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1、主講人:譚寧主講人:譚寧中國(guó)石化集團(tuán)四川維尼綸廠分檢車間監(jiān)測(cè)組五日生化需氧量的測(cè)定一、目的和要求一、目的和要求了解了解BOD5測(cè)定的意義及稀釋與接種法測(cè)測(cè)定的意義及稀釋與接種法測(cè)BOD5的基本原理。的基本原理。掌握本方法操作技能,如稀釋水的制備、掌握本方法操作技能,如稀釋水的制備、稀釋倍數(shù)選擇、稀釋水的校核和溶解稀釋倍數(shù)選擇、稀釋水的校核和溶解氧的測(cè)定等。氧的測(cè)定等。二、原理二、原理n生化需氧量是指在好氧條件下,微生物分解存在水中的有機(jī)物質(zhì)的生物化學(xué)過(guò)程中所需的溶解氧量。n根據(jù)參加反應(yīng)的物質(zhì)和最終生成的物質(zhì),可用下列的反應(yīng)式來(lái)概括生物化學(xué)反應(yīng)過(guò)程:n 酶n 6C6H12O6+16O2+4NH3

2、 4C5H7O2N+16CO2+28H2On 微生物 n 有機(jī)污染物 CO2+H2O+NH3n O2 微生物分解有機(jī)物是一個(gè)緩慢的過(guò)程,要把可分解的有機(jī)物全部分解掉常需要20d以上的時(shí)間,微生物的活動(dòng)與溫度有關(guān),所以測(cè)定生化需氧量時(shí),常以20作為測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)溫度。一般來(lái)說(shuō),在第5天消耗的氧量大約是總需氧量的70%,為便于測(cè)定,目前國(guó)內(nèi)外普遍采用20培養(yǎng)5d所需溶解氧含量作為指標(biāo),單位以的mg/L表示,簡(jiǎn)稱BOD5。水體發(fā)生生物化學(xué)過(guò)程必須具備:水體中存在能降解有機(jī)物的好氧微生物。對(duì)易降解的有機(jī)物,如碳水化合物、脂肪酸、油脂等,一般微生物均能將其降解,如硝基或硫酸取代芳烴等,則必須進(jìn)行生物菌種馴化

3、。有足夠的溶解氧。為此,實(shí)驗(yàn)用的稀釋水要充分曝氣以達(dá)到氧的飽和或接近飽和。稀釋還可以降低水中有機(jī)污染物的濃度,使整個(gè)分解過(guò)程在有足夠的溶解氧的條件下進(jìn)行。有微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)加入了一定量的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物物質(zhì),如磷鹽酸、鈣鹽、鎂鹽和鐵鹽等。n稀釋法測(cè)定BOD5是將水樣經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋后,使其中含有足夠的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求,將此水樣分成兩份。一份測(cè)定培養(yǎng)前的溶解氧;另一份放入20恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)5d后測(cè)定溶解氧,兩者的差值即為BOD5。n水中有機(jī)污染物的含量越高,水中溶解氧消耗愈多,BOD5值也愈高,水質(zhì)愈差。BOD5是一種量度水中可被生物降解部分有機(jī)物包括某些無(wú)機(jī)物的綜合指標(biāo),常

4、用來(lái)評(píng)價(jià)水體有機(jī)物的污染程度,并已成為污水處理過(guò)程中的一項(xiàng)基本指標(biāo)。三、儀器與試劑三、儀器與試劑n恒溫培養(yǎng)箱(20+1)。n20L細(xì)口玻璃瓶。n10002000mL量筒。n特制攪拌棒,在玻璃下端安裝一個(gè)2mm厚,大小和量筒相匹配的有孔橡皮片。n250300mL碘量瓶,帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。n虹吸管,供分取水樣和添加稀釋水用。n氯化鈣溶液。稱取27.5g無(wú)水氯化鈣,溶于水中,稀釋至1000mL。n三氯化鐵溶液。稱取0.25g三氯化鐵FeCl36H2O),溶于水中,稀釋至1000mL。n硫酸鎂溶液。稱取22.5g硫酸鎂MgSO47H2O),溶于水中,稀釋至1000mL。n磷酸鹽溶液

5、。稱取8.5g磷酸二氫鉀KH2PO4)、21.75g磷酸氫二鉀K2HPO4)、33.4g磷酸氫二鈉n(NaHPO47H2O和1.7g氯化氨NH4Cl),溶于約500mL水中,稀釋至1000mL并混合均勻,此緩沖溶液的pH應(yīng)為7.2。n葡萄糖-谷氨酸溶液。分別稱取150mg葡萄糖和谷氨酸均于130烘過(guò)1h),溶于水中,稀釋至1000mL。n鹽酸溶液,0.5mol/L。n氫氧化鈉溶液,0.5mol/L。n稀釋水。在20L玻璃瓶?jī)?nèi)加入18L水,控制水溫在20左右,用抽氣或無(wú)油壓縮機(jī)通入清潔空氣28h,使水中溶解氧飽和或接近飽和20時(shí)溶解氧大于8mg/L)。使用前,每升水中加入氯化鈣溶液、三氯化鐵溶液

6、、硫酸鎂溶液和磷酸鹽溶液各1mL,混合均勻。稀釋水pH值應(yīng)為7.2,其BOD5值應(yīng)小于0.2mg/L。n接種稀釋水。取適量生活污水于20放置2436h,上層清液即為接種液,每升稀釋水中加入13mL 接種液即為接種稀釋水。接種稀釋水pH值應(yīng)為7.2,其BOD5值以在0.31.0mg/L之間為宜,接種稀釋水配制后應(yīng)立即使用。對(duì)某些特殊工業(yè)廢水最好加入專門培養(yǎng)馴化過(guò)的菌種。n其他溶液。與碘量法測(cè)定溶解氧實(shí)驗(yàn)相同的硫酸錳溶液、堿性碘化鉀溶液、(1+5硫酸、0.025mol硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和1%的淀粉溶液詳見(jiàn)實(shí)驗(yàn)四“水中溶解氧的測(cè)定”)。四、操作步驟1、水樣的采集、存儲(chǔ)和預(yù)處理采集水樣于適當(dāng)大小的玻璃

7、瓶中根據(jù)水質(zhì)情況而定),用玻璃塞塞緊,且不留氣泡。采樣后,需在2h內(nèi)測(cè)定;否則,應(yīng)在4或4以下保存,且應(yīng)在采集后10h內(nèi)測(cè)定。用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值接近7。游離氯大于0.10mg/L的水樣,加亞硫酸鈉或硫代硫酸鈉除去。確定稀釋倍數(shù)。2、水樣的稀釋根據(jù)確定的稀釋倍數(shù),用虹吸法把一定量的污水引入1000mL量筒中,再沿壁慢慢加入所需稀釋水接種稀釋水),用特制攪拌棒在水面以下慢慢攪勻不應(yīng)產(chǎn)生氣泡),然后沿瓶壁慢慢傾入兩個(gè)預(yù)先編號(hào)、體積相同的(250mL)的碘量瓶中,直到充滿后溢出少許為止。蓋嚴(yán)并水封,注意瓶?jī)?nèi)不有氣泡。用同樣方法配置另兩份稀釋比水樣。3、對(duì)照樣的配

8、置 另取兩個(gè)有編號(hào)的碘量瓶加入稀釋水或接種稀釋水作為空白。4、培育 將各稀釋比的水樣,稀釋水或接種稀釋水空白各取一瓶放入20+1的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5d,培養(yǎng)過(guò)程中需每天添加封口水。5、溶解氧的測(cè)定參考“水中溶解氧的測(cè)定”。用碘量法測(cè)定未經(jīng)培養(yǎng)的各份稀釋比的水樣和空白水樣中的剩余溶解氧。用同樣方法測(cè)定經(jīng)培養(yǎng)5d后,各份稀釋水樣和溶解水樣中的剩余溶解氧。五、數(shù)據(jù)處理五、數(shù)據(jù)處理n 根據(jù)公式計(jì)算BOD5,并以表格形式表示測(cè)定數(shù)據(jù)和結(jié)果。n BOD5以O(shè)2計(jì))(mg/L)= (D1-D2)-(B1-B2)n式中:nD1稀釋水樣培養(yǎng)前的溶解氧量,mg/L;nD2稀釋水樣培養(yǎng)5d后剩余溶解氧量,mg/L;nB

9、1稀釋水或接種稀釋水培養(yǎng)前的溶解氧量,mg/L;nB2稀釋水或接種稀釋水經(jīng)培養(yǎng)5d后剩余溶解氧量,mg/L;nf 1稀釋水或接種稀釋水在培養(yǎng)溶液中所占的比例;nf 2水樣在培養(yǎng)液中所占的比例。21ff六、本卷須知六、本卷須知u稀釋比可參考下表來(lái)確定。預(yù)期BOD5值,mg/L稀釋比適用的水樣 26 12之間 R 412 2R,E 1030 5R,E 2060 10E 40120 20S 100300 50S,C 200600 100S,C4001200 200I,C 10003000 500I 20006000 1000I 表中:R代表河水;E代表生物凈化過(guò)的污水;S代表澄清過(guò)的污水或輕度污染的

10、工業(yè)廢水;C代表原污水;I代表嚴(yán)重污染的工業(yè)廢水。性質(zhì)不了解的水樣,稀釋倍數(shù)從COD值估算,取大于酸性高錳酸鹽指數(shù)值的1/4,小于CODcr值的1/5。恰當(dāng)?shù)南♂尡葢?yīng)使培養(yǎng)后剩余溶解氧至少有1mg/L和消耗的溶解氧至少2mg/L。n為除去水樣中游離氯而加入亞硫酸鈉的量可用實(shí)驗(yàn)方法得到。取100.0mL待測(cè)水樣于碘量瓶中,加入1mL 1%硫酸溶液,1mL 10%碘化鉀溶液,搖勻,以淀粉為指示劑,用標(biāo)準(zhǔn)硫代硫酸鈉或亞硫酸鈉溶液滴定,計(jì)算100mL水樣所需硫代硫酸鈉的量,推算所用水樣應(yīng)加入的量。n本操作最好在20左右室溫下進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)用稀釋水和水樣應(yīng)保持在20左右。n所用試劑和稀釋水如發(fā)現(xiàn)渾濁有細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí),應(yīng)棄去重新配制,或用葡萄糖谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液校核。當(dāng)測(cè)定2%稀釋度的葡萄糖谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí),若BOD5超過(guò)

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