第六章黃酮類

1、1(flavonoids) 2目的要求目的要求 1.掌握黃酮類化合物的定義、結(jié)構(gòu)類型和代表化合物2.掌握黃酮類化合物的理化性質(zhì)及與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系3.掌握黃酮類化合物的提取分離方法 3 黃酮類化合物黃酮類化合物(flavonoids)廣泛存在于自然界，是廣泛存在于自然界，是一類重要的天然有機(jī)化合物。其不同的顏色為天然色一類重要的天然有機(jī)化合物。其不同的顏色為天然色素家族添加了更多的色彩。素家族添加了更多的色彩。 黃酮類化合物在植物界主黃酮類化合物在植物界主要分布在雙子葉植物中，如豆科、唇形科、菊科等。要分布在雙子葉植物中，如豆科、唇形科、菊科等。其次為裸子植物，如銀杏科。而在菌類、藻類、地衣其次

2、為裸子植物，如銀杏科。而在菌類、藻類、地衣類等低等植物中較少見。許多天然藥物如槐花、黃芩、類等低等植物中較少見。許多天然藥物如槐花、黃芩、葛根、補(bǔ)骨脂、芫花、忍冬等都含有此類成分，葛根、補(bǔ)骨脂、芫花、忍冬等都含有此類成分， 該類化合物在植物體內(nèi)部分與糖結(jié)合成苷存在，該類化合物在植物體內(nèi)部分與糖結(jié)合成苷存在，部分以游離形式存在。據(jù)統(tǒng)計(jì)已分離出的黃酮類化合部分以游離形式存在。據(jù)統(tǒng)計(jì)已分離出的黃酮類化合物總數(shù)超過物總數(shù)超過4000多個(gè)。多個(gè)。 4 黃酮類化合物具有多種生理活性，如蘆黃酮類化合物具有多種生理活性，如蘆丁、橙皮苷等能降低血管脆性，可用于防治丁、橙皮苷等能降低血管脆性，可用于防治高血壓及動(dòng)

3、脈硬化高血壓及動(dòng)脈硬化;再如水飛薊素等具有很強(qiáng)再如水飛薊素等具有很強(qiáng)的保肝作用，可用于治療肝炎、肝硬化等的保肝作用，可用于治療肝炎、肝硬化等;此此外還有抗炎作用，雌激素樣作用等。外還有抗炎作用，雌激素樣作用等。5OOOO第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型6共同特征：共同特征：C6-C3-C6基本骨架基本骨架 OO第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型7 根據(jù)根據(jù)B B環(huán)連接位置（環(huán)連接位置（2 2位或位或3 3位）、位）、C C環(huán)氧化環(huán)氧化程度、程度、C C環(huán)是否成環(huán)等將黃酮類化合物分為以下環(huán)是否成環(huán)等將黃酮類化合物分為以下八大類。八大類。 一、黃酮和黃酮醇 二、二氫黃酮和二氫黃酮醇 三、異黃酮和

4、二氫異黃酮 四、查耳酮和二氫查耳酮類 五、橙酮類 六、花色素和黃烷醇類 七、第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型8ORO第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇R=H 黃酮黃酮 R=OH 黃酮醇黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇9 如存在于忍冬科金銀花、忍冬藤中的木犀草素如存在于忍冬科金銀花、忍冬藤中的木犀草素(luteolin) 具有抗菌作用。具有抗菌作用。 木犀草素木犀草素OHOOHHOOOH第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇10 金絲桃科紅旱蓮里的金絲桃科紅旱蓮里的槲皮素（槲皮素（querce

5、tin）具有）具有抗炎、止咳祛痰等作用，治療支氣管炎。此外還有抗炎、止咳祛痰等作用，治療支氣管炎。此外還有降低血壓、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈血流量等作用。降低血壓、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈血流量等作用。 OOOHOHHOOHOH第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇11槲皮素槲皮素OOOHOHHOOHOH蘆丁蘆丁OOOrutinoseOHHOOHOH第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇一、黃酮和黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇一、黃酮和黃酮醇12OOOHOHHO芹菜素芹菜素OOOHOHOHOH山奈素

6、山奈素第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇一、黃酮和黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型一、黃酮和黃酮醇一、黃酮和黃酮醇13OROR=H R=H 二氫黃酮二氫黃酮 R=OH R=OH 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 與黃酮和黃酮醇相比，其結(jié)構(gòu)中C環(huán)C2-C3位雙鍵被飽和。第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃酮和二氫黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃酮和二氫黃酮醇14OOOHOH甘草素治療消化系統(tǒng)潰瘍治療消化系統(tǒng)潰瘍 杜鵑花科興安杜鵑祛痰、止咳、抗菌第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃

7、酮和二氫黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃酮和二氫黃酮醇15具有具有保肝作用，臨床上用于治療急、慢性肝炎、肝硬化保肝作用，臨床上用于治療急、慢性肝炎、肝硬化及代謝中毒性肝損傷。及代謝中毒性肝損傷。 OOHOOHOOOHOCH3OHCH2OH水飛薊賓水飛薊賓第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃酮和二氫黃酮醇第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、二氫黃酮和二氫黃酮醇二、二氫黃酮和二氫黃酮醇16 異黃酮類為具有3苯基色原酮基本骨架的化合物，與黃酮相比其B環(huán)位置連接不同。 大豆素大豆素 R R1 1=R=R2 2=R=R3 3=H

8、=H 大豆苷大豆苷 R R1 1=R=R3 3=H R=H R2 2=glc=glc 葛根素葛根素 R R2 2=R=R3 3=H R=H R1 1=glc=glc OOR3R1R2OO第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、異黃酮和二氫異黃酮二、異黃酮和二氫異黃酮第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型三、異黃酮和二氫異黃酮三、異黃酮和二氫異黃酮17 二氫異黃酮類可看作是異黃酮類C2和C3 雙鍵被還原成單鍵的一類化合物。 如中藥廣豆根中的紫檀素就屬于二氫異黃酮的衍生物。 OCH3OOOO紫檀素 第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型二、異黃酮和二氫異黃酮二、異黃酮和二氫異黃酮有抗癌活性和抗真菌作用第一節(jié)

9、第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型三、異黃酮和二氫異黃酮三、異黃酮和二氫異黃酮18OOOCH3OCH3OO魚藤酮魚藤酮第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型三、異黃酮和二氫異黃酮三、異黃酮和二氫異黃酮19OOH結(jié)構(gòu)特征：結(jié)構(gòu)特征： 三碳鏈未成環(huán)三碳鏈未成環(huán) 四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型查耳酮查耳酮四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型20 二氫黃酮在堿的作用下易開環(huán)生成鄰二氫黃酮在堿的作用下易開環(huán)生成鄰-羥基查耳羥基查耳酮，由無色轉(zhuǎn)為深黃色，后者經(jīng)酸化又能轉(zhuǎn)化為原來酮，由無色轉(zhuǎn)為深黃色，后者經(jīng)酸化又能轉(zhuǎn)化為

10、原來的二氫黃酮。的二氫黃酮。四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型21四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型22二氫查耳酮二氫查耳酮四、查耳酮和二氫查耳酮類四、查耳酮和二氫查耳酮類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型23OCHO2345612361745ABOCHOHO2345612361745結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：可看作是黃酮的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：可看作是黃酮的C環(huán)分

11、出一個(gè)碳原子變成五環(huán)分出一個(gè)碳原子變成五元環(huán)，其余部位不變，但元環(huán)，其余部位不變，但C原子定位也有所不同，又名原子定位也有所不同，又名噢哢。噢哢。第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型五、橙酮類五、橙酮類如硫磺菊中含有的硫磺菊如硫磺菊中含有的硫磺菊素。素。24OHOOHOHR2R1OH+飛燕草素飛燕草素R1=R2=OHR1=R2=OH 矢車菊素矢車菊素R1=OH R2=HR1=OH R2=H 天竺葵素天竺葵素R1=R2=HR1=R2=H 花色素類又稱花青素，廣泛存在于植物的花、果實(shí)等部花色素類又稱花青素，廣泛存在于植物的花、果實(shí)等部位，是形成植物藍(lán)、紅、紫等色的一類水溶性色素，它們主位，是形成植物

12、藍(lán)、紅、紫等色的一類水溶性色素，它們主要以苷的形式存在，故稱為花色苷。植物中存在的花色素主要以苷的形式存在，故稱為花色苷。植物中存在的花色素主要有矢車菊素、飛燕草素與天竺葵素等。要有矢車菊素、飛燕草素與天竺葵素等。 六、花色素和黃烷醇類六、花色素和黃烷醇類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型六、花色素和黃烷醇類六、花色素和黃烷醇類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型25 黃烷醇類生源上是由二氫黃酮醇類還原而來，又分為 OOHOOHOH六、花色素和黃烷醇類六、花色素和黃烷醇類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型六、花色素和黃烷醇類六、花色素和黃烷醇類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型26 黃烷-3-醇

13、在植物界分布很廣， 如兒茶素和表兒茶素。 故又稱為兒茶素類。 兒茶素為豆科兒茶的有效成分，具有一定的抗癌活性。 OHOOHHOHHOHOHOHOOHHOHOHOHH（+）兒茶素 （-）表兒茶素六、花色素和黃烷醇類六、花色素和黃烷醇類第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型27OOOOR2OOHOCH3HOOHOR1銀杏素銀杏素 R1=CH3, R2=H異銀杏素異銀杏素 R1=H, R2=CH3白果素白果素 R1=H, R2=H七、七、第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型28OO第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型29 如水龍骨科石韋、漆樹科芒果葉和百合科知母葉如水龍骨科

14、石韋、漆樹科芒果葉和百合科知母葉中的異芒果素，就屬于此類，該化合物具有止咳祛痰中的異芒果素，就屬于此類，該化合物具有止咳祛痰的功效。的功效。第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型30 類別 特點(diǎn)或組間區(qū)別 組內(nèi)區(qū)別黃酮和黃酮醇 2-苯基色原酮 3-OH （C2-C3雙鍵）二氫黃酮和 2-苯基色原酮 3-OH二氫黃酮醇 （C2-C3單鍵）異黃酮和二氫異黃酮 3-苯基色原酮 C2-C3雙鍵和單鍵查耳酮和二氫查耳酮 C環(huán)開環(huán) 3碳鏈為雙鍵和單鍵橙酮 C環(huán)為五元環(huán)花色素和黃烷醇 無4位羰基 離子和分子第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與類型結(jié)構(gòu)與類型31 分子中是否存在交叉共軛體系分子中是否存在交叉共軛體系;助色團(tuán)的數(shù)目

15、多少；助色團(tuán)的數(shù)目多少；取代基的位置有關(guān)。取代基的位置有關(guān)。 32OO-+OO-+OO33OOOOOOOH34OOOH.HO. 在在7, 4 位引入位引入-OH, OCH3等助色基團(tuán)，使化合等助色基團(tuán)，使化合物物顏色加深顏色加深。其它位置影響小。其它位置影響小 。3536 1. 游離苷元游離苷元難溶或不溶于水，易溶于難溶或不溶于水，易溶于MeOH, EtOH, EtOAc, Et2O.黃酮、黃酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌緊密，黃酮、黃酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌緊密，分子間引力較大，更難溶于水分子間引力較大，更難溶于水. 二氫黃酮、二氫黃酮醇是非平面型分子，分子排二氫黃酮、二氫黃酮

16、醇是非平面型分子，分子排列不緊密，分子間引力降低，對(duì)水的溶解度較大。列不緊密，分子間引力降低，對(duì)水的溶解度較大。 OORHOO 1. 游離苷元游離苷元難溶或不溶于水，易溶于難溶或不溶于水，易溶于MeOH, EtOH, EtOAc, Et2O.黃酮、黃酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌緊密，黃酮、黃酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌緊密，分子間引力較大，更難溶于水分子間引力較大，更難溶于水. 37OOH+ 異黃酮類化合物的異黃酮類化合物的B B環(huán)受吡喃酮環(huán)碳基立體結(jié)構(gòu)的環(huán)受吡喃酮環(huán)碳基立體結(jié)構(gòu)的阻礙，分子的平面性降低，水溶性增大阻礙，分子的平面性降低，水溶性增大; ;38 黃酮類化合物的羥基糖苷

17、化后，水溶性黃酮類化合物的羥基糖苷化后，水溶性增大，一般易溶于熱水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極增大，一般易溶于熱水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中，而難溶或不溶于苯、氯仿等有機(jī)性溶劑中，而難溶或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。糖鏈越長(zhǎng)，親水性越強(qiáng)。黃酮苷和溶劑中。糖鏈越長(zhǎng)，親水性越強(qiáng)。黃酮苷和苷元因含有酚羥基，均可溶于堿性溶液中。苷元因含有酚羥基，均可溶于堿性溶液中。2 2、黃酮苷、黃酮苷3940OOHOOHOOOH* * 7 7，4-OH4-OH酸性強(qiáng)于其他位置羥基的酸性（在酸性強(qiáng)于其他位置羥基的酸性（在P P一一共扼效共扼效應(yīng)的影響下，使酸性增強(qiáng)）。應(yīng)的影響下，使酸性增強(qiáng)）。* 5-OH5-OH酸性最弱（處于

18、羰基鄰位，形成分子內(nèi)氫鍵）酸性最弱（處于羰基鄰位，形成分子內(nèi)氫鍵）* 酚羥基數(shù)目越多，酸性越強(qiáng)。酚羥基數(shù)目越多，酸性越強(qiáng)。41 7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + 應(yīng)用：應(yīng)用：pHpH梯度法分離梯度法分離42 -吡喃酮上的吡喃酮上的1-位氧原子上有未共用電子對(duì)，表位氧原子上有未共用電子對(duì)，表現(xiàn)微弱的堿性，可與強(qiáng)無機(jī)酸如濃硫酸，鹽酸生成現(xiàn)微弱的堿性，可與強(qiáng)無機(jī)酸如濃硫酸，鹽酸生成烊鹽，但極不穩(wěn)定，加水即可分解。烊鹽，但極不穩(wěn)定，加水即可分解。 黃酮類化合物溶于濃硫酸中生成的烊鹽常表性黃酮類化合物

19、溶于濃硫酸中生成的烊鹽常表性特殊的顏色，可用于鑒別。特殊的顏色，可用于鑒別。 H2OHClClOOHOO431下列黃酮中酸性最強(qiáng)的是（下列黃酮中酸性最強(qiáng)的是（ ）A. 3-OH黃酮黃酮 B. 5-OH黃酮黃酮 C. 5，7-二二OH黃酮黃酮 D. 7，4-二二OH黃酮黃酮 E. 3，4 -二二OH黃酮黃酮2下列黃酮中水溶性最小的是（下列黃酮中水溶性最小的是（ ） A. 黃酮黃酮 B. 二氫黃酮二氫黃酮 C. 黃酮苷黃酮苷 D. 異黃酮異黃酮 E. 花色素花色素3下列黃酮類化合物酸性強(qiáng)弱的順序?yàn)椋ㄏ铝悬S酮類化合物酸性強(qiáng)弱的順序?yàn)椋?） （1）5，7-二二OH黃酮黃酮 （2）7，4-二二OH黃酮黃

20、酮 （3）6，4-二二OH黃酮黃酮 A.（1）（）（2）（）（3） B.（2）（）（3）（）（1） C.（3）（）（2）（）（1） D.（2）（）（1）（）（3） E.（1）（）（3）（）（2） D AB練習(xí)練習(xí)練習(xí)練習(xí)444下列化合物水溶性強(qiáng)下列化合物水溶性強(qiáng)弱順序：弱順序： OOOHOHOHOOOHOHOHOHCH3CH3O+OHOHOHOHOHOHA B C理由：理由：答：水溶性強(qiáng)答：水溶性強(qiáng)弱順序：弱順序： C B A 理由：理由：C是離子型化合物，水溶性最大；是離子型化合物，水溶性最大；B是二氫黃酮，分是二氫黃酮，分子是非平面結(jié)構(gòu)，且分子中羥基較多，所以水溶性較平面型子是非平面結(jié)構(gòu)，

21、且分子中羥基較多，所以水溶性較平面型結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)的A大。大。練習(xí)練習(xí)45四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 黃酮類化合物的顯色反應(yīng)多與分子中的酚羥基及黃酮類化合物的顯色反應(yīng)多與分子中的酚羥基及一吡喃酮環(huán)有關(guān)。一吡喃酮環(huán)有關(guān)。還原反應(yīng)還原反應(yīng)1.鹽酸一鎂粉鹽酸一鎂粉(或鋅粉或鋅粉)反應(yīng)反應(yīng) 此為鑒定黃酮類化合物最常用的顯色反應(yīng)。方法此為鑒定黃酮類化合物最常用的顯色反應(yīng)。方法是將試樣溶于是將試樣溶于1.0ml甲醇或乙醇中，加人少許鎂粉甲醇或乙醇中，加人少許鎂粉(或鋅粉或鋅粉)振搖，滴加幾滴濃鹽酸，振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1 2分鐘內(nèi)分鐘內(nèi)(必要必要時(shí)微熱時(shí)微熱)即可顯色。即可顯色。 四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 4

22、6 多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯合物顯橙紅一紫紅色橙紅一紫紅色，少數(shù)顯紫一藍(lán)色；，少數(shù)顯紫一藍(lán)色； 查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色;異黃酮除少數(shù)例異黃酮除少數(shù)例外也不顯色外也不顯色; 由于花色素及部分查耳酮在單純濃鹽酸中也會(huì)發(fā)由于花色素及部分查耳酮在單純濃鹽酸中也會(huì)發(fā)生顏色變化，故需預(yù)先做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即在供試液生顏色變化，故需預(yù)先做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即在供試液中僅加人濃鹽酸進(jìn)行觀察，以便排除。中僅加人濃鹽酸進(jìn)行觀察，以便排除。 四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 還原反應(yīng)還原反應(yīng)1.鹽酸一鎂粉鹽酸一鎂粉(或鋅粉或鋅粉)

23、反應(yīng)反應(yīng) 四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 47四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 還原反應(yīng)還原反應(yīng)2.四氫硼鈉四氫硼鈉(鉀鉀)反應(yīng)反應(yīng) 為二氫黃酮、二氫黃酮醇類專屬性較強(qiáng)的一種還為二氫黃酮、二氫黃酮醇類專屬性較強(qiáng)的一種還原試劑，反應(yīng)顯原試劑，反應(yīng)顯紅紫紅色紅紫紅色。其他黃酮類化合物均不。其他黃酮類化合物均不顯色，可與之區(qū)別。顯色，可與之區(qū)別。 方法是將樣品溶于乙醇液，加人等量方法是將樣品溶于乙醇液，加人等量2%NaBH4的甲醇液，的甲醇液，1 min后，再加濃鹽酸數(shù)滴，生成后，再加濃鹽酸數(shù)滴，生成紅紫紅紫紅色紅色。四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 48（二）與（二）與OOHOOOHOHOH四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 四

24、、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 49四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) 1 1、鋁鹽、鋁鹽 常用試劑為常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。三氯化鋁或硝酸鋁溶液。生成的絡(luò)合物多為黃色，并有熒光，可用于定生成的絡(luò)合物多為黃色，并有熒光，可用于定性及定量分析。性及定量分析。（二）與（二）與50四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與（二）與（二）與四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與51OOHOHOOZrOClOHHOH2O黃綠色，并有熒光黃綠色，并有熒光用途：可用于區(qū)別黃用途：可用于區(qū)別黃酮類化合物分子中酮類化合物分子中 3-OH3-OH或或5-OH5-OH的存在的存在. . 四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二

25、）與（二）與（二）與（二）與四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與52 3 3、鎂鹽、鎂鹽: : 常用試劑：醋酸鎂甲醇液常用試劑：醋酸鎂甲醇液 實(shí)驗(yàn)過程：供試液實(shí)驗(yàn)過程：供試液滴在紙上滴在紙上噴顯色劑噴顯色劑加熱干加熱干燥燥紫外燈下觀察紫外燈下觀察 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象：實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象： 二氫黃酮二氫黃酮, ,二氫黃酮醇類顯天藍(lán)色熒光；二氫黃酮醇類顯天藍(lán)色熒光； 黃酮黃酮, ,黃酮醇及異黃酮類黃酮醇及異黃酮類 顯示黃橙黃褐色顯示黃橙黃褐色 四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與（二）與（二）與四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與53四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng) （二）與（二）與 取約取約1.0mg1.

26、0mg檢品置小試管中，加人檢品置小試管中，加人1.0 ml1.0 ml甲醇甲醇使溶使溶( (必要時(shí)可在水浴上加熱必要時(shí)可在水浴上加熱) )，加人，加人3 3滴滴0.0l 0.0l mol/Lmol/L氯化鍶的甲醇落液，再加氯化鍶的甲醇落液，再加3 3滴已用氨蒸氣飽滴已用氨蒸氣飽和的甲醇溶液，有沉淀生成。和的甲醇溶液，有沉淀生成。+ Sr2+OOHOHOOHOHHOOOOOOHOHHOSr+2OH-2H2O54練習(xí)練習(xí)1某中藥提取液只加鹽酸不加鎂粉，即產(chǎn)生紅色的是（某中藥提取液只加鹽酸不加鎂粉，即產(chǎn)生紅色的是（ ） A. 黃酮黃酮 B. 黃酮醇黃酮醇 C. 二氫黃酮二氫黃酮 D. 異黃酮異黃酮

27、E. 花色素花色素2可用于區(qū)別可用于區(qū)別3-OH黃酮和黃酮和5-OH黃酮的反應(yīng)試劑是（黃酮的反應(yīng)試劑是（ ） A. 鹽酸鹽酸-鎂粉試劑鎂粉試劑 B. NaBH4試劑試劑 C.-萘酚萘酚-濃硫酸試濃硫酸試劑劑 D. 鋯鋯-枸櫞酸試劑枸櫞酸試劑 E .三氯化鋁試劑三氯化鋁試劑3四氫硼鈉試劑反應(yīng)用于鑒別（四氫硼鈉試劑反應(yīng)用于鑒別（ ） A. 黃酮醇黃酮醇 B. 二氫黃酮二氫黃酮 C. 異黃酮異黃酮 D. 查耳酮查耳酮 E. 花色素花色素 ED B練習(xí)練習(xí)554蘆丁具有的反應(yīng)有（蘆丁具有的反應(yīng)有（ ） A. 鹽酸鹽酸-鎂粉反應(yīng)鎂粉反應(yīng) B. -萘酚萘酚-濃硫酸反應(yīng)濃硫酸反應(yīng) C. 四氫硼鈉反四氫硼鈉反

28、應(yīng)應(yīng) D. 三氯化鋁反應(yīng)三氯化鋁反應(yīng) E. 鋯鋯-枸櫞酸反應(yīng)枸櫞酸反應(yīng)蘆丁蘆丁OOOrutinoseOHHOOHOHABDE練習(xí)練習(xí)56練習(xí)練習(xí)鑒別題鑒別題 1 OOOHHOOOOHHO(A) (B)答案答案： NaBH4 反應(yīng)反應(yīng)練習(xí)練習(xí)57練習(xí)練習(xí)鑒別題鑒別題 2.答案：答案：ZrOCL2/ZrOCL2/枸櫞酸反應(yīng)枸櫞酸反應(yīng) 58練習(xí)練習(xí)鑒別題鑒別題 3. 答案：答案： HCL-MgHCL-Mg反應(yīng)反應(yīng) 59練習(xí)練習(xí)鑒別題鑒別題 4 答案：分別取答案：分別取A、B、C樣品乙醇液，加入樣品乙醇液，加入2NaBH4的的甲醇液和濃甲醇液和濃HCl，如產(chǎn)生紅紫紅色物質(zhì)為，如產(chǎn)生紅紫紅色物質(zhì)為A。再

29、分別取。再分別取B、C的乙醇液，加等量的的乙醇液，加等量的10%-萘酚乙醇液，搖勻，沿壁滴萘酚乙醇液，搖勻，沿壁滴加濃硫酸，試管中兩液界面有紫色環(huán)出現(xiàn)為加濃硫酸，試管中兩液界面有紫色環(huán)出現(xiàn)為C、無上述現(xiàn)象、無上述現(xiàn)象的是的是B。60第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取 黃酮類化合物在花、葉，果等組織中，一般多以黃酮類化合物在花、葉，果等組織中，一般多以苷的形式存在，而在木部堅(jiān)硬組織中，則多為游離苷苷的形式存在，而在木部堅(jiān)硬組織中，則多為游離苷元形式存在。元形式存在。 黃酮苷類以及極性稍大的苷元，一般可用丙酮、黃酮苷類以及極性稍大的苷元，一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些極性較大的

30、混合溶劑進(jìn)行醋酸乙酯、乙醇、水或某些極性較大的混合溶劑進(jìn)行提取。一些多糖苷類則可以用沸水提取。提取。一些多糖苷類則可以用沸水提取。 大多數(shù)黃酮苷元宜用極性較小的溶劑，如用氯仿、大多數(shù)黃酮苷元宜用極性較小的溶劑，如用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等提取，而對(duì)親酯性較強(qiáng)的多甲氧基乙醚、醋酸乙酯等提取，而對(duì)親酯性較強(qiáng)的多甲氧基黃酮的游離苷元，甚至可用苯進(jìn)行提取。黃酮的游離苷元，甚至可用苯進(jìn)行提取。 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取61第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取常用的提取方法有常用的提取方法有: :、醇提法、醇提法 乙醇和甲醇最常用，乙醇和甲醇最常用，60%左右的稀乙醇提左右的

31、稀乙醇提取黃酮苷類，取黃酮苷類，90%95%的乙醇提取黃酮苷的乙醇提取黃酮苷元。醇提液，可用石油醚處理，以除去葉綠素、元。醇提液，可用石油醚處理，以除去葉綠素、胡蘿卜素等脂溶性色素。胡蘿卜素等脂溶性色素。第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取62第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取熱水提取法熱水提取法 黃酮苷類也可用熱水提取，提取物的水溶液經(jīng)黃酮苷類也可用熱水提取，提取物的水溶液經(jīng)濃縮后可加人多倍量的乙醇，以沉淀除去蛋白質(zhì)、濃縮后可加人多倍量的乙醇，以沉淀除去蛋白質(zhì)、多糖類等水溶性雜質(zhì)。多糖類等水溶性雜質(zhì)。第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取63第三節(jié)第三節(jié) 提取分

32、離提取分離一、提取一、提取第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取64第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離一、提取一、提取、堿提酸沉法堿提酸沉法 利用黃酮類化合物多數(shù)具有酚羥基，顯酸性而易利用黃酮類化合物多數(shù)具有酚羥基，顯酸性而易溶于堿水，故可用堿水提取。堿水提取液加酸酸化，溶于堿水，故可用堿水提取。堿水提取液加酸酸化，黃酮類化合物游離即可沉淀析出。黃酮類化合物游離即可沉淀析出。 常用的堿水有飽和石灰水溶液常用的堿水有飽和石灰水溶液,5%碳酸鈉水溶液碳酸鈉水溶液或稀氫氧化鈉溶液?；蛳溲趸c溶液。 當(dāng)藥材為花、果實(shí)類時(shí)，宜用石灰水提取，使其當(dāng)藥材為花、果實(shí)類時(shí)，宜用石灰水提取，使其中含羧基的果

33、膠、粘液質(zhì)等水溶性雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀，中含羧基的果膠、粘液質(zhì)等水溶性雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀，更有利于黃酮類化合物的純化處理。更有利于黃酮類化合物的純化處理。注意所用的堿液濃度不宜過高，以免注意所用的堿液濃度不宜過高，以免在強(qiáng)堿性下，尤其加熱時(shí)破壞黃酮母在強(qiáng)堿性下，尤其加熱時(shí)破壞黃酮母核。在加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過強(qiáng)，核。在加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過強(qiáng)，以免生成樣鹽，致使析出的黃酮化合以免生成樣鹽，致使析出的黃酮化合物又重新溶解，降低產(chǎn)品收率。物又重新溶解，降低產(chǎn)品收率。65二二. .分離分離 黃酮與雜質(zhì)黃酮與雜質(zhì) 分離依據(jù)：成分之間分離依據(jù)：成分之間 苷與苷元苷與苷元 的極性差異的極性差異 苷元與苷元苷

34、元與苷元 分離工藝：分離工藝： 原料的提取濃縮液（水原料的提取濃縮液（水、稀醇稀醇溶液）溶液） 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取 石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水飽和正丁醇水飽和正丁醇 母液母液（脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)） 回收回收 回收回收 減壓回收減壓回收 （水溶性雜質(zhì)（水溶性雜質(zhì)) 苷元苷元 單糖苷單糖苷 多糖苷多糖苷 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離（一）溶劑萃取法（一）溶劑萃取法二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離66分離依據(jù)：分離依據(jù)： 游離黃酮類化合物的酸性差異（見黃酮酸性規(guī)律）游離黃酮類化

35、合物的酸性差異（見黃酮酸性規(guī)律） 總游離黃酮的乙醚液總游離黃酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO5%NaHCO3 3 、5%Na5%Na2 2COCO3 3、 0.2%NaOH0.2%NaOH、4%NaOH4%NaOH萃取萃取 5%NaHCO35%NaHCO3液液 5%Na2CO35%Na2CO3液液 0.2%NaOH0.2%NaOH液液 4%NaOH4%NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）7 7，4-OH4-OH黃酮黃酮 7 7或或4-OH4-OH黃酮黃酮 一般一般-OH-OH黃酮黃酮 5-OH5-OH黃酮黃酮（二）（二）pHpH梯度萃取法梯度萃取法二二. .分離

36、分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離67二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離 分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠及纖維素粉等。聚酰胺、葡聚糖凝膠及纖維素粉等。 1 1、聚酰胺柱色譜法、聚酰胺柱色譜法 聚酰胺柱色譜是目前常用較為理想的分離黃酮類聚酰胺柱色譜是目前常用較為理想的分離黃酮類化合物的方法，具吸附容量大，分辨力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。適化合物的方法，具吸附容量大，分辨力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。適用于分離各種類型的黃酮類化合物，包括黃酮苷及其用于分離各種類型的黃酮類化合物，包括黃酮苷及其苷元。

37、苷元。 聚酰胺的吸附作用是通過其酰胺基與黃酮類化合聚酰胺的吸附作用是通過其酰胺基與黃酮類化合物分子上的酚羥基形成氫鍵締合而產(chǎn)生的，其吸附強(qiáng)物分子上的酚羥基形成氫鍵締合而產(chǎn)生的，其吸附強(qiáng)度取決于黃酮類化合物的羥基數(shù)目與位置，以及溶劑度取決于黃酮類化合物的羥基數(shù)目與位置，以及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。大小。 二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離（三）柱色譜法（三）柱色譜法68聚酰胺對(duì)羰基間位或?qū)ξ坏牧u聚酰胺對(duì)羰基間位或?qū)ξ坏牧u基吸附力大于鄰位羥基，故鄰位基吸附力大于鄰位羥基，故鄰位羥基（氫鍵）者先被洗出羥基（氫

38、鍵）者先被洗出。二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離69二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離2.2.硅膠柱色譜法硅膠柱色譜法 主要適用于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及主要適用于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化高度甲基化(或乙酰化或乙?；?的黃酮及黃酮醇類。分離黃酮苷的黃酮及黃酮醇類。分離黃酮苷元常用氯仿元常用氯仿-甲醇混合溶劑作洗脫劑，甲醇混合溶劑作洗脫劑， 少數(shù)情況下，加水去活化后也可用于分離黃酮苷，少數(shù)情況下，加水去活化后也可用于分離黃酮苷，可用氯仿可用氯仿-甲醇甲醇-水或乙酸乙酯水或乙酸乙酯-丙酮丙酮

39、-水作為洗脫劑。水作為洗脫劑。二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離二二. .分離分離第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離701以聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以濃度遞增的乙醇液洗脫以聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以濃度遞增的乙醇液洗脫時(shí)的洗脫先后順序時(shí)的洗脫先后順序OOOHOHOHOHOOOHOHOHOHOHOOOHOHOHOHCH3CH3 A B CA、C都具有都具有4個(gè)酚羥基，但是個(gè)酚羥基，但是C是二氫是二氫黃酮，與聚酰胺吸附力較弱，所以先于黃酮，與聚酰胺吸附力較弱，所以先于A洗脫；洗脫；B分子中羥基最多與聚酰胺吸附最分子中羥基最多與聚酰胺吸附最牢固，所以最后洗脫下來。牢固，所以最后洗脫

40、下來。洗脫先洗脫先后順序是：后順序是： 理由：理由：CAB練習(xí)練習(xí)第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離712用聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以用聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以50%乙醇液洗脫先乙醇液洗脫先 后順序：后順序： OOOHOHOHOHOHOOH OOglcOHOHOOHOHOHOHOC6H11O5 A B C理由：理由：答：洗脫先答：洗脫先后順序是：后順序是： B C A 理由：理由：B、C同是單糖苷，但同是單糖苷，但B中羥基少且分子是中羥基少且分子是非平面與聚酰胺吸附力較弱，所以先于非平面與聚酰胺吸附力較弱，所以先于A洗脫下來，洗脫下來，A是苷元，且分子中羥基最多與聚酰胺吸附最牢固，是苷元

41、，且分子中羥基最多與聚酰胺吸附最牢固，所以最后洗脫下來。所以最后洗脫下來。練習(xí)練習(xí)第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離723用聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以濃度遞增的乙醇液洗脫用聚酰胺柱色譜分離下列化合物，以濃度遞增的乙醇液洗脫時(shí)的先時(shí)的先后順序，并說明理由。后順序，并說明理由。OOOHHOOHOHOOOHOHHOOHO葡萄糖甙OOOHHOOHOH洗脫先后順序：洗脫先后順序： 理由：理由：洗脫先洗脫先后順序是：后順序是：B AC原因：以含水溶劑系統(tǒng)洗脫時(shí)，苷比苷元先洗脫原因：以含水溶劑系統(tǒng)洗脫時(shí)，苷比苷元先洗脫下來，因此下來，因此B最先洗脫。而分子內(nèi)芳香程度越高，最先洗脫。而分子內(nèi)芳香程度越高，共軛

42、雙鍵越多，吸附力越強(qiáng)。黃酮共軛雙鍵越多，吸附力越強(qiáng)。黃酮二氫黃酮，即二氫黃酮，即CA，因此，因此A比比C先洗脫下來。先洗脫下來。練習(xí)練習(xí)第三節(jié)第三節(jié) 提取分離提取分離73第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定一、薄層色譜一、薄層色譜一般采用硅膠或聚酰胺薄層色譜一般采用硅膠或聚酰胺薄層色譜1 1、硅膠薄層色譜、硅膠薄層色譜 用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物較好。分離用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物較好。分離黃酮苷元常用的展開劑是甲苯黃酮苷元常用的展開劑是甲苯-甲酸甲酯甲酸甲酯-甲酸甲酸(5: 4:1 )，并可根據(jù)待分離成分的極性大小適當(dāng)?shù)卣{(diào)整，并可根據(jù)待分離成分的極性大小適當(dāng)?shù)卣{(diào)整甲苯與甲酸的比例。另外還有苯甲

43、苯與甲酸的比例。另外還有苯-甲醇甲醇(95:5)、苯、苯-甲甲醇醇-乙酸乙酸(35:5:5)等。等。 分離苷元的衍生物如甲醚或乙酸酯等中性成分，分離苷元的衍生物如甲醚或乙酸酯等中性成分，可用苯可用苯-丙酮丙酮(9:1)、苯、苯-乙酸乙酯乙酸乙酯(7.5:2.5)等弱極性等弱極性展開劑。展開劑。 74第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定一、薄層色譜一、薄層色譜2 2、聚酰胺薄層色譜、聚酰胺薄層色譜 特別適合分離檢識(shí)含游離酚羥基的黃酮及其苷類。特別適合分離檢識(shí)含游離酚羥基的黃酮及其苷類。由于聚酰胺對(duì)黃酮類化合物吸附能力較強(qiáng)，因而展開由于聚酰胺對(duì)黃酮類化合物吸附能力較強(qiáng)，因而展開劑需要較強(qiáng)的極性。在大多數(shù)展開劑中

44、含有醇、酸或劑需要較強(qiáng)的極性。在大多數(shù)展開劑中含有醇、酸或水。水。 鑒定苷元常用的展開劑有氯仿鑒定苷元常用的展開劑有氯仿-甲醇甲醇(94:6) 、氯仿、氯仿-甲醇甲醇-丁酮丁酮(12: 2:1 )等。等。 鑒定黃酮苷類需要極性更強(qiáng)的展開劑，常用的展鑒定黃酮苷類需要極性更強(qiáng)的展開劑，常用的展開劑有甲醇開劑有甲醇-水水(1:1)、甲醇、甲醇-醋酸一水醋酸一水(90:5:5)等。等。 75第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 紙色譜紙色譜(PC)適用于分離鑒定各種黃酮及其苷類。適用于分離鑒定各種黃酮及其苷類。鑒定粗體物中黃酮苷及苷原時(shí)可以采用雙向紙色譜法。鑒定粗體物中黃酮苷及苷原時(shí)可以采用雙向

45、紙色譜法。 第一向展開采用某種醇性溶劑，如第一向展開采用某種醇性溶劑，如n-BuOH-HOAc-H2O( 4:1:5上層，上層，BAW)， t-BuOH-HOAc-H20(3: 1:1 ,TBA)或水飽和的或水飽和的n-BuOH等，此時(shí)主要等，此時(shí)主要是根據(jù)分配色譜原理進(jìn)行分離。是根據(jù)分配色譜原理進(jìn)行分離。雙向紙色譜法雙向紙色譜法 第二向展開溶劑采用水或下列水溶液，如第二向展開溶劑采用水或下列水溶液，如2%6%HOAc ,3 % NaCl水溶液及水溶液及HOAc-濃濃HCl -H2O (30:3:10)等，主要是根據(jù)吸附色譜原理進(jìn)行分離。等，主要是根據(jù)吸附色譜原理進(jìn)行分離。第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒

46、定二、紙色譜二、紙色譜 76一次一次二次二次第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 雙向紙色譜法雙向紙色譜法第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 77 鑒定黃酮苷元一般宜用醇性溶劑進(jìn)行分離，黃酮鑒定黃酮苷元一般宜用醇性溶劑進(jìn)行分離，黃酮苷宜用水性展開劑。對(duì)于花色苷及其苷元，可用含苷宜用水性展開劑。對(duì)于花色苷及其苷元，可用含HCl或或HOAc的溶液作為展開劑。在紙色譜中，黃酮類化合的溶液作為展開劑。在紙色譜中，黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與物的結(jié)構(gòu)與Rf值有如下的關(guān)系值有如下的關(guān)系: 第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 1.1.在醇性溶劑系統(tǒng)中展開在醇性溶劑系統(tǒng)中展開(1)苷元相同時(shí)，苷

47、元相同時(shí)，Rf大小值依次為大小值依次為:苷元苷元單糖苷單糖苷雙糖雙糖苷，以在苷，以在BAW中展開為例，多數(shù)類型苷元中展開為例，多數(shù)類型苷元(花色苷元花色苷元例外例外) Rf值在值在0.70以上，而苷則小于以上，而苷則小于0.7。(2)結(jié)構(gòu)類型相同的黃酮類化合物，取代羥基越多，極結(jié)構(gòu)類型相同的黃酮類化合物，取代羥基越多，極性越強(qiáng)，性越強(qiáng)，Rf值越小值越小;羥基甲基化后，極性降低，羥基甲基化后，極性降低，Rf值值增大。增大。78一次一次二次二次第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 雙向紙色譜法雙向紙色譜法第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色譜 79第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定二、紙色譜二、紙色

48、譜 2.2.在水性溶劑系統(tǒng)中展開在水性溶劑系統(tǒng)中展開、苷元相同時(shí)苷元相同時(shí)Rf值與上述相反，依次是值與上述相反，依次是:雙糖苷雙糖苷單單糖苷糖苷苷元。苷元幾乎停留在原點(diǎn)不動(dòng)，苷類的苷元。苷元幾乎停留在原點(diǎn)不動(dòng)，苷類的Rf值值可在可在0.5以上，糖鏈越長(zhǎng)則以上，糖鏈越長(zhǎng)則Rf值越大。值越大。、不同類型的黃酮類化合物苷元中，平面性分子如黃不同類型的黃酮類化合物苷元中，平面性分子如黃酮類、黃酮醇類、查耳酮類等，用含水溶劑如酮類、黃酮醇類、查耳酮類等，用含水溶劑如3%一一5% HOAc展開時(shí)，幾乎停留在原點(diǎn)不動(dòng)展開時(shí)，幾乎停留在原點(diǎn)不動(dòng)(Rf黃酮黃酮5一一OH二氫黃酮二氫黃酮5-OH鄰二酚鄰二酚OH二

49、氫二氫黃酮醇黃酮醇3-OH。第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜98AlClAlCl3 3/HCl AlCl/HCl AlCl3 3 MeOH MeOH判斷鄰二判斷鄰二ArAr-OH-OH的有無、位置的有無、位置判斷分子中判斷分子中3-OH,5-OH3-OH,5-OH的有無的有無AlCl3/HCl AlCl3/HCl MeOHMeOH 無無3-OH3-OH，無，無5-OH5-OHAlCl3/HCl MeOHAlCl3/HCl MeOH 可能有可能有3-OH3-OH、5-OH5-OH 帶帶 + 35 + 3555nm 55nm 只有只有5-OH5-OH + 60nm

50、+ 60nm 只有只有3-OH3-OH + 50 + 5060nm 60nm 可能同時(shí)有可能同時(shí)有3-OH3-OH、5-OH5-OH + 17 + 1720nm 20nm 除除5-OH,5-OH,尙有尙有6-O-6-O-AlCl3/HCl AlCl3/HCl AlCl3 AlCl3 無鄰二無鄰二ArAr-OH-OHAlCl3/HCl AlCl3 AlCl3/HCl AlCl3 可能有鄰二可能有鄰二ArAr-OH-OH帶帶 - 30 - 3040nm B40nm B環(huán)有環(huán)有 - 50- 5065nm A65nm A、B B環(huán)均可能有環(huán)均可能有第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光

51、譜可見光譜 5. AlCl3 5. AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜 5. AlCl3 5. AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜 5. AlCl3 5. AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl99OOOHHOOHOHOglc 61rhaAlClAlCl3 3 AlClAlCl3 3/HCl /HCl -40nm-40nmB B環(huán)有鄰二環(huán)有鄰二ArAr-OH-OH第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜 5. AlCl3 5. A

52、lCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜100診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬 NaOMe NaOMe 帶帶I I紅移紅移404060nm60nm，強(qiáng)度不降，強(qiáng)度不降 示有示有4 4-OH -OH 、 無無3-OH3-OH 帶帶I I紅移紅移505060 nm60 nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降 示有示有3-OH3-OH、但無、但無4 4-OH-OH NaOAc NaOAc（未熔融）（未熔融） 帶帶IIII紅移紅移5 520nm 20nm 示有示有7-OH7-OH 帶帶I I在長(zhǎng)波一側(cè)有明顯肩峰在長(zhǎng)波一側(cè)有明顯肩峰

53、 示有示有4 4-OH -OH 但無但無3-3- OH OH及及7-OH7-OH NaOAc NaOAc / H / H3 3BOBO3 3 帶帶I I紅移紅移121230nm 30nm 示示B B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶IIII紅移紅移5 510nm10nm 示示A A環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 NaOAc NaOAc（熔融）（熔融） 帶帶I I紅移紅移404065nm65nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降 示有示有4 4-OH-OH第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜101 AlClAlCl3 3

54、/HCl/HCl譜圖譜圖 = MeOH= MeOH譜圖譜圖 示無示無3-3-或或5-OH5-OH AlCl AlCl3 3/HCl/HCl譜圖譜圖 MeOHMeOH譜圖譜圖 示可能有示可能有3-3-或或5-OH5-OH 帶帶I I紅移紅移353555 nm55 nm 示只有示只有5-OH5-OH 紅移紅移60nm60nm 示只有示只有3-OH3-OH 紅移紅移5060nm5060nm 示既有示既有3-OH3-OH又有又有5-OH5-OH 紅移紅移1720 nm1720 nm 示除示除5-OH5-OH外，尚有外，尚有6-6-氧取代氧取代診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬AlClAlC

55、l3 3/HCl/HCl譜圖譜圖 = AlCl= AlCl3 3譜圖譜圖 示無鄰二酚羥基示無鄰二酚羥基AlClAlCl3 3/HCl/HCl譜圖譜圖 AlClAlCl3 3譜圖譜圖 示有鄰二酚羥基示有鄰二酚羥基 帶帶紫移紫移303040 nm 40 nm 示示B B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶紫移紫移505065 nm 65 nm 示示A A、B B環(huán)均可能有鄰二酚羥基環(huán)均可能有鄰二酚羥基第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜102UV spectral Data(max,nmmax,nm) )Me

56、OHMeOH 259, 266sh ,299sh,359 259, 266sh ,299sh,359NaOCH3NaOCH3 272,327,410 272,327,410AlCl3AlCl3 275,303sh,433 275,303sh,433AlCl3/HClAlCl3/HCl 271,300,364sh,402 271,300,364sh,402NaOACNaOAC 271,325,393 271,325,393NaOAC/H3BO3NaOAC/H3BO3 262,298,387 262,298,387練習(xí)練習(xí) 試對(duì)蘆丁的試對(duì)蘆丁的UVUV數(shù)據(jù)進(jìn)行歸屬數(shù)據(jù)進(jìn)行歸屬黃酮醇或黃酮醇或3-O

57、糖苷糖苷=410-359=51nm=410-359=51nm，4 4-OH=402-433=-31nm=402-433=-31nm，B B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基=402-359=43nm=402-359=43nm，有，有5 5 OH，無，無3 OH=271-259=12nm=271-259=12nm，7 7-OH=387-359=28nm=387-359=28nm， B環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基OOOrutinoseOHHOOHOH第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)測(cè)定結(jié)構(gòu)測(cè)定一、紫外一、紫外一可見光譜可見光譜103 二二、1H-NMR104 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 從以下幾個(gè)

58、方面介紹：二二、1H-NMR1051. A環(huán)質(zhì)子 (1) 5,7-二羥基黃酮類H-6dJ= 2.5 HzH-8OOHOHOHH866.00 6.206.30 6.505.75 5.955.90 6.10OOHOHO86 ppm 5.70 6.90黃酮、黃酮醇、異黃酮 二氫黃酮、二氫黃酮醇二二、1H-NMR1061. A環(huán)質(zhì)子 (1) 5,7-二羥基黃酮類OOOHOHH86糖6.20 6.406.50 6.905.90 6.106.10 6.40黃酮、黃酮醇、異黃酮二氫黃酮、二氫黃酮醇苷化后向低場(chǎng)位移6.00 6.206.30 6.505.75 5.955.90 6.10苷化前苷化前 ppm 5

59、.70 6.90 ppm H-8 H-6109876543210 ppmTMSH-8 H-6二二、1H-NMR107108109H-5 ppm 8.0 d, J= 9.0 Hz （C4羰基負(fù)屏蔽效應(yīng)，使其在較低場(chǎng)； 與H-6鄰偶二重峰）H-6 ppm 6.77.1 dd, JH-5=9.0 Hz JH-8=2.5 Hz （與H-5鄰偶；與H-8間偶）H-8 ppm 同H-6 d, J=2.5 Hz1. A環(huán)質(zhì)子 (2) 7-羥基黃酮類OOHO685二二、1H-NMR1101. A環(huán)質(zhì)子 (2) 7-羥基黃酮類羥基黃酮類OOHHOHH6857.90 8.207.70 7.906.70 7.006.30 6.406.70 7.106.40 6.50dddddddd黃酮、黃酮醇、異黃酮黃酮、黃酮醇、異黃酮二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇二二、1H-NMR111112 1.