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1、新鄉(xiāng)醫(yī)學院醫(yī)用化學實驗課教案首頁授課教師姓名及職稱:一、實驗名稱分光光度法測定Fe3+的含量二、授課對象普本授課形式實驗教學三、教學目標1 .了解分光光度法的基本原理和測定方法2 .學習分光光度計的使用四、教學內(nèi)容1 .分光光度計的使用方法2 .標準溶液的配制及標準曲線的繪制3 .待測液的測定五、教學安排與課時分配1 .講解、演小40min2 .學生操作、老師輔導80min六、授課重點分光光度計的原理及721型分光光度計的使用方法七、注思事項721型分光光度計的正確使用方法八、授課方法教帥小范,學生操作九、使用教材醫(yī)用化學實驗自編教材十、教研室審查意見主任簽字新鄉(xiāng)醫(yī)學院化學教研室實驗分光光度法
2、測定Fe3+的含量一、實驗目的:1 .了解分光光度法的基本原理和測定方法2 .學習721型分光光度計的使用二、實驗原理:1朗伯-比爾定律一一分光光度法定量分析的基礎基本內(nèi)容:當一束單色光通過含有吸光物質(zhì)的溶液后,溶液的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度及液層厚度的乘積成正比。A = ;lcA = - lg TT透光率A吸光度£摩爾吸光系數(shù),物質(zhì)的特性常數(shù)C溶液的濃度l液層厚度,單位cm當液層厚度一定時:A=KcA與c成正比,作圖為正比例曲線吸收曲線:在固定濃度的條件下,選擇不同的入射光波長,測得A值彳A-A圖即為吸收曲線。目的找最大吸收波長(在最吸收大波長的照射下的溶液進行分析,靈敏度較高)入
3、max= 480nm3 .標準曲線法:先配制一系列不同濃度的標準溶液,用合適的波長的入射光測繪標準曲線(或稱工作曲線)。再用完全相同的方法和步驟測定被測液的吸光度,即可以從標準曲線上找到被測溶液的濃度或含量。4 .顯色反應:無色或顏色較淺的物質(zhì)常加入合適的顯色劑顯色后再進行測定。分光光度法測定Fe3+的含量常用方法用硫氧酸鹽顯色法、磺基水楊酸顯色法及鄰二氮菲顯色法等,本次試驗用硫氟酸鹽顯色法。(酸性條件下)Fe36SCN一=FeSCN63一(血紅色)三、儀器與試劑:分光光度計、50mL容量瓶,5mL吸量管,0.1mgmL1Fe3+的標準溶液,300g-L-1KSCN,3molL-1HNO50g
4、-L-1(NH4)2S2Q,Fe3+的待測溶液721型分光光度計的結(jié)構(gòu)和使用方法:光源-單色器-吸收池-檢測器-顯示器使用方法:1 .接通電源,打開暗盒蓋,調(diào)零旋鈕,使透光率(T)為零2 .調(diào)節(jié)波長使入=入max,預熱20分鐘3 .放入?yún)⒈仍噭?,合上暗室蓋,調(diào)“100”旋鈕,使透光率為100%4 .重復1、3至儀器穩(wěn)定為止5 .將待測液拉入光路,合上暗室蓋,讀取A值四、實驗步驟:1 .標準曲線的繪制按下表配制溶液:編號Fe3+(mL)KSCN(mL)HNO3(mL)(NH4)2S2O8(滴)A10.00532021.0053231.5053242.0053252.50532待測2.00532繪制Ac圖2 .待測液的Fe3+含量的測定及計算Cx50.0014c=ImgmL)2.00五:注意事項:1 .比色皿的保護2 .分光光度計
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