SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的分子量(垂直板型電泳)

1、1 學習SDSPAGE測定蛋白質(zhì)分子量的基本原理。 2掌握垂直板型電泳的基本操作技術。 二、原理： 由實驗十五中已知，蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時，它的遷移率取決于它所帶凈電荷以及分子的大小和形狀等因素。 1967年，Shapiro等人發(fā)現(xiàn)，如果在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中加入陰離子去污劑十二烷基磺酸鈉（sodium dodecyl sulfate，簡稱SDS），則蛋白質(zhì)分子的電泳遷移率主要取決于它的分子量，而與所帶電荷和形狀無關。在一定條件下，蛋白質(zhì)的分子量與電泳遷移率間的關系，可用下式表示：因此，測定某個蛋白質(zhì)的分子量，只需比較它和一系列已知分子量的蛋白質(zhì)在SDS-凝膠電泳

2、時的遷移率就可以了。后來，Weber等人基本按Shapiro的方法對約40種蛋白質(zhì)進行了研究，進一步證實了這個方法地可行性(見圖16-1。用這種方法測定蛋白質(zhì)的分子量，簡便、快速，只需要廉價的設備和微克量的蛋白質(zhì)樣品；所得結果，在分子量為15,000200，000的范圍內(nèi)，與用其他方法測得的分子量相比，誤差一般在±10%以內(nèi)。因此，近幾年來，SDS-凝膠電泳測定分子量的方法，已得到非常廣泛的應用和迅速的發(fā)展。為了闡明SDS-凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量的原理，許多人進行了深入的研究。實驗證明，在蛋白質(zhì)溶液中加入SDS和巰基乙醇后，巰基乙醇能使蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵還原；SDS能使蛋白質(zhì)的

3、氫鍵、疏水鍵打開，并結合到蛋白質(zhì)分子上，形成蛋白質(zhì)-SDS復合物。在一定條件下，SDS與大多數(shù)蛋白質(zhì)的結合比為1.4克SDS/1克蛋白質(zhì)。由于十二烷基磺酸根帶負電，使各種蛋白質(zhì)的SDS-復合物都帶上相同密度的負電荷，它的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種類蛋白質(zhì)間原有的電荷差別。 SDS與蛋白質(zhì)結合后，還引起了蛋白質(zhì)構象的改變。蛋白質(zhì)-SDS復合物的流體力學和光學性質(zhì)表明，它們在水溶液中的形狀，近似于雪匣煙形的長橢圓棒，不同蛋白質(zhì)的SDS復合物的短軸長度都一樣，約為18A，而長軸則隨蛋白質(zhì)的分子量成正比地變化。 這樣的蛋白質(zhì)-SDS復合物，在凝膠電泳中的遷移率，不再受蛋白質(zhì)原

4、有電荷和形狀的影響，而只是橢圓棒的長度也就是蛋白質(zhì)分子量的函數(shù)。 將蛋白質(zhì)-SDS復合物在不同濃度的SDS-凝膠中電泳，得到的結果按Ferguson公式作圖，也證明了蛋白質(zhì)-SDS復合物的上述性質(zhì)。Ferguson公式：1gmR=1gm0KRC 該公式原來是Ferguson提出來描述蛋白質(zhì)在淀粉凝膠中電泳行為的，后來證明它也同樣適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳，式中mR是蛋白質(zhì)在一定濃度凝膠（C）中的遷移率；m0是當凝膠濃度外推到零時的遷移率即自由遷移率，它與蛋白質(zhì)的凈電荷量（q）成正比，與蛋白質(zhì)在溶液中的摩擦系數(shù)（f）成反比（m0q/f，f由溶液的粘滯性、蛋白質(zhì)分子的大小和形狀決定）；KR是阻滯系數(shù)

5、（retardation coefficient），它與蛋白質(zhì)分子量成線性關系。因此，不同的蛋白質(zhì)分子有不同的mR，m0和KR值，幾種蛋白質(zhì)的Ferguson圖見圖16-2。而蛋白質(zhì)-SDS復合物的Ferguson圖則不同（見圖16-3）。從圖16-3可以清楚地看到，不同蛋白質(zhì)的SDS復合物的m0值都很接近，分子量相差5倍的蛋白質(zhì)之間，m0值只相差10%，如果忽略這個差別，就可以認為，各種蛋白質(zhì)-SDS復合物的m0基本上是一個定值。這表明，不同蛋白質(zhì)的SDS復合物都帶有相同密度的負電荷，并具有同樣的構象，因此，它們的凈電荷量與磨擦系數(shù)之比（q/f）都接近于一個定值而不受各種蛋白質(zhì)原來

6、的電荷、分子大小和形狀的影響，因而，在溶液中，自由遷移率就表現(xiàn)出一致性；但在一定濃度的凝膠中，由于引入了凝膠的分子篩效應，電泳遷移率mR就成為蛋白質(zhì)分子量的函數(shù)。 根據(jù)以上事實，可以認為SDS-凝膠電泳測定蛋白質(zhì)分子量方法的基礎是可靠的。當然，還有許多問題有待于更深入地研究。 在用SDS-凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量時，應注意以下幾個問題：1如果蛋白質(zhì)-SDS復合物不能達到1.4克SDS/1克蛋白質(zhì)的比率并具有相同的構象，就不能得到準確的結果。影響蛋白質(zhì)和SDS結合的因素主要有以下3個：（1）二硫鍵是否完全被還原：只有在蛋白質(zhì)分子內(nèi)的二硫鍵被徹底還原的情況下，SDS才能定量地結合到蛋白質(zhì)分子上去

7、，并使之具有相同的構象。一般以巰基乙醇作還原劑。在有些情況下，還需進一步將形成的巰基烷基化，以免在電泳過程中重新氧化而形成蛋白質(zhì)聚合體。（2）溶液中SDS的濃度：溶液中的SDS的總量，至少要比蛋白質(zhì)的量高3倍，一般需高達10倍以上。（3）溶液的離子強度：溶液的離子強度應較低，最高不能超過0.26，因為SDS在水溶液中是以單體和分子團的混合體而存在的，SDS結合到蛋白質(zhì)分子上的量，僅決定于平衡時SDS單體的濃度而不是總濃度，在低離子強度的溶液中，SDS單體具有較高的平衡濃度。 2不同的凝膠濃度適用地不同的分子量范圍，Weber的實驗指出，在5%的凝膠中，分子量25,000200,000的蛋白質(zhì)，

8、其分子量的對數(shù)與遷移率呈直線關系；在10%的凝膠中，10.00070,000分子量的蛋白質(zhì)呈直線關系；在15%的凝膠中，10,00050,000分子量的蛋白質(zhì)呈直線關系；3.33%（以上各種濃度的凝膠，其交聯(lián)度都是2.6%）的凝膠可用于分子量更高的蛋白質(zhì)。 可根據(jù)所測分子量范圍選擇最適凝膠濃度，并盡量選擇分子量范圍和性質(zhì)與待測樣品相近的蛋白質(zhì)作標準蛋白質(zhì)。標準蛋白質(zhì)的相對遷移率（蛋白質(zhì)的電泳遷移距離除以染料遷移距離即為相對遷移率，詳見后）最好在0.20.8之間均勻分布。 在凝膠電泳中，影響遷移率的因素較多，而在制膠和電泳過程中，很難每次都將各項條件控制得完全一致，因此，用SDS-凝膠電泳法測定

9、分子量，每次測定樣品必須同時做標準曲線，而不得利用另一次電泳的標準曲線。 3有許多蛋白質(zhì)，是由亞基（如血紅蛋白）或兩條以上肽鏈（如-胰凝乳蛋白酶）組成的，它們在SDS和巰基乙醇的作用下，解離成亞基或單條肽鏈。因此，對于這一類蛋白質(zhì)，SDS-凝膠電泳測定的只是它們的亞基或單條肽鏈的分子量，而不是完整分子的分子量。為了得到更全面的資料，還必須用其它方法測定其分子量及分子中肽鏈的數(shù)目等，與SDS-凝膠電泳的結果互相參照。 4不是所有的蛋白質(zhì)都能用SDS-凝膠電泳法測定其分子量，已發(fā)現(xiàn)有些蛋白質(zhì)用這種方法測出的分子量是不可靠的。這些蛋白質(zhì)有：電荷異?；驑嬒螽惓５牡鞍踪|(zhì)，帶有較大輔基的蛋白質(zhì)（如某些糖蛋

10、白）以及一些結構蛋白如膠原蛋白等。例如組蛋白F1，它本身帶有大量正電荷，因此，盡管結合了正常比例的SDS，仍不能完全掩蓋其原有正電荷的影響，它的分子量是21,000，但SDS-凝膠電泳測定的結果卻是35,000。因此，在分析SDS-凝膠電泳所得的結果時，應該小心。一般至少用兩種方法來測定未知樣品的分子量，互相驗證。為了判斷待測樣品是否可用SDS-凝膠電泳法來測定分子量，也可以使蛋白質(zhì)-SDS復合物在不同濃度（交聯(lián)度相同）的SDS-凝膠中電泳，得到Ferguson圖。如果待測樣品的自由遷移率m0與標準蛋白質(zhì)的m0基本交于一點（如圖16-3），而且在不同濃度的SDS-凝膠中測得的分子量都相同，則表

11、明此蛋白質(zhì)在SDS-凝膠電泳中的行為是正常的，可以用SDS-凝膠電泳法測定其分子量。 SDS-PAGE有連續(xù)體系及不連續(xù)體系兩種，這兩種體系有各自的樣品溶解液及緩沖液，但加樣方式，電泳過程及固定、染色與脫色方法完全相同。三、器材與試劑：1器材：夾心式垂直板電泳槽，凝膠模（135×100×1.5mm）（北京六一儀器廠）直流穩(wěn)壓電源（電壓300600V，電流50100mA）吸量管（1,5,10 ml）燒杯（25,50,100 ml）細長頭的滴管           &#

12、160;            1ml注射器及6號長針頭微量注射器（10l或50l）水泵或油泵真空干燥器                            培養(yǎng)皿（直徑120mm）2試劑：（1）標準蛋白質(zhì)目前國內(nèi)外均

13、有廠商生產(chǎn)低分子量及高分子量標準蛋白質(zhì)成套試劑盒，用于SDS-PAGE測定未知蛋白質(zhì)分子量。高分子量標準蛋白試劑盒（Pharmacia公司產(chǎn)品，表中16-1）。表16-1  5種標準蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)名稱Mr來  源甲狀腺球蛋白鐵蛋白過氧化氫酶乳酸脫氫酶血清清蛋白669 000440 000232 000140 00067 000豬甲狀腺馬    肺牛    肝牛    心牛 血 清同時按說明書要求處理低分子量標準蛋白試劑盒，中國科學院上海生物化學研究所東風生化試劑廠生產(chǎn)（表16-

14、2）。表16-2  5種標準蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)名稱Mr磷酸化酶B牛血清蛋白肌動蛋白磷酸酐酶煙草花葉病毒外殼蛋白94 00067 00043 00030 00017 500每種蛋白含量為40g。用時加入200l樣品溶解，經(jīng)處理后，上樣10l（2g）就能顯示出清晰的條帶。 自己配制低分子量或高分子量標準蛋白質(zhì)混合試劑。如買不到標準蛋白試劑盒時，可參考常用的標準蛋白質(zhì)及其分子量表。從中選擇35種蛋白質(zhì)，如馬心細胞色素C（Mr12 500）、牛胰胰凝乳蛋白原A（Mr25 000）、豬胃胃蛋白酶（Mr35 000）、雞卵卵清蛋白（Mr43 000）、

15、牛血清白蛋白（Mr67 000）等蛋白質(zhì)，按照每種蛋白0.51mg·ml-1樣品溶解液配制?？膳渲瞥蓡我坏鞍踪|(zhì)標準液，也可配成混合蛋白質(zhì)標準液。 （2）連續(xù)體系SDS-PAGE有關試劑 0.2mol·L-1pH7.2磷酸鹽緩沖液：稱取磷酸氫二鈉(ARNa2HPO4·2H2O25.63g或Na2HPO4·12H2O51.58g，再稱取磷酸二氫鈉(ARNaH2PO4·H2O7.73g或NaH2PO4·2H2O8.74g，溶于重蒸水中并定容到1000ml。 樣品溶解液：0.01mol·L-1pH7.2磷酸鹽緩沖液，內(nèi)含1

16、%SDS、1%巰基乙醇、10%甘油或40%蔗糖及0.02%溴酚藍。用來溶解標準蛋白質(zhì)及待測固體蛋白質(zhì)樣品。配制方法如表16-3。表16-3  連續(xù)體系樣品溶解液配制SDS巰基乙醇甘油溴酚藍0.2mol·L-1磷酸鹽緩沖液加重蒸水至最后總體積為100mg0.1ml1ml2mg0.5ml10ml如樣品為液體，則應用濃一倍的樣品溶解液，然后等體積混合。 凝膠貯液：稱Acr 30g,Bis 0.8g，加重蒸水至100ml，過濾后置棕色瓶，4貯存可用12個月。 凝膠緩沖液：稱SDS 0.2g，加0.2mol·L-1 pH7.2磷酸鹽緩

17、沖液至100ml。4貯存，用前，稍加溫使SDS溶解。 1%TEMED：取TEMED1ml，加重蒸水至100ml，置棕色瓶內(nèi)4貯存。 10%過硫酸銨（AP）：稱AP1g，加重蒸水至100ml，此液應每周新配，置棕色瓶內(nèi)，4貯存。 電極緩沖液（0.1%SDS，0.1mol·L-1 pH7.2磷酸鹽緩沖液）：稱SDS1g，加500ml0.2mol·L-1 pH7.2磷酸鹽緩沖液，再用蒸餾水定容至1000ml。 1%瓊脂（糖）：稱瓊脂（糖）1g，加100ml上述電極緩沖液使其溶解，4貯存。 （3）不連續(xù)體系SDS-PAGE有關試劑 10%（W/V）SDS溶液：稱5gSDS，加重蒸水

18、至50ml，微熱使其溶解，置試劑瓶中，4貯存。SDS在低溫易析出結晶，用前微熱，使其完全溶解。 1%TEMED（V/V）：取1mLTEMED，加重蒸水至100ml，置棕色瓶中，4貯存。 10%AP（W/V）：稱AP1g，加重蒸水至10ml。最好臨用前配制。 樣品溶解液：內(nèi)含1%SDS，1%巰基乙醇，40%蔗糖或20%甘油，0.02%溴酚藍，0.01mol·L-1 pH8.0 Tris-HCl緩沖液。 先配制0.05mol·L-1 pH8.0 Tris-HCl緩沖液：稱Tris 0.6g，加入50ml重蒸水，再中入約3ml 1mol&#

19、183;L-1 HCl，調(diào)pH至8.0，最后用重蒸水定容至100ml。 按表16-4配制樣品溶解液。 表16-4  不連續(xù)體系樣品溶解液配制SDS巰基乙醇溴酚藍蔗糖0.05mol·L-1Tris-HCl加重蒸水至最后總體積為100mg0.1ml2mg4g2ml10ml*如樣品為液體，則應用濃一倍的樣品溶解液，然后等體積混合。 凝膠貯液 30%分離膠貯液：配制方法與連續(xù)體系相同，稱Acr 30g及Bis 0.8g，溶于重蒸水中，最后定容至100ml，過濾后置棕色試劑瓶中，4貯存。 10%濃縮膠貯液：稱Acr 10g及Bis 0

20、.5g，溶于重蒸水中，最后定容至100mL，過濾后置棕色試劑瓶中，4貯存。 凝膠緩沖液 分離膠緩沖液（3.0mol·L-1 pH8.9 Tris-HCl緩沖液）：稱Tris 36.3g，加少許重蒸水使其溶解，再加1mol·L-1 HCl約48ml，調(diào)pH至8.9，最后加重蒸水定容至100ml，4貯存。 濃縮膠緩沖液（0.5mol·L-1 pH6.7 Tris-HCl緩沖液）：稱Tris6.0g，加少許重蒸水使其溶解，再加1mol·L-1 HCl約48ml調(diào)pH至6.7。最后用重蒸水定容至100m

21、l，4貯存。 電極緩沖液（內(nèi)含0.1%SDS，0.05mol·L-1 Tris0.384 mol·L-1甘氨酸緩沖液pH8.3）：稱Tris6.0，甘氨酸28.8g，加入SDS 1g，加蒸餾水使其溶解后定容至1000ml。 1%瓊脂（糖）溶液：稱瓊脂（糖）1g，加電極緩沖液100ml，加熱使其溶解，4貯存，備用。（4）固定液取50%甲醇454ml，冰乙酸46ml混勻。（5）染色液稱考馬斯亮藍R250 0.125g，加上述固定液250ml，過濾后應用。（6）脫色液冰乙酸75ml，甲醇50ml，加蒸餾水定容至1000ml。四、操作步驟：（一）安裝夾

22、心式垂直板電泳槽關心式垂直板電泳槽操作簡單，不易滲漏，其裝置如圖16-4。這種電泳槽兩側為有機玻璃制成的電極槽，兩個電極槽中間夾有一個凝膠模，該模由1個  形硅膠框、長與短玻璃板及樣品槽模板（梳子）所組成（見圖16-5）。電泳槽由上貯槽（白金電極在上或面對短玻璃板），下貯槽（白金電極在下或面對長玻璃板）和回紋狀冷凝管組成。兩個電極槽與凝膠模間靠貯液槽螺絲固定。各部間依下列順序組裝：2、將長、短玻璃板分別插到  形硅橡框的凹形槽中。注意勿用手接觸灌膠面的玻璃。 3、將已插好玻璃板的凝膠模平放在上貯槽上，短玻璃板應面對上貯槽。 4、將下貯槽的銷孔對準已裝好螺絲銷釘?shù)纳?/p>

23、貯槽，雙手以對角線的方式旋緊螺絲帽。 5、豎直電泳槽，在長玻璃板下端與硅膠?？蚪唤绲目p隙內(nèi)加入已融化的1%瓊脂（糖）。其目的是封住空隙，凝固后的瓊脂（糖）中應避免有氣泡。 （二）配膠及凝膠板的制備 1配膠 根據(jù)所測蛋白質(zhì)分子量范圍，選擇適宜的分離膠濃度。由于SDS-PAGE有連續(xù)系統(tǒng)及不連續(xù)系統(tǒng)兩種，兩者間有不同的緩沖系統(tǒng)，因而有不同的配制方法，見表16-5和表16-6。 表16-5  SDS-不連續(xù)體系凝膠配制電極緩沖液為pH8.3Tris-甘氨酸緩沖液，內(nèi)含0.1%SDS。電極緩沖液為0.1mol·L-1 pH7.2磷酸緩沖液，內(nèi)含0.1%SDS。

24、2凝膠板的制備 （1）SDS-不連續(xù)體系凝膠板的制備 分離膠的制備：按表16-5配制20ml10%分離膠，混勻后用細長頭滴管將凝膠液加至長、短玻璃板間的縫隙內(nèi)，約8cm高，用1ml注射器取少許蒸餾水，沿長玻璃板板壁緩慢注入，約34mm高，以進行水封。約30min后，凝膠與水封層間出現(xiàn)折射率不同的界線，則表示凝膠完全聚合。傾去水封層的蒸餾水，再用濾紙條吸去多余水分。 濃縮膠的制備：按表16-5配制10ml3%濃縮膠，混勻后用細長頭滴管將濃縮膠加到已聚合的分離膠上方，直至距離短玻璃板上緣約0.5cm處，輕輕將樣品槽模板插入濃縮膠內(nèi)，約30min后凝膠聚合，再放置2030min，使凝膠“老化”。小心

25、拔去樣品槽模板，用窄條濾紙吸去樣品凹槽中多余的水分，將pH8.3 Tris-甘氨酸緩沖液倒入上、下貯槽中，應沒過短板約0.5cm以上，即可準備加樣。 （2）SDS-連續(xù)體系凝膠板的制備：按表16-6配制20ml所需濃度的分離膠，用細長頭滴管將分離膠混合液加到兩塊玻璃板的縫隙內(nèi)直至距離短玻璃板上緣0.5cm處，插入樣品槽模板。為防止?jié)B漏，可在上、下電極槽中加入蒸餾水，但不能超過短板，以防凝膠被稀釋，約30min，凝膠聚合，繼續(xù)放置2030min后，倒去上、下電極槽中的蒸餾水，小心拔出梳形樣品槽模板，用窄條濾紙吸去殘余水分，注意不要弄破凹形加樣槽的底面。倒入電極緩沖液即可進行預電泳或準備

26、加樣。（三）樣品的處理與加樣1樣品的處理根據(jù)分子量標準蛋白試劑盒的要求加樣品溶解液，如上海東風生化試劑廠生產(chǎn)的低分子量標準蛋白試劑盒，每一安瓿則需加入200L樣品溶解液，自己配制標準及未知樣品，按.51mg/1mL樣品溶解液，溶解后，將其轉移到帶塞小離心管中，輕輕蓋上蓋子（不要塞緊以免加熱迸出），在100沸水浴中保溫3min，取出冷卻后加樣。如處理好的樣品暫時不用，可入在20冰箱保存較長時間，使用前在100沸水中加熱3min，以除去亞穩(wěn)態(tài)聚合。2、加樣一般每個凹形樣品槽內(nèi)，只加一個種樣品或已知分子量的混合標準蛋白質(zhì)，加樣體積要根據(jù)凝膠厚及樣品濃度靈活掌握，一般加樣體積為1015L（即210g蛋

27、白）。如樣品較稀，加樣體積可達100L。如樣品槽中有所泡，可用注射器針頭挑除。加樣時，將微量注射器的針頭通過電極緩沖液伸入加樣槽內(nèi)，盡量接近底部，輕輕推動微量注射器，注意針頭勿碰破凹形槽膠面。由于樣品溶解液中含有比重較大的蔗糖或甘油，因此樣品溶液會自動沉降在凝膠表面形成樣品層。（四）電泳分離脈聚合后是否進行預電泳則應根據(jù)需要而定，SDS連續(xù)系統(tǒng)預電泳采用30mA60120min。1連續(xù)系統(tǒng)在電極槽中倒入0.1%SDS pH7.2 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，連接電泳儀與電泳槽，上槽接負極，下槽接正極。打開電源，將電流調(diào)至20mA，待樣品進入分離膠后，將電流調(diào)至50mA，待染料前沿遷移至距硅橡

28、膠框底邊11.5cm處，停止電泳，一般需56h。2不連續(xù)系統(tǒng)在電極槽中倒入pH8.3Tris-HCl電級緩沖液，內(nèi)含0.1%SDS即可進行電泳。在制備濃縮膠后，不能進行預電泳，因預電泳會破壞pH環(huán)境，如需要電泳只能在分離膠聚合后，并用分離膠緩沖液進行。預電泳后將分離膠面沖洗干凈，然后才能制備濃縮膠。電泳條件也不同于連續(xù)SDS-PAGE。開始時電流為10mA左右，待樣品進入分離膠后，改為2030mA，當染料前沿距硅橡膠框底邊1.5cm時，停止電泳，關閉電源。（五）凝膠板剝離與固定電泳結束后，取下凝膠模，卸下硅橡膠框，用不銹鋼藥鏟或鑷子撬開短玻璃板，在凝膠板切下一角作為加樣標志，在兩側溴酚藍染料區(qū)

29、帶中心，插入細銅絲作為前沿標記。將凝膠板放在大培養(yǎng)皿內(nèi)，加入固定液，固定守液。（六）染色與脫色將染色液倒入培養(yǎng)皿中，染色1h左右，用蒸餾水漂洗數(shù)次，再用脫色液脫色，直到蛋白質(zhì)區(qū)帶清晰，即可計算相對遷移率。（七）結果與分析1繪制標準曲線將大培養(yǎng)皿放在一張坐標紙上，量出加樣端距細銅絲間的距離（cm）以及各蛋白質(zhì)樣品區(qū)帶中心與加樣端的距離（cm），如圖18-6所示。按下式計算相對遷移率mR：以標準蛋白質(zhì)的相對遷移率為橫坐標，標準蛋白質(zhì)分子量為縱坐標在半對數(shù)坐標紙上作圖，可得到一條標準曲線。 2根據(jù)未知蛋白質(zhì)樣品相對遷移率直接在標準曲線上查出其分子量。 3分析各蛋白質(zhì)相對遷移率高氏主要是由什么決定的？   注意事項 （1）由于與凝膠聚合有關的硅橡膠稱、玻璃板表面不光滑潔凈，在電泳時會造成凝膠板與玻璃板或硅橡膠條剝離，產(chǎn)生氣泡或滑膠；剝膠時凝膠板易斷裂，為防止引現(xiàn)象，所用器材均應嚴格地清洗。硅橡膠條的凹槽、樣品槽模板及電泳槽用泡沫海綿蘸取“洗潔凈