肝細(xì)胞損傷的藥物干預(yù)研究進(jìn)展

1、肝細(xì)胞損傷的藥物干預(yù)研究進(jìn)展        肝細(xì)胞損傷是各型肝病的共同的病理基礎(chǔ)，治療與糾正肝細(xì)胞損傷是各型肝病治療的主要措施之一，近年來認(rèn)為肝細(xì)胞損傷是多因素多步驟的結(jié)果，因此，對肝細(xì)胞損傷的藥物干預(yù)包括多環(huán)節(jié)不同種類的藥物，對肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用的藥物主要包括某些細(xì)胞因子、自由基清除劑和一些內(nèi)、外源性保護(hù)因子及具有膜穩(wěn)定作用的某些藥物。 1 細(xì)胞因子 肝臟是產(chǎn)生與分解細(xì)胞因子的主要器官，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的平衡是肝細(xì)胞功能正常的必要條件，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡失常是肝細(xì)胞損傷的重要機(jī)制。因此，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)的平衡為抗

2、肝細(xì)胞損傷的重要手段網(wǎng)絡(luò)。 1.1 腫瘤壞死因子 腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-，TNF-）是內(nèi)毒素、酒精、D-半乳糖胺以及缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷的重要致?lián)p傷因子。TNF-主要由肝實質(zhì)細(xì)胞和肝內(nèi)kupffer細(xì)胞分泌，盡管低水平的TNF-是肝細(xì)胞生長分化與再生所必需的調(diào)節(jié)因子，但高水平的TNF-既可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，也可以導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，是眾多肝毒素造成肝細(xì)胞損傷的主要因子。此外，TNF-尚能誘導(dǎo)Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生自由基，對肝竇內(nèi)的中性粒細(xì)胞具有趨化作用而進(jìn)一步加重肝細(xì)胞損傷。實驗證實，TNF-單抗能明顯減低輕肝細(xì)胞損傷網(wǎng)絡(luò)。 1.2 白細(xì)胞介素-10 白細(xì)胞介

3、素-10（interleukin-10,IL-10）主要來源于肝細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，T、B淋巴細(xì)胞，另Kupffer細(xì)胞也可以分泌，是一種重要的抗炎細(xì)胞因子。Louis等網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)IL-10對D-半乳糖胺及內(nèi)毒素誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷具有明顯的保護(hù)作用，其主要機(jī)制是抑制肝細(xì)胞TNF-的分泌，抑制淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（ICAM-1，VCAM-1等）的表達(dá)，從而抑制肝內(nèi)粒細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥過程，減輕肝細(xì)胞損傷。Moine等研究也發(fā)現(xiàn)外源性IL-10能明顯降低缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷時的TNF-分泌量，使肝細(xì)胞損傷程度減輕。 1.3 胰島素樣生長因子-1 細(xì)胞膜脂質(zhì)的氧化和細(xì)胞骨架蛋白的損傷是CCl4等毒物

4、性肝細(xì)胞損傷的主要生物學(xué)機(jī)制，其中線粒體膜的脂質(zhì)過氧化起著關(guān)鍵性的作用。胰島素樣生長因子-1（insulin growth factor-1,IGF-1)能提高超氧化物岐化酶及過氧化氫酶的活性，提高肝細(xì)胞清除自由基的能力，研究證實，IGF-1能明顯減輕CCl4誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，具有良好的肝細(xì)胞保護(hù)作用The。 1.4 肝細(xì)胞生長刺激物 早在90年代初我國學(xué)者就發(fā)現(xiàn)在人胎肝提取的肝細(xì)胞生長刺激物可以逆轉(zhuǎn)D-半乳糖胺介導(dǎo)的致死性肝細(xì)胞損傷，晚近Theocharis等研究發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞生長刺激物能減輕硫代乙酰氨（300mg/kg）介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，作者認(rèn)為其主要作用機(jī)制是通過磷酯酰肌醇途徑調(diào)節(jié)肝細(xì)胞膜N

5、a 、Ca2 離子流，促進(jìn)相關(guān)蛋白質(zhì)磷酸化，進(jìn)而增加肝細(xì)胞DNA合成，抑制肝細(xì)胞損傷，并具有促進(jìn)肝細(xì)胞再生的作用。 2 自由基清除劑 肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化是眾多毒素介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷的主要作用機(jī)制，如CCl4、膽汁淤積和酒精性肝細(xì)胞損傷，因此，有效地清除自由基，保護(hù)肝細(xì)胞膜的生物功能就成為抗肝細(xì)胞損傷的研究熱點。 2.1 維生素E 維生素E是臨床上使用較早的抗氧化劑，脂溶性的維生素E可以在細(xì)胞膜上積聚，結(jié)合并清除自由基，減輕肝細(xì)胞膜及線粒體膜的脂質(zhì)過氧化。Sokol等目前發(fā)現(xiàn)維生素E能明顯減輕膽汁淤積時疏水性膽汁酸所引起的肝細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，從而減輕肝細(xì)胞損傷。 2.2 熊脫氧膽酸 自由基的作用

6、是灑精性肝細(xì)胞損傷的主要機(jī)制，酒精在肝細(xì)胞內(nèi)的代謝過程中產(chǎn)生大量的自由基，造成肝細(xì)胞微粒體混合功能氧化酶復(fù)合體中的關(guān)鍵性部分細(xì)胞色素P450的損傷 ，使谷胱甘肽不能維持其還原狀態(tài)，導(dǎo)致肝細(xì)胞膜過氧化性損傷。還原型的谷胱甘肽是肝細(xì)胞膜抗氧化性損傷的主要部分，因此，細(xì)胞膜還原型谷胱甘肽的減少將導(dǎo)致肝細(xì)胞膜的氧化性損傷。研究證實，熊脫氧膽酸能減少腸道疏水性膽汁酸的吸收，增加肝細(xì)胞膜還原型谷胱甘肽的含量，同時抑制TNF-等致肝細(xì)胞損傷的細(xì)胞因子的分泌，因而具有良好的肝細(xì)胞保護(hù)作用參考。 2.3 乙酰半胱氨酸 中性粒細(xì)胞的浸潤及氧自由基的釋放是缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷的主要機(jī)制。還原型谷胱甘肽是肝細(xì)胞膜抗

7、氧化的主要因素，其缺乏將導(dǎo)致嚴(yán)重的肝細(xì)胞損傷。Nakano等文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)還原型谷胱甘肽的前體物質(zhì)乙酰半胱氨酸能明顯增加肝細(xì)胞膜還原型谷胱甘肽的含量，而減輕缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷，但乙酰半胱氨酸本身并不能直接清除肝細(xì)胞或肝竇內(nèi)的氧自由基，提示其抗肝細(xì)胞損傷的作用可能是通過促進(jìn)細(xì)胞膜還原型谷胱甘肽的合成來實現(xiàn)的，另外，乙酰半胱氨酸的肝細(xì)胞保護(hù)作用可能還與其作為內(nèi)源性血管松弛因子有關(guān)。 3 內(nèi)源性保護(hù)因子 體內(nèi)某些血管活性物質(zhì)和抗應(yīng)激因子可以調(diào)節(jié)肝細(xì)胞的功能，發(fā)揮肝細(xì)胞保護(hù)因子的作用，如熱休克蛋白、一氧化氮和前列腺素等。 3.1 熱休克蛋白 是在應(yīng)激時肝細(xì)胞等合成與分泌的一種具有細(xì)胞保護(hù)作用的應(yīng)激蛋白。

8、Fujimori等The通過對浸水應(yīng)激大鼠的動物模型的研究發(fā)現(xiàn)，分子量為72KD的熱休克蛋白具有內(nèi)源性肝細(xì)胞保護(hù)作用，在給大鼠注射內(nèi)毒素前先給大鼠浸水應(yīng)激，誘導(dǎo)大鼠熱休克蛋白的合成，能明顯減輕內(nèi)毒素造成的肝細(xì)胞的損傷程度。熱休克蛋白的肝細(xì)胞保護(hù)作用與其穩(wěn)定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，發(fā)揮“分子伴娘”的作用有關(guān)。 3.2 前列腺素E（PGE） 是一種重要的內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)因子，對D-半乳糖胺及病毒性肝炎性細(xì)胞損傷有良好的保護(hù)作用，PGE的肝細(xì)胞保護(hù)作用是多環(huán)節(jié)多步驟的協(xié)同作用。它可以促進(jìn)肝細(xì)胞DNA合成，誘導(dǎo)肝細(xì)胞分化，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能，改善自由基損傷造成的膜流動性低下，發(fā)揮膜穩(wěn)定作用，抑制Kupffer

9、細(xì)胞TNF-的合成與釋放，增加肝血管生成。Muntane等目前用外源性PGE治療暴發(fā)性病毒性肝炎，顯示了良好的治療效果。 3.3 一氧化氮 一氧化氮（NO）是近年來研究較多的血管活性物質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)，具有廣泛的生物學(xué)作用。低劑量的NO是肝臟微循環(huán)功能的重要調(diào)節(jié)因子，而高濃度的NO卻有明顯的肝細(xì)胞毒性，是缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷的重要致?lián)p傷因子之一參考。NO造成的肝細(xì)胞損傷主要與其下調(diào)細(xì)胞色素P450、抑制肝細(xì)胞DNA及蛋白質(zhì)的合成，并誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡有關(guān)。此外，NO尚能抑制過氧化物酶的活性，從而抑制其對自由基的清除。實驗證實，NO合酶抑制劑氨基胍能明顯減輕醋安酚誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，具有良好的肝細(xì)胞保護(hù)

10、作用文獻(xiàn)。 4 外源性保護(hù)因子 4.1 內(nèi)皮素受體拮抗劑 內(nèi)皮素（ET）是由血管內(nèi)皮細(xì)胞等合成與分泌的血管活性物質(zhì)，主要在肝內(nèi)降解，過量的內(nèi)皮素可以導(dǎo)致門脈及肝竇收縮，減少肝血流灌注，肝內(nèi)多數(shù)細(xì)胞上分布有內(nèi)皮素受體。Koeppel等The發(fā)現(xiàn)ETA/ETB非選擇性受體拮抗劑波生坦（Bosentan）15 mg/kg能明顯減輕缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷的程度。 4.2 全反式維甲酸（ATRA） ATRA能促進(jìn)肝細(xì)胞的增生與分化，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能與炎癥過程，在實驗性肝損傷的動物模型上給予ATRA20mg/kg，能明顯改善內(nèi)毒素誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，內(nèi)毒素誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷的主要機(jī)制在于它能促進(jìn)肝內(nèi)巨噬細(xì)胞

11、和Kupffer細(xì)胞合成與分泌前炎性細(xì)胞因子，如TNF、IL-1等，ATRA能抑制前炎性細(xì)胞因子的釋放，下調(diào)巨噬細(xì)胞膠原酶的活性而發(fā)揮肝細(xì)胞保護(hù)作用目前。 4.3 放線菌酮 放線菌酮是一種蛋白質(zhì)合成抑制劑，能明顯抑制轉(zhuǎn)化生長因子-(transforming growth factor,TGF-)誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡。TGF-是一種炎性細(xì)胞因子，能調(diào)節(jié)肝細(xì)胞基因表達(dá)，阻止肝細(xì)胞生長G1/S期，有人發(fā)現(xiàn)放線菌酮能促進(jìn)TGF-的分泌和抑制氧自由基的產(chǎn)生而發(fā)揮肝細(xì)胞保護(hù)作用參考。 4.4 甘草甜素（Glycyrrhizin ,GL) GL是甘草根的提取物，日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)GL能抑制TNF的分泌，抑制Fas系統(tǒng)

12、介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡與CTL的細(xì)胞毒活性，而CTL介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷是病毒性肝損傷的主要機(jī)制，這提示GL具有一定的肝細(xì)胞保護(hù)作用文獻(xiàn)。 5 具有膜穩(wěn)定作用的藥物 細(xì)胞膜內(nèi)外適當(dāng)?shù)碾x子濃度差是細(xì)胞興奮性的基礎(chǔ)，膜內(nèi)外離子濃度差的異常改變是細(xì)胞由可逆性損傷向不可逆性損傷進(jìn)展的關(guān)鍵，因此，調(diào)整細(xì)胞膜內(nèi)，外離子的分布的藥物是肝細(xì)胞保護(hù)的另外一個研究立足點。 5.1 Ca2 離子通道阻滯劑 細(xì)胞內(nèi)Ca2 濃度的升高可以激活Ca2 依賴性蛋白激酶，使細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)損傷；激活磷脂酶促進(jìn)花生四烯酸的代謝及氧自由基的生成。研究證實，內(nèi)毒素性、酒精及缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷伴有明顯的細(xì)胞內(nèi)Ca2 的升高。因此，不少的研究顯

13、示Ca2 拮抗劑對肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，在毒素性肝損傷的大鼠模型上，地爾硫網(wǎng)絡(luò)和尼群地平研究均已顯示了良好的肝細(xì)胞保護(hù)作用，Ca2 拮抗劑的肝細(xì)胞保護(hù)作用除與其調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的離子分布有關(guān)外，可能還與其改善微循環(huán)有關(guān)。 5.2 襻利尿劑 最近的網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)缺血再灌注性細(xì)胞性損傷時，肝細(xì)胞內(nèi)Na 的濃度的變化發(fā)揮更為重要的作用，有人發(fā)現(xiàn)將肝細(xì)胞培養(yǎng)液中的Na 換成Cl-，則缺氧誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷能明顯地減輕。Fiegen等The發(fā)現(xiàn)速尿等襻利尿劑能明顯減輕缺血再灌注性肝細(xì)胞損傷的程度，并認(rèn)為這與速尿等抑制肝細(xì)胞膜上的Na -K -2Cl-的協(xié)同轉(zhuǎn)運有關(guān)，從而抑制了缺血時肝細(xì)胞內(nèi)Na 濃度的升高。 5.

14、3 甘氨酸與-氨基丁酸（GABA）受體阻滯劑 肝細(xì)胞膜上Cl-的內(nèi)流是與Na 、Ca2 內(nèi)流相伴發(fā)生的，甘氨酸能抑制細(xì)胞膜上Cl-的內(nèi)流，從而減輕肝細(xì)胞損傷，對缺血性和毒素性肝細(xì)胞損傷具有明顯的保護(hù)作用參考。也有人認(rèn)為甘氨酸的肝細(xì)胞保護(hù)作用與其抑制Ca2 依賴性非溶酶體酶的活性有關(guān)。 GABA也是氨基酸類抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，能明顯促進(jìn)Cl-的跨膜流動。Kaita等文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)GABA能明顯抑制肝細(xì)胞再生，加重酒精性和CCl4性肝損傷，而GABA受體阻滯劑Ciprofloxin(100mg/kg)可明顯減輕暴發(fā)性肝炎時的肝細(xì)胞損傷，并對肝細(xì)胞再生具有良好的促進(jìn)作用。 6 結(jié) 語 有關(guān)肝細(xì)胞損傷與抗損傷的

15、研究一直是肝病研究的熱點，但目前許多的研究還停留在實驗室水平上，在眾多的制品中，抗氧化劑、膜穩(wěn)定劑和某些細(xì)胞因子（如IL-10）可望在不久的將來成為臨床上新的“保肝藥”。 參考文獻(xiàn) 網(wǎng)絡(luò) Arai M,Mochida S,Ohno A,et al.J.Hepatology,1998;27:123 網(wǎng)絡(luò) Neuman MG,Shear NH.Bellentani S, et al.J.Gastroenterology,1998;115:157 網(wǎng)絡(luò) Louis H,Le Moine O.Peny MO.et al.J.Gastroenterology,1997;112:935 網(wǎng)絡(luò) Moine

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