電融合儀操作手冊(cè)

1、.Multiporator® 電轉(zhuǎn)化儀使用說明書目 錄1 簡(jiǎn)介12 應(yīng)用范圍13 安全警示14 儀器介紹4.1 包 裝24.2 開 始4.3 電擊杯插槽4.4 鍵 區(qū)4.5 鍵及鍵組合4.6 屏幕顯示4.7 真核細(xì)胞和細(xì)菌酵母的電轉(zhuǎn)化4.7.1 連接外接電極（電轉(zhuǎn)化/電融合）插件4.8 細(xì)胞融合（可選擇）4.8.1 優(yōu)化細(xì)胞融合（鏡下監(jiān)測(cè)）4.8.2 清洗微融合杯4.8.3 螺旋融合杯4.8.4 螺旋融合杯的上樣及置入4.8.5 融合及細(xì)胞懸液提取4.8.6 螺旋融合杯的清洗和消毒4.9 打印連接打印機(jī)（可選擇）5 操作模式5.1 真核細(xì)胞模式5.2 細(xì)菌和酵母模式（可選擇）5.3

2、細(xì)胞融合模式（可選擇）5.3.1 功能：細(xì)胞排列5.3.2 細(xì)胞融合步驟6 錯(cuò)誤提示7 儀器的維護(hù)7.1 消 毒7.2 清 洗8 技術(shù)數(shù)據(jù)9 訂購信息1 簡(jiǎn)介Multiporator®為真核細(xì)胞的電轉(zhuǎn)染而設(shè)計(jì)，因?yàn)橛捎卸喾N模式可選，也可進(jìn)行細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)以及細(xì)菌和酵母的電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)。該操作手冊(cè)包括該儀器的所有使用說明。Multiporator®的最大特點(diǎn)在于儀器內(nèi)部可以自動(dòng)計(jì)算放電曲線從而維持真核細(xì)胞電轉(zhuǎn)化和細(xì)胞融合的參數(shù)。2 應(yīng)用范圍儀器的安全規(guī)則和工業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，儀器應(yīng)用必須符合以下規(guī)定：僅限于細(xì)胞技術(shù)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用應(yīng)用范圍包括酵母、細(xì)菌和細(xì)胞的電轉(zhuǎn)化及細(xì)胞融合。請(qǐng)使用Eppen

3、dorf的原裝零配件只能使用原始零配件。原裝零配件專門為保證Multiporator®的最佳性能所設(shè)計(jì)，在制造商的推薦下也可使用其他裝置。因使用儀器不當(dāng)或采用非制造商推薦的配置造成的損壞，Eppendorf不承擔(dān)任何責(zé)任。3 安全警示考慮到個(gè)人安全，必須注意下列幾點(diǎn)！ 仔細(xì)閱讀操作手冊(cè)中的操作規(guī)程。必須遵守手冊(cè)中的規(guī)程！ 僅使用含有接地點(diǎn)的電源！ 使用Multiporator®儀器之前請(qǐng)保證使用正確電壓的電源！ 儀器應(yīng)由授權(quán)的專業(yè)人員打開！儀器內(nèi)可能有高壓。 不要在暴露環(huán)境中拆開儀器！ 不要讓任何液體進(jìn)入儀器或電擊杯座！ 該儀器僅限于體外實(shí)驗(yàn)使用！僅限于儀器說明所提供范圍的

4、使用。不要將其他未經(jīng)Eppendorf AG承認(rèn)的零部件、工具或物體放入電擊杯座，有高電壓！ 僅使用所列零部件。經(jīng)過Eppendorf AG承認(rèn)，并獲得安全證明其他零件也可使用。未在該操作手冊(cè)中提及的線路連接須事先得到制造商的允許。 螺旋融合杯必須小心操作處理！松散或損壞的電極會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作造成較大程度的影響。在這種情況下，螺旋融合杯不能使用！在融合過程為結(jié)束前，不要打開螺旋融合杯。 微融合腔杯必須小心操作處理！小心加入細(xì)胞懸液！不要用槍頭觸及或移動(dòng)電極以免造成損壞！在細(xì)胞排列融合過程中，避免和電極的直接接觸！ 只有當(dāng)微融合腔杯連接后才可進(jìn)行細(xì)胞排列融合！連接電線僅為微融合腔杯的連接所設(shè)計(jì)！不允

5、許有其他連接！不要將插頭接觸液體！當(dāng)該儀器被非Eppendorf工程師維修或保養(yǎng)，或未遵照操作規(guī)程和警示進(jìn)行操作時(shí)，該儀器的擁有者或操作者對(duì)儀器的性能負(fù)責(zé)。EppendorfAG對(duì)上述行為所造成的損壞不負(fù)任何責(zé)任。上述情況不會(huì)影響作為Eppendorf AG的銷售和運(yùn)輸中保修和責(zé)任約定！ 在未得到Eppendorf AG書面允許情況下，操作手冊(cè)的任何內(nèi)容不能以任何形式進(jìn)行復(fù)制。 Eppendorf AG保留對(duì)該產(chǎn)品的技術(shù)更改權(quán)力！4 儀器介紹該產(chǎn)品有四種不同層次的型號(hào)：最基本的是供真核細(xì)胞電轉(zhuǎn)染所用?？梢陨?jí)為用于細(xì)菌和酵母的電轉(zhuǎn)化，也可升級(jí)提供細(xì)胞融合的功能。這兩個(gè)水平加以聯(lián)合應(yīng)用形成第四個(gè)

6、層次。Multiporator®具有簡(jiǎn)易直觀的鍵區(qū)和視屏界面，并且電擊杯的插槽就位于鍵區(qū)的旁邊。圖1：Multiporator®儀器，前面觀。4.1 包裝基本配置：可進(jìn)行真核細(xì)胞電轉(zhuǎn)染的Multiporator®儀器（包括主要電線）； 電擊杯座； 電擊杯（電極間距：2 mm4 mm）； 電轉(zhuǎn)染低滲和等滲緩沖液； 操作手冊(cè)和基本應(yīng)用手冊(cè)。選擇“細(xì)菌模式”配置：整合有細(xì)菌模式的基本裝置；額外的電擊杯（電極間距為1 mm）。選擇“細(xì)胞融合模式”配置： 整合有細(xì)胞融合模式的基本裝置； 螺旋融合杯（電極間距為0.2 mm）； 螺旋融合杯插槽；微融合杯（電極間距0.2 mm）

7、和專用插槽；低滲和等滲細(xì)胞融合緩沖液。選擇“融合和細(xì)菌模式”配置： 整合有融合和細(xì)菌模式的基本裝置。4.2 開始Multiporator®電源插座在，保險(xiǎn)絲，電源開關(guān)在儀器后方。將電源插入儀器后方的插座，再接好電源即可。撳一下電源開關(guān)即打開了儀器。圖2：Multiporator®儀器，后面觀。電源連接口（左）打印機(jī)連接口（右）4.3 電擊杯座 電擊杯座位于儀器正面的鍵區(qū)旁邊。將電擊杯座拔出后即可取出電擊杯。插入新的電擊杯時(shí)，要保證杯子的塑料突起正好位于杯座后方的裂縫中，然后將杯座推到底。儀器中的傳感器可檢測(cè)杯座是否有電擊杯。注意：在搬運(yùn)儀器時(shí)，確保電擊杯中沒有電擊杯，或者單

8、獨(dú)搬運(yùn)電擊杯座。 有專用于“細(xì)胞融合”融合杯插槽。4.4 鍵區(qū)鍵區(qū)用于設(shè)置參數(shù)、選擇電轉(zhuǎn)模式以及啟動(dòng)電轉(zhuǎn)化。根據(jù)儀器的模式層次，一至四種模式可供選擇。鍵組合不僅可用于設(shè)置聲音信號(hào)高低的設(shè)置，也可設(shè)置日期和時(shí)間。圖3. 帶鍵區(qū)和屏幕的控制面板4.5 鍵及鍵組合SETSET鍵用于選擇預(yù)定的參數(shù)。屏幕中此參數(shù)有下劃線標(biāo)識(shí)。撳動(dòng)SET鍵合適的次數(shù)，可設(shè)定更多的參數(shù)。重復(fù)按動(dòng)SET按鈕直至屏幕上的下劃線消失，或者按動(dòng)MODE或START按鈕均可結(jié)束SET模式設(shè)置。（注意：MODE鍵可轉(zhuǎn)入另一個(gè)模式。）上下箭頭鍵可進(jìn)行參數(shù)的改動(dòng)。當(dāng)?shù)竭_(dá)參數(shù)最低設(shè)置值后會(huì)跳到該參數(shù)的最高設(shè)置值。同樣，最高數(shù)值達(dá)到后也會(huì)跳到

9、最低值。MODEMODE鍵用于選擇激活電轉(zhuǎn)化模式。若儀器具有多種模式，該鍵能進(jìn)行可能模式的選擇，即包括真核細(xì)胞模式在內(nèi)最多有三種模式可供選擇。相關(guān)符號(hào)出現(xiàn)在屏幕上：真核細(xì)胞的模式 模式水平：基本 使用脈沖：指數(shù)衰減波：細(xì)菌和酵母的模式 模式水平：細(xì)菌模式 使用脈沖：指數(shù)衰減波：細(xì)胞融合的模式 模式水平：融合模式 使用脈沖：方波脈沖START撳動(dòng)SATRT按鈕即啟動(dòng)程序操作。Arrow keys 箭頭鍵用于改變預(yù)設(shè)的參數(shù)（下劃線標(biāo)識(shí)）。Setting the date同時(shí)撳動(dòng)SET和MODE按鈕即可進(jìn)入日期和時(shí)間的設(shè)置狀態(tài)。再次撳動(dòng)SET按鈕，屏幕上日期和時(shí)間的下劃線會(huì)從左移至右，然后用上下箭頭

10、鍵進(jìn)行改動(dòng)。重復(fù)撳動(dòng)SET鍵直到屏幕上的下劃線消失即結(jié)束日期和時(shí)間的設(shè)定?；蛘邠鍎?dòng)MODE或START鍵下劃線也可消失。（注意：MODE鍵可轉(zhuǎn)入另一個(gè)模式。）Setting the volume of the acoustic signals 同時(shí)撳動(dòng)MODE和START鍵即可進(jìn)入聲音信號(hào)音量的調(diào)節(jié)狀態(tài)。在屏幕的最底部出現(xiàn)”VOLUME”以及百分比數(shù)值。百分比數(shù)值表示音量高低和音調(diào)類型，改變上下箭頭鍵可以改變音量和音調(diào)。 撳動(dòng)SET、MODE、或START按鈕即可結(jié)束聲音的設(shè)定。（注意：MODE鍵可轉(zhuǎn)入另一個(gè)模式。）“VOLUME”即從屏幕上消失。Reset關(guān)閉電源總開關(guān)即結(jié)束了實(shí)驗(yàn)，Rese

11、t 鍵與電源總開關(guān)功能一致。4.6 屏幕顯示 實(shí)驗(yàn)相關(guān)參數(shù)以大粗體形式出現(xiàn)在屏幕上，約2至4行。參數(shù)和數(shù)值隨選擇的模式而改變，而日期和時(shí)間地出現(xiàn)在第一行。選擇的模式以一個(gè)符號(hào)出現(xiàn)在最低行的右側(cè)：真核細(xì)胞的模式 模式水平：基本：細(xì)菌和酵母的模式 模式水平：細(xì)菌模式：細(xì)胞融合的模式 模式水平：融合模式“VOLUME”或?qū)嶒?yàn)剩余時(shí)間同樣出現(xiàn)在這一行。圖：設(shè)置提示信號(hào)音量屏顯實(shí)驗(yàn)中和實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，屏幕轉(zhuǎn)為顯示該次實(shí)驗(yàn)設(shè)置的相關(guān)信息。4.7 真核細(xì)胞和細(xì)菌酵母的電轉(zhuǎn)化 實(shí)驗(yàn)采用一次性的電擊杯，生物學(xué)樣品放在電極間的縫隙中。樣品體積遵照電擊杯上的標(biāo)示體積。雖然電極上的液體不會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)，但總體效率會(huì)下降。

12、 電擊杯的磨砂窗可供作記號(hào)。 電擊杯的塑料突起可保證杯子按正確方向插入電擊杯座中。杯蓋可蓋住杯子。但是，安全起見，避免過大壓力，蓋子和杯子不能密封太嚴(yán)。加好樣品的電擊杯在轉(zhuǎn)運(yùn)途中要保證垂直方向，以免樣品漏出。圖4：電擊杯的結(jié)構(gòu)圖抓住突出把手取出電擊杯。加樣后電擊杯中不能有氣泡。 當(dāng)電擊杯放入轉(zhuǎn)化槽中時(shí)，必須注意保證杯子的突起位于長(zhǎng)斜縫中，杯子接觸到槽的底部。完全插好電擊杯的轉(zhuǎn)化槽才可插至儀器底部進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 轉(zhuǎn)化槽可儲(chǔ)存于低溫環(huán)境中。 在搬運(yùn)儀器途中，請(qǐng)注意沒有電擊杯的轉(zhuǎn)化槽會(huì)從儀器中滑落。4.7.1 連接外接電極（電轉(zhuǎn)化電融合）的插件 非標(biāo)準(zhǔn)零部件（見訂購信息）含有一個(gè)插件，連接外接電極。改變

13、功能鍵（P/F）的位置，插件可連接外接電極進(jìn)行電轉(zhuǎn)化（符號(hào)：）和細(xì)胞融合（符號(hào)：）。4 mm安全插頭連接外接電極。 1連接插座，火線（紅色）2連接插座，地線（黑色）當(dāng)用外接電極進(jìn)行細(xì)胞電融合實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于插頭連接，一個(gè)50歐姆的電阻與電極并聯(lián)。使用外在電極必須仔細(xì)檢查是否符合國家安全規(guī)定以及電磁兼容性應(yīng)用規(guī)定，確保安全！使用者必須對(duì)所有連接的設(shè)備負(fù)責(zé)！4.8 細(xì)胞融合（可選擇）4.8.1 優(yōu)化細(xì)胞融合（鏡下監(jiān)測(cè)） 為了優(yōu)化細(xì)胞融合參數(shù)，有必要借助特殊的微融合杯在顯微鏡下觀察監(jiān)測(cè)細(xì)胞排列和融合。微融合杯通過專用的連接線（將近1米長(zhǎng)）與微融合插口相連。注意：輕拿輕放微融合杯！小心加好細(xì)胞懸液！不要用

14、槍頭觸及或移動(dòng)電極，防止損壞！細(xì)胞排列融合過程中避免與電極直接接觸！只有將微融合杯連接后，細(xì)胞排列融合才能進(jìn)行！微融合杯緊緊連接Multiporator®。將微融合杯（加有大約50 ul的細(xì)胞懸液）放在顯微鏡下。注意：在電極周圍小心滴加細(xì)胞懸液增加電極間的細(xì)胞數(shù)。夾片可以在顯微鏡平臺(tái)上固定微融合杯，也可用于固定玻片。將微融合杯和專用連接線連接起來。聚焦電極和細(xì)胞。撳動(dòng)START按鈕按預(yù)先設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞排列融合?？梢栽阽R下加以監(jiān)測(cè)。微融合杯的最大注入體積大約為200 ul。已經(jīng)確定的參數(shù)可直接用于螺旋融合杯。4.8.2 清洗微融合杯用洗瓶中的雙蒸水沖洗微融合杯內(nèi)部，頑固殘留的細(xì)胞殘

15、余物可用柔軟刷子仔細(xì)擦拭電極。（清洗過程中必須保持電極間距不變。）可以用70酒精清洗以加速干燥過程。4.8.3 螺旋融合杯 大量細(xì)胞的融合可采用螺旋融合杯。螺旋融合杯的結(jié)構(gòu)螺旋融合杯由一個(gè)杯子和一個(gè)由并列斷裂鉑絲環(huán)繞的中心部件兩部分組成。鉑絲即為電極。斷裂的鉑絲以雙螺旋形式環(huán)繞中心部件。兩部分都相互擰緊。杯子和核心間的空間可容納250 ul的樣品。 螺旋融合杯通過共軸的接頭與融合插口相連。 斷裂鉑絲電極間距大約為200 m。圖5：鏡下螺旋融合杯電極觀注意：小心處理螺旋融合杯！松動(dòng)或損壞電極會(huì)極大影響操作程序，這種情況下，螺旋融合杯不能使用！4.8.4 螺旋融合杯的上樣及置入螺旋融合杯可容納25

16、0 ul的樣品，必須保證液體全部加至杯子的底部。邊緣和壁上不應(yīng)潮濕，否則會(huì)負(fù)面影響樣品加入螺旋融合杯中。氣泡也會(huì)降低實(shí)驗(yàn)的效率。核心插入口向上放置的杯子，然后小心擰緊入位。擰緊過程中，縫隙中曾處于底部的的細(xì)胞懸液被迫上升。擰緊核心時(shí)，確保沒有氣泡形成。直到融合完成前，保證螺旋融合杯豎直放置在共軸連接器上！4.8.5 融合及細(xì)胞懸液提取將融合插入槽穩(wěn)定地插入儀器中。將密封好的螺旋融合杯連接到融合共軸插口上，旋轉(zhuǎn)90度后鎖緊。按預(yù)先設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行融合（見5.3部分）。小心旋轉(zhuǎn)90度松動(dòng)后取下螺旋融合杯。垂直方向小心打開腔室。小心擰開核心。用小量適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基洗下核心上粘附的細(xì)胞懸液。杯中的細(xì)胞懸液和

17、洗下的懸液收集后按需要作進(jìn)一步處理。4.8.6螺旋融合杯的清洗和消毒 防止細(xì)胞和緩沖液干后粘附，需在實(shí)驗(yàn)后用去離子水清洗杯子和核心。 如果污染嚴(yán)重，必須用超聲（可能的話用Edisonite Super）潔凈螺旋融合杯，或者用非常柔軟的刷子清洗。若用刷子清洗，請(qǐng)保證刷洗方向與鉑絲電極纏繞方向一致，否則錯(cuò)位的鉑絲電極會(huì)導(dǎo)致螺旋融合杯不能使用。 用70酒精清洗消毒。清洗后豎直放在無菌無灰的環(huán)境中干燥，干燥后螺旋融合杯可重復(fù)使用。4.9 打印連接打印機(jī)（可選擇）Multiporator®可輸出每個(gè)實(shí)驗(yàn)打印報(bào)告。打印報(bào)告不僅含有設(shè)定的參數(shù)以及試驗(yàn)的日期和時(shí)間，還可列出緩沖液、濃度、細(xì)胞株等其他

18、的數(shù)據(jù)信息。出錯(cuò)時(shí)，出錯(cuò)信息也會(huì)被打印出來。不同打印應(yīng)用例子列舉如下：串聯(lián)打印機(jī)可以接于儀器后方的打印機(jī)接口。也可通過PC 閱讀所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，這需要一個(gè)無調(diào)制解調(diào)器的線纜（9-針in 插槽，貨號(hào)：0013610.525）Eppendorf AG提供以下熱敏打印機(jī)。為兼容IBM打印機(jī)的DIP轉(zhuǎn)換裝置也列舉如下：5 操作模式5.1 真核細(xì)胞模式這種模式的符號(hào)為。第一步設(shè)定參數(shù)根據(jù)需要，撳MODE鍵轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞狀態(tài)。撳SET鍵選擇預(yù)設(shè)參數(shù)（選擇的參數(shù)會(huì)有下劃線出現(xiàn)）。用上下箭頭鍵按要求改動(dòng)參數(shù)的大小。根據(jù)需要撳SET鍵和箭頭修改其他參數(shù)。停止參數(shù)設(shè)定，當(dāng)時(shí)設(shè)定的參數(shù)有效，不必儲(chǔ)存。真核細(xì)胞電轉(zhuǎn)化模

19、式屏顯舉例。相關(guān)參數(shù)以大斜體形式出現(xiàn)。U：電壓，單位：V?？梢? V 增幅在20-100V 范圍內(nèi)增減；或者以10v的增幅在20100 V范圍內(nèi)增減，以100 V增幅在1,000 1,200 V范圍內(nèi)增減。：時(shí)間，單位：us（微秒）。可以5 us增幅在15 500 us范圍內(nèi)增減。n：實(shí)驗(yàn)中脈沖次數(shù)?？梢詮?設(shè)至99次。每?jī)纱蚊}沖中間隔時(shí)間為1分鐘。注意：已設(shè)定的參數(shù)即可應(yīng)用。根據(jù)設(shè)定的參數(shù)，儀器內(nèi)部自行計(jì)算脈沖曲線，因此可以按照輸入的參數(shù)自行維持放電曲線（指數(shù)衰減曲線）。融合模式應(yīng)用的是方波脈沖（見5.4部分）。第二步開始電轉(zhuǎn)化撳START鍵開始電轉(zhuǎn)化?！癈harge”（充電）出現(xiàn)在屏幕第三

20、行。充電過程結(jié)束后，開始放電過程，屏幕第三行會(huì)有一個(gè)閃動(dòng)加以提示。若設(shè)定了多于一個(gè)的脈沖，“Wait”和剩余時(shí)間將出現(xiàn)在屏幕上。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，儀器會(huì)發(fā)出兩聲提示，屏幕回復(fù)到預(yù)先設(shè)定和已使用的界面。從實(shí)驗(yàn)結(jié)束開始的延長(zhǎng)時(shí)間會(huì)以分秒的形式出現(xiàn)在最底行，超過99分鐘或撳動(dòng)任何按鈕，這個(gè)信息會(huì)從屏幕上消失。5.2 細(xì)菌和酵母模式（可選擇）這種模式的符號(hào)為。第一步設(shè)定/修改參數(shù)根據(jù)需要，撳MODE鍵轉(zhuǎn)入細(xì)菌和酵母操作狀態(tài)。撳SET鍵選擇預(yù)設(shè)電壓（U）參數(shù)（選擇的參數(shù)會(huì)有下劃線出現(xiàn)）。用上下箭頭鍵按要求改動(dòng)參數(shù)的大小。停止參數(shù)設(shè)定，當(dāng)時(shí)設(shè)定的參數(shù)有效，不必儲(chǔ)存。細(xì)菌和酵母電轉(zhuǎn)化模式屏顯舉例。相關(guān)參數(shù)以大斜體

21、形式出現(xiàn)。U：電壓，單位：V?？梢?0V增幅在200-1000V范圍內(nèi)增減；或者以100v的增幅在10002500 V范圍內(nèi)增減。：延續(xù)時(shí)間，單位：ms（毫秒）。設(shè)成5.0 ms。第二步開始電轉(zhuǎn)化撳START鍵開始電轉(zhuǎn)化。“Charge”(充電）出現(xiàn)在屏幕第三行。充電過程結(jié)束后，開始放電過程，屏幕第三行會(huì)有一個(gè)閃動(dòng)加以提示，并發(fā)出兩聲響聲。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，儀器會(huì)發(fā)出兩聲提示，設(shè)定的參數(shù)出現(xiàn)在屏幕上，實(shí)際應(yīng)用的參數(shù)Ua和a出現(xiàn)在屏幕第三行。Ua：實(shí)際測(cè)量的使用電壓，單位：伏特（V）a：實(shí)際使用脈沖時(shí)間，單位：ms（毫秒），時(shí)間0.8ms記為0.8 ms。從實(shí)驗(yàn)結(jié)束開始的延長(zhǎng)時(shí)間會(huì)以分秒的形式出現(xiàn)在最

22、底行，超過99分鐘或撳動(dòng)任何按鈕，這個(gè)信息會(huì)從屏幕上消失。5.3 細(xì)胞融合模式（可選擇）5.3.1 功能：細(xì)胞排列細(xì)胞排列功能分別在屏幕第二行和第四行以符號(hào)U¢（脈沖前）和U¢¢（脈沖后）表示。第一步設(shè)定參數(shù)根據(jù)需要，撳MODE鍵轉(zhuǎn)入細(xì)胞融合狀態(tài)。撳SET鍵選擇預(yù)設(shè)參數(shù)（選擇的參數(shù)會(huì)有下劃線出現(xiàn)）。用上下箭頭鍵按預(yù)先要求改動(dòng)參數(shù)大小。若U¢U¢¢U參數(shù)設(shè)為0，則該項(xiàng)不被執(zhí)行。這樣使得U¢U¢¢可單獨(dú)或依次激活而不需要激活融合脈沖。停止參數(shù)設(shè)定，當(dāng)時(shí)設(shè)定的參數(shù)有效，不必儲(chǔ)存。不激活脈沖UÕ和U&#

23、162;¢激活，以U¢進(jìn)行細(xì)胞排列屏顯舉例。相關(guān)參數(shù)以大斜體形式出現(xiàn)。U¢U¢¢：交流電壓，單位：V?？梢栽O(shè)為0V，或以0.1V增幅在1.0-10V 范圍內(nèi)增減。t：排列持續(xù)時(shí)間，單位：s（秒）。可以5s增幅在095s范圍內(nèi)增減。U：電壓（方波脈沖），單位：v?？梢栽O(shè)為0，或以1V增幅在5-100V 范圍內(nèi)增減。，或以10V增幅在100-300V 范圍內(nèi)增減。t：脈沖持續(xù)時(shí)間，單位：us（微秒）。可以5 us增幅在0-30us增減。n：脈沖次數(shù)?？梢灾鸫卧鲋?9次。第二步開始細(xì)胞排列撳START鍵觸發(fā)細(xì)胞排列電壓U¢。“”出現(xiàn)在屏幕第

24、四行，交流電壓作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，儀器會(huì)發(fā)出兩聲提示，屏幕回復(fù)到預(yù)先設(shè)定和已使用的界面。從實(shí)驗(yàn)結(jié)束開始的延長(zhǎng)時(shí)間會(huì)以分秒的形式出現(xiàn)在最底行，超過99分鐘或撳任何按鈕，這個(gè)信息會(huì)從屏幕上消失。5.3.2 細(xì)胞融合步驟第一步設(shè)定/改變參數(shù)撳SET鍵選擇預(yù)設(shè)參數(shù)（選擇的參數(shù)會(huì)有下劃線出現(xiàn)）。用上下箭頭鍵按預(yù)先要求改動(dòng)參數(shù)大小。根據(jù)選擇的參數(shù)U¢和U¢¢融合可以在無細(xì)胞排列的情況下進(jìn)行，也可與一個(gè)或兩個(gè)選擇的排列功能結(jié)合進(jìn)行。停止參數(shù)設(shè)定，當(dāng)時(shí)設(shè)定的參數(shù)有效，不必儲(chǔ)存。具有U¢U¢¢激活細(xì)胞排列的電融合模式屏顯舉例。無排列電壓脈沖U¢

25、細(xì)胞融合模式屏顯舉例。相關(guān)參數(shù)以大斜體形式出現(xiàn)。U：電壓，單位：V?？梢栽O(shè)為0，也可以10 V增幅在5100V范圍內(nèi)增減，或以10 V增幅在100300 V范圍內(nèi)增減。t：脈沖持續(xù)時(shí)間，單位：us（微秒）。可以5 us增幅在0300 us范圍內(nèi)增減。U¢U¢¢：交流電壓，單位：V。可以設(shè)為0，或以0.1 V增幅在1.010 V范圍內(nèi)增減。n：脈沖次數(shù)?？梢灾鸫卧鲋?9次。第二步開始細(xì)胞融合撳START鍵觸發(fā)細(xì)胞融合。“Charge”出現(xiàn)在屏幕第四行，提示正在進(jìn)行操作。執(zhí)行操作期間交流電壓U¢作用，交流電壓以符號(hào)表示（正弦波）。細(xì)胞排列時(shí)間（095秒）后即

26、開始放電，這時(shí)會(huì)在屏幕第四行有個(gè)閃動(dòng)。若設(shè)定的次數(shù)n大于1，則過1秒后會(huì)再次執(zhí)行放電。放電結(jié)束后，交流電壓U¢¢作用（099秒），整個(gè)實(shí)驗(yàn)所剩時(shí)間顯示在屏幕最底行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，儀器會(huì)發(fā)出兩聲提示，屏幕回復(fù)到預(yù)先設(shè)定和已使用的菜單界面。從實(shí)驗(yàn)結(jié)束開始的延長(zhǎng)時(shí)間會(huì)以分秒的形式出現(xiàn)在最底行，超過9分鐘或撳任何按鈕，這個(gè)信息會(huì)從屏幕上消失。注意：當(dāng)U¢U¢¢設(shè)為0時(shí)通常情況下用于細(xì)胞融合的方波脈沖也可用于電轉(zhuǎn)化。這時(shí)電轉(zhuǎn)化以融合模式和其相關(guān)參數(shù)進(jìn)行。在非融合模式下，方波脈沖不能應(yīng)用。6 錯(cuò)誤提示出錯(cuò)時(shí)，Multiporator®儀器會(huì)發(fā)出鳴聲

27、提示，屏幕上也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤提示或通過打印機(jī)打印出來。這些錯(cuò)誤信息包括儀器的錯(cuò)誤和應(yīng)用的錯(cuò)誤。錯(cuò)誤14，9可能發(fā)生于細(xì)菌模式實(shí)驗(yàn)，錯(cuò)誤17可能發(fā)生于真核細(xì)胞模式，錯(cuò)誤18發(fā)生于細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)。編碼錯(cuò)誤信息原因解決方法01No Display顯示器壞了與供應(yīng)商聯(lián)系。02No RTC/NVRAM儀器內(nèi)時(shí)鐘的電子有問題與供應(yīng)商聯(lián)系。03High Current在放電過程電流太高降低使用溶液的傳導(dǎo)性；檢查選用的電擊杯是否正確。04No Cuvette未插入電擊杯插入電擊杯；重新啟動(dòng)儀器；將電擊杯槽插到底。05Timeout Charge在分配的時(shí)間內(nèi)電容分壓器不能工作與供應(yīng)商聯(lián)系。06Timeout Cha

28、rge在反復(fù)脈沖過程中，電容分壓器在兩個(gè)脈沖間無法工作降低使用溶液的傳導(dǎo)性；檢查選用的電擊杯是否正確。07Short 電容分壓器完全空了，不能確定是否能執(zhí)行。元件的有限性在于電容分壓器而不是脈沖調(diào)節(jié)器。降低使用溶液的傳導(dǎo)性；檢查選用的電擊杯是否正確。08Low Resistance電擊杯的電流太大，無法維持交流電壓。降低使用溶液的傳導(dǎo)性。09Timeout Measuring 細(xì)菌模式中測(cè)量終止與供應(yīng)商聯(lián)系。細(xì)菌模式a=0.8 ms, Ua is considerably lower than the parameter U which has been set.電擊杯中有火花在放電過程電流太

29、高技術(shù)錯(cuò)誤使用電極間距較大的電擊杯。降低使用溶液的傳導(dǎo)性。與供應(yīng)商聯(lián)系。7 儀器的維護(hù)儀器不需要經(jīng)常維護(hù)，儀器經(jīng)銷商負(fù)責(zé)保修和售后服務(wù)。7.1 消毒 消毒前首先切斷電源。Multiporator®儀器所有部分，包括零部件和連接線必須擦拭消毒。電擊杯座也可進(jìn)行噴洗消毒。但是不建議將整個(gè)儀器進(jìn)行噴霧消毒，以防止消毒劑進(jìn)入儀器內(nèi)部。7.2 清洗清洗Multiporator®儀器前切斷電源。保證沒有液體進(jìn)入儀器，防止造成電路短路和儀器腐蝕。用柔和清潔劑擦拭噴漆和鋁制部位，然后用干布擦干。注意：禁止使用任何具有腐蝕性、有機(jī)的或摩擦性的去污劑或上光劑。8 技術(shù)數(shù)據(jù)電壓/頻率: 100-

30、240 V ± 10%, 50-60 Hz保險(xiǎn): T0, 1.0 A-5*20 mm (2pcs)功率: 60 W過壓類型: II保護(hù)級(jí)別: I污染程度: 2下列模式電壓范圍: 真核模式: 20-100 V,增幅 1 V 100-1,000 V, 增幅10 V 1,000-1,200 V,增幅100 V兩次脈沖間隔： 1 分鐘 細(xì)胞融合: 0, 5-100 V, 增幅 1 V 100-300 V, 增幅 10 V兩次脈沖間隔: 1秒交流電壓: 0, 1.0-10 V, 增幅 0.1 V 細(xì)菌: 200-1,000 V,增幅 10 V 1,000-2,500 V,增幅 100 V無多次

31、沖 電容: 10 uF, 2,500 V 脈沖放電 電阻: 600 W 并聯(lián) 56 W s串聯(lián)充電時(shí)間: < 30 秒脈沖次數(shù) (n): 0-99放電時(shí)間: 真核細(xì)胞: 15-500 us,增幅 5 us,指數(shù)衰減波 細(xì)菌: 默認(rèn) 5 ms, 帶一 3.3 kW 測(cè)試和顯示的時(shí)間 0.8-6.0 ms排列時(shí)間: 0-95 s, 增幅 5 s脈沖時(shí)間: 細(xì)胞融合: 0-300 us, 增幅 5 us,方波RS 232 接口環(huán)境溫度: 最高 40相對(duì)濕度: 最大. 80%重量: 最多 5.5 kg (依儀器模式而定）大小: 寬: 25.2 cm 深: 34.2 cm 高: 12.0 cm該儀

32、器經(jīng)認(rèn)證并由UL和CSA授權(quán)（cUL: E158089）。9 訂購信息目錄號(hào)4308 000.015Multiporator®basic version, for eukaryotic cells, 100-240 V, 50-60 Hz4308 000.023Multiporator®, eukaryotic cells, and modification level “bacteria mode”4308 000.031Multiporator®, eukaryotic cells and modification level “cell fusion”430

33、8 000.040Multiporator®, eukaryotic cells and modification level “bacteria mode” and “cell fusion”附件緩沖液4308 070.501Hypo-osmolar buffer for electroporation (PH), 100 ml4308 070.510Iso-osmolar buffer for electroporation (PI), 100 ml4308 070.528Hypo-osmolar buffer for cell fusion (FH), 100 ml4308 070.536Iso-osmolar buffer for cell fusion (FI), 100 ml電擊杯4307 000.5691 mm gap width, aluminum, sterile, 50 pcs.4307 000.5932 mm gap w