微生物的實驗室培養(yǎng)zj

1、微生物微生物的類群的類群真菌：真菌：原生動物：原生動物：特點：特點：結(jié)構(gòu)簡單結(jié)構(gòu)簡單, ,代謝產(chǎn)物多樣、生長繁殖迅代謝產(chǎn)物多樣、生長繁殖迅速、易于培養(yǎng)、突變率高等，是生物學基礎(chǔ)研速、易于培養(yǎng)、突變率高等，是生物學基礎(chǔ)研究和實踐應(yīng)用中的重要材料究和實踐應(yīng)用中的重要材料. .一、認識微生物一、認識微生物酵母菌、霉菌、食用菌酵母菌、霉菌、食用菌草履蟲、變形蟲、衣藻、團藻等草履蟲、變形蟲、衣藻、團藻等細菌細菌 常見的三種細菌典型形態(tài)常見的三種細菌典型形態(tài)A.球菌球菌 B.桿菌桿菌 C.弧菌弧菌細菌的構(gòu)造細菌的構(gòu)造細菌的特殊結(jié)構(gòu)細菌的特殊結(jié)構(gòu)n莢膜莢膜n鞭毛鞭毛n芽孢芽孢關(guān)于芽孢關(guān)于芽孢 有些細菌在一定

2、的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠有些細菌在一定的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠體，叫做體，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。例如，有的細菌的芽孢，煮沸境有很強的抵抗力。例如，有的細菌的芽孢，煮沸3 3小時以后才小時以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風飄散。當環(huán)境適宜（如溫度、水死亡。芽孢又小又輕，可以隨風飄散。當環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細菌分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細菌. .菌落：菌落：n單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上

3、大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，叫做菌落形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，叫做菌落。n菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落菌落細菌的菌落特征細菌的菌落特征因種而異因種而異 微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生是由放線菌產(chǎn)生的的 ，如，如鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素大霉素 等等SARS病毒、病毒、 禽流感病毒禽流感病毒病毒病毒真菌真菌如圖是酵母菌電子顯微如圖是酵母菌電子顯微鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)酵母菌和霉

4、菌酵母菌和霉菌青霉青霉二、微生物的分離和純培養(yǎng)的基本操作程序二、微生物的分離和純培養(yǎng)的基本操作程序培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制 接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)觀察記錄觀察記錄純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)（一）（一）培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制1、概念、概念2、營養(yǎng)組成、營養(yǎng)組成（1）碳源）碳源（2）氮源）氮源（3）生長因子）生長因子: （4）水）水（5）無機鹽）無機鹽無機碳源：無機碳源：CO2、 CO32- 、 HCO3-有機碳源：有機物（常用：糖類）有機碳源：有機物（常用：糖類）是微生物生長必需的微量有機物的統(tǒng)稱是微生物生長必需的微量有機物的統(tǒng)稱,主主要包括維生素、某些氨基酸、堿基（嘌呤、要包括維生素、某些氨基酸、堿基（嘌呤

5、、嘧啶）等，一般來源于天然物質(zhì)。嘧啶）等，一般來源于天然物質(zhì)。常用：銨鹽、硝酸鹽常用：銨鹽、硝酸鹽課本課本P83 P83 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（1 1）按）按物理狀態(tài)物理狀態(tài)分：分：固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基和和液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基5 5. .培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型和用途的類型和用途 3. 3.培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制方法的配制方法原料稱量、溶解原料稱量、溶解調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)PH分裝、包扎分裝、包扎滅菌滅菌4 4. .倒平板倒平板將滅菌后的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制備平板培養(yǎng)基將滅菌后的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制備平板培養(yǎng)基（2 2）按）按功能功能分分: : 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基和和鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)

6、基選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基加入青霉素加入青霉素: : 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽加入高濃度食鹽: : 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源不加氮源: : 分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機物不加含碳有機物: :分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物鑒別培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：如如加入伊紅加入伊紅- -美藍美藍，可鑒別大腸桿菌，可鑒別大腸桿菌（若有大腸桿（若有大腸桿菌，則菌落成深紫色，并帶有金屬光澤）菌，則菌落成深紫色，并帶有金屬光澤）（3 3）按）按成分成分來分來分: :天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基和和合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基能讓特定的微生物生長，抑制其它微生物的生長，從而能讓特定

7、的微生物生長，抑制其它微生物的生長，從而將所需要的微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培將所需要的微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基，叫做選擇培養(yǎng)基。養(yǎng)基，叫做選擇培養(yǎng)基。根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的，用以鑒別不同種類的微生物藥品配制而成的，用以鑒別不同種類的微生物1、平板劃線法、平板劃線法2、稀釋涂布平板法、稀釋涂布平板法3、稀釋混合平板法、稀釋混合平板法接種針與涂布器接種針與涂布器1、溫度、溫度2、PH值值3、氧氣、氧氣真菌真菌 5.06.0 細菌細菌 6.57.5 放線菌放線菌 7.58.5

8、 條件：條件：注意：培養(yǎng)皿倒置注意：培養(yǎng)皿倒置n單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，就會形成一單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，叫做菌個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，叫做菌落落。n菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落菌落培養(yǎng)基配制完成培養(yǎng)基配制完成最后一步，一定是最后一步，一定是調(diào)整調(diào)整PH值值四、無菌技術(shù)四、無菌技術(shù)無菌工作室無菌工作室無菌工作臺無菌工作臺手：酒精消毒手：酒精消毒培養(yǎng)基：高壓蒸氣滅菌培養(yǎng)基：高壓蒸氣滅菌接種環(huán)：灼燒滅菌接種環(huán)：灼燒滅菌 1.1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前為

9、什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時

10、菌種的數(shù)目逐漸減少，次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。感染操作者。 2.2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3.3.在做第二次以及其后的劃線操作時，在做第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 答：劃線后，線條末端

11、細菌的數(shù)目比線答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。的菌落?！镜淅馕龅淅馕觥坷? 1有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 A. A.是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量 C. C.除水以外的無機物只提供無機鹽除水以外的無機物只提供無機鹽 D.D.無機氮源也能提供能

12、量無機氮源也能提供能量D例例2 2下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是 A. A.防止雜菌污染防止雜菌污染 B. B.消滅雜菌消滅雜菌 C. C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D. D.滅菌必須在接種前滅菌必須在接種前B例例3 3右表是某微生物右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請據(jù)此回培養(yǎng)基成分，請據(jù)此回答：答：（1 1）右表培養(yǎng)基可培）右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型養(yǎng)的微生物類型是是 。（2 2）若不慎將過量）若不慎將過量NaClNaCl加入培養(yǎng)基中。加入培養(yǎng)基中。如不想浪費此培養(yǎng)基，如不想浪費此培養(yǎng)基，可再加入可再加入 . .自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物 含碳有機物含碳有機物 （3 3）若除去成分，加）若除去成分，加入（入（CH2OCH2O），該培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)可用于培養(yǎng) 。（4 4）表中營養(yǎng)成分共有）表中營養(yǎng)成分共有 類。類。固氮微生物固氮微生物 3 調(diào)整調(diào)整pHpH 例例3 3右表是某微生物培右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請據(jù)此回答：養(yǎng)基成分，請據(jù)此回答：（5 5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝）不論何種培養(yǎng)基，在