維生素A對新生兒單個核細胞IgM生成能力的促進作用

1、            丁艷華王衛(wèi)平 【摘要】目的探討維生素A(VitA)對新生兒臍血單個核細胞IgM生成能力的影響。方法應用體外培養(yǎng)試驗在培養(yǎng)基中加入一定量的視黃酸(RA)，觀察VitA水平正常組與缺乏組新生兒臍血單個核細胞生成IgM的變化。結(jié)果RA能夠增加SAC刺激下的單個核細胞的IgM生成，加RA后VitA正常組IgM由666±402 g/L增加到1 389±982 g/L(P<0.01)，VitA缺乏組由350±136 g/L(增到

2、581±241 g/L)(P<0.01)。盡管體外加RA后Vit A缺乏組的IgM水平有所上升，但增加量和增加幅度都顯著低于VitA正常組。相關(guān)分析的結(jié)果表明，新生兒臍血VitA含量與體外培養(yǎng)加RA后IgM的增加幅度之間存在著一定的正相關(guān)關(guān)系。結(jié)論VitA對新生兒單個核細胞生成IgM的能力具有重要的促進作用。 【關(guān)鍵詞】維生素A嬰兒，新生胎血IgM單核細胞 The effects of vitamin A nutritional status on the IgM producing ability of the cord blood mononuclear cells Din

3、g Yanhua, Wang Weiping. The Childrens Hospital, Shanghai Medical University, Shanghai 200032 【Abstract 】ObjectiveTo assess the effect of vitamin A(Vit A) nutritional status on the IgM producing ability of the cord blood mononuclear cells (CBMNC). MethodsThe IgM production of newborns CBMNC after sup

4、plenting a certain dosage of retinoic acid (RA) in vitro was investigated in both VitA normal and deficient groups. ResultsRA was able to augment the IgM production of CBMNC induced by staphylococcus aureus cowan. In VitA normal group, the IgM production increased from 666±402 g/L to 1389±

5、982 g/L(P<0.05), while in VitA deficient group, it increased from 350±136 g/L to 581±241 g/L. The level of IgM production in VitA deficient group was significantly lower than that in VitA normal group (P<0.05). Both the enhanced quantity and the enhanced amplitude in VitA deficient g

6、roup were lower than those in VitA normal group. The serum VitA concentration of newborns correlated positively with the enhanced amplitude of IgM production of CBMNC. ConclusionVitA is important for the mononuclear cells to produce sufficient IgM. 【Key words 】VitAInfant, newbornFetal bloodIGMMonocy

7、tes 維生素A(Vit A)及其代謝產(chǎn)物視黃醇為機體許多重要的生理過程所必需，如暗適應、維持上皮組織的完整性、促進機體生長發(fā)育等。近年來，VitA與免疫之間的關(guān)系又為人們所關(guān)注，特別是VitA對體液免疫的促進作用，被認為是提高機體抗感染能力的主要原因之一。 Buck等1的細胞培養(yǎng)結(jié)果顯示，視黃醇可發(fā)揮B淋巴細胞生長因子的作用，且B淋巴細胞生長速度呈現(xiàn)與VitA“劑量相關(guān)性”的增高。視黃酸(RA)是天然VitA在體內(nèi)代謝后的活性產(chǎn)物，正常血清水平遠低于視黃醇，但對多種組織的分化增殖和功能成熟具有更明顯的促進作用。Wang等2將RA用于體外細胞培養(yǎng)，證實RA能增強SAC(staphylococc

8、us aureus cowan I，又稱溶血性葡萄球菌cowan株)刺激下的臍血單個核細胞的IgM生成，其最適濃度為1×10-6 mol/L。本研究在此實驗基礎(chǔ)上，進一步探討了新生兒自身的VitA營養(yǎng)狀況對于RA增強單個核細胞IgM生成能力作用的影響。 對象及方法 一、研究對象與標本采集 1.采集上海市國際和平婦幼保健院的34例健康足月新生兒臍血10 ml，肝素抗凝。 2.采用熒光分光光度法測定新生兒臍血中血清VitA含量，其中血清VitA含量>0.70 mol/L者(20例)為VitA正常組；血清VitA含量0.70 mol/L(14例)為VitA缺乏組。兩組新生兒身高與體重

9、差異無顯著意義。 二、測定方法 1.將抗凝的臍血經(jīng)密度梯度離心法分離得單個核細胞，并調(diào)整細胞濃度至1×106個/ml。 2.于96孔培養(yǎng)板中，將細胞混懸液分為三組：空白組：不加任何刺激物；對照組：加SAC刺激；試驗組：加SAC與RA共同培養(yǎng)。每組三份，其中SAC的最終稀釋度為1 1 800，RA的最終濃度為1×10-6mol/L。 3.于5% 37的二氧化碳(CO2)孵箱中培養(yǎng)細胞8天后，收集細胞上清液。 4.采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)雙抗夾心法檢測上清IgM。 三、統(tǒng)計學處理 統(tǒng)計分析采用Lotus 1-2-3 Release 4.01軟件在IBM-PC/XT微型

10、計算機上處理。 結(jié)果及分析 一、VitA對新生兒臍血單個核細胞IgM生成水平的促進作用 體外培養(yǎng)加RA后增加了SAC誘導的臍血單個核細胞產(chǎn)生IgM的量，其中VitA正常組由666±402 g/L增加到1389±982 g/L，差異有非常顯著意義(P<0.01)；缺乏組由350±136 g/L增加到581±241 g/L，差異有非常顯著意義(P<0.01)(附表)。 附表兩組新生兒臍血單個核細胞的 IgM生成水平(g/L,±s) 組別 未加RA 加RA后 增加量 增加幅度 (倍) VitA正常組 666±420 1 389&

11、#177;982 749±602 3.1±1.9 VitA缺乏組 350±136 581±241 246±193 2.2±1.3 t值 3.83 5.47 3.64 2.32 P值 0.01 0.01 0.01 0.05 二、VitA正常組與缺乏組IgM生成水平的比較 由附表可見，未加RA與加RA后，VitA缺乏組的IgM生成量均低于VitA正常組，差異有非常顯著意義(P<0.01)，且增加量與增加幅度也都較VitA正常組為低，差異有顯著意義(P<0.05)。 三、新生兒臍血VitA水平與IgM生成水平的相關(guān)性 相關(guān)分析的

12、結(jié)果表明，新生兒臍血VitA含量與體外培養(yǎng)加RA后IgM的增加幅度之間有顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.379、>0.334，P<0.05)。 討論 本研究的試驗結(jié)果表明，1×10-6mol/L濃度下的RA能夠增加SAC誘導的臍血單個核細胞產(chǎn)生IgM的量(P<0.01)，這與Wang等2的報道結(jié)果是一致的。                  本研究進一步發(fā)現(xiàn)，在相同的體外培養(yǎng)條件下，VitA缺乏組的新生兒較VitA正

13、常組臍血單個核細胞生成IgM的量有明顯差異，無論是單一的SAC刺激下，還是加入RA后的SAC刺激下，缺乏組的IgM生成量均顯著低于正常組(P<0.01)，而且增加量與增加幅度亦較正常組為低(P<0.05)。提示：體外培養(yǎng)RA對于新生兒單個核細胞生成IgM的促進作用，顯然還受到新生兒機體VitA營養(yǎng)狀況的制約。盡管加入RA后，缺乏組的IgM生成水平有所上升，但RA對于新生兒出生后IgM生成量的這種上調(diào)作用，也許較為微弱或緩慢。因此，糾正胎兒期的VitA缺乏狀態(tài)，可望促進胎兒免疫功能的發(fā)育成熟，從而提高他們生后的免疫能力。 動物實驗表明，VitA缺乏的小鼠呈現(xiàn)胸腺和淋巴器官萎縮及胸腺淋

14、巴細胞減少，再給VitA缺乏的小鼠或家兔肌注VitA后，其胸腺和脾臟的重量顯著增加，說明VitA對于免疫系統(tǒng)的正常維持，具有重要影響3。人類免疫系統(tǒng)的發(fā)生發(fā)育在胚胎早期已經(jīng)開始。到出生時尚處于逐漸完善的繼續(xù)發(fā)育階段。胎兒時期的VitA營養(yǎng)不良，是否阻滯了胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育成熟，繼而影響到胎兒生后的免疫功能，值得進一步探討。就B淋巴細胞而言，新生兒時期盡管B細胞的數(shù)量與成人相似，并且B細胞膜表面免疫球蛋白(SIg)已達到成人水平，但抗體生成卻低下，且主要為IgM類抗體4。因此，維持和促進B細胞的抗體生成能力對提高此時期的抗感染免疫功能非常重要。 本研究通過相關(guān)分析還發(fā)現(xiàn)，臍血VitA水平和體外培

15、養(yǎng)加RA后IgM的增加幅度之間存在著顯著的正相關(guān)關(guān)系，其機制很可能在于：視黃醇賴以結(jié)合的細胞內(nèi)視黃醇特異性受體(CRAR)的表達水平與機體VitA營養(yǎng)有關(guān)。隨著分子生物學檢測技術(shù)的發(fā)展，最近已在多種組織細胞中發(fā)現(xiàn)視黃醇的特異性受體CRAR。CRAR屬于固醇類核受體家族，多位于細胞內(nèi)基因表達控制區(qū)，與RA結(jié)合后通過調(diào)節(jié)某些細胞基因的轉(zhuǎn)錄表達，產(chǎn)生特殊的功能活動或活性物質(zhì)5。繼續(xù)深入研究VitA營養(yǎng)對小兒淋巴細胞功能的作用機制是否同細胞內(nèi)CRAR的表達水平有關(guān)，將提供VitA營養(yǎng)促進小兒免疫功能的直接證據(jù)。 作者單位：200032 上海醫(yī)科大學兒科醫(yī)院 參考文獻 1Buck J, Retter G

16、, Dannecker L, et al. Retinol is essential for growth of activated human B cells. J Exp Med, 1990, 171:1613-1624. 2Wang W, Napoli JL, Ballow M. The effects of retinol on in vitro immunoglobulin synthesis by cord blood and adult peripheral blood mononuclear cells. Clin Exp Immunol, 1993, 92:164-168. 3衣京梅.維生素A對新生兒免疫功能的影響.國外醫(yī)學兒科學分冊，1994，21：248-251. 4Watson W, Oen K, Ramdahim R, et al. Imm