方法，并提高了分析速度。外標(biāo)峰高法定量，要求色譜條件穩(wěn)定，樣品進(jìn)樣量控制在線(xiàn)性范圍內(nèi)，結(jié)果準(zhǔn)確性較好。 作者簡(jiǎn)介：吳蘇澄